Apostila pratica bio cel agronomia

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FACULDADE ASSIS GURGACZ – FAGAvenida das Torres, 500 – Fone: (45) 321-3900 Fax: (045) 321-3913

CEP: 85802-640 – Cascavel – ParanáE-mail: [email protected]

AGRONOMIAAPOSTILA DE AULA PRÁTICA

BIOLOGIA CELULAR

Docente: Me. Bianca Pierina Carraro Vicente

Acadêmico(a):__________________________________________________________

Curso:____________Período:________Turma:_______________________________

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Roteiro de Aula Prática nº 01 Data:1. Introdução: Descrição do microscópio fotônico

A palavra microscópio é de origem grega (micros =pequeno, scopein =observar, olhar com

atenção). É um instrumento óptico que amplia a imagem de um pequeno objeto utilizando um

sistema de lentes e fontes de iluminação.

Todo microscópio é composto de partes mecânicas e partes ópticas, que juntas nos

permitem a observação detalhada de materiais em estudo.

1.1. Partes mecânicas:

• Base ou pé: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras partes do

aparelho.

• Braço ou coluna: peça que liga o pé à parte superior do microscópio.

• Mesa ou platina: peça de apoio da lâmina contendo o material para estudo, no

centro da mesa existe um orifício para a passagem da luz.

• Charriot: peça ligada à platina que permite movimentar a lâmina no plano horizontal da

esquerda para a direita e vice-versa, e de trás para frente e vice-versa.

• Parafuso macrométrico: localiza-se em ambos os lados do braço, serve para

ajustar o foco grosseiramente através de avanço ou recuo da mesa em relação à objetiva.

• Parafuso micrométrico: ajusta o foco finamente através de pequenos avanços

ou recuos da mesa.

• Canhão: parte superior do microscópio constituída por um tubo contendo um

prisma. Sustenta lentes objetivas e oculares, e serve para focalização do material.

• Revolver: peça onde se encaixam as lentes objetivas. É composto por um disco

de ranhuras que permite a mudança das objetivas.

1.2. Partes ópticas:

• Condensador: conjunto de lentes situado abaixo da platina que concentra a luz e fornece

iluminação uniforme à preparação biológica.

• Botão do condensador: permite a movimentação do condensador.

• Diafragma: regula a intensidade de luz que atinge a preparação através de uma

alavanca para sua abertura ou fechamento.

• Objetivas: conjunto de 4 ou mais lentes superpostas que proporcionam

aumentos diferentes para observação do material. O valor do aumento está gravado na

objetiva.

• Oculares: possui 2 lentes convergentes que ampliam e corrigem os defeitos da

imagem. O valor do aumento proporcionado está gravado na ocular.

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MICROSCÓPIO ÓTICO

2. Assunto: Microscopia e a utilização do microscópio

3. Objetivos: 3.1. Conhecer os componentes do microscópio identificando suas partes.

3.2. Fazer observações de materiais ao microscópio relacionando as imagens formadas e

os aumentos obtidos com seu funcionamento.

4. Materiais, equipamentos e reagentes:4.1.Microscópio óptico comum;

4.2.Letras recortadas do jornal;

4.3.Lâminas e lamínulas;

4.4. Copo com água;

OCULAR

CANHÃO

REVÓLVEROBJETIVA

PRESILHA

MESA

CONDENSADORDIAFRAGMA

FILTROILUMINAÇÃO DO CONDENSADOR

BASECONTROLE DE LUZ

CHARRIOT

MICROMÉTRICO

MACROMÉTRICO

BOTÃO DO CONDENSADOR

BRAÇO

BOTÃO PARA MOVER O CANHÃO

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4.5.Papel filtro.

5. Procedimento:5.1.Lâminas com letras:

• Coloque sobre a lâmina uma letra que você recortou do jornal;

• Coloque esta lâmina sobre a platina do microscópio, de modo a manter a letra na

posição em que é lida por você;

• Focalize a letra, conforme o procedimento descrito anteriormente;

• Observe a posição da letra, na imagem formada pelo microscópio com a objetiva

de 4X e 10X;

• Desenhe o observado.

6. Fechamento:6.1.Que diferenças você observou entre a posição das letras a olho nu e na imagem ao

MO?

6.2.Nas objetivas de diferentes aumentos, o que você notou quanto ao tamanho da imagem

e quanto à área do campo de observação?

6.3.Por que a lamínula deve estar sempre voltada para cima quando se observa o material

ao microscópio?

6.4.Por que é necessário o uso do óleo de imersão na objetiva de 100X?

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Roteiro de Aula Prática nº 02 Data:

1. Assunto: Identificação de componentes químicos celulares

2. Objetivos: 2.1. Identificar macromoléculas constituintes das células em batata-inglesa, laranja leite em

pó.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:3.1. Experimento 1: batata inglesa, lugol, lâmina, lamínula, bisturi, microscópio óptico, papel

filtro.

3.2. Experimento 2: açúcar, água, reagente de benedict, leite em pó, suco de laranja, bico

de bunsen, tubo de ensaio, grampo de madeira.

3.3. Experimento 3: laranja, bisturi, azul de metileno, vidro de relógio, pincel, lâmina e

lamínula.

4. Procedimento:4.1. Experimento 1:

• Cortar uma fatia de batata com bisturi. A espessura deverá ser muito fina.

• Colocar esta fatia em uma lâmina. Pingar 1 a 2 gotas de lugol e deixar corar por 3

minutos.

• Cobrir com lamínula e observar nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar apenas na de

40x.

• Observar a coloração dos grãos de amiloplasto, morfologia, estrutura celular (parede

celular).

4.2. Experimento 2:

• Numerar tubos de ensaio de 1 a 3.

• Colocar no tubo 1: um grama de açúcar comum, 1 ml de água e 5 gotas de reagente de

benedict.

• Colocar no tubo 2: 1ml de leite em pó já dissolvido em água e 5 gotas de reagente de

benedict.

• Colocar no tubo 3: 1ml de suco de laranja e 5 gotas de reagente de benedict.

• Acender o bico de bunsen e aquecer os tubos com auxílio do grampo de madeira até

levantar fervura.

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• Observar possíveis alterações nas colorações e descrevê-las.

4.3. Experimento 3:

• Fazer um corte tangencial na casca da laranja. A espessura do corte deverá ser fina de

tal maneira que possa transpassar a luz que nela incidirá.

• Pingar algumas gotas de ou azul de metileno em um vidro de relógio e acrescentar a

este o corte efetuado na laranja.

• Aguardar aproximadamente 7 minutos.

• Retirar o corte com um pincel e transferi-lo para uma lâmina.

• Cobrir com lamínula e observar nas objetivas de 4x e 10x. Desenhar em ambas.

5. Fechamento:

5.1. Como podemos perceber a presença de bolsas de lipídios ao descascar uma

laranja?

5.2. Qual é a importância dos carboidratos, lipídios e proteínas na composição

macromolecular da célula?

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Roteiro de Aula Prática nº 03Data:

1. Assunto: Permeabilidade seletiva e osmose

2. Objetivos:2.1. Demonstrar a presença da membrana em células vegetais e animais;

2.2. Observar o comportamento da membrana quanto a sua permeabilidade seletiva a

diferentes substâncias e tratamentos.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:3.1. Beterraba (Beta vulgaris);

3.2. Leveduras (fermento biológico);

3.3. Epiderme de cebola (Allium cepa);

3.4. Tubos de ensaio;

3.5. Acetona

3.6. Vermelho Congo 1%;

3.7. Lâmina, lamínula, bisturi;

3.8. Água destilada, NaCl 3.0%;

3.9. Banho Maria, M.O.

4. Procedimento:4.1. Experimento 1: efeito da acetona

• Numere os tubos de ensaio e coloque em cada um deles 5ml das seguintes

soluções, respectivamente:

o água destilada

o acetona 25%

o acetona 50%

o acetona 75%

o acetona pura

• Adicione a cada tubo um pequeno pedaço de beterraba (1cm3);

• Espere cerca de 1 hora e observe o que ocorreu em cada tubo.

4.2. Experimento 2: Efeito do calor

• Numere 2 tubos de ensaio e coloque em cada um 5ml da solução de vermelho

Congo 1%;

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• Adicione 5ml de suspensão de fermento nos 2 tubos;

• O tubo 1 deixe à temperatura ambiente. O tubo 2 incube a 50ºC por 5 minutos.

• Monte uma lâmina com a suspensão do tubo 1 e observe ao MO, nas objetivas de

10X e 40X.

• Faça o mesmo com o tubo 2. Desenhe e anote o que observou nos dois casos.

4.3. Experimento 3: Efeito da diferença de concentração

• Retire um fragmento da epiderme inferior de cebola e coloque-a sobre a lâmina;

• Cubra co uma gota de água e lamínula;

• Observe ao MO em 10X e 40X.

• Desenhe o que observou.

• Em seguida retire a lamínula, seque o excesso de água e coloque uma gota de

solução NaCl 3.0% sobre a epiderme;

• Observe ao MO em 10X e 40X e desenhe.

• Agora retire a lamínula e a epiderme que você observou. Coloque-a em outra lâmina

limpa com duas gotas de água destilada;

• Observe ao MO em 10X e 40X e desenhe.

5. Fechamento:5.1. Anote os resultados observados, comparando as soluções de cada tubo.

5.2. Explique o efeito da água destilada e das diferentes concentrações de acetona sobre a

membrana plasmática.

5.3. Que diferenças você observou nas células submetidas aos dois tratamentos?

5.4. Explique o efeito do calor sobre a membrana. E quanto à difusão do vermelho Congo?

5.5. Que nome se dá ao movimento de água através da membrana plasmática?

5.6. Qual a diferença entre os fenômenos de difusão e osmose?

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Roteiro de Aula Prática nº 04Data:

1. Assunto: Movimento celular – cílios e flagelos

2. Objetivo:2.1. Observar a estrutura dos cílios e flagelos no material em estudo.

2.2. Relacionar as estruturas responsáveis pelos movimentos com as funções que estas

desempenham nos diferentes tipos celulares.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:3.1. Lâmina permanente de traquéia de coelho em corte transversal;

3.2. Preparação a fresco de cultura de protozoários ciliados e flagelados;

3.3. Lâmina;

3.4. Lamínula;

3.5. Pipeta de Pasteur;

3.6. Microscópio ótico.

4. Procedimento:4.1. Observação da lâmina de traquéia:

Focalize a lâmina ao microscópio com o menor aumento (4X);

Encontre o epitélio de revestimento voltado para a luz da traquéia, escolha uma região

bem preservada e coloque-a sob a objetiva de 40X;

Observe os cílios e esquematize.

4.2. Movimento de protistas:

Coloque sobre um lâmina uma gota de cultura de protozoários e cubra com lamínula;

Observe ao MO com o diafragma fechado nas objetivas de 4X, 10X e 40X;

Esquematize os protozoários que encontrar e indique se é ciliado ou flagelado.

5. Fechamento:5.1. Quias as diferenças morfológicas que puderam ser detectadas entre cílios e flagelos?

5.2. A forma de deslocamento dos protozoários ciliados é a mesma que a dos flagelados?

Como eles se deslocam?

5.3. Qual é a estrutura responsável pelo movimento dos cílios e dos flagelos? Do que é

composta? Como estão arranjados estes componentes na estrutura?

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Roteiro de Aula Prática nº 05Data:

1 Assunto: Sistema de endomembranas

2 Objetivo: Reconhecer a estrutura das organelas componentes do sistema de

endomembranas.

3 Materiais: 3.1 Eletromicrografias do retículo endoplasmático e do complexo de Golgi.

4 Procedimento: 4.1 Observar as eletromicrografias e desenhá-las a lápis.

4.2 Identificar as estruturas.

5 Fechamento: 5.1 Quais são as principais funções do sistema de endomembranas?

5.2 Como ocorre a síntese de macromoléculas?

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Roteiro de Aula Prática nº 06Data:

1 Assunto: Mitocôndrias

2 Objetivo: Reconhecer a estrutura das mitocôndrias.

3 Materiais:

3.1 Eletromicrografias de mitocôndrias.

4 Procedimento:

4.1 Observar as eletromicrografias e desenhá-las a lápis.

4.2 Identificar as estruturas.

5 Fechamento:

5.1 Quais são as principais funções da mitocôndria?

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Roteiro de Aula Prática nº 07Data:

1 Assunto: Identificação de núcleo e nucléolo

2 Objetivo: Identificar a estrutura de núcleo e nucléolo.

3 Materiais, equipamentos e reagentes: 3.1 Fígado bovino fresco;

3.2 Lâmina;

3.3 Lamínula;

3.4 Azul de metileno;

3.5 Algodão;

3.6 Álcool iodado;

3.7 Etanol absoluto;

3.8 Lanceta;

3.9 Microscópio ótico.

4 Procedimento: 4.1 Experimento 1:

4.1.1 Tocar uma lâmina levemente na superfície do fígado bovino;

4.1.2 Deixar secar as células sobre a lâmina;

4.1.3 Corar o material por 5 minutos com Azul de metileno;

4.1.4 Cobrir com lamínula, e observar ao MO em 4X, 10X e 40X;

4.1.5 Esquematizar.

4.2 Experimento 2:

4.2.1 Limpar a ponta do dedo indicador com um pedaço de algodão embebido em

álcool iodado;

4.2.2 Picar a ponta do dedo com uma lanceta;

4.2.3 Colocar uma gota de sangue próxima a borda de uma lâmina;

4.2.4 Colocar uma das bordas da lamínula sobre a gota de sangue fazendo um

ângulo de 45° entre a lâmina e a lamínula;

4.2.5 Nesta posição deslize a lamínula sobre a lâmina mergulhando a lâmina por 4

minutos em uma cubeta com álcool absoluto;

4.2.6 Deixar secar a lâmina;

4.2.7 Corar por 5 minutos em uma cubeta com azul de metileno;

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4.2.8 Enxaguar em água corrente na torneira, deixar secar;

4.2.9 Observar ao MO em 4X, 10X, 40X e 100X.

4.2.10 Esquematizar o material observado.

5 Fechamento: 5.1 Qual a importância do núcleo para uma célula?

5.2 O que o nucléolo representa em uma célula eucarionte?

5.3 Identifique e desenhe os tipos de leucócitos encontrados no esfregaço

sangüíneo.

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Roteiro de Aula Prática nº 8Data:

1. Assunto: Mitose

2. Objetivos: 2.1. Identificar as diferentes fases da mitose através de observação ao MO.

3. Materiais, equipamentos e reagentes:3.1.Lâminas permanentes em corte longitudinal de pontas de raiz de Allium cepa (cebola).

4. Procedimento:4.1.Utilizando a objetiva de 4X localize a região meristemática da raiz que fica entre a coifa,

bem na extremidade, e a zona de alongamento e diferenciação celular, na parte

posterior do corte.

4.2.Centralize o tecido meristemático e passe para as objetivas de 10X e 40X.

4.3.Ao longo do tecido meristemático, identifique células nas diferentes fases do ciclo

celular, com objetiva de 40X ou 100X (imersão).

4.4.Esquematize cada uma das fases.

5. Fechamento:5.1.Como pode-se diferenciar prófase, anáfase e metáfase na mitose?

5.2.Por que se diz que a mitose é um processo conservativo, do ponto de vista genético?