AULA 3 - MODELO DE PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO (POP).ppt

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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃ O ( POP) Profa. Ms. Dor a Lú cia Carrara Moreti

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    PROCEDIMENTO

    OPERACIONALPADR O (POP)

    Pro fa. Ms. Dora Lcia Carrara Moreti

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    ENTREGAR O POP COM A CAPA

    (seguir normas de Vancouver)

    link para acesso:http://www.unifran.br/site/canais/pos/latoSens

    u/docnormas.php

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    Procedimento Operacional Padro

    (POP) CABEALHO

    LOGO DA

    EMPRESA

    PROCEDIMENTO OPERACIONALPADRO (POP)

    N 01

    REVISO:00

    NOME DO PROCEDIMENTO - MARCA

    PAG.

    01/0..

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    1.0 FINALIDADE

    2.0 PRINCPIOA glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidao da glicose paracido glicnico e perxido de hidrognio. Atravs de uma reaooxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), operxido de hidrognio formado reage com 4-aminoantipirina e

    fenol, formando um complexo de cor vermelha (quinoneimina),cuja absorbncia medida em 500 nm, diretamente proporcional concentrao de glicose na amostra.

    22

    GOD

    2 OHGlicnicocidoOH1/2ecosGli

    OH4aminQuinoneiFenolaoantipirinmina4OH2 2POD

    22

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    3.0 SIGNIFICADO CLNICO

    - Diabetes Mellitus Tipo I

    - Diabetes Mellitus Tipo II

    - Diabetes Mellitus Secundria

    - Diabetes Mellitus Gestacional

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    4.0 INFLUNCIAS PR-ANALTICAS

    5.0 AMOSTRAS Preparo do Paciente

    Colher sangue pela manh aps jejum 8 horas, salvo orientaesmdicas.

    Amostras utilizadasSoro, plasma, lquor e outros lquidos biolgicos.

    Anticoagulantes como heparina, oxalato, fluoreto ou EDTA, nointerferem.

    Estabilidade e armazenamento da amostra

    O analito estvel por 7 dias a 2-8 C.Separar o soro ou plasma dos elementos celulares no prazomximo de 1 hora.

    Adicionando um inibidor de glicolise como o fluoreto, melhora apreservao da amostra.

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    6.0 METODOLOGIA

    7.0 REAGENTES

    1- Padro - Contm Glicose 100 mg/dL.

    2- Reagente de Cor - Contm tampo pH 7,5 de fosfato70 mmol/L, fenol 5,0 mmol/L, glicoseoxidase 10000U/L, peroxidase 1000 U/L, e 4-aminoantipirina 0,4

    mmol/L.

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    8.0 CURVA DE CALIBRAO

    Padro Concentrao

    (mg/L)

    Absorbncia

    1 0 0,000

    2 50 0,172

    3 100 0,343

    4 250 0,859

    5 400 1,374

    6 600 1,986

    7 800 2,350

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    9.0 LINEARIDADE

    A reao linear at 600 mg/dL . Quando obtido valorigual ou maior que 600 mg/dL, diluir a amostra comNaCl 150mmol/L, realizar nova medio e multiplicaro resultado pelo fator de diluio. Diluir a amostra detal modo que o valor encontrado se situe entre 80 e

    200md/dL. Sugerimos a verificao d linearidademetodolgica e fotomtrica, no mnimosemestralmente, utilizando amostra com valores at600 mg/dL.

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    10.0 MATERIAIS NECESSRIOS

    Procedimento Tcnico Manual

    Banho-Maria a 37C

    Espectrofotmetro ou fotmetro para leituras em500 nm

    Pipetas automticas volume:

    Cronmetro

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    11.0 CONTROLE INTERNO DA QUALIDADE

    Utilizao de amostras controles com valor:

    situado na faixa de referncia (nvel de deciso)

    e

    em outra faixa de significncia clnica

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    12.0 PROCEDIMENTO TCNICOProcedimento Manual

    1- Deixar os reagentes atingirem a temperatura ambiente ou a do banho-mariaantes da realizao do teste.2- Identificar 3 tubos de ensaio com "Branco", "Teste" e "Padro" e proceder:

    3- Homogeneizar bem e incubar os tubos durante 10 minutos temperaturaambiente (15-30C) ou durante 5 minutos a 37C .

    4- Ler a absorbncia (A) do Padro (Ap) e do Teste (At) zerando o aparelho com oBranco em 500 nm.

    5- A cor estvel durante 2 horas .

    Tubos Branco Teste Padro

    Amostra 10 L Padro (1) 10 LReagente de Cor (2) 1000 L 1000 L 1000 L

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    13.0 CLCULOSVer linearidade

    Glicose (mg/dL) = X 100

    Fator de Calibrao =

    Glicose (mg/dL) = Absorbncia do Teste x Fator de Calibrao

    Absorbncia do teste

    Absorbncia do Padro

    ____________________

    ____________________

    Absorbncia do Padro

    100

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    14.0 INTERVALO DE REFERNCIA /

    VALORES RECOMENDVEIS OU DESEJADOS

    Plasma: 70 a 99 mg/dL ou 3,9 a 6,1 mmol/L

    Lquor: 40 a 70 mg/dL

    Lquidos Corporais: > 60 mg/dL (ou diferena entreglicemia e concentrao de glicose no lquido,

    desde que no for > 40 mg/dL)

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    15.0 REFERNCIAS

    Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, Academic Press 2nd ed.1205-1214.

    Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry.Philadelphia: W.B. Saunders Co. 1994: 932-958.

    Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4a Ed -Editora Guanabara Koogan; 1998.

    Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation andTechniques. Philadelphia: Lea & Febiger, 1988:288-293.

    Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6:24.

    Trivedi RC et al. Clin Chem 1978;24:1908-1911.

    GLICOSE-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica.

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    16.0 APROVAO

    Setor Tcnico: nome completo de um colega

    Responsvel Tcnico: seu nome completo

    Gerente da Qualidade: nome da profa. completo

    Data:___/___/___

    Data:___/___/___

    Data:___/___/___

    Assinatura do colega

    Sua assinatura