ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS

E ACTINOMICETOS DO SOLO.

COMO TAMBÉM DE LEVEDURAS DE

SUCO DE UVA E CALDO DE CANA DE

AÇÚCAR

Profa. Dra. Maria Bernadete Medeiros

ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA -USP

ENGENHARIA BIOQUIMICA

AULA 3 MICROBIOLOGIA EXPERIMENTAL 2015

Introdução

A proposta da aula é isolar do solo

BACTÉRIAS AERÓBIAS e ACTINOMICETOS.

Como também isolar LEVEDURAS do caldo de

cana-de-açúcar e do suco de uva.

Analisar as colônias obtidas no meio ágar

nutriente e as células em caldo nutriente.

Classificar as bactérias e os actinomicetos

quanto a sua morfologia celular e a coloração

de Gram. Descrever a célula de levedura.

Classificação dos

actinomicetos

ACTINOMICETOS

1. São Eubactérias, Gram-positivas, filamentosos e aeróbios que tem

como habitat o solo. Na rizosfera que é a região do solo sob influência

das raízes das plantas. O odor de terra do solo é devido a produção de

um metabolito dos Streptomyces denominado de geosmina.

2. A ordem Actinomicetales incluem diversos genêros sendo

conhecidos Streptomyces, Nocardia e Actinomyces.

3. O seu metabolismo e fisiologia são semelhantes ao da bactéria.

Porém, quando cultivado em meio sólido apresentam-se como os

fungos filamentosos, isto é, contém micélio composto de hifas

ramificadas. A reprodução ocorre por meio da fragmentação das hifas

ou por esporos.

4. São microrganismos de interesse industrial. Atualmente, 70% dos

antibióticos produzidos pela indústria farmacêutica são sintetizados por

actinomicetos do gênero Streptomyces. Enquanto que, o gênero

Frankia possui a propriedade de fixar o nitrogênio no interior das raízes

de plantas lenhosas não leguminosa.

Domínio – Eubacteria

Classe – Actinobacteria

Ordem – Actinomycetales

Família – Streptomycetaceae

Gênero - Streptomyces

Gram-positivos filamentosos

Aeróbios estritos

Temperatura 25-35 ºC

pH 6,5 – 8,0

Habitat o solo

Ciclo de Vida

QUANTO A COMPOSIÇÃO DO

MEIO DE CULTURA DOS

MICRORGANISMOS

COMPOSIÇÃO ELEMENTAR DOS

MICRORGANISMOS BASE SECA (%)

ELEMENTO

BACTERIA

LEVEDURA

FUNGO

FILAMENTOSO

CARBONO 45 - 52 45 – 52 45 – 55

NITROGENIO 10 - 14 6 - 9 4 - 7

HIDROGENIO 10 10 10

OXIGÊNIO 20 20 20

ENXOFRE 0.2 - 1.0 0.05 – 0.3 0.1 – 0.5

FÓSFORO* 2.0 - 3.0 0.8 – 2.5 0.5 – 4.5

MAGNÉSIO 0,1 - 0.5 0.1 – 0.5 0.1 _ 0.3

POTÁSSIO 0.2 - 1.0 0.2 – 0.8 0.5 – 1.0

Profa Dra Maria Bernadete de Medeiros

MEIO DE CULTURA CALDO

1.BACTÉRIAS

Extrato de carne 3,0

Peptona 10,0

Cloreto de sódio 5,0 g/ L., pH 7,0

2. ACTINOMICETOS

Glicerol 10,0

Asparagina 1,0

K2HPO4 1,0 g/L, pH 7,0

3. LEVEDURAS

Extrato de levedura 3.0

Extrato de malte 3.0

Peptona 5.0

Glicose 10.0 g / L, pH 4.5

DIFERENÇA ENTRE O MEIO DE CULTURA

CALDO E AGAR NUTRIENTE.

O MEIO SÓLIDO CONTÉM O AGENTE GELIFICANTE

CHAMADO ÁGAR. TEM COMO FUNÇÃO SOLIDIFICAR O

MEIO DE CULTURA.

O ÁGAR É ENCONTRADO NAS ALGAS VERMELHAS

MARINHAS DA DIVISÃO Rhodophyta. É EXTRAÍDO DAS

ALGAS DOS GÊNEROS Gelidium spp. E Gracilaria spp .

É UM POLIMERO COMPOSTO DE UNIDADES DE galactose

- ácido galacturônico.

O AGAR É LIQUEFEITO A 45-50 0C E SÓLIDO EM

TEMPERATURA INFERIOR A 45 0C.

Profa Dra Maria Bernadete de Medeiros

ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS

E ACTINOMICETOS DO SOLO

COLETA DE AMOSTRA DE

SOLO E SUSPENSÃO EM

SOLUÇÃO SALINA ESTERIL

PREPARO

DA AMOSTRA DE SOLO

COLETA E PREPARO DA AMOSTRA DE SOLO

Técnica de repique

ISOLAR BACTÉRIAS E

ACTINOMICETOS

SEMEAR O INÓCULO

NA SUPERFÍCIE DO MEIO DE

CULTURA SÓLIDO EM PLACA DE

PETRI.

ISOLAMENTO DE LEVEDURAS

ISOLAMENTO DE LEVEDURAS

As leveduras serão isoladas do suco de

uva e do caldo de cana.

Os cultivos serão em meio para Levedura

e para o isolamento da colônia será

utilizado método das diluições

sucessivas.

MÉTODO DAS DILUIÇÕES SUCESSIVAS.

COLONIAS ISOLADAS EM PLACA DE PETRI

UTILIZANDO ESPÁTULA DE DRIGALSKY

MÉTODO DE ESGOTAMENTO

DO INÓCULO.

Isolamento de bactérias, actinomicetos e leveduras

utilizando o método de esgotamento do inóculo.