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  • 7/29/2019 8.- Peristaltismo

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    UNIVERSIDAD NACIONALAUTNOMA DE MXICO

    FACULTAD DE QUIMICA

    Peristaltismo

    Laboratorio:Fisiologa

    Grupo: 4

    Fecha de entrega: 08 /mayo/2012

    Integrantes:

    Ramos Meja Anglica Sofa__________

    Rivas Carrasco Luis Guillermo__________

    Villegas Ortiz Liliana__________

    Velazco San Agustn Cynthia.__________

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    INTRODUCCIN.

    Desde el punto de vista anatmico, el msculo liso se distingue del msculo estriado y

    del cardiaco porque carece de estriaciones visibles. Tiene actina y miosina II, y se

    deslizan una sobre otra para producir contraccin.

    Existe una variacin en la estructura y la funcin del msculo liso en diferentespartes del cuerpo. En general el msculo liso puede dividirse en msculo liso unitario se

    dispone en grandes lminas, tiene muchas conexiones de bja resistencia po uniones

    comunicantes netre las clulas musculares individuales y funcionan como sincitio. El

    msculo liso unitario se encuentra sobre todo en las vsceras huecas, los ejemplos

    incluyen la musculatura del intestino, tero y urtes.

    Las clulas musculares lisas se contraen mediante un sistema de actina-miosina,

    pero no tiene estriaciones bien organizadas. A diferencia del msculo estriado y

    cardiaco, la regulacin de la contraccin por Ca+ se debe sobre todo a reacciones de

    fosforilacin y desfosforilacin.

    El tubo digestivo es un conducto continuo que se prolonga de la boca hasta el

    ano. Su principal funcin es ser una puerta de entrada, por donde los nutrimentos y elagua pueden absorberse hacia el organismo. .

    El intestino realiza diversos tipos de motilidad que sirven para mezclar la

    comida con las secreciones digestivas y desplazarlas a lo largo del tubo digestivo.

    La luz del tubo digestivo tiene una contigidad funcional con el exterior del

    organismo. El intestino tambin cuenta con un rea de superficie muy sustancial, la cual

    es importante para su funcin de absorcin. (Ganong 2010)

    La funcin digestiva y resortiva del tracto gastrointestinal depende

    esencialmente de la motricidad de la musculatura parietal. Los patrones de motilidad

    ms importantes son: peristaltismo, segmentacin rtmica y contraccin tnica.

    El peristaltismo es el fenmeno por el cual se desplazan los alimentos en sentidodescendente por el esfago y conlleva la contraccin y el relajamiento alternos de los

    msculos del esfago. Por un peristaltismo propulsivo tiene lugar un transporte ora

    laboral.

    La contraccin de la musculatura circular se propaga en forma de ondas a travs

    del tubo intestinal, precedindola casi siempre una onda de relajacin. La mezcla del

    bolo alimenticio con los jugos digestivos se realiza por el peristaltismo no- propulsivo,

    que se propaga slo por trayectos cortos, as como por movimientos de segmentacin.

    La segmentacin consiste en la contraccin simultanea de la musculatura

    circular de regiones vecinas y alternantes. Como la frecuencia de las contracciones

    disminuye de arriba abajo, el contenido del intestino se desplaza tambin lentamente

    hacia el ano por el peristaltismo no-propulsivo. Por la contraccin tnica y duradera de

    determinadas regiones especializadas (esfnteres), se separan funcionalmente diversos

    espacios entre s, por ejemplo, el esfago del estmago por el esfnter esofgico inferior

    y el leo del ciego por la vlvula de Bauhin. Al mismo tiempo se garantiza as un

    transporte dirigido sin reflujo.

    OBJETIVOS.

    Realizar un registro grfico de la actividad mecnica del msculo liso intestinal de

    rata.

    Observar la movilidad del intestino delgado de la rata.

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    Describir el efecto que tiene la temperatura, la aeracin y la tensin sobre la

    actividad muscular del intestino de la rata.

    Observar el efecto de algunos frmacos, como la acetilcolina, la adrenalina, el

    citrato de sodio y el calcio, sobre la actividad muscular del intestino

    MATERIAL Y MTODO

    Cristalera instrumental y equipo:

    1 Cmara de rganos aislados.

    1 Termmetro.

    1 Equipo de diseccin.

    Hilo inextensible.

    1 Caja de Petri.

    1 Pinza de tres dedos.

    1 Bomba de aire para acuario. 1 Mechero.

    1 Tripi

    1 Tela de asbesto.

    2 Vasos de precipitados de 250 ml.

    1 Matraz Earlenmayer de 500 ml.

    1 Jeringa de 5 ml con aguja y una cnula de polietileno.

    1 Tensimetro.

    1 Computadora conectada al Sistema MP 35, con el programa Biopac Student

    Lab 3.7.1

    1 Unidad de adquisicin (MP35) 1 Transformador para la unidad de adquisicin MP35 (AC300A o AC100A)

    1 Transductor de fuerza (Migrafo) (SS12LA) con gancho en forma de S

    1 Aguja quirrgica curva.

    1 Pesa para calibracin (5 g).

    Material biolgico:

    Una rata con ayuno de 12 hrs.

    Sustancias de consumo:

    Solucin salina de Tyrode para mamfero.

    Solucin de citrato de sodio al 3%

    Solucin de cloruro de calcio al 2.5%

    Solucin de acetilcolina al 0.01%

    Solucin de epinefrina 1/10,000

    Solucin de sulfato de atropina 100 mg/litro (= 10-8)

    MTODO

    Se prepar el dispositivo para el registro grfico de la actividad del msculo liso con un

    transductor de fuerza sujeto a un soporte universal. En el mismo soporte se coloc la

    cmara para rganos aislados de manera que qued debajo del migrafo. Se revis que

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    el tapn de la cmara tuviera su sistema de tubos de desage y de burbujeo

    funcionando, ste se colocar en la parte inferior de la cmara.

    Se coloc un vaso de precipitados lleno de solucin salina para mamfero en la

    flama del mechero, de manera que se mantuvo la temperatura a 37C. Se hizo uso de un

    vaso de precipitados con agua a temperatura de 37C para que se cambiara

    frecuentemente en la parte externa de la cmara de rganos aislados para ayudar amantener constante la temperatura de la solucin salina en la que se sumergi la

    preparacin biolgica.

    Se prepar la computadora y la unidad de adquisicin con todas sus conexiones.

    Se conect el cable del transductor de fuerza en el canal 1 de la Unidad de adquisicin.

    Se encendi la Unidad y la computadora; en la pantalla se seleccion el programa BSL

    PRO. Al seleccionar el programa apareci una ventana para iniciar el registro, pero

    antes se establecieron las condiciones para el registro, las cuales se detallan a

    continuacin.

    Lo primero que se hizo fue seleccionar la opcin MP35 localizada en la parte

    superior de la pantalla, se despleg un men del cual se seleccion la primera opcin

    (Set Up Channels), en la pantalla que apareci se activ el canal 1 (en el cual estaba

    conectado el transductor) seleccionando cada uno de los cuadros que se muestran a la

    izquierda del men, despus se seleccion el cuadro localizado en la parte derecha del

    men en la columna correspondiente a Preset, al hacer esta seleccin apareci una lista

    de transductores, se seleccion el de Fuerza (0-50 g). Una vez seleccionado el canal y el

    transductor que se utilizara se procedi a la calibracin del transductor, se seleccion la

    opcin Scaling y apareci una ventana que permiti llevar a cabo la calibracin. Se

    coloc cuidadosamente el gancho en forma de S en el transductor de fuerza, en el

    orificio correspondiente a la sensibilidad de 0-50 g (en el experimento el hilo que estaba

    atado a un extremo del msculo estuvo amarrado a este gancho), una vez colocado el

    gancho (sin movimiento) se indic en el rengln correspondiente a CAL1 que el pesocorresponde a 0 gramos y entonces se seleccion la opcin CAL1, apareci un valor de

    voltaje en la pantalla; despus se procedi a colocar con cuidado la pesa de calibracin

    de 5 g anotando el valor en el rengln correspondiente a CAL2 y en el momento en el

    que estuvo inmvil se seleccion CAL2, apareci un valor de voltaje que debe ser

    diferente al de CAL1.

    Realizada la calibracin se regres a la pantalla inicial y nuevamente se

    seleccion la opcin MP35 y del men se seleccion la segunda opcin (Set Up

    Acquisition), apareci una ventana que permiti establecer las caractersticas de la

    adquisicin de los datos del registro: en la parte superior se seleccion, de izquierda a

    derecha, Record, Append y Disk con esta seleccin se podrn registrar segmentos

    (uno para cada variable) los cuales sern unidos por el programa y guardados en el discoduro de la computadora; en el siguiente rengln apareci la opcin para la frecuencia de

    muestreo, la opcin que present el programa era de 200 muestras por segundo pero se

    modific, debajo de esta opcin apareca la posibilidad de establecer la longitud total de

    captura de cada segmento (en unidades de tiempo o de muestras), la opcin que

    apareci en el programa era de 30 segundos pero se cambi.

    Se sacrific una rata por medio de traccin en la parte superior de la mdula

    espinal. Se abri el abdomen mediante una incisin en la lnea media abdominal para

    exponer las vsceras. Una vez localizado el intestino delgado, se tom desde su primera

    porcin cortando sus uniones ploro-duodenal e leo-cecal, se extraj cuidando de no

    estirarlo ni pinzarlo y se coloc en una caja de Petri que contena solucin salina deTyrode fra (colocada en un bao de hielo) y aeracin dentro de la solucin.

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    Se cort un tramo de intestino con longitud entre 2 y 3 centmetros que

    corresponda a la regin del duodeno. Se insert una cnula en la luz del segmento

    intestinal y con una jeringa que contena solucin de Tyrode se lav con cuidado el

    segmento intestinal.

    En una caja de Petri con solucin salina se coloc el segmento intestinal y se at

    uno de los extremos con un hilo haciendo pasar la aguja a travs de la pared, (sin quequedara cerrada la luz intestinal); se dejaron los cabos del hilo lo suficientemente largos.

    Se realiz la misma atadura en el otro extremo, de tal manera que se obtuvo un tubo

    abierto, a travs del cual flua libremente la solucin dentro y fuera del intestino.

    Se sujet con el hilo uno de los extremos al ganchillo del tapn inferior de la

    cmara de rganos aislados, se introdujo el segmento intestinal por debajo de la cmara

    con ayuda de unas pinzas de diseccin, se coloc el tapn en su lugar.

    Se llen la cmara con solucin de Tyrode a 37C; se sujet el otro extremo del

    intestino al ganchillo del migrafo, se acopl inmediatamente el sistema de aeracin. La

    preparacin debe estar en bao de mara para mantener constante la temperatura del

    sistema.

    Para iniciar el registro de cada uno de los segmentos se seleccion en la parteinferior derecha de la pantalla la opcin Start y para suspender la captura se

    seleccionaba Stop. Entre cada segmento el programa coloc una marca y durante el

    registro de cada segmento se colocaron marcas (oprimiendo F9) y se anot a que

    corresponda cada marca.

    Registro de la actividad basal

    Con la preparacin sumergida en solucin de Tyrode a 38C y con el burbujeo

    de aire regulado, se registr la actividad mecnica generada por el intestino delgado. Al

    inicio de cada registro de las diferentes variables se tena un registro basal con duracin

    entre 30 y 60 segundos y el anlisis de los efectos provocados por las variables sehicieron con su propio registro basal.

    A. Efecto de la tensin

    Se produjo una distensin del tejido intestinal, por medio del tensimetro,

    aproximadamente del 20 al 30 % de su longitud inicial; se registr la actividad mecnica

    del intestino durante 40 segundos y luego se regres el segmento intestinal a su longitud

    inicial y se continu registrando durante otros 40 segundos.

    B. Efecto del calcio

    Se registr la actividad basal del intestino, despus se agregaron 5 gotas de la

    solucin de citrato de sodio (se marc con F9) y se registr durante 60 segundos. Sindetener el registro se procedi a agregar 5 gotas de solucin de cloruro de calcio (F9).

    Se suspendi el registro.

    Se lav la preparacin muscular recambiando la solucin de Tyrode a 37C para

    eliminar las soluciones que se aadieron.

    C. Efecto de la acetilcolina

    Despus de un registro de actividad basal, se agreg una gota de la solucin de

    acetilcolina (F9), el efecto fue inmediato. Sin detener el registro se agregaron 5 gotas de

    la solucin de atropina (F9) y se registr durante 60 a 90 segundos. Nuevamente se

    recambi la solucin de Tyrode a 37C para remover las soluciones aadidas.

    D. Efecto de la adrenalina

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    Despus de un registro de actividad basal, se agregaron 5 gotas de la solucin de

    adrenalina (F9), se registr durante 2 minutos. Nuevamente se recambi la solucin de

    Tyrode a 37C para remover la solucin aadida.

    E. Efecto de la aeracin

    Comenzando con un registro basal de la actividad del intestino se desconect elsistema de aeracin proporcionado por la bomba de aire, se observ el efecto que

    produce la ausencia de oxgeno sobre la actividad del msculo, se registr durante 2

    minutos despus de quitar el aire. Se conect nuevamente el sistema de burbujeo.

    F. Efecto de la temperatura

    Se realiz un registro de actividad basal del intestino, despus de esto, sin

    detener el registro y con mucho cuidado para evitar movimientos en el dispositivo en el

    que estaba el msculo, se cambi el agua del bao de mara por agua fra y se observ el

    efecto que produce la temperatura baja sobre la contraccin del msculo intestinal. Se

    registr durante 2 minutos y, sin suspender el registro, se recambi tanto la solucin de

    Tyrode como el agua del bao para recuperar la temperatura de 37C.

    RESULTADOS.

    Registro de la actividad basal

    Amplitud de onda: 0.543075g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.074156 = 4.449388

    Segment 1, 02:55:55 p.m.

    0.00 3.60 7.19 10.79seconds

    108.73

    109.00

    109.27

    109.54

    gramos

    Fuerza

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    Efecto del citrato de sodio

    Amplitud de onda: 0.027154g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.037622 = 2.257336

    Efecto del cloruro de calcio

    Amplitud de onda: 0.271538g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.039300 = 2.358027

    Segment 3, 02:58:12 p.m.

    14.38 21.58 28.77 35.96seconds

    104.18

    104.72

    105.25

    105.79

    gramos

    Fuerza

    Segment 6, 03:04:25 p.m.

    50.35 57.54 64.73 71.92seconds

    85.44

    85.98

    86.51

    87.05

    gramos

    Fuerza

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    Efecto de la acetilcolina

    Amplitud de onda: 4.263142g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.116822 = 7.009346

    Efecto de la epinefrina

    Amplitud de onda: 0.162923g

    187.00 190.60 194.19seconds

    78.34

    79.82

    81.31

    82.79

    gramos

    Fuerza

    215.77 222.96seconds

    80.62

    81.16

    81.69

    82.23

    gramos

    Fuerza

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    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.051989 = 3.119314

    Efecto del sulfato de atropina

    Amplitud de onda: -3.149837g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.044160 = 2.649592

    Efecto de la ausencia de oxgeno

    359.62 366.81 374.00seconds

    77.14

    78.41

    79.68

    80.94

    gramos

    Fuerza

    Segment 26, 03:28:33 p.m.

    589.78 604.16 618.55seconds

    77.94

    79.02

    80.09

    81.16

    gramos

    Fuerza

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    Amplitud de onda: -1.143457g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.028333 = 1.1699958

    Efecto de la temperatura (solucin Tyrode a 10C)

    Amplitud de onda: -5.810907g

    Duracin: 0.03 segundos

    Frecuencia de contraccin: 0.017627 = 1.057641

    ANALISIS.

    Se obtuvieron las tendencias de comportamiento de peristalsis del musculo liso del

    intestino delgado mediante el programa de biopac, a partir de lo que se determin el

    efecto que induce la adicin de diferentes compuestos a la solucin Tyrode.

    El comportamiento basal del musculo liso del intestino delgado con una media

    de la fuerza de movimiento de 0.543075g.

    El comportamiento del intestino delgado cuando se adiciona citrato de sodio, el

    cual promueve la peristalsis del duodeno con una media de fuerza de 0.027154g.

    La adicin de CaCl2 a la solucin de Tyrode se observa un notable aumento en

    la actividad peristltica del intestino delgado de la rata con una fuerza de 0.271538g

    El efecto que ejerce la adicin de Acetilcolina a la solucin que contiene al

    intestino delgado, tyrode donde se observa un aumento en la actividad peristltica del

    Duodeno del sujeto de estudio. Y al adicionar atropina la actividad disinuye

    considerablemente a -3.149837g.

    Segment 27, 03:29:08 p.m. Segment 28, 03:30:13 p.m.

    647.31 661.70 676.08 690.47seconds

    73.16

    75.46

    77.76

    80.06

    gramos

    Fuerza

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    El efecto que tiene la adicin de epinefrina a la solucin de Tyrode donde se

    aprecia claramente una disminucin en la actividad peristltica del intestino delgado con

    una media de fuerza 0.162923g.

    El comportamiento de la ausencia de oxigeno mostro una actividad mecnica

    deficiente del intestino denotando una fuerza de -1.143457g

    El comportamiento del intestino delgado cuando se modific la temperatura

    provoc una notable disminucin en la peristalsis del intestino delgado, con una media

    de fuerza de -5.810907g.

    DISCUSIN.

    Estadobasal.

    En el intestino delgado podemos observar diversos movimientos arrtmicos de la

    actividad basal, sin variaciones significativas comparadas con el segmento de msculointestinal en solucin Tyrode, ste est compuesto en su mayora por cloruros de Calcio

    y de Potasio cuyas funciones de estos iones en el intestino delgado son la

    despolarizacin y generar un potencial de accin en las clulas de msculo liso.

    Efecto del citrato de sodio

    El transporte de Sodio juega un papel crucial en el suministro de energa para la captacin,

    proporciona el mecanismo para la traduccin de energa qumica en ATP, en energa

    osmtica a partir de un gradiente de concentracin. La estequiometria nos indica que

    1mol de ATP acoplado hacia el bombeo exterior de 3 moles de Na+, as mismo para

    producir el movimiento peristatal del intestino es indispensable un potencial elctrico de

    unos 60mVolts, esta contribucin se lleva a cabo mediante el movimiento de cargas

    cuando 3iones de Na+ por dos iones K+ que se convierte en la fuerza dominante en el

    establecimiento del potencial elctrico por el movimiento de K+ a travs de los canales

    K+. Las clulas epiteliales del intestino delgado poseen un sistema de transporte en la

    membrana del borde en cepillo que cataliza un intercambio de Na+/H+

    elctricamente neutro origina una concentracin e H+, dicho intercambio origina una

    concentracin de H+ que origina a su vez la absorcin de Cl- a travs de un intercambiador

    Cl-/HCO3- situada en la membrana plasmtica luminal, este intercambio intertestinal

    est codificado por ARN. La necesidad de dos tipos de absorcin de Na+ puede

    provenir de las diferentes funciones del intestino, por lo tanto podemos decir que al

    aumentar la concentracin de Na+, ste estimular favorablemente el peristaltismo delintestino delgado.

    Efecto del cloruro de calcio

    La cantidad e calcio absorbida en el intestino delgado depende de la vitamina D, una

    ausencia de esta provoca que el calcio no sea absorbido adecuadamente. El efecto del

    calcio sobre el intestino es la contraccin del msculo por la entrada de calcio de las

    fibras y la unin de ste a la calmodulina. La calmodulina es una protena que al

    combinarse con calcio a su entrada en el citoplasma, es estructuralmente parecido a la

    troponina. Al juntarse el calcio con la calmodulina forman un complejo que se combina

    con la quinasa de la cadena ligera de miosina y la activa, dicha enzima cataliza

    la fosforilacin de las cadenas ligeras de miosina, que forman parte en los puentescruzados de miosina, dichos puentes son los que permiten la contraccin al unirse a la

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    actina.( Fox 2008). El proceso ya mencionado no se puede observar

    macroscpicamente, pero se pueden obtener registros con ayuda del Biopac. El calcio es

    un elemento muy importante ya que del depende que se lleve a cabo la contraccin de

    msculos lisos, de tener agotado el calcio en el cuerpo humano es imposible la

    absorcin en cualquier parte del organismo. El proceso de despolarizacin leda al

    msculo la capacidad de contraerse lentamente pero muy sostenidamente; es decir quela fuerza con la que se contraen a pesar de ser lenta es muy fuerte, y esto se puede

    observar en el intestino, la vejiga y en el tero durante el parto.

    Efectos de la Epinefrina y de laAcetilcolina:

    Las hormonas pueden llegar a afectar la contraccin del musculo liso, tales como la

    noradrenalina, adrenalina, acetilcolina, angiotensina, vasopresina, oxitocina y

    serotonina. En la prctica utilizamos la acetilcolina, esta es una hormona excitatoria que

    interacciona con los receptores muscarinicos, tras su estimulacin se desencadenan una

    serie de procesos que conducen a un incremento de Ca 2+ intracelular y esto provoca la

    contraccin del musculo liso. La adrenalina tambin causa una contraccin en el

    musculo liso.

    Efecto de la atropina:

    La antropina es un compuesto anticolinergico por lo que disminuye la motilidad ya que

    bloquea los receptores muscarinicos en el muscilo liso cuando lo aplicamos en el bao,

    ya si inhiben la accin de la acetilcolina.

    CONCLUSIONES.

    El efecto que tienen diferentes sustancias sobre la peristalsis del musculo liso

    del intestino delgado, puede favorecerlo, (tal es el caso de la Acetilcolina, la adicin de

    iones Ca2+, Na+), o inhibirlo (Disminucin de la temperatura o la adicin de

    Epinefrina). Al realizar la prctica, cuando hicimos las pruebas con los

    neurotransmisores, en la epinefrina observamos que los movimientos peristlticos

    requieren seales hormonales. Cuando aadimos la epinefrina causo un incremento

    en la contraccin del tejido muscular liso debido a que la cantidad que le agregamos era

    suficiente para observar los procesos por lo cuales se lleva a cabo la digestin y los

    procesos de metabolismo.

    BIBLIOGRAFA. Kim e. Barret, Scott Boitano, Susan M. Marman, Heddwen L. Brookd, Ganong,

    Fisiologa mdica, Editorial Mc Graw Hill, Mxico 23a

    edicin 2010, pp 429-433.