• 1810 - Nicholas Appert - “A arte de preservar os alimentos de origem animal e vegetal“ 1º Livro de Bioquímica

Fermenta Não Fermenta

“ PARA FERMENTAR PRECISA DE AR”

Coberta com mercúrioAbre

Gay-Lussac - Porquê não estraga?

Experimento: Vasilha com alimento fervido e fechado:

A Fermentação é um movimento intestino de Partículas, ou Princípios de cada corpo, tendendo para a perfeição ou para a transformação em outro. As Partículas Elementares postas em movimento, devido a sua própria natureza ou ocasionalmente vibrando maravilhosamente, são aprisionadas e transformam-se em outras: as sutis e mais ativas esforçam-se na tentativa de escapar suavemente, mas estando entrelaçadas com outras mais espessas são impedidas de fazê-lo. Também as mais espessas são mantidas unidas pelo intento e Expansão das mais Sutis e são enfraquecidas até que cada uma alcance sua própria grandeza e exaltação. Elas Fixam em si a devida perfeição ou completam as Alterações e Mutações designadas pela Natureza.

(Willis, 1684, p. 9)

• 1830 - Liebig - “Teoria das vibrações desestabilizantes”

Oxigênio do ar interage com o nitrogênio dos alimentos provocando vibrações desestabilizantes que promovem a fermentação (Bolhas).

• 1850 - Lois Pasteur - Um plano de Luz sofre rotação ao atravessar um cristal de quartzo

Fermentação

Repique, vinhos iguais

UVA Vinho (BOM)

Repique Suco da Uva Tempo “Bolinhas” Fermenta (Vinho)

Repique Fervido

Suco da Uva - Não Fermenta

Repique tratado com Fenol (Desinfetante)

Não Fermenta

“ Para haver Fermentação são necessários microorganismo sensíveis ao calor, fenol, clorofórmio”

“ Eu acredito que não há nenhuma fermentação alcoólica, sem ter ao mesmo tempo a organização, desenvolvimento e multiplicação dos glóbulos” Teoria Vitalista - Lois Pasteur

• Liebig - O aquecimento inativa o nitrogênio, tira o Ar, impedindo a interação com o O2 do Ar.• Pasteur - Lava bem as bolinhas, coloca glicose e tira o Ar com uma bomba de Vácuo.

“ La Vie Sans Air” Efeito Pasteur

• Repique

• Suco de Uva

Microscópio

“Bolinhas”

Não

... 50 anos depois, alemanha, sec XX

• Hans Buchner (Microbiologista) e Edward Buchner (Químico)

Lêvedo de Cerveja - Presença de Antitoxinas que combateriam a Tuberculose

Cultivar as Leveduras

Xarope, conservado com açúcar (Nicholas Appert)Extrair as

toxinas

Quebravam as células com areia, filtravam, olhavam no microscópio somente o suco de leveduras.

Sempre no dia seguinte – Fermentava

Se fervesse – Matava as Atitoxinas

Edward e Hans brigam...

Edward continua e resolve colocar muito açúcar para conservar -

Acelera a fermentação – Microscópio – Não há bolinhas

Denominou o suco de Zimaze, rebateu a teoria Vitalista de Pasteur:

1907 – 1º Nobel de Química – “ Metabolismo ocorria com moléculas do interior da célula, sem vida”

Carvão + O2 CO2 + H2O + E

C6H12O6 CO2 + H2O + EZimaze

C6H12O6 + O2 CO2 + Etanol + E

Lavoisier

Pasteur -1800

Buchner -1897

Se fervesse o suco da levedura não havia fermentação

• 1905 – Artur Harden e Willian Young – Trabalham em uma cervejaria da Inglaterra com o suco das leveduras - células quebradas

Açúcar acabou?Produto inibe?

NãoNão

Falta algo...

Como testar? Separar os componentes do Suco

Diálise – no saquinho – parte termosensivel (Zimaze) e Albuminóide e fora parte termoestável, elementos inorgânicos (cozimaze)

“ São necessários os dois fatores para a fermentação ocorrer, mas somente o produto dializado é capaz de aumentar a fermentação”

Tentativa e erro – Dentro do saquinho : Substância de alto peso molecular; Fora do saquinho : Substância de baixo peso molecular

Pi – Aumenta a Fermentação – Fator Limitante

Pi sendo utilizado – Dosar em função do tempo

Pi deve se ligar a algum composto, não está livre, está estereficado.

C6H12O6 + O2 CO2 + H2O Lavoisier

C6H12O6 + O2 CO2 + Etanol Pasteur

Cadê o Pi?

Harden e Young, por tentativa e erro preciptaram:

Mg2+ - Pi Livre

Hg2+ - Açucar fosforilado - C6H12O6 -P-

C6H12O6 -P- + suco de levedura CO2 + Etanol

Testar íons: Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl-, SO2-4, ..., PO2-4

Deve haver algum composto fosfatado intermediário.

Frutose 1,6 Bifosfato = Ester de Hander e Young = 1º Intermediário Fosforilado

1910 – Nobel de Química – Campo aberto para estudo da quebra da glicose - + 40 anos para elucidar todos os passos.

1859 – Darwin – Teoria da evolução dos seres vivos.

O2 Ionogênio Contração Muscular + Ácido Lático

Reagia Produzia

Fletcher e Hopkins – Músculo Sártório de Rã

Como provar a influencia do O2?

Óleo

Músculo Músculo

Ambos contraiam - não é necessário O2 para a contração muscular.

O que lembra isto? Pasteur

Idéia da Contração Muscular:

• 1930 - Otto Meyerhof - Alemanha

Sem ar - O Lêvedo produz etanol que vem da glicose

Sem ar o músculo produz ácido lático

Qual será a sua origem?

Como a levedura era capaz de contrair ?!?!?!?!?

Fosfato

Suco de levedura dializado retido na membrana

O ativador é obtido por autólise do lêvedo na presença de tolueno, subsequentemente é adicionado igual volume de alcóol. O preciptado é disperso em água e centrifugado, o extrato aquoso tem o catalizador, preciptável em 50% de alcóol, termosensível também a alcalis e ácidos, o ativador tem as propriedades de uma enzima e utiliza somente hexoses, eu proponho chamá-la de hexoquinase”

Otto Meyerohf

Levedura ativa o nobre músculo?

Vias metabólicas iguais entre seres inferiores e superiores?

Otto meyerhof continua e....

Repetem os passos de Harden e Young e obdrevam que os passos são os mesmos

Muda qualitativamente a idéia de célula

Regulação da Glicolise

Pontos onde as enzimas catalizam reações irreversíveis ∆G

Reações Irreversíveis

Glicose + ATP Glicose 6-Fosfato + ADP + H+Hexokinase

Frutose, 6-Fosfato + ATP

Furtose 1, 6-bifosfato + ADP + H+

Fosfofrutokinase

Fosfoenolpiruvato+ ADP + H+

Piruvato + ATPPiruvato kinase

*

Aumento de ATP inibe e diminui a afinidade pelo substrato

Aumento de AMP reverte essa inibição

Aumento de citrato - inibe

Piruvato kinase inibida pelo aumento de ATP

Hexokinase inibida por glicose 6 fosfato ( exceto no fígado)