21/02/2013

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Prof. Cleiton Nunes DCA/UFLA

Cromatografia planar

A fase estacionria est na forma de uma superfcie plana

PAPEL

ou

CAMADA DELGADA

Cromatografia planar

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Processo de partio liquido -liquido. (gua na celulose-fase mvel)

Separao: diferena de solubilidade entre gua em celulose e o solvente.

FE: suporte: papel

FE: gua

FM: solventes, misturas de solventes

Aplicaes:

separao e identificao de diversos compostos

como antibiticos hidrosolveis

cidos orgnicos, pigmentos vegetais, etc.

Cromatografia em papel

Processo de adsoro lquido-slido.

Separao: diferena de afinidade dos componentes pela fase estacionria.

FE: slica

alumina

FM: solventes, misturas de

Aplicaes: separao e identificao de ampla gama de compostos devido

flexibilidade de fases mveis e estacionrias.

Cromatografia em camada delgada

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Cromatografia em camada delgada

Preparo da placa para CCD

Equipamentos para CCD

Aplicador automtico CCD circular

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Revelao dos cromatogramas

Diretamente: no caso de substncias coloridas

Separao de clorofilas por cromatografia em papel

Cromatografia planar

Revelao dos cromatogramas

Processos qumicos: uso de reagentes especficos (agentes cromognicos) capazes de tornar os compostos visveis

Cromatografia planar

Frutos da famlia Annonaceae

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Reveladores mais cumuns:

EtOH + H2SO4 / 8:2: revelador universal (forte agente oxidante)

EtOH + cido fosfomolbdico / 95:5: para esteris e derivados de lipdios

EtOH + SnCl3 (cloreto de antimnio) / 9:1: para flavonides

EtOH + ninidrina / 99:1: para aminocidos e aminas primrias

KMnO4 + Na2CO3: para cidos carboxlicos

Vapor de cristais de I2: para substncias com duplas ligaes (inclusive aromticas)

Cromatografia planar

Revelao dos cromatogramas

Processos fsicos: alguns compostos tornam-se fluorescentes sob luz UV.

Thin layer chromatography (TLC) of ethanolic extracts of M. azedarach (Ma) and A. indica (Ai) seed kernels as compared to a commercial Neem preparation (a16) and to azadirachtin (a) and melianin B (m) standards. (A) Natural light; (B) 354 nm UV light.

Cromatografia planar

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Cromatografia planar

m

rf

d

dR

Anlise qualitativa

Rf: fator de reteno caracterstico de cada composto

Anlise quantitativa

rea da mancha: a rea de mancha usada como parmetro quantitativo Densitometria: mede-se a intensidade de cor da mancha Extrao da substncia: extrai-se a substncia da mancha atravs de solvente adequado e analisa-se por outra tcnica analtica Em todos os casos aplicado curva de calibrao

Cromatografia planar

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Cromatografia Planar Bidimensional

Cromatografia Planar Bidimensional