Aplicações da Citometria de Fluxo - BD Biosciences ... · A BD é uma empresa líder mundial em...
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Aplicações da Citometria de Fluxo Citometria de fluxo multicolor | Citometria de fluxo intracelular Quantificação simultânea de múltiplas proteínas Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade
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Aplicações da Citometria de Fluxo
Citometria de fluxo multicolor | Citometria de fluxo intracelularQuantificação simultânea de múltiplas proteínasApoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade
A BD é uma empresa líder mundial em tecnologia médica que
desenvolve, fabrica e vende dispositivos médicos, sistemas de
instrumentos e reagentes. A empresa se dedica a melhorar a saúde
das pessoas em todo o mundo, está focada na melhoria da
qualidade e velocidade do diagnóstico de doenças infecciosas e
câncer, além do avanço na descoberta, pesquisa e produção de
novos medicamentos e vacinas. Fundada em 1897 e sediada em
Franklin Lakes, New Jersey, emprega cerca de 30.000 associados
em mais de 50 países em todo o mundo. A BD atende
principalmente a instituições de saúde, pesquisadores das ciências
da vida, laboratórios clínicos, indústria farmacêutica e o público em
geral. Para mais informações visite www.bd.com.
Soluções em Serviços apoiando os avanços nas descobertas científicas e nas necessidades clínicas.
Conheça nossos programas especializados de serviços técnicos
e científicos desenvolvidos para atender as necessidades
laboratoriais por meio de ações voltadas aos seus recursos
humanos e tecnológicos. Entre em contato com o Especialista
de Produtos de sua região ou pelo 0800 771 7157.
PARA VOCÊ: Capacitação e educação continuada
• Treinamentos• Workshops• Acompanhamento de experimentos• Webinars• Atendimento preferencial� Outras vantagens exclusivas
PARA SEU EQUIPAMENTO: Suporte técnico diferenciado• Contrato de Manutenção• Extensão de Garantia• Acesso Remoto*• Serviços de Manutenção: Preventiva e Corretiva
*Consulte configurações necessárias para acesso remoto.
A BD é uma empresa líder mundial em tecnologia médica que
desenvolve, fabrica e vende dispositivos médicos, sistemas de
instrumentos e reagentes. A empresa se dedica a melhorar a saúde
das pessoas em todo o mundo, está focada na melhoria da
qualidade e velocidade do diagnóstico de doenças infecciosas e
câncer, além do avanço na descoberta, pesquisa e produção de
novos medicamentos e vacinas. Fundada em 1897 e sediada em
Franklin Lakes, New Jersey, emprega cerca de 30.000 associados
em mais de 50 países em todo o mundo. A BD atende
principalmente a instituições de saúde, pesquisadores das ciências
da vida, laboratórios clínicos, indústria farmacêutica e o público em
geral. Para mais informações visite www.bd.com.
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Índice
Amplie suas
possibilidades de análise com
a Citometria de Fluxo.
www.bdbiosciences.com/br/ccabd
CONSULTE NOSSOS CURSOS E AGENDA EM
O Centro de Conhecimento Aplicado BD – CCABD – possui toda a
infraestrutura necessária para garantir uma experiência de
aprendizado qualificada e prática. As diferentes plataformas de
citometria de fluxo disponíveis e os reagentes utilizados garantem a
todos os participantes o melhor aproveitamento das aulas práticas,
integrando sistemas e soluções.
Citometria de fluxo multicolor.............................................................6
Recursos e ferramentas .......................................................................6
Painel de Especificações de Fluorocromos.............................................8
BD Horizon™......................................................................................10
Citometria de fluxo intracelular ...........................................................11
Citocinas e fatores de transcrição.........................................................12
Proteínas fosforiladas BD Phosflow .....................................................13
Recursos e ferramentas .......................................................................14
Quantificação simultânea de múltiplas proteínas:
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) ......................................................15
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) Kit .................................................16
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) Flex Set..........................................16
Recursos e Ferramentas .......................................................................18
Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade ..............................19
Viabilidade celular e apoptose .............................................................20
Ciclo e proliferação celular...................................................................20
Recursos e ferramentas .......................................................................22
Portfólio de Equipamentos BD Biosciences..........................................23
BD Accuri™ C6 ...................................................................................24
BD LSRFortessa™ X20 e BD FACSAria™ Fusion ....................................26
BD FACSJazz™....................................................................................27
Índice
Amplie suas
possibilidades de análise com
a Citometria de Fluxo.
www.bdbiosciences.com/br/ccabd
CONSULTE NOSSOS CURSOS E AGENDA EM
O Centro de Conhecimento Aplicado BD – CCABD – possui toda a
infraestrutura necessária para garantir uma experiência de
aprendizado qualificada e prática. As diferentes plataformas de
citometria de fluxo disponíveis e os reagentes utilizados garantem a
todos os participantes o melhor aproveitamento das aulas práticas,
integrando sistemas e soluções.
Citometria de fluxo multicolor.............................................................6
Recursos e ferramentas .......................................................................6
Painel de Especificações de Fluorocromos.............................................8
BD Horizon™......................................................................................10
Citometria de fluxo intracelular ...........................................................11
Citocinas e fatores de transcrição.........................................................12
Proteínas fosforiladas BD Phosflow .....................................................13
Recursos e ferramentas .......................................................................14
Quantificação simultânea de múltiplas proteínas:
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) ......................................................15
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) Kit .................................................16
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) Flex Set..........................................16
Recursos e Ferramentas .......................................................................18
Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade ..............................19
Viabilidade celular e apoptose .............................................................20
Ciclo e proliferação celular...................................................................20
Recursos e ferramentas .......................................................................22
Portfólio de Equipamentos BD Biosciences..........................................23
BD Accuri™ C6 ...................................................................................24
BD LSRFortessa™ X20 e BD FACSAria™ Fusion ....................................26
BD FACSJazz™....................................................................................27
A citometria de fluxo é uma tecnologia que permite análise simultânea e multiparamétrica de células ou partículas em suspensão, avaliando-as individualmente. À medida que o fluxo de amostra passa por um ou mais feixes de luz (gerados por um ou mais lasers), o sistema óptico-eletrônico registra a forma como as estruturas dispersam a luz do laser incidente e captando as fluorescências emitidas. Assim, o equipamento obtém informações de diversos parâmetros, como tamanho relativo, complexidade interna e intensidades de fluorescências de cada célula ou partícula avaliada.
Bem vindo a um mundo mais colorido!
Análise de múltiplos parâmetros simultâneos e adicionando mais cores, você pode desvendar um novo mundo de informações e correlações.Experimente todo o potencial da citometria de fluxo multicolor com os equipamentos e reagentes BD. Utilizando anticorpos conjugados a fluorocromos, explore características celulares como expressão de moléculas de superfície, intracelulares, proteínas secretadas e muito mais.
A BD desenvolveu diversas ferramentas para lhe auxiliar no desenvolvimento de painéis multicores e permitir o aproveitamento completo desta poderosa metodologia, explore mais em: www.bdbiosciences.com/br/tools
Fluorescence Spectrum Viewer
Absorption and Emission Spectra
BD Antibodies iPad® App
BD FACSelect™ Buffer Compatibility Resource
Fluorochrome Specifications Chart and Poster
Example Human and Mouse Panels
BD FACSelect™ Multicolor Panel Designer
Multicolor Antibody Reagents Catalog
Encontre opções de fluorocromos para experimentos com mais cores e menos compensação.
Veja os espectros de emissão e aprenda mais sobre cada fluorocromo contido na linha de produtos da BD.
Pesquise anticorpos e encontre ferramentas e recursos adicionais para usar em seu iPad.
Navegue pelas opções de buffer para selecionar a combinação certa para as suas experiências de marcadores intracelulares e de superfície.
Construa um painel de reagentes baseadoem espécies, especificidades ou clones ecores do interesse.
Escolha a partir de nosso extenso portfólio de anticorpos conjugados a diversos fluorocromos os reagentes necessários para a montagem de seus painéis multicolor.
Citometria de Fluxo
AplicaçõesA técnica da citometria de fluxo vem ganhando cada vez mais importância, tanto na área clínica, quanto da pesquisa. Qualquer célula ou partícula suspensa em meio líquido pode ter diversos parâmetros analisados simultâneamente. Conheça as suas principais aplicações abaixo.
Pesquisa:• Imunofenotipagem• Proliferação Celular• Vida e Morte Celular: Viabilidade,
apoptose e ciclo celular• Comunicação Celular: quantificação de
proteínas, marcação Intracelular e sinalização celular por citometria de Fluxo
• Marcação de Proteínas Intracelulares
Clínica:• Caracterização de Células Tronco• Monitoramento de HIV• Diagnóstico de Leucemia• Prova Cruzada de Transplantes
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A citometria de fluxo é uma tecnologia que permite análise simultânea e multiparamétrica de células ou partículas em suspensão, avaliando-as individualmente. À medida que o fluxo de amostra passa por um ou mais feixes de luz (gerados por um ou mais lasers), o sistema óptico-eletrônico registra a forma como as estruturas dispersam a luz do laser incidente e captando as fluorescências emitidas. Assim, o equipamento obtém informações de diversos parâmetros, como tamanho relativo, complexidade interna e intensidades de fluorescências de cada célula ou partícula avaliada.
Bem vindo a um mundo mais colorido!
Análise de múltiplos parâmetros simultâneos e adicionando mais cores, você pode desvendar um novo mundo de informações e correlações.Experimente todo o potencial da citometria de fluxo multicolor com os equipamentos e reagentes BD. Utilizando anticorpos conjugados a fluorocromos, explore características celulares como expressão de moléculas de superfície, intracelulares, proteínas secretadas e muito mais.
A BD desenvolveu diversas ferramentas para lhe auxiliar no desenvolvimento de painéis multicores e permitir o aproveitamento completo desta poderosa metodologia, explore mais em: www.bdbiosciences.com/br/tools
Fluorescence Spectrum Viewer
Absorption and Emission Spectra
BD Antibodies iPad® App
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Fluorochrome Specifications Chart and Poster
Example Human and Mouse Panels
BD FACSelect™ Multicolor Panel Designer
Multicolor Antibody Reagents Catalog
Encontre opções de fluorocromos para experimentos com mais cores e menos compensação.
Veja os espectros de emissão e aprenda mais sobre cada fluorocromo contido na linha de produtos da BD.
Pesquise anticorpos e encontre ferramentas e recursos adicionais para usar em seu iPad.
Navegue pelas opções de buffer para selecionar a combinação certa para as suas experiências de marcadores intracelulares e de superfície.
Construa um painel de reagentes baseadoem espécies, especificidades ou clones ecores do interesse.
Escolha a partir de nosso extenso portfólio de anticorpos conjugados a diversos fluorocromos os reagentes necessários para a montagem de seus painéis multicolor.
Citometria de Fluxo
AplicaçõesA técnica da citometria de fluxo vem ganhando cada vez mais importância, tanto na área clínica, quanto da pesquisa. Qualquer célula ou partícula suspensa em meio líquido pode ter diversos parâmetros analisados simultâneamente. Conheça as suas principais aplicações abaixo.
Pesquisa:• Imunofenotipagem• Proliferação Celular• Vida e Morte Celular: Viabilidade,
apoptose e ciclo celular• Comunicação Celular: quantificação de
proteínas, marcação Intracelular e sinalização celular por citometria de Fluxo
• Marcação de Proteínas Intracelulares
Clínica:• Caracterização de Células Tronco• Monitoramento de HIV• Diagnóstico de Leucemia• Prova Cruzada de Transplantes
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Violet Laser (405nm)
Ultraviolet Laser (355nm)
Blue Laser (488 nm) / Yellow-Green Laser (561 nm)
Red Laser (640 nm)
Painel de referência de Lasers e Fluorocromos
Painel de Especificações de Fluorocromos
Utilize esta tabela para determinar quais fluorocromos são excitados pelos lasers de seu equipamento.
Visite bdbiosciences.com/br/colors para informações detalhadas sobre novos fluorocromos, equipamentos e ferramentas que auxiliam a montagem de painéis multicolor.
**A linha de excitação do laser representa os lasers que excitam o fluorocromo. Não necessariamente são os lasers de cada equipamento.† APC e PE-Cy5 devem ser utilizados juntos nos instrumentos com compensação cross-beam.‡ A sensibilidade do PerCP com laser de alta potência (>25mW) é reduzida e é somente recomendado para marcadores de alta expressão.§ Capaz de detectar 8 cores simultâneamente (4 laser azul, 2 laser vermelho, 2 laser violeta). Filtros BD Horizon PE-CF594 e Alexa Fluor® 700 são
disponíveis separadamente.¶ Cuidado extra para evitar a sobreposição de espectros.
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *. 98
Analisadores
Fluorocromo
Sorters
Cor da emissão fluorescente
Ex-Max (nm)
Em-Max (nm)
Linha de excitação do laser (nm)*
355
488
405
355
405
348
490
407
348
407
395
515
650
737
786
VioletBD Horizon™ BUV395
BD Horizon™ BB515
BD Horizon™ BV650
BD Horizon™ BUV737
BD Horizon™ BV786
Laser
UV
Violeta
Azul
Azul / YG
Azul / YG
Vermelho
Vermelho
Azul / YG
Azul / YG
Azul
Violeta
Violeta
UV
Violeta
Violeta
Vermelho
UV
Violet Laser (405nm)
Ultraviolet Laser (355nm)
Blue Laser (488 nm) / Yellow-Green Laser (561 nm)
Red Laser (640 nm)
Painel de referência de Lasers e Fluorocromos
Painel de Especificações de Fluorocromos
Utilize esta tabela para determinar quais fluorocromos são excitados pelos lasers de seu equipamento.
Visite bdbiosciences.com/br/colors para informações detalhadas sobre novos fluorocromos, equipamentos e ferramentas que auxiliam a montagem de painéis multicolor.
**A linha de excitação do laser representa os lasers que excitam o fluorocromo. Não necessariamente são os lasers de cada equipamento.† APC e PE-Cy5 devem ser utilizados juntos nos instrumentos com compensação cross-beam.‡ A sensibilidade do PerCP com laser de alta potência (>25mW) é reduzida e é somente recomendado para marcadores de alta expressão.§ Capaz de detectar 8 cores simultâneamente (4 laser azul, 2 laser vermelho, 2 laser violeta). Filtros BD Horizon PE-CF594 e Alexa Fluor® 700 são
disponíveis separadamente.¶ Cuidado extra para evitar a sobreposição de espectros.
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *. 98
Analisadores
Fluorocromo
Sorters
Cor da emissão fluorescente
Ex-Max (nm)
Em-Max (nm)
Linha de excitação do laser (nm)*
355
488
405
355
405
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407
348
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395
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786
VioletBD Horizon™ BUV395
BD Horizon™ BB515
BD Horizon™ BV650
BD Horizon™ BUV737
BD Horizon™ BV786
Laser
UV
Violeta
Azul
Azul / YG
Azul / YG
Vermelho
Vermelho
Azul / YG
Azul / YG
Azul
Violeta
Violeta
UV
Violeta
Violeta
Vermelho
UV
TM TMBD Horizon Brilliant VioletMarcadores brilhantes auxiliam na identificação de populaçõescelulares raras ou com baixa expressão das moléculas de interesse.
Agora você pode identificar populações celulares raras ou com baixa expressão das moléculas de interesse com os polímeros conjugados BD Horizon™ Brilliant Violet™.
Desenvolvidos a partir de uma tecnologia pioneira na área de polímeros fluorescentes adquirida da Sirigen Ltd., os marcadores fluorescentes da linha BD Horizon Brilliant Violet são mais brilhantes que as alternativas convencionais. Sua maior intensidade de brilho permite que você identifique populações celulares com menor densidade de receptores em comparação com outros marcadores, permitindo a visualização de populações celulares que não eram identificadas antes.
Além disso, os reagentes BD Horizon Brilliant Ultraviolet abrem um mundo de possibilidades e produtividade para pesquisadores que utilizam a citometria de fluxo multicolor em sua pesquisa. Ao adicionar a faixa do ultravioleta ao painel, marcadores podem ser distribuídos por mais lasers, reduzindo os requisitos de compensação do experimento.
A utilização destes novos corantes excitados pelo laser ultravioleta reduz o tempo de configuração, porque há menos necessidade de ajustar a compensação. Quando corantes são combinados com uma posição específica do laser ultravioleta, as opções e capacidades são expandidos.
Saiba Mais em bdbiosciences.com/br/go/brilliant/
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Citometria de fluxo intracelular: Análise multiparamétrica de citocinas, fatores de transcrição e proteínas fosforiladas
bdbiosciences.com/br/intracellularProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
A citometria de fluxo intracelular é uma poderosa técnica para identificação de diversos tipos celulares e análise das vias de sinalização e respostas funcionais em amostras de linhagens celulares e populações heterogêneas. Para determinados tipos celulares essa identificação depende da utilização combinada de marcadores de superfície e intracelulares, como citocinas ou fatores de transcrição.
Por meio desta técnica, diversas informações sobre a função e sinalização celular podem ser obtidas pela combinação de anticorpos fluorescentes específicos para marcadores de superfície com marcadores de apoptose, proliferação e proteínas fosforiladas determinando assim, a resposta a estímulos ou tratamentos em diferentes subtipos celulares.
A c o m b i n a ç ã o d e m ú l t i p l o s m a r c a d o re s simultaneamente diminui o tempo de aquisição dos dados e possibilita a utilização de amostras raras, permitindo que um maior número de parâmetros possam ser estudados simultaneamente, em uma mesma célula.
Enquanto outras metodologias, como o Western blot, são úteis no estudo da expressão de proteínas em uma população celular como um todo, a citometria de fluxo intracelular permite a detecção de múltiplas proteínas de superfície e intracelulares, simultaneamente, em células individuais.
A BD Biosciences possui anticorpos conjugados a diversos fluorocromos, tampões, kits e protocolos para citometria de fluxo intracelular para o estudos de citocinas, fatores de transcrição, vias de sinalização e análise de proteínas fosforiladas, contribuindo assim, com novas descobertas nas áreas de imunologia, inflamação, biologia celular e células-tronco.
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TM TMBD Horizon Brilliant VioletMarcadores brilhantes auxiliam na identificação de populaçõescelulares raras ou com baixa expressão das moléculas de interesse.
Agora você pode identificar populações celulares raras ou com baixa expressão das moléculas de interesse com os polímeros conjugados BD Horizon™ Brilliant Violet™.
Desenvolvidos a partir de uma tecnologia pioneira na área de polímeros fluorescentes adquirida da Sirigen Ltd., os marcadores fluorescentes da linha BD Horizon Brilliant Violet são mais brilhantes que as alternativas convencionais. Sua maior intensidade de brilho permite que você identifique populações celulares com menor densidade de receptores em comparação com outros marcadores, permitindo a visualização de populações celulares que não eram identificadas antes.
Além disso, os reagentes BD Horizon Brilliant Ultraviolet abrem um mundo de possibilidades e produtividade para pesquisadores que utilizam a citometria de fluxo multicolor em sua pesquisa. Ao adicionar a faixa do ultravioleta ao painel, marcadores podem ser distribuídos por mais lasers, reduzindo os requisitos de compensação do experimento.
A utilização destes novos corantes excitados pelo laser ultravioleta reduz o tempo de configuração, porque há menos necessidade de ajustar a compensação. Quando corantes são combinados com uma posição específica do laser ultravioleta, as opções e capacidades são expandidos.
Saiba Mais em bdbiosciences.com/br/go/brilliant/
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Citometria de fluxo intracelular: Análise multiparamétrica de citocinas, fatores de transcrição e proteínas fosforiladas
bdbiosciences.com/br/intracellularProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
A citometria de fluxo intracelular é uma poderosa técnica para identificação de diversos tipos celulares e análise das vias de sinalização e respostas funcionais em amostras de linhagens celulares e populações heterogêneas. Para determinados tipos celulares essa identificação depende da utilização combinada de marcadores de superfície e intracelulares, como citocinas ou fatores de transcrição.
Por meio desta técnica, diversas informações sobre a função e sinalização celular podem ser obtidas pela combinação de anticorpos fluorescentes específicos para marcadores de superfície com marcadores de apoptose, proliferação e proteínas fosforiladas determinando assim, a resposta a estímulos ou tratamentos em diferentes subtipos celulares.
A c o m b i n a ç ã o d e m ú l t i p l o s m a r c a d o re s simultaneamente diminui o tempo de aquisição dos dados e possibilita a utilização de amostras raras, permitindo que um maior número de parâmetros possam ser estudados simultaneamente, em uma mesma célula.
Enquanto outras metodologias, como o Western blot, são úteis no estudo da expressão de proteínas em uma população celular como um todo, a citometria de fluxo intracelular permite a detecção de múltiplas proteínas de superfície e intracelulares, simultaneamente, em células individuais.
A BD Biosciences possui anticorpos conjugados a diversos fluorocromos, tampões, kits e protocolos para citometria de fluxo intracelular para o estudos de citocinas, fatores de transcrição, vias de sinalização e análise de proteínas fosforiladas, contribuindo assim, com novas descobertas nas áreas de imunologia, inflamação, biologia celular e células-tronco.
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PRINCIPAIS KITSVeja a lista completa de Kits em bdbiosciences.com/br/intracellular
560750 BD Phosflow™ Human T Cell Activation KitAlexa Fluor® 647 conjugados com: p38 MAPK (pT180/Y182), ERK (pT202/204), Stat1 (pY701), Stat3 (pY705), Stat5 (pY694), and Stat6 (pY641); cocktail T cell humano; reagentes para compensação, células controle e tampões
562089 BD Phosflow™ Human Monocyte/NK Cell Activation Kit
562496 BD Stemflow™ Human Definitive and Pancreatic Endoderm Analysis KitPax-6 Alexa Fluor® 488, PDX-1 PE, FoxA2 PE, Sox2 PerCP-Cy™5.5, Sox17PerCP-Cy™5.5, Nanog Alexa Fluor® 647; BD Phosflow™ perm buffer III; Tampão de fixação BD Cytofix™
561526 BD Stemflow™ Human Neural Lineage Analysis KitSox2 PerCP-Cy™5.5, GFAP Alexa Fluor® 647, Doublecortin PE, Nestin Alexa Fluor 647, Ki-67 Alexa Fluor 488, Sox1 PerCP-Cy5.5, CD44 FITC; tampão de fixação BD Cytofix™; BD Phosflow™ perm buffer III
550502 BD Phosflow™ Underphosphorylated Retinoblastoma (Rb) SetUnderphosphorylated Rb PE (clone G99-549); mouse IgG1, k PE isotype control (clone MOPC-21)
Protocolos padronizados e compatibilidade de reagentes
BD Phosflow - Principais Produtos
558049 - BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer (Amostras de sangue total)
557870 - BD Phosflow™ Fix Buffer I
557885 - BD Phosflow™ Perm/Wash Buffer I
558052 - BD Phosflow™ Perm Buffer II
558050 - BD Phosflow™ Perm Buffer III
560746 - BD Phosflow™ Perm Buffer IV
Anticorpos da linha BD Phosflow para marcação das vias de sinalização
Anticorpos contra proteínas de membrana ou intracelulares para fenotipagem celular
bdbiosciences.com/br/intracellularProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Fixar as células com um dos tampões fixadores BD Phosflow por 10 minutos.
3
MARCAÇÃO
Passo 3
4
ANÁLISE
Passo 4
2
PERMEABILIZAÇÃO
Passo 2
1
FIXAÇÃO
Passo 1
Permeabilizar as células com um dos tampões permeabilizadores BD Phosflow por 30 minutos.
Marcar as células com os anticorpos conjugados BD Phosflow diluídos no tampão BD Pharmingen Stain Buffer.
Analisar as células em um instrumento de citometria de fluxo BD FACS™.
13
1FIXAÇÃO e
PERMEABILIZAÇÃO
Passo 1
Marcação Intracelular - Principais Produtos
bdbiosciences.com/br/intracellular* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção do item marcado com *.
Citocinas e fatores de transcrição
12
CITOCINAS
Inibição do transporte de
proteínas
3
ANÁLISE
Passo 3
2
MARCAÇÃO
Passo 2
Lise de eritrócitospara amostras de sangue total periférico
!
1
554724 - BD GolgiStop™ – Protein Transport Inhibitor - Monensin solution555029 - BD GolgiPlug™ – Protein Transport Inhibitor - Brefeldin A solution555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus - Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus - Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™
Tampões de Fixação554655 - BD Cytofix™ Fixation BufferTampões de Permeabilização554723 - BD Perm/Wash™ Buffer554722 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution347692 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 10mL340973 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 25mL
Tampões de Marcação554657 - Stain Buffer (BSA)554656 - Stain Buffer (FBS)Tampões de Lise555899 - BD Pharm Lyse™ – Lysing Buffer 10x349202 - BD FACS™ Lysing Solution*
2 Conjuntos de Tampões (Fatores de Transcrição/Detecção de Citocinas)562725 - Transcription Factor Buffer Set 25 testes (com Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer)562574 - Transcription Factor Buffer Set 100 testes (com Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer)554714 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™560409 - Mouse Foxp3 Buffer Set641776 - BD IntraSure™ Kit
3
Analisar as células em um citômetro de fluxo BD FACS™
!
PRINCIPAIS KITSVeja a lista completa de Kits em bdbiosciences.com/br/intracellular
560750 BD Phosflow™ Human T Cell Activation KitAlexa Fluor® 647 conjugados com: p38 MAPK (pT180/Y182), ERK (pT202/204), Stat1 (pY701), Stat3 (pY705), Stat5 (pY694), and Stat6 (pY641); cocktail T cell humano; reagentes para compensação, células controle e tampões
562089 BD Phosflow™ Human Monocyte/NK Cell Activation Kit
562496 BD Stemflow™ Human Definitive and Pancreatic Endoderm Analysis KitPax-6 Alexa Fluor® 488, PDX-1 PE, FoxA2 PE, Sox2 PerCP-Cy™5.5, Sox17PerCP-Cy™5.5, Nanog Alexa Fluor® 647; BD Phosflow™ perm buffer III; Tampão de fixação BD Cytofix™
561526 BD Stemflow™ Human Neural Lineage Analysis KitSox2 PerCP-Cy™5.5, GFAP Alexa Fluor® 647, Doublecortin PE, Nestin Alexa Fluor 647, Ki-67 Alexa Fluor 488, Sox1 PerCP-Cy5.5, CD44 FITC; tampão de fixação BD Cytofix™; BD Phosflow™ perm buffer III
550502 BD Phosflow™ Underphosphorylated Retinoblastoma (Rb) SetUnderphosphorylated Rb PE (clone G99-549); mouse IgG1, k PE isotype control (clone MOPC-21)
Protocolos padronizados e compatibilidade de reagentes
BD Phosflow - Principais Produtos
558049 - BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer (Amostras de sangue total)
557870 - BD Phosflow™ Fix Buffer I
557885 - BD Phosflow™ Perm/Wash Buffer I
558052 - BD Phosflow™ Perm Buffer II
558050 - BD Phosflow™ Perm Buffer III
560746 - BD Phosflow™ Perm Buffer IV
Anticorpos da linha BD Phosflow para marcação das vias de sinalização
Anticorpos contra proteínas de membrana ou intracelulares para fenotipagem celular
bdbiosciences.com/br/intracellularProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Fixar as células com um dos tampões fixadores BD Phosflow por 10 minutos.
3
MARCAÇÃO
Passo 3
4
ANÁLISE
Passo 4
2
PERMEABILIZAÇÃO
Passo 2
1
FIXAÇÃO
Passo 1
Permeabilizar as células com um dos tampões permeabilizadores BD Phosflow por 30 minutos.
Marcar as células com os anticorpos conjugados BD Phosflow diluídos no tampão BD Pharmingen Stain Buffer.
Analisar as células em um instrumento de citometria de fluxo BD FACS™.
13
1FIXAÇÃO e
PERMEABILIZAÇÃO
Passo 1
Marcação Intracelular - Principais Produtos
bdbiosciences.com/br/intracellular* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção do item marcado com *.
Citocinas e fatores de transcrição
12
CITOCINAS
Inibição do transporte de
proteínas
3
ANÁLISE
Passo 3
2
MARCAÇÃO
Passo 2
Lise de eritrócitospara amostras de sangue total periférico
!
1
554724 - BD GolgiStop™ – Protein Transport Inhibitor - Monensin solution555029 - BD GolgiPlug™ – Protein Transport Inhibitor - Brefeldin A solution555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus - Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus - Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™
Tampões de Fixação554655 - BD Cytofix™ Fixation BufferTampões de Permeabilização554723 - BD Perm/Wash™ Buffer554722 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution347692 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 10mL340973 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 25mL
Tampões de Marcação554657 - Stain Buffer (BSA)554656 - Stain Buffer (FBS)Tampões de Lise555899 - BD Pharm Lyse™ – Lysing Buffer 10x349202 - BD FACS™ Lysing Solution*
2 Conjuntos de Tampões (Fatores de Transcrição/Detecção de Citocinas)562725 - Transcription Factor Buffer Set 25 testes (com Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer)562574 - Transcription Factor Buffer Set 100 testes (com Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer)554714 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™560409 - Mouse Foxp3 Buffer Set641776 - BD IntraSure™ Kit
3
Analisar as células em um citômetro de fluxo BD FACS™
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15bdbiosciences.com/br/cbaProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Quantificação de Proteínas solúveis: BD™ Cytometric Bead Array (CBA)
BeadsFluorescentes
Anticorpode captura
Anticorpode detecção
Fluorocromo PEAnalíto
Imunoensaio tipo sanduíche, o BD CBA é uma aplicação da citometria de fluxo que permite quantificar até 30 proteínas solúveis e intracelulares ao mesmo tempo com apenas 25 a 50 μL de amostra. O sistema utiliza uma combinação de diferentes faixas de f luorescênc ia e beads conjugadas a anticorpos de captura de alta afinidade. Cada uma destas beads possui uma fluorescência única, permitindo a detecção de várias proteínas simultaneamente num único tubo.
O sistema foi desenvolvido para análises multiplex, oferece maior quantidade de informações de uma mesma amostra, maximizando o número de proteínas que podem ser analisadas com uma pequena amostra disponível. Assim a técnica reduz o tempo e quantidade de amostra necessários para os resultados se comparado às técnicas tradicionais ELISA e Western Blot.
Beads Amostra
Anticorpos de detecção
Lavagem Análise por Citometria de Fluxo
Concentração
Curva padrão
14
Citometria de Fluxo Intracelular - Recursos
Conheça os recursos disponíveis para a Citometria de Fluxo Intracelular que auxiliam sua pesquisa e aumentam seu conhecimento na área.
Consulte brochuras, FAQ, protocolos,
ferramentas e muito mais*!
• Intracellullar Flow Cyometry
• BD Phosflow™ Cell Signaling
• BD Pharmingen™ Transcription Factor Buffer Set • BD FACSelect™ Buffer Compatibility Resource• BD Phosflow™ Human CrkL (pY207) Monoclonal Antibodies• BD Phosflow™ Human Monocyte/NK Cell Activation Kit• BD Phosflow™ Smad Monoclonal Antibodies• BD Phosflow™ T Cell Activation Kit (Human)• BD Phosflow™ Violet Fluorescent Cell Barcoding Kit• Cytobank Flow Cytometry Data Analysis Software
• BD Phosflow™ Technology Product List• Intracellular Flow Cytometry Product List
• Antibodies to Cell-Surface Markers Tested for BD Phosflow™ Protocols• BD FACSelect™ Buffer Compatibility Resource• Cytobank
• 96 Deep Well Phosflow Staining with Cytokine Stimulation• BD Phosflow™ Alternative Protocol 1: Fix–Stain–Perm• BD Phosflow™ Alternative Protocol 2: Stain–Fix–Perm• BD Phosflow™ Protocol for Adherent Cells• BD Phosflow™ Protocols for Human PBMCs• BD Phosflow™ Protocols for Human Whole Blood Samples• BD Phosflow™ Protocols for Mouse Splenocytes or Thymocytes• BD Phosflow™ Protocols for TCR Stimulation: Human• Simultaneous Measurement of Cell Surface Markers with Cellular Proliferation and Protein Phosphorylation• Simultaneous Measurement of Cell Surface Markers with T-bet and Stat5 (pY694) in IL-2–Stimulated Human
Whole Blood using BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer and BD Phosflow™ Perm Buffer III• Suggested Stimulation Conditions for Phosphoprotein Detection
Brochuras
Perguntas Frequentes
Informações de Produtos
Lista de Produtos
Ferramentas
Protocolos
bdbiosciences.com/br/intracellular
*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/ics
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
15bdbiosciences.com/br/cbaProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Quantificação de Proteínas solúveis: BD™ Cytometric Bead Array (CBA)
BeadsFluorescentes
Anticorpode captura
Anticorpode detecção
Fluorocromo PEAnalíto
Imunoensaio tipo sanduíche, o BD CBA é uma aplicação da citometria de fluxo que permite quantificar até 30 proteínas solúveis e intracelulares ao mesmo tempo com apenas 25 a 50 μL de amostra. O sistema utiliza uma combinação de diferentes faixas de f luorescênc ia e beads conjugadas a anticorpos de captura de alta afinidade. Cada uma destas beads possui uma fluorescência única, permitindo a detecção de várias proteínas simultaneamente num único tubo.
O sistema foi desenvolvido para análises multiplex, oferece maior quantidade de informações de uma mesma amostra, maximizando o número de proteínas que podem ser analisadas com uma pequena amostra disponível. Assim a técnica reduz o tempo e quantidade de amostra necessários para os resultados se comparado às técnicas tradicionais ELISA e Western Blot.
Beads Amostra
Anticorpos de detecção
Lavagem Análise por Citometria de Fluxo
Concentração
Curva padrão
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Whole Blood using BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer and BD Phosflow™ Perm Buffer III• Suggested Stimulation Conditions for Phosphoprotein Detection
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Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Destaques dos produtos BD CBA
bdbiosciences.com/br/cbaProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.*Templates disponíveis para todos os citometros de fluxo BD validados para o uso do BD CBA.
Reagentes com qualidade e reprodutibilidade superiores.Todos os produtos BD CBA têm a sua performance avaliada em relação à reprodutibilidade, linearidade, taxa de recuperação e limite de detecção teórica. Estes valores são reportados na documentação que acompanha cada produto BD CBA.
• Reprodutibilidade
• Linearidade
• Taxa de recuperação
• Limite teórico de detecção
A reprodutibilidade intra e inter-ensaios são determinadas através da avaliação de dez replicatas com três diferentes níveis de proteínas de uma mesma amostra (intra-ensaio) e três replicatas de três diferentes níveis de proteínas de quatro experimentos diferentes (inter-ensaio)
Uma quantidade conhecida de determinada proteína é diluída em amostras de sobrenadante de cultura celular, soro ou plasma com EDTA - ethylenediamine tetraacetic acid - seguido de uma diluição seriada. As amostras diluídas são levadas ao ensaio e os resultados são comparados com os valores esperados desta proteína em cada diluição.
Três concentrações diferentes de determinada proteína são adicionadas à amostras de sobrenadante de cultura celular, soro ou plasma com EDTA - ethylenediamine tetraacetic acid. As amostras são analisadas e os resultados comparados com a concentração esperada para determinar a recuperação.
A curva padrão individual de determinada citocina define os níveis mínimos e máximos de quantificação.
Templates de aquisição e análise disponíveis para todos os equipamentos BD.*Análise automatizada usando o FCAP Array.
17
Um método de detecção aberto e configurável, para que o pesquisador possa construir seu próprio ensaio Multiplex. Escolha até 30 proteínas de interesse e o conjunto de tampões apropriado para o seu ensaio. Flex Sets são suficientes para 100 testes e contém os reagentes de captura, detecção e curva-padrão.
BD CBA Flex Set
Painéis pré-configurados para análise de perfis imunológicos. Suficientes para 50, 80 ou 100 amostras (dependendo do kit escolhido). Contém todos os reagentes necessários para realização do ensaio. Kits para Humanos, Camundongos e Primatas não-humanos. Detectam de 6 a 7 citocinas simultaneamente.
BD CBA Kit
Para pesquisadores que desejam quantificar uma proteína que não faz parte do portfólio dos sistemas BD CBA.BD CBA Functional Beads
O sistema BD CBA está disponível em três formatos para diferentes necessidades:
BD CBA - Principais Produtos
Master Buffer Kit apropriado*
Functional Beads Conjugation Buffer Set*
Tampões*
Beads de Captura + Reagente de Detecção
Beads de Captura
Beads de Captura + Reagente de Detecção
Curva Padrão*
Reagente deDetecção
Curva Padrão*
Disponíveis para 100 ou 500 testesProteínas Liofilizadas para confecção da curva (acompanham as beads de captura e detecção).
Proteínas liofilizadas para confecção da curva padrão
• Diluentes• Tampão de lavagem• Beads de Setup• Alguns kits incluem outros
reagentes adicionais
55855615 conjugações• Tampão de conjugação• Tampão de armazenamento
* Para confirmação da conjugação recomenda-se o uso de detectores
marcados com PE contra a imunoglobulina conjugada.
• Mouse Ig Detector – 558550 • Rabbit IgG Detector – 558553 • Rat Ig Detector - 558551
• Anticorpo conjugado a PE contra a proteína ou anticorpo de interesse capturado.
• Reagente não comercializado.
• Diluentes• Tampão de lavagem• Beads de Setup
• Imunoglobulinas• Citocinas e fatores• Proteínas fosforiladas• Alta sensibilidade
6 – 12 conjugações de 500 – 1000 testes cada30 opções de fluorescências
• Para conjugação ao anticorpo contra a
poteína de interesse ou conjugação a um
substrato poteico para captura do anticorpo a
ser investigado naamostra.
Reagentes para detecção de um conjunto pré-estabelecido de proteínas solúveis, como Citocinas, imunoglobulinas e fatores.
* Os componentes podem ser adquiridos separadamente, caso haja necessidade.bdbiosciences.com/br/cbaProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.16
Destaques dos produtos BD CBA
bdbiosciences.com/br/cbaProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.*Templates disponíveis para todos os citometros de fluxo BD validados para o uso do BD CBA.
Reagentes com qualidade e reprodutibilidade superiores.Todos os produtos BD CBA têm a sua performance avaliada em relação à reprodutibilidade, linearidade, taxa de recuperação e limite de detecção teórica. Estes valores são reportados na documentação que acompanha cada produto BD CBA.
• Reprodutibilidade
• Linearidade
• Taxa de recuperação
• Limite teórico de detecção
A reprodutibilidade intra e inter-ensaios são determinadas através da avaliação de dez replicatas com três diferentes níveis de proteínas de uma mesma amostra (intra-ensaio) e três replicatas de três diferentes níveis de proteínas de quatro experimentos diferentes (inter-ensaio)
Uma quantidade conhecida de determinada proteína é diluída em amostras de sobrenadante de cultura celular, soro ou plasma com EDTA - ethylenediamine tetraacetic acid - seguido de uma diluição seriada. As amostras diluídas são levadas ao ensaio e os resultados são comparados com os valores esperados desta proteína em cada diluição.
Três concentrações diferentes de determinada proteína são adicionadas à amostras de sobrenadante de cultura celular, soro ou plasma com EDTA - ethylenediamine tetraacetic acid. As amostras são analisadas e os resultados comparados com a concentração esperada para determinar a recuperação.
A curva padrão individual de determinada citocina define os níveis mínimos e máximos de quantificação.
Templates de aquisição e análise disponíveis para todos os equipamentos BD.*Análise automatizada usando o FCAP Array.
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Um método de detecção aberto e configurável, para que o pesquisador possa construir seu próprio ensaio Multiplex. Escolha até 30 proteínas de interesse e o conjunto de tampões apropriado para o seu ensaio. Flex Sets são suficientes para 100 testes e contém os reagentes de captura, detecção e curva-padrão.
BD CBA Flex Set
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BD CBA Kit
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Tampões*
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Beads de Captura
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Curva Padrão*
Reagente deDetecção
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Disponíveis para 100 ou 500 testesProteínas Liofilizadas para confecção da curva (acompanham as beads de captura e detecção).
Proteínas liofilizadas para confecção da curva padrão
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55855615 conjugações• Tampão de conjugação• Tampão de armazenamento
* Para confirmação da conjugação recomenda-se o uso de detectores
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• Mouse Ig Detector – 558550 • Rabbit IgG Detector – 558553 • Rat Ig Detector - 558551
• Anticorpo conjugado a PE contra a proteína ou anticorpo de interesse capturado.
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6 – 12 conjugações de 500 – 1000 testes cada30 opções de fluorescências
• Para conjugação ao anticorpo contra a
poteína de interesse ou conjugação a um
substrato poteico para captura do anticorpo a
ser investigado naamostra.
Reagentes para detecção de um conjunto pré-estabelecido de proteínas solúveis, como Citocinas, imunoglobulinas e fatores.
* Os componentes podem ser adquiridos separadamente, caso haja necessidade.bdbiosciences.com/br/cbaProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.16
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O balanço entre a proliferação e morte celular é importante para o desen-volvimento e homeostasia tecidual. A proliferação celular é regulada pelo processo de c ic lo ce lu la r, possibilitando o aumento do número de células após o p roces so de m i to se . A apoptose é caracterizada como uma morte celular programada.
Nos últimos anos a citometria de fluxo multicolor tornou-se essenc ia l no es tudo de processos celulares como ciclo Celular, apoptose, viabilidade e prol i feração celular e seus mecanismos fundamentais envol-vidos na imunidade, inflamação, hematopoiese e neoplasia, dentre outros. O sucesso da metodologia é resultante da sua capacidade de monitorar esses processos simultaneamente a outros eventos celulares como a fosforilação de proteínas e secreção de citocinas dentro de populações celulares heterogêneas.
Para o estudo destes processos por citometria de fluxo, a BD Biosciences oferece diversas ferramentas incluindo anticorpos, kits, e sistemas, além de reagentes de alta qualidade para determinação e detecção da apoptose e proliferação celular por ELISA, imunohistoquímica, imagem celular e Western blot. Não deixe de conhecer as inovações do BD Horizon™ Violet Cell Proliferation Dye 450 (VPD450) e anticorpos para PARP clivado e caspase-3 disponíveis para diferentes tipos de aplicações.
bdbiosciences.com/br/apoptosisProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade
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BD CBA - Quantificação de proteínas por Citometria de Fluxo - Recursos
Conheça os recursos disponíveis para BD CBA - Quantificação de proteínas por Citometria de Fluxo – que auxiliam sua pesquisa e aumentam seu conhecimento na área.
Consulte brochuras, FAQ,
Informações de produtos,guias, ferramentas
e muito mais*!
• BD™ Cytometric Bead Array
CBA Kits• BD™ Cytometric Bead Array: BD CBA Human and Mouse Th1/Th2/Th17 Kits• BD™ CBA Reagents: A complete solution with the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer• Comparison of BD™ CBA Standards to the NIBSC/WHO International Standards• Tools for Cytokine and Chemokine QuantitationFlex Sets• BD™ CBA: Cell Signaling Flex Set System• BD™ CBA Enhanced Sensitivity Flex Set System• BD™ CBA Human Immunoglobulin Flex Set System: Multiplexed, Sensitive Detection of Soluble Immunoglobulins• BD™ CBA Reagents: A complete solution with the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer• BD™ CBA Soluble Protein Flex Set System: For Multiplex Analysis of Cytokines, Chemokines, and Growth Factors• BD Human IL-17A Reagents: A Comprehensive Portfolio for Inflammation and Autoimmunity Research• BD Pharmingen Mouse IL-17A Antibodies for Flow Cytometry and Multiplexed Bead Assays• Comparison of BD™ CBA Standards to the NIBSC/WHO International Standards
• BD™ Cytometric Bead Array
CBA Kits & Flex Sets• BD Accuri™ C6 flow cytometer• BD FACSAria™ III cell sorter• BD FACSArray™ flow cytometer
• Aquisition Templates for BD Accuri™ C6• Bead Library - FCAP Array• Cell Signaling Flex Set Compatibility• Human Ig Flex Set Compatibility• Human Soluble Protein/Receptor Flex Set Compatibility• Mouse/Rat Soluble Protein Flex Set Compatibility• References
• BD FACSCalibur™ flow cytometer *• BD FACSCanto™ II flow cytometer *• BD FACSVerse™ flow cytometer• BD LSRFortessa™ flow cytometer
Brochuras
Perguntas Frequentes
Lista de Produtos
Ajuste e Configuração de Equipamento
Ferramentas
bdbiosciences.com/br/cba
*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/cba
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *.
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O balanço entre a proliferação e morte celular é importante para o desen-volvimento e homeostasia tecidual. A proliferação celular é regulada pelo processo de c ic lo ce lu la r, possibilitando o aumento do número de células após o p roces so de m i to se . A apoptose é caracterizada como uma morte celular programada.
Nos últimos anos a citometria de fluxo multicolor tornou-se essenc ia l no es tudo de processos celulares como ciclo Celular, apoptose, viabilidade e prol i feração celular e seus mecanismos fundamentais envol-vidos na imunidade, inflamação, hematopoiese e neoplasia, dentre outros. O sucesso da metodologia é resultante da sua capacidade de monitorar esses processos simultaneamente a outros eventos celulares como a fosforilação de proteínas e secreção de citocinas dentro de populações celulares heterogêneas.
Para o estudo destes processos por citometria de fluxo, a BD Biosciences oferece diversas ferramentas incluindo anticorpos, kits, e sistemas, além de reagentes de alta qualidade para determinação e detecção da apoptose e proliferação celular por ELISA, imunohistoquímica, imagem celular e Western blot. Não deixe de conhecer as inovações do BD Horizon™ Violet Cell Proliferation Dye 450 (VPD450) e anticorpos para PARP clivado e caspase-3 disponíveis para diferentes tipos de aplicações.
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Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade
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APLI
CAÇÃ
O E
PRO
DUTO
S
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Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade - Principais Produtos
CÉLULAS VIVAS /NÃO FIXADAS
VIABILIDADE APOPTOSE
TIPO
DE
AMO
STRA
TIPO
DE
ESTU
DO
CORANTECELULAR
CICLO EPROLIFERAÇÃO
bdbiosciences.com/br/apoptosisProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
562158 - BD Horizon™ Violet Proliferation Dye 450
556463 - Propidium Iodide Staining Solution
349483 - BD™ Cell Viability Kit
559925 - 7-AAD Staining Solution
555816 - BD Via-Probe™ Cell Viability Solution
Anexina V
Conjugada com diversos fluorocromos
Annexin V kits
556570 - Annexin V : FITC Apoptosis Detection Kit II
559763 - Annexin V : PE Apoptosis Detection Kit I
Potencial de membrana mitocondrial
551302 BD™ MitoScreen (JC-1)
Células vivas em proliferação
(pode ser detectado pós fixação/
permeabilização celular)
APLI
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Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade - Principais Produtos
bdbiosciences.com/br/apoptosisProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Anticorpos Anti-Ki-67 eAnti-PCNA
Caspase-3 ativa
PARP clivado
Interação com DNA dupla-fita
Viabilidade celular;Análise do perfil da
distribuição das fases do ciclo celular
Síntese de DNA
BrdU e anticorpos para BrdU
Proteínas
CICLO EPROLIFERAÇÃO
FIXADAS / PERMEABILIZADAS
VIABILIDADE APOPTOSE
TIPO
DE
AMO
STRA
TIPO
DE
ESTU
DO
556463 - Propidium Iodide Staining Solution
340242 - BD Cycletest™ Plus DNA Reagent Kit
349483 - BD™ Cell Viability Kit
559925 - 7-AAD Staining Solution
555816 - BD Via-Probe™ Cell Viability Solution
550891 - BrdU solution
562253 - Apoptosis, DNA Damage and Cell Proliferation Kit
559619 - FITC BrdU Flow Kit
552598 - APC BrdU Flow Kit
562247 BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450
Fragmentação de DNA/TUNEL
556381 - APO-DIRECT™ Apoptosis Detection Kit
556405 - APO-BRDU™ Apoptosis Detection Kit
APLI
CAÇÃ
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Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade - Principais Produtos
CÉLULAS VIVAS /NÃO FIXADAS
VIABILIDADE APOPTOSE
TIPO
DE
AMO
STRA
TIPO
DE
ESTU
DO
CORANTECELULAR
CICLO EPROLIFERAÇÃO
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Potencial de membrana mitocondrial
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Células vivas em proliferação
(pode ser detectado pós fixação/
permeabilização celular)
APLI
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O E
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Anticorpos Anti-Ki-67 eAnti-PCNA
Caspase-3 ativa
PARP clivado
Interação com DNA dupla-fita
Viabilidade celular;Análise do perfil da
distribuição das fases do ciclo celular
Síntese de DNA
BrdU e anticorpos para BrdU
Proteínas
CICLO EPROLIFERAÇÃO
FIXADAS / PERMEABILIZADAS
VIABILIDADE APOPTOSE
TIPO
DE
AMO
STRA
TIPO
DE
ESTU
DO
556463 - Propidium Iodide Staining Solution
340242 - BD Cycletest™ Plus DNA Reagent Kit
349483 - BD™ Cell Viability Kit
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555816 - BD Via-Probe™ Cell Viability Solution
550891 - BrdU solution
562253 - Apoptosis, DNA Damage and Cell Proliferation Kit
559619 - FITC BrdU Flow Kit
552598 - APC BrdU Flow Kit
562247 BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450
Fragmentação de DNA/TUNEL
556381 - APO-DIRECT™ Apoptosis Detection Kit
556405 - APO-BRDU™ Apoptosis Detection Kit
BD FACSCalibur™ * BD FACSCanto™ II *
Portfólio Equipamentos
Equipamentos para Pesquisa
Equipamentos Clínicos
Separador Celular - Cell Sorters
Analisadores
Analisadores
Analisadores
SPECIAL ORDER PRODUCTS
Separador CelularCell Sorters
BD FACSAria™ Fusion
BD Accuri™ C6
BD FACSAria™ III
BD FACSVerse™
BD FACSJazz™
BD LSRFortessa™ X-20
BD Influx™
BD LSRFortessa™
BD Accuri™ C6BD LSRFortessa™BD FACSAria™ III
BD Influx™
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivospara uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *.22
Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade - Recursos*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/apoptosis
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• Apoptosis Brochure
CBA Kits• Cell Cycle Analysis Using the BD BrdU FITC Assay on the BD FACSVerse™ System • Detection of Apoptosis Using the BD Annexin V FITC Assay on the BD FACSVerse™ System • Multiple Methods for Detecting Apoptosis on the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer • Technique for Loading Cells with BD Horizon™ Violet Proliferation Dye 450 (VPD450)
• Annexin V Reagents • Apoptosis, DNA Damage, and Cell Proliferation Kit • BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450 • BD Horizon™ Violet Cell Proliferation Dye 450
• Apoptosis Product List
• Annexin V with Cell Surface Antibody Staining for Suspension Cells • Annexin V Staining of Adherent Cells for Flow Cytometry • Annexin V Staining Protocol • APO-BRDU™ Procedure (TUNEL Assay for Flow) • APO-DIRECT™ Procedure (TUNEL Assay for Flow) • Cell Death Induced by Camptothecin • Cell Death Induced by Staurosporine • Induction of Apoptosis Using Anti-Human Fas (CD95), Clone DX2 • Induction of Apoptosis Using Anti-Mouse Fas (CD95), Clone Jo2
Brochuras
Application Notes
Informações de Produtos
Lista de Produtos
Protocolos
bdbiosciences.com/br/apoptosis
23Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
BD FACSCalibur™ * BD FACSCanto™ II *
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Separador Celular - Cell Sorters
Analisadores
Analisadores
Analisadores
SPECIAL ORDER PRODUCTS
Separador CelularCell Sorters
BD FACSAria™ Fusion
BD Accuri™ C6
BD FACSAria™ III
BD FACSVerse™
BD FACSJazz™
BD LSRFortessa™ X-20
BD Influx™
BD LSRFortessa™
BD Accuri™ C6BD LSRFortessa™BD FACSAria™ III
BD Influx™
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivospara uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *.22
Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade - Recursos*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/apoptosis
Conheça os recursos disponíveis para BD CBA - Quantificação de proteínas por Citometria de Fluxo – que auxiliam sua pesquisa e aumentam seu conhecimento na área.
Consulte brochuras, FAQ,
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e muito mais*!
• Apoptosis Brochure
CBA Kits• Cell Cycle Analysis Using the BD BrdU FITC Assay on the BD FACSVerse™ System • Detection of Apoptosis Using the BD Annexin V FITC Assay on the BD FACSVerse™ System • Multiple Methods for Detecting Apoptosis on the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer • Technique for Loading Cells with BD Horizon™ Violet Proliferation Dye 450 (VPD450)
• Annexin V Reagents • Apoptosis, DNA Damage, and Cell Proliferation Kit • BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450 • BD Horizon™ Violet Cell Proliferation Dye 450
• Apoptosis Product List
• Annexin V with Cell Surface Antibody Staining for Suspension Cells • Annexin V Staining of Adherent Cells for Flow Cytometry • Annexin V Staining Protocol • APO-BRDU™ Procedure (TUNEL Assay for Flow) • APO-DIRECT™ Procedure (TUNEL Assay for Flow) • Cell Death Induced by Camptothecin • Cell Death Induced by Staurosporine • Induction of Apoptosis Using Anti-Human Fas (CD95), Clone DX2 • Induction of Apoptosis Using Anti-Mouse Fas (CD95), Clone Jo2
Brochuras
Application Notes
Informações de Produtos
Lista de Produtos
Protocolos
bdbiosciences.com/br/apoptosis
23Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
TM
BD Accuri C6Citometria de Fluxo ao seu alcance.
Leve a citometria de fluxo para onde você quiser: um equipamento acessível, portátil e de fácil utilização.
Citometria descomplicada
Extremamente compacto
Automação
O BD Accuri™ C6 possui dois lasers (azul e vermelho), processa simultaneamente até quatro cores e seis parâmetros e é capaz de ler os marcadores mais conhecidos e utilizados do mercado.
Com alta capacidade de processamento de dados, ele simplifica sensivelmente a operação de um citômetro de fluxo. Sem necessitar de ajustes de voltagem, a obtenção de resultados pode ser obtida através de análises simples. Seu software possui interface altamente intuitiva, permitindo a aquisição e análise de dados sem complicação. Usando a última geração de arquivos de citometria, permite modificação de parâmetros após a aquisição de dados.
Com tamanho reduzido, cabe facilmente nas bancadas padrão dos laboratórios. E pode ser facilmente transportado, graças ao desenho de seu sistema ótico que garante grande estabilidade e seus menos de 15kg.
rotinas dentro do laboratório. Esta opção permite a leitura automatizada de tubos ou placas de 48 e 96 poços. Utilizando o software do BD Accuri™ C6, a programação da leitura dos tubos ou poços é muito simples e intuitiva.
O BD Accuri™ C6 pode contar com o CSampler™, opcional que facilita ainda mais as
bdbiosciences.com/br/accuriProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
TM
Kits e Templates para o BD Accuri C6
O BD Accuri™ C6 torna ainda mais fácil aliar o poder da citometria de fluxo com sua pesquisa através de templates livres, pré-configurados e kits prontos de reagentes específicos, oferecendo um fluxo de trabalho mais fácil e intuitivo.Kits pré-configurados incluem anticorpos fluorescentes, sistemas de tampões e reagentes necessários para aquisição e análise. Os templates do software BD Accuri™ C6 combinados aos kits incluem Workspaces predefinidos, marcadores, regiões, gates e nomes dos parâmetros para uma rápida e fácil configuração e análise.
Análise Celular fácil como nunca visto antes
Categoria
BiologiaCelular
Imunologia
Ensaios Bead-Based
CélulasTronco
Microbiologia
Configurações do Equipamento
Informações
Kits e Templates BD Apoptose
Kits e Templates BD Ciclo Celular e DNA
Kits e Templates BD Célula T Intracelular
Kits e Templates BD Naïve/Memory T- Cell
Reagentes BD™ Cytometric Bead Array (CBA)
Template BD Accuri™ C6 de Qualidade da Água Eawag
Guia de Usuário do software BD Accuri™
Kit
Annexin V FITC Apoptosis Detection Kit II
Annexin V PE Apoptosis Detection Kit I
MitoScreen (JC-1) Kit
Caspase-3 PE Assay Kit
DNA Reagent Kit
FITC BrdU Flow Kit
APC BrdU Flow Kit
Th1/Th2/Th17 Phenotyping Kit
CD45RA / CD45RO / CD3 / CD4
IFN-g/CD69/CD8/CD3 Kit
CD45RA / CD62L / CD3 / CD4
IFN-g/IL4 Kit
Human Naïve/Memory T Cell Panel
CBA Kits
CBA Flex Sets
Eawag Water Quality Template
8 and 6 Peak Bead Template
8 and 6 Peak Bead Template 24-tube Rack
Nº Catálogo
556570
559763
551302
550914
340242
559619
552598
560751
340571
346048
340977
340456
561438
Consulte site
Consulte site
-
653144, 653145,653160
653144, 653145,653160
Kits e Templates BD Células-Tronco Pluripotentes
Human Pluripotent Stem Cell Sorting and Analysis Kit
Human and Mouse Pluripotent Stem Cell Analysis Kit
560461
560477
560589Human Pluripotent Stem Cell Transcription Factor Analysis Kit
Kits e Templates BD para Células T Reguladoras
Human Regulatory T Cell Cocktail
FoxP3 Staining Kit
560249
560132
560762Human Th17/Treg Phenotyping Kit
2524Faça download dos templates em bdbiosciences.com/br/templatesProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
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BD Accuri C6Citometria de Fluxo ao seu alcance.
Leve a citometria de fluxo para onde você quiser: um equipamento acessível, portátil e de fácil utilização.
Citometria descomplicada
Extremamente compacto
Automação
O BD Accuri™ C6 possui dois lasers (azul e vermelho), processa simultaneamente até quatro cores e seis parâmetros e é capaz de ler os marcadores mais conhecidos e utilizados do mercado.
Com alta capacidade de processamento de dados, ele simplifica sensivelmente a operação de um citômetro de fluxo. Sem necessitar de ajustes de voltagem, a obtenção de resultados pode ser obtida através de análises simples. Seu software possui interface altamente intuitiva, permitindo a aquisição e análise de dados sem complicação. Usando a última geração de arquivos de citometria, permite modificação de parâmetros após a aquisição de dados.
Com tamanho reduzido, cabe facilmente nas bancadas padrão dos laboratórios. E pode ser facilmente transportado, graças ao desenho de seu sistema ótico que garante grande estabilidade e seus menos de 15kg.
rotinas dentro do laboratório. Esta opção permite a leitura automatizada de tubos ou placas de 48 e 96 poços. Utilizando o software do BD Accuri™ C6, a programação da leitura dos tubos ou poços é muito simples e intuitiva.
O BD Accuri™ C6 pode contar com o CSampler™, opcional que facilita ainda mais as
bdbiosciences.com/br/accuriProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
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Kits e Templates para o BD Accuri C6
O BD Accuri™ C6 torna ainda mais fácil aliar o poder da citometria de fluxo com sua pesquisa através de templates livres, pré-configurados e kits prontos de reagentes específicos, oferecendo um fluxo de trabalho mais fácil e intuitivo.Kits pré-configurados incluem anticorpos fluorescentes, sistemas de tampões e reagentes necessários para aquisição e análise. Os templates do software BD Accuri™ C6 combinados aos kits incluem Workspaces predefinidos, marcadores, regiões, gates e nomes dos parâmetros para uma rápida e fácil configuração e análise.
Análise Celular fácil como nunca visto antes
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BiologiaCelular
Imunologia
Ensaios Bead-Based
CélulasTronco
Microbiologia
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Kits e Templates BD Apoptose
Kits e Templates BD Ciclo Celular e DNA
Kits e Templates BD Célula T Intracelular
Kits e Templates BD Naïve/Memory T- Cell
Reagentes BD™ Cytometric Bead Array (CBA)
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Guia de Usuário do software BD Accuri™
Kit
Annexin V FITC Apoptosis Detection Kit II
Annexin V PE Apoptosis Detection Kit I
MitoScreen (JC-1) Kit
Caspase-3 PE Assay Kit
DNA Reagent Kit
FITC BrdU Flow Kit
APC BrdU Flow Kit
Th1/Th2/Th17 Phenotyping Kit
CD45RA / CD45RO / CD3 / CD4
IFN-g/CD69/CD8/CD3 Kit
CD45RA / CD62L / CD3 / CD4
IFN-g/IL4 Kit
Human Naïve/Memory T Cell Panel
CBA Kits
CBA Flex Sets
Eawag Water Quality Template
8 and 6 Peak Bead Template
8 and 6 Peak Bead Template 24-tube Rack
Nº Catálogo
556570
559763
551302
550914
340242
559619
552598
560751
340571
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340977
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Consulte site
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Human Pluripotent Stem Cell Sorting and Analysis Kit
Human and Mouse Pluripotent Stem Cell Analysis Kit
560461
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560589Human Pluripotent Stem Cell Transcription Factor Analysis Kit
Kits e Templates BD para Células T Reguladoras
Human Regulatory T Cell Cocktail
FoxP3 Staining Kit
560249
560132
560762Human Th17/Treg Phenotyping Kit
2524Faça download dos templates em bdbiosciences.com/br/templatesProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
TM
BD LSRFortessa X-20
TM
BD FACSAria Fusion
Desenvolvido para espaços reduzidos e potenciais sem limites
A fusão de segurança, performance e separação celular
Analisador celular de alta performance para ensaios multicolor com as menores dimensões de sua categoria: 76,2 x 73,7 e 76,2 cm. Pode ser configurado com até 5 lasers, para detecção de até 20 parâmetros simultâneos. A configuração óptica mais comum inclui os lasers azul, vermelho, violeta, yellow-green e UV. Mas há opções de lasers que podem ser incorporados ao instrumento na compra ou poster iormente, atendendo a novas necessidades e aplicações.
O BD FACSAria™ Fusion traz melhorias à tecnologia patenteada que une a excepcional performance multicolor e a facilidade de uso trazida para o universo da separação celular com o lançamento do BD FACSAria™ em 2003. Agora a expertise da separação celular foi combinada com a melhor opção em biossegurança para criar o BD FACSAria Fusion, um separador celular totalmente integrado a uma cabine de biossegurança para os laboratórios de pesquisa. Um equipamento que atende a exigência crescente de laboratórios procupados com a exposição acidental dos operadores às amostras biológicas.
bdbiosciences.com/br/x20
bdbiosciences.com/br/fusion
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.26
TM
BD FACSJazzA nova era do cell sorting da BD.
Desempenho de tirar o fôlego. Isolamento celular - cell sorting - de bancada com preço acessível.
Sorting Compacto e DescomplicadoNecessita menos de 51 x 51cm de espaço de bancada, o BD FACSJazz™ adequa-se bem tanto como equipamento único do laboratório, quanto como componente de facilities. O sistema eletrônico, fontes de alimentação de energia e tanques de fluídos ficam localizados embaixo da bancada, ocupando um reduzido espaço da área de trabalho ou, caso necessário, sendo facilmente instalado em cabines de segurança biológica (CBS).
Com recursos que simplificam a operação de isoladores “stream-in-air”, o BD FACSJazz™ aumenta a eficiência operacional de laboratórios com alto fluxo de trabalho. O BD FACSJazz™ opera com diversos ajustes pré-otimizados, visando simplificar a instalação e o treinamento. O inovador BD FACS™ Sortware foi especialmente desenvolvido para fácil controle do equipamento durante a aquisição, isolamento e análise.
ConfiguraçãoO BD FACSJazz™ pode ser configurado com até 3 (três) lasers e 8 parâmetros, adequando-se às necessidades de laboratórios de diferentes portes. O sistema foi desenvolvido para também realizar aplicações mais elaboradas, como, por exemplo, análises “single-cell”, grandes responsáveis pelo acelerado ritmo de crescimento das áreas de genômica e sequenciamento de nova geração.
bdbiosciences.com/br/jazzProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 27
TM
BD LSRFortessa X-20
TM
BD FACSAria Fusion
Desenvolvido para espaços reduzidos e potenciais sem limites
A fusão de segurança, performance e separação celular
Analisador celular de alta performance para ensaios multicolor com as menores dimensões de sua categoria: 76,2 x 73,7 e 76,2 cm. Pode ser configurado com até 5 lasers, para detecção de até 20 parâmetros simultâneos. A configuração óptica mais comum inclui os lasers azul, vermelho, violeta, yellow-green e UV. Mas há opções de lasers que podem ser incorporados ao instrumento na compra ou poster iormente, atendendo a novas necessidades e aplicações.
O BD FACSAria™ Fusion traz melhorias à tecnologia patenteada que une a excepcional performance multicolor e a facilidade de uso trazida para o universo da separação celular com o lançamento do BD FACSAria™ em 2003. Agora a expertise da separação celular foi combinada com a melhor opção em biossegurança para criar o BD FACSAria Fusion, um separador celular totalmente integrado a uma cabine de biossegurança para os laboratórios de pesquisa. Um equipamento que atende a exigência crescente de laboratórios procupados com a exposição acidental dos operadores às amostras biológicas.
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Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.26
TM
BD FACSJazzA nova era do cell sorting da BD.
Desempenho de tirar o fôlego. Isolamento celular - cell sorting - de bancada com preço acessível.
Sorting Compacto e DescomplicadoNecessita menos de 51 x 51cm de espaço de bancada, o BD FACSJazz™ adequa-se bem tanto como equipamento único do laboratório, quanto como componente de facilities. O sistema eletrônico, fontes de alimentação de energia e tanques de fluídos ficam localizados embaixo da bancada, ocupando um reduzido espaço da área de trabalho ou, caso necessário, sendo facilmente instalado em cabines de segurança biológica (CBS).
Com recursos que simplificam a operação de isoladores “stream-in-air”, o BD FACSJazz™ aumenta a eficiência operacional de laboratórios com alto fluxo de trabalho. O BD FACSJazz™ opera com diversos ajustes pré-otimizados, visando simplificar a instalação e o treinamento. O inovador BD FACS™ Sortware foi especialmente desenvolvido para fácil controle do equipamento durante a aquisição, isolamento e análise.
ConfiguraçãoO BD FACSJazz™ pode ser configurado com até 3 (três) lasers e 8 parâmetros, adequando-se às necessidades de laboratórios de diferentes portes. O sistema foi desenvolvido para também realizar aplicações mais elaboradas, como, por exemplo, análises “single-cell”, grandes responsáveis pelo acelerado ritmo de crescimento das áreas de genômica e sequenciamento de nova geração.
bdbiosciences.com/br/jazzProdutos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 27
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BD BiosciencesRua Alexandre Dumas, 1976São Paulo - SP - 04717-004bdbiosciences.com/br
Alexa Fluor® é marca registrada de Molecular Probes, Inc.BD, Logo BD e todas as outras marcas são propriedade de Becton, Dickinson and Company. © 2014 BD
Abr
il/20
14
Conheça as ferramentas online que auxiliam sua pesquisa:
Saiba mais sobre aplicações específicas com os webinars BD Biosciences online:
bdbiosciences.com/br/tools
bdbiosciences.com/br/webinars
![um nibdoo/- QUfflMîânnt] bd 19.0 bb untJ bd ñuentju bd ...](https://static.fdocumentos.com/doc/165x107/619acb7ab9511f55be7713e7/um-nibdoo-qufflmnnt-bd-190-bb-untj-bd-uentju-bd-.jpg)
