IMUNOENSAIOS

PARÂMETROS DOS TESTES

SOROLÓGICOS

Validação de Testes Sorológicos Validade intrínseca de um teste=

Desempenho do teste quando comparado com teste de referência

(gold standard)

Uso de populações sabidamente positivas e negativas para o parâmetro que está sendo avaliado

PARÂMETROSSENSIBILIDADEESPECIFICIDADEVALOR PREDITIVOLIMIAR DE REATIVIDADEEXATIDÃO, PRECISÃO,

REPRODUTIBILIDADE

SENSIBILIDADEÉ A PORCENTAGEM DE

RESULTADOS POSITIVOS NA POPULAÇÃO DOENTE,

PROPORÇÃO DE RESULTADOS VERDADEIROS POSITIVOS

Mesmo em baixas quantidades

SENSIBILIDADE

S= VPVP + FN

PRESENTE AUSENTEPOSITIVO VP FPNEGATIVO FN VN

TOTAL VP + FN FP + VN

DOENÇA - DIAGNÓSTICO VERDADEIROTESTE

SENSIBILIDADE DA TÉCNICAMEDE O LIMIAR DE

DETECÇÃO DA REAÇÃO

NÃO CONFUNDIR!!!

ESPECIFICIDADE É A PORCENTAGEM DE

RESULTADOS NEGATIVOS NA POPULAÇÃO NÃO DOENTE,

PROPORÇÃO DE RESULTADOS VERDADEIROS NEGATIVOS

Dá idéia da possibilidade de reação cruzada

ESPECIFICIDADE

E= VNVN + FP

PRESENTE AUSENTEPOSITIVO VP FPNEGATIVO FN VN

TOTAL VP + FN FP + VN

DOENÇA - DIAGNÓSTICO VERDADEIROTESTE

Quando temos falsos positivos e como eliminar o problema? Poliinfecções Mimetismo molecular entre agentes Tipo de antígeno utilizado na técnica

Utilização de 2-ME Peptídeos sintetizados

EFICIÊNCIARELAÇÃO ENTRE A SOMATÓRIA DOS

VERDADEIROS RESULTADOS POSITIVOS E NEGATIVOS COM A

POPULAÇÃO ESTUDADA

QUANTO MAIS PRÓXIMO DE 1, MELHOR O TESTE

EFICIÊNCIA

Eficiência= VP + VNVP + VN + FP + FN

PRESENTE AUSENTEPOSITIVO VP FPNEGATIVO FN VN

TOTAL VP + FN FP + VN

DOENÇA - DIAGNÓSTICO VERDADEIROTESTE

zero

VALOR PREDITIVO POSITIVO = PROBABILIDADE DE

DOENÇA QUANDO O TESTE FOR POSITIVO

NEGATIVO = PROBABILIDADE DE NÃO-DOENÇA QUANDO O TESTE FOR NEGATIVO

TESTE DOENTES SAUDÁVEIS TOTALPOSITIVO 380 80 460NEGATIVO 20 1520 1540

TOTAL 400 1600 2000

PARA UMA DOENÇA QUE TEM 20% DE INCIDÊNCIA

VPP = VP/VP+FP = 380/460 = 0,82

VPN = VN/VN+FN = 1520/1540 = 0,98

VALORES PREDITIVOS Dependem de:

• Sensibilidade do teste (intrínseco)• Especificidade (intrínseco)• Prevalência da doença na população em

estudo (extrínseca)

PREVALÊNCIA Prevalência = Porcentagem de indivíduos

doentes em uma população Prevalência Sorológica = Porcentagem de

casos positivos pelo teste

EXERCÍCIOTESTE DOENTES SAUDÁVEIS TOTAL

POSITIVO

NEGATIVO

TOTAL 2000

Sensibilidade: 95%

Especificidade: 95%

Incidência: 20%

CALCULAR

EXERCÍCIOTESTE DOENTES SAUDÁVEIS TOTAL

POSITIVO

NEGATIVO

TOTAL 2000

Sensibilidade: 92%

Especificidade: 70%

Incidência: 70%

CALCULAR

LIMIAR DE REATIVIDADE ou cut off

É O VALOR DO TESTE: ACIMA DO QUAL OS RESULTADOS

SÃO CONSIDERADOS POSITIVOS E INDICAM DOENTES

ABAIXO DO QUAL OS RESULTADOS SÃO DADOS COMO NEGATIVOS E

INDICAM OS NÃO DOENTES

Escolha do limiar de reatividade

MÉDIA DOS NÃO DOENTES + 2, 3 ....DP

Escolha do Cut-off em ensaio

TÍTULO DOENTES NÃODOENTES SENSIBILIDADE ESPECIFICIDADE

10 1 30 99 70

20 8 25 91 95

40 16 5 75 100

Qual Título deve ser usado de cut-off em

BANCO DE SANGUE?

EM LAB. DIAGNÓSTICO?

SORO LIMIAR DE REATIVIDADE Def: soro de indivíduos reagentes dilído

em soro não reagente

Resultado: Índice de Reatividade para

• DO TESTE• DO SLR

PRECISÃODETERMINA A CONCORDÂNCIA

DOS RESULTADOS OBTIDOS QUANDO O TESTE É FEITO VÁRIAS VEZES

MEDE ERRO EXPERIMENTAL

EXATIDÃODETERMINA A CAPACIDADE DO

TESTE EM FORNECER RESULTADOS MUITO PRÓXIMOS AO VERDADEIRO

REPRODUTIBILIDADE REFERE-SE À OBTENÇÃO DE

RESULTADOS IGUAIS, EM TESTES COM A MESMA AMOSTRA, FEITOS POR PESSOAS DIFERENTES, EM LOCAIS DIFERENTES

ASSOCIADA A ERROS ACIDENTAIS E SISTEMÁTICOS

Critérios para a escolha dos Testes Sorológicos Testes de Alta Sensibilidade:

• Testes de triagem• Falso-negativo é mais grave

Testes de Alta Especificidade• Doenças graves sem tratamento eficaz• Teste confirmatório• Teste admissional• Falso-positivo é mais grave

Critérios para a escolha dos Testes Sorológicos

Testes de Alta Eficiência:• Diagnóstico em geral• Falso-positivo e falso-negativo são igualmente graves• Maternidades, Hospitais gerais, Bancos de Sangue

Testes de Alta Reprodutibilidade• Acompanhamento sorológico para diagnóstico• Controle terapêutico• Fases de LES, cura de doenças

Critérios para a escolha dos Testes Sorológicos Diagnóstico de Doença congênita

• Detecção de IgM e IgA, que não atravessam a placenta

• Acompanhamento sorológico com testes anti-IgG• IgG de baixa avidez• IgM total• Práticos na execução ou automatizável

Triagem sorológica de doadores de sangue• Alta sensibilidade• Automatizável• Janela sorológica