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1 INTRODUO

As pastagens cultivadas representam forma mais pratica e econmica de alimentao

dos bovinos constituindo a base de sustentao da pecuria de corte e leite no Brasil

(TEIXEIRA 2010). As cigarrinhas-daspastagens so consideradas os principais insetos-praga

das gramneas forrageiras na Amrica Tropical (COSENZA ET al., 1981; FONTES et al.,

1995), e a partir, da dcada de 60, estes insetos-praga passaram a ser relatados em todo o

Brasil (SANTOS et al., 1982; GALLO et al., 2002). A ocorrncia das cigarrinhas-das-

pastagens se d durante o perodo chuvoso, podendo ocorrer de trs a cinco geraes anuais,

dependendo das condies climticas (FONTES et al., 1995). As cigarinhas-das-patagens

(Deois flavopicta) so insetos sugadores, pertencentes famlia Cercopidae, distribudas nasmais diversas condies ecolgicas. Os adultos sugam a seiva das folhas e injetan toxinas,

causando intoxicao sistmica das plantas (fitotoxemia) que interrompe o fluxo de seiva e o

processo vegetativo. Os sintomas iniciais so estrias longitudinais amareladas que aumentam

para o pice da folha e posteriormente secam. Quando o ataque intenso, pode haver

amarelecimento geral da pastagem ("queima das pastagens"). As formas jovens (ninfas)

sugam continuamente a seiva das razes, produzindo espuma branca tpica, que as protege dos

raios solares e de certos predadores. Nessa fase causam desequilbrio hdrico e esgotamento

das reservas orgnicas da planta. Os danos causados s pastagens so variveis em funo daseveridade do ataque. Ocorre decrscimo significativo na produo, prximo a 15%, e na

qualidade da forragem, resultando em diminuies na capacidade de suporte, na produo de

leite e no ganho de peso. Em certas condies a severidade do ataque das cigarrinhas tem

causado a "queima" total das pastagens, deixando os produtores sem alternativa de manejo do

rebanho. Alm das pastagens, as lavouras de milho, arroz, aveia-preta e cana podem sofrer

srios danos pelo ataque dessa praga, principalmente dos adultos, pela injeo de toxinas

durante a suco de seiva. Havendo a necessidade de utilizao de grandes quantidades de

pesticidas, ou utilizao de controle fsico (fogo), usados pelos pecuaristas para o controle,gerando o risco de intoxicaes de pessoas e animais, contaminaes do meio ambiente por os

mesmos, e ainda a necessidade da retirada dos animais do local de aplicao, gerando altos

custos de logstica e mo de obra. Uma alternativa aos manejos convencionais o uso do

controle biolgico. No Brasil se utilizaM. anisopliae, para controlar as populaes de insetos-

praga, de importncia mdica, veterinria e agrcola (GERRA 2009). Para esse fim M.

anisopliae apontado como um agente de controle biolgico de grande potencialidade. A

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utilizao de fungos para o controle de insetos est fundamentada na capacidade que eles tem

de infectar os insetos e lhes causar doena e morte, num processo dependente de fatores

biticos e abiticos, descrito por Agostino Bassi, o pai da patologia de insetos, e que teve sua

utilizao proposta como controladores alternativos de pragas em 1879 por Metchnikoff

(MESSIAS 1989). O fungo entomopatognico Metarhizium anisoplia uma das alternativas

mais utilizadas como controle biolgico de pastagens. Porm o uso de controle biolgico

barrado ou limitado por fatores ambientais com temperatura, umidade do ar etc.

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivos gerais

Os objetivos do presente trabalho ser avaliar a evoluo do desenvolvimento do

fungo M. anisoplia comercializado, com o nome comercial de Metaril, em diferentes

temperaturas e umidade relativa, e o grau de infecciosidade em cigarinhas-das-pastagens.

2.2 ObjetivoS especficoS

Delimitar a as temperaturas abaixo de 24C, e umidades relativa do ar de 55% e 65%

, e como o fungo M. anisopleae,se comporta quanto ao seu desenvolvimento,

e a sua capacidade de infeco alterada nestas condies ambientais.

3. REVISO BIBLIOGRFICA

O fungo Metharizium anisopleae um deutoremiceto pertencente ordem

Monilaces, famlia moniliaceaes. Esta amplamente distribudo na natureza, sendo

facilmente encontrado nos solos, onde pode sobreviver por longos perodos.Este fungo

infecta mais de 300 especies de incetos das diferentes ordens, includo impotantes pragas.A

espcieM. anisopliae tem sido usada em diversos pases, como Estados Unidos, Canad,

Frana, Austrlia, frica e Brasil . Esta espcie ataca inmeras espcies de insetos, e est

amplamente distribudo na natureza (LIMA 2007). Seus condios podem ser elipsides ou

ovides e sua colorao pode variar de verde plida a verde oliva.

As estruturas mais produzidas e comercializadas de M. anisopliae so os condios,

utilizando-se meio de cultura slido. Esse processo tem sido usado para a manuteno

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rotineira de isolados e produo em pequena escala de condios visando estudos de

laboratrio, bem como a produo em grande escala visando testes de campo e

comercializao. O fungo produzido na superfcie de meio slido, dentro de diferentes

recipientes conforme o objetivo e escala de produo.

O processo de infeco iniciado pela germinao dos esporos sobre a cutcula do

hospedeiro. O esporo germina e o tubo germinativo se diferencia por dilatao da

extremidade das hifas para a formao do apressrio, que estimuladapelo contato fsico

com a cutcula do hospedeiro. Esse estmulo tambm sensvel aalteraes da superfcie,

indicando um possvel mecanismo pelo qual o patgenoreconhece seu hospedeiro. Aps a

formao do apressrio, ocorre o desenvolvimento de estruturas denominadas grampos de

penetrao, que so caracterizadas por uma alterao na parede celular da parte do

apressrio que est em contato com o hospedeiro, sendomais fina e saliente.Evidncias obtidas por microscopia eletrnica e histoqumica sugerem que a etapa de

penetrao ocorre por uma combinao de degradao enzimtica e presso mecnica

Aps o processo de penetrao, o fungo inicia a colonizao do hospedeiro. As hifas que

atravessam a cutcula do hospedeiro sofrem um engrossamento e se ramificam inicialmente

no tegumento e, posteriormente, na cavidade geral do corpo, liberando toxinas e

ocasionando a morte do hospedeiro devido produo de metablicos secundrios

denominados destruxinas, que afetam os canais de transportes de ons, envolvidos na

resposta muscular e a integralidade da membrana celular. O hospedeiro exibe vriossintomas incluindo inquietao, perda de coordenao e parada de ingesto de alimento. O

processo de infeco em seus hospedeiros ocorre em fases sucessivas de germinao,

diferenciao, penetrao, colonizao, reproduo e disseminao Vrios fatores tm sido

apontados como possveis determinantes de patogenicidade, entre os quais, a produo de

toxinas e a produo e secreo de enzimas hidrolticas, como quitinases, proteases e

lpases (MARI, 2006).

4. MATERIAL E MTODOS

O fungo ser cedido por comerciantes de produtos de controle biolgico. Para a

realizao dos bioensaios do metaril com consentrao de 5 x 1011 p emosoluvel, o

material ser diludo conforme recomendao do produto em gua destilada, e inoculados

em placas de Petri, de 9,0 cm de dimetro, contendo meio decultura BDA, ser inoculado

em trs pontos nas placas atravs de uma ala deplatina, previamente flambada.

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As placas sero mantidas em cmaras para germinao (B.O.D.), aTemperaturas de

13 C, 15C, 17C, 19C, 20C com UR 55 e 65, com fotofase de 12 horas, e testemunha

com temperatura de 24C e UR 80% com perodo de incubao de 10 dias. Para os

experimentos de virulncia sero realizadas trs repeties, contendo 10 cigarinhas-das-

pastagens (Deois flavopicta) para cada um dos 12 tratamentos, totalizando 20 cigarigas-

das-pastagens por tratamento e 240 para o experimento. Cada lote de 10 cigarinhas-das-

pastagens foi colocado sobre uma placa de Petri de 12,0 cm de dimetro para serem

pulverizadas na torre de Potter.

Os insetos sero pulverizados com 2 mL da suspenso de fungo, As testemunhas

sero pulverizadas com 2 mL de gua estril. Em todos os tratamentos ser adicionado

espalhante adesivo a (0,01% de Tween 80). Em seguida, as cigarinhas-das-paasagens

sero transferidas para potes de plstico transparente de 6,5 cm de altura x 5,0 cm dedimetro, com tampa de rosca, permanecendo em jejum, Cada inseto morto foi lavado em

lcool 70% e gua destilada, para desinfestao Superficial. Em seguida, os insetos sero

transferidos para placas plsticas de 4,5 cm de dimetro, contendo algodo embebido em

gua para formar um ambiente mido. As placas sero mantidas em cmara climatizada

temperatura de 251C, com fotofase de 12 horas e umidade relativa de 7010%. Por meio

deste procedimento que ser observada a confirmao da mortalidade causada pelo

patgeno, observando-se o crescimento micelial e conidiognese no cadver.

5. RESULTADOS ESPERADOS

Os resultados obtidos no trabalho sero posteriormente divulgados em revistas do

gnero, e com a realizao de um novo trabalho que ser desenvolvido a campo para

comprovao dos dados obtidos em laboratrio, e verificao da eficcia do fungo a campo.

6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

COSEGA, G. W. (s.d.). Resitencia de gramineas forageiras cigarinhas-das-pastgens Deois

flvopicta(stal 1854). Brasilia: EMBRPA-CPAC, 1981. 16p. ( Boletim de Pesquissa, 07).

GALHO, D. e. (2002). Entomologia Agricola. Piiracicaba,SP.: FELAQ.

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GERRA, S. M. (abril/junho de 2009). Persitncia de Metarhizium anisopliae spp no solo sob

diferentes condies de emperatura e umidade. Revista Caatinga (Mossor, Brasil) , v.22,

n.1, p.50-54.

LIMA, D. O. (2007). Produo de Metharizium(metsch)sorok.E beauveria bassiana (bals) vuill.

Em diferentes substratos eefeito da radiao ultravioleta e da temperatura sobreestruturas

infectivas desses entopatgenicos- Tese (doutorado)- Univercidade Estadual Paulista, Facul.

Botucatu,.

SANTOS, P. B. (1982.). Avaliao de dano e controle da cigarinhas-das-pastagens em plantas

de milho com diferentes idades. Sete Lagoas: EMBRAPA-CNPMS. p8

TEIXEIRA, V. M. ( 2010). EFICINCIA DE Metarhizium anisopliae (Metsch) SOROKIN NO

CONTROLE DE CIGARRINHAS-DAS-PASTAGENS (Hemiptera: Cercopidae) EM Brachiaria

bryzantha EM RONDNIA - BRASIL. REVISTA VERDEDE AGROECOLOGIA E

DESENVOLVIMENTO SUSTENTVEL GRUPO VERDEDE AGRICULTURA ALTERNATIVA (GVAA) ,v.5, n.3, p. 263 273.

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO RIO GRANDE DO SUL

UNIDADE DE VACARIA

CURSO DE AGROPECUARIA INTEGRADA

LUCAS DE ALMEIDA BIZOTTO

PROJETO DE PESQUISA

VACARIA

2011

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LUCAS DE ALMEIDA BIZOTTO