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[ NOTA TÉCNICA ]

SOLUÇÕES DA WATERSSistema Xevo™ TQ-GC

Extração de CEN DisQuE™ QuEChERS

Tipo de recheio de cartucho para extração em fase sólida (SPE) Oasis™ PRiME HLB

Software MassLynx™ MS

Banco de dados Quanpedia™

Gerenciador de aplicações TargetLynx™

PALAVRAS-CHAVEXevo TQ-GC, MRM, biblioteca NIST, pesticidas, QuEChERS, SPE

BENEFÍCIOS TECNOLÓGICOSA aquisição de dados com varredura completa e MRM simultâneo utilizando a tecnologia RADAR™ proporciona a identificação de contaminantes coextraídos com impacto mínimo sobre a sensibilidade do método.

INTRODUÇÃOO chá representa uma das bebidas mais consumidas no mundo, e a análise de pesticidas dos chás é exigida por lei para garantir a segurança dos consumidores.1 Análises de GC-MS/MS utilizando transições de MRM específicas e altamente seletivas são exigidas para cobertura completa de todos os pesticidas passíveis de GC nos níveis de rastreamento exigidos para muitos tipos de métodos diferentes. Como o chá verde é uma matriz complexa, contaminantes coextraídos ou interferências na matriz podem afetar os MRMs. Nesta nota técnica, demonstramos uma configuração de método fácil para análise direcionada de pesticidas no chá verde, bem como aquisição de varredura completa/MRM simultâneo para monitoramento de contaminantes coextraídos de matrizes.

Análise de Pesticidas por GC-MS/MS no Chá Verde em Uma Aquisição Unica Utilizando o Xevo TQ-GCLauren Mullin,1 Adam Ladak,1 Jonathan Fox,2 DeFeng Huang,3 Jody Dunstan,2 e Douglas Stevens1

1 Waters Corporation, Milford, MA, EUA; 2 Waters Corporation, Wilmslow, Reino Unido; 3 Waters Corporation, Shanghai, China

Xevo TQ-GC.

[ NOTA TÉCNICA ]

2Análise de pesticidas por GC-MS/MS no chá verde em uma aquisição única utilizando o Xevo TQ-GC

RESULTADOS E DISCUSSÃO Amostras de chá verde foram preparadas utilizando a extração de CEN do Waters™ DisQuE QuEChERS, seguida pelo cleanup de preparação de amostras Pass-Through da extração em fase sólida (SPE), utilizando o Oasis PRiME HLB. Depois da extração e do cleanup, uma curva de calibração correspondente à matriz e amostras de CQ foram preparadas para injeções de 1 µL utilizando em modo de injeção splitless. Os dados foram adquiridos utilizando EI+ em um potencial de 70 eV. A determinação da concentração é descrita aqui como ppb (fortificado no volume de extrato final, ou seja, correspondente à matriz) e mg/kg no chá, que é 0,005 × o valor de ppb, com base no preparo das amostras utilizado (2 g de chá reconstituído de acordo com a extração feita pelo QuEChERS). O programa de temperatura de GC, as transições de MRM e o método de processamento foram automaticamente gerados utilizando o Quanpedia (Figura 1), que eliminou o potencial de erro de transcrição na entrada das condições de MRM e GC. Utilizar o Quanpedia também elimina a necessidade de um desenvolvimento de método abrangente e simplifica a rotina de trabalho para análise cotidiana.

Método de MS

Método de

processamento

Método de GC

Figura 1. A utilização do banco de dados Quanpedia para geração automática de métodos.

[ NOTA TÉCNICA ]

3Análise de pesticidas por GC-MS/MS no chá verde em uma aquisição única utilizando o Xevo TQ-GC

Para avaliar a capacidade do sistema Xevo TQ-GC de atender a recomendações normativas, curvas de calibração correspondentes à matriz foram preparadas. Como mostrado na Figura 2, a curva de calibração e as injeções de CQ atenderam aos principais critérios da conservação de proporção de íons de ±30%, linearidade de R2 ≥0,998 (1 para 100 ppb, que calcula a 0,005 mg/kg para 0,5 mg/kg na matriz de chá), resíduos com cálculo retroativo <20%, e concentrações calculadas dos CQs dentro de ±15% do valor nominal. A Tabela 1 mostra um resumo dos dados de amostra de CQ para vários pesticidas organoclorados.

Principais critérios

- Conservação da proporção de íons: ±30%

- Linearidade: R2=0,998 (1-100 ppb em matriz de chá)

- Concentração calculada de CQs: ±15% do valor

10 ppb na matriz de chá

Padrão interno

50 ppb

10 ppb

Figura 2. Curva de calibração de mirex de 1 a 100 ppb (0,005 mg/kg a 0,5 mg/kg) na matriz de chá verde.

Tabela 1. Resumo das injeções de CQ a 10 e 50 ppb (0,05 mg/kg e 0,25 mg/kg) na matriz de chá verde.

Média de conc. calculada (ppb) (mg/kg no chá) %RSD (n=5)

Analito 10 (0,05)

50 (0,250) 10 50

Heptacloro 11,0 51,2 14,8 6,12,4-metoxicloro 11,4 53,4 5,1 3,4

Clorbenside 9,8 48,9 8,3 2,4Fenson 10,5 51,6 3,7 0,9

Tetradifona 9,4 51,0 7,6 4,2Clorfenson 10,6 51,0 4,6 1,7BHC, alfa- 10,7 50,6 11,0 4,8BHC, beta- 9,8 52,9 6,3 4,9BHC, delta- 10,1 49,9 6,5 2,5BHC, gama- 10,4 52,4 13,4 3,9

Cloroneb 11,3 50,9 7,1 7,1Isodrina 11,1 54,2 14,2 5,9Etileno 10,5 49,8 9,0 2,6

DDD, o,p- 10,5 49,4 9,3 3,2DDD, p,p- 11,0 52,5 15,9 1,6DDT, p,p- 11,0 52,3 9,3 4,8

4,4-Olefina de metoxicloro 11,2 52,2 6,8 5,5Éter endosulfano 9,4 53,0 16,0 7,3

DDE, o,p- 10,9 52,3 11,8 1,9DDE, p,p- 10,2 49,4 11,9 2,6

Pentaclorobenzeno 10,6 51,1 2,9 3,7Pentacloroanisol 10,7 52,1 7,3 3,7

Mirex 10,2 51,0 4,7 3,4Endrin cetona 9,3 51,6 6,6 5,8

[ NOTA TÉCNICA ]

4Análise de pesticidas por GC-MS/MS no chá verde em uma aquisição única utilizando o Xevo TQ-GC

Seguindo a demonstração quantitativa de MRMs-alvo, a utilização de dados de varredura completa (RADAR) e MRM simultâneo foi avaliada. A aquisição de varredura completa foi de m/z 50-650 com um tempo de varredura de 0,5 s. Extratos de amostras de chá verde foram fortificados a 0,1 mg/kg com mais de 200 pesticidas (em nove misturas separadas para impedir efeitos interativos conforme fornecido no Kit multirresíduo de GC-MS da Restek Corporation). Os dados de varredura completa foram investigados para determinar a identidade de dois picos grandes de interferência na matriz. Na Figura 3, a identificação de 1,2,3-benzenotriol e cafeína é mostrada utilizando a biblioteca NIST. A cafeína é um estimulante conhecido encontrado naturalmente no chá verde, e o composto fenólico 1,2,3-benzenotriol (também conhecido como ácido pirogalol ou pirogálico) também é encontrado no chá verde.2

Coextratos da matriz

Pesquisa do NIST = 1,2,3-benzenotriol Pesquisa do NIST = Cafeína

Varredura completa 50-650 Da

(Sinal = 9,49e9)

Correspondência: 966Correspondência r.: 973

Correspondência: 925Correspondência r.: 930

Figura 3. Utilização da tecnologia do RADAR para a identificação de interferências nos extratos de amostras associados à pesquisa na Biblioteca NIST.

Figura 4. Avaliação do sinal de MRM mantido durante a aquisição do RADAR.

Utilizando as mesmas amostras, uma avaliação da perda no sinal devido à aquisição combinada de varredura completa e MRM também foi feita. Isso foi obtido por meio da execução de uma amostra fortificada, com somente MRM, seguida da mesma amostra com o RADAR ativado. A perda de sinal depende do número de transições contidas no método e quando as transições ocorrem relacionadas entre si. A Figura 4 mostra que a conservação do sinal ao utilizar o RADAR tem uma variação de 56 a 97% para os três compostos ilustrados, representando a faixa aproximada observada para os pesticidas nas misturas. Isso significa que baixos limites de detecção podem ainda ser obtidos ao utilizar o RADAR, que permite que mais informações da amostra sejam analisadas.

MRMs

MRMs + Full Scan56% of dedicated

MRM signal

Mix 1: Pyridaphenthion

MRMs

MRMs + Full Scan85% of dedicated

MRM signal

Mix 8: Edifenphos

MRMs

MRMs + Full Scan

97% of dedicated

MRM signal

Mix 2: Chlorbenside

Waters Corporation 34 Maple Street Milford, MA 01757 EUA Tel.: 1 508 478 2000 F: 1 508 872 1990 www.waters.com

[ NOTA TÉCNICA ]

Waters, Xevo, MassLynx, TargetLynx, Quanpedia, RADAR, Oasis, DisQuE e The Science of What’s Possible são marcas comerciais da Waters Corporation. Todas as outras marcas comerciais são propriedade de seus respectivos proprietários.

©2018 Waters Corporation. Produzido nos EUA. Setembro de 2018 720006377PB AG-PDF

RESUMO O Xevo TQ-GC simplificou rotinas de trabalho que permitem que os usuários produzam resultados que atendam às recomendações regulatórias. As funções incluídas do RADAR permitem que dados de MRM e varredura completa sejam coletados simultaneamente. Esses dados podem ser investigados para identificar mudanças para entender as interferências de extração no momento da análise original, como parte de uma investigação de extração de dados retrospectiva. A combinação de MRM e varredura completa em uma única aquisição, não afeta a sensibilidade e é importante para utilização na otimização de métodos.

Referências1. Hayward D et al. (2015) J. Agri. Food Chem.

37:8116–8124.

2. Cody R. (2018) J. Am. Soc. Mass Spectrom. 29:1594-1600.