AULA BIOQUIMICA

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LABORATRIO DE BIOQUMICA CLNICA

Dra. Rosilene Linhares Dutra

Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi

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Ramo do laboratrio clnico no qual os mtodos qumicos e bioqumicos so aplicados para pesquisa de uma doena. Compreendem mais de 1/3 de todas as investigaes laboratoriais de um hospital; Analitos testados: - sangue; - urina; - aspirado do suco gstrico; - Lquor;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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USO TESTES BIOQUMICOSDIAGNSTICO EXCLUSO DE DIAGNSTICO MONITORAMENTO DE TRATAMENTO MONITORAMENTO CURSO DA DOENA ESTABELECER PROGNSTICO TRIAGEM



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PROCEDIMENTOSPR-ANALTICOS: - POP da coleta; - Orientaes ao paciente; - Obteno da amostra; - Tipos de amostra; - Processamento da amostra; - Armazenamento da amostra; - Transporte da amostra;



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ANALTICOS: - Equipamentos; - Metodologia: . reaes segundo o produto formado; . reaes segundo o procedimento tcnico; PS-ANALTICOS: - Clculos corretos; - Linearidade do mtodo; - Valores dos controles; - Resultados x quadro clnico paciente; - Liberao do resultado;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

PROCEDIMENTOS PR-ANALTICOS ORIENTAES AO PACIENTE: - Necessidade de jejum? Por quanto tempo? - Restrio alimentar? - Tipo de amostra

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RECEBIMENTO E LEITURA DA SOLICITAO MDICA;

- Fornecimento de frasco, orientaes de coleta; - Quantidade de amostra que deve ser coletada; - Horrio da coleta x horrio entrega ao laboratrio; - Cuidados com a manipulao da amostra, armazenamento, tempo.Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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1.

COLETA DA AMOSTRA: - Quantidade adequada; - Identificao do paciente e da amostra; - Informaes sobre o caso clnico; - Registro do paciente e da amostra; - Tipo de tubo para coleta; - Viabilidade da amostra;



3.1) TIPOS DE AMOSTRAS PUNO VENOSA SORO: - Parte lquida do sangue; - Coletar sem anticoagulante; - Centrifugar aps a coagulao PLASMA: - uria, glicose, creatinina - coletar com anticoagulante inibidor de gliclise - Obtido aps centrifugao SANGUE TOTAL - Hemoglobina glicadaAulas gratuitas da Professora Dra Rosi

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Sistema de Coleta com Vcuo

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PUNO ARTERIAL SANGUE ARTERIAL: Sangue oxigenado pelos pulmes e bombeado do corao para todos os tecidos; essencialmente uniforme em composio em todo corpo; Nvel hospitalar; UTI Gasometria: . ngulo de 30 a 45 (artria radial); . ngulo de 45 60 (artria braquial); . ngulo de 45-90 (artria femoral)Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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LOCAIS DE PUNO ARTERIAL

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PUNO CAPILAR - Controle da glicemia - Coagulao LQUIDOS CORPREOS LCR; Sinovial; Asctico; Pleural; Pericrdico URINA - Provas bioqumicas; - TTGOAulas gratuitas da Professora Dra Rosi

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3.2) SELEO DA VEIA Facilmente palpvel; Brao sem realizao de mastectomia;, Brao sem infuso IV; Local sem hematoma, edema, contuso; Local sem mltiplas punes; Uso de bolsa de gua quente; NO APLICAR TAPINHAS NO LOCAL A SER PUNCIONADO; No dobrar o brao aps a coleta....aplicar presso no local suficiente; Retirar objetos do brao do paciente a ser puncionado;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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3.3) MICROCOLETA DE SANGUE CAPILAR E VENOSO PARA NEONATOS E BEBS:

-

Puno digital; Puno do calcanhar; Profundidade da lanceta: 2,4 mm Coletar em macas com auxlio de outro profissional.

- Coagulao Puno lbulo da orelha



3.4) ERROS NA COLETA:

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- Tcnica aplicada na coleta: hemlise, liberao de K+

das HM; - Estase prolongada (garrote > 2 minutos) durante a puno venosa; - Amostra insuficiente; - Erros na cronometragem: ex: Urina de 24hs - Recipiente incorretos; - Local de coleta inadequado; - Tubos de soro coletados antes dos tubos contendo anticoagulante; - Armazenamento incorreto: K+, PO42-, enzimas das HMAulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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Hemlise



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1.

ARMAZENAMENTO, CONSERVAO E TRANSPORTE - Possibilitar a manuteno da integridade dos

elementos;

-Contribuir para estabilidade das substncias qumicas; - Orientaes ao paciente; - Tempo mximo 1hora at o laboratrio; - Refrigerao 2-10C; - Atividade enzimtica estvel por 4 dias entre 1525C; - Turbulncia excessiva leva a hemlise; - Evaporao de amostras;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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PROCEDIMENTOS ANALTICOS EQUIPAMENTOS: - Centrfuga; - Espectrofotmetro; - Densitmetro para eletroforese; - Fotmetro de chama; - Deionizador; - Banho-maria; - Estufa para secagem



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CENTRIFUGAO: - Aps repouso de 20-30 minutos para coagulao; - Suave; - Tempo determinado para o analito (3500rpm/10min); - Retirar o cogulo rapidamente.



ESPECTROFOTMETRO

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A espectrofotometria baseia-se na absoro da radiao

nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e o infravermelho; Quando luz passa atravs de uma amostra ou quando ela refletida de uma amostra, a quantidade de luz absorvida a diferena entre a radiao incidente (I0) e a radiao transmitida (I). A quantidade de luz absorvida expressa tanto como transmitncia ou absorbncia.



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COMPONENTES BSICOS DA FOTOMETRIA Fonte de energia eltrica Fonte de energia radiante

Lmpada de Tunstnio UV prximo e visvel Lmpada de Hidrognio regio do UV

Monocromador Porta Cubetas

Quadradas Redondas

Detectores: E radiante transmitida em E eltrica Circuito medidor: E eltrica emitida e medido em A e/ou T



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Iofeixe de luz de intensidade Iosoluo 10 g/l

IT1

Iosoluo 20 g/l

IT2

A absoro da luz tanto maior quanto mais concentrada for a soluo por ela atravessada

Iofeixe de luz de intensidade Io1 cm

IT1

Io3 cmAulas gratuitas da Professora Dra Rosi

IT3

A absoro da luz tanto maior quanto maior for a distncia percorrida pelo feixe luminoso atravs das amostras


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Logo: Quando a Eradiante atravessa uma soluo, aquantidade de E transmitida com: - espessura atravessada (LEI DE LAMBERT); - da concentrao ou intensidade da cor da soluo (LEI DE BEER); LEI DE LAMBERT-BEER A relao entre E emergente / E incidente indica a transmitncia da soluo



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Se a luz passa em uma soluo onde no h absoro nenhuma, a absorvncia ser zero e a transmitncia ser 100.



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ESPECTRO UV / VISVEL

Na faixa de leitura entre 400 700 nmAulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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ESPECTRO UV

O espectro UV est dividido em 3 partes: UVC (< 280nm), UVB (280320nm), UVA (320400nm).Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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UVA Luz Negra 320:400 nm

Bronzeado; Formao da catarata;

UVB Regio do eritema 280:320nm

Regio potencialmente carcinognica; Protetores solares;

UVC Bactericida e Germicida - < 280 nm

Protegidos pela camada de oznio; Lmpadas de vidro bloqueiam completamente esses raios;



PRINCPIO DA COR COMPLEMENTAR

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OU SEJA: Uma soluo AZUL absorve o VERMELHO com maior intensidade e portanto deve-se escolher a poro vermelha para medida da soluo azul

OBJETIVO: Utilizar uma faixa no espectro na qual a E radiante seja absorvida ao mximo ou aproximadamente



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ESPECTRO IVtil na determinao de grupos funcionais em compostos orgnicos; Quando a ligao covalente entre os tomos sofre ao de E elas vibram e deformam; O retorno ao estado original, libera E que medida;



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DENSITMETRO-Instrumento de controle utilizado para medir a densidade ptica em amostras opacas;

- Uso em eletroforese de protenas, lipdios e Hb;



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FOTMETRO DE CHAMAMedida de concentrao de um determinado produto qumico, alcalino ou alcalino terroso, quando introduzido em uma chama na forma de aerossol. Chama excita os tomos com produo de espectros caractersticos. Converte amostras lquidas em estados gasosos, decompondo em tomos.

Para dosagem de: - Na -K - Li - CaAulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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DEIONIZADORSo teis para obter gua desmineralizada com alto grau de pureza aninica e catinica;

Utiliza mtodo de Resina de troca inica: - Remoo dos ctions presentes na gua bruta RESINA H+; - Remoo dos nions presentes na gua bruta RESINA HO-;



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Elementos retirados: - Clcio; - magnsio; - Sdio; - Potssio; - Nitrato; - Slica; - Hidrognio; - Ferro; - Mangans; - CO2;

- Bicarbonato; - Cloretos - Carbonatos; - Sais;Bio-quimica.blogspot.com


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BANHO MARIA Aquecimento lento e uniforme sem exceder 100C; Acima de 100C, o calor transferido gua transformado em energia cintica, formando vapor;



ESTUFA PARA SECAGEM No inserir vidraria volumtrica Vidraria volumtrica:

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Vidraria No-volumtrica:

- Bales volumtricos; Pipetas volumtricas.

- Tubos de ensaio; - Frascos para reagentes; - Funil; - Bquer **; - Proveta **;



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Problemas analtico: Calibrao equipamento; Limpeza do instrumento; Qualidade dos reagentes; Controle de qualidade do equipamento; Manuteno de peas do equipamento;



1.

METODOLOGIA:

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SEGUNDO PRODUTO FORMADO

AGLUTINAO

COLORIMTRICA

PRECIPITAOAulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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SEGUNDO PROCEDIMENTO TCNICOREAO DE PONTO FINAL: Aquelas reaes que formam produtos cuja concentrao chega a um ponto mximo permanecendo estvel por um certo tempo;



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REAO DE CINTICA CONTNUA: Reaes que utilizam medidas contnuas da formao de produtos;



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REAES CINTICAS DE TEMPO FIXO: Reaes que utilizam um tempo fixo de incubao sendo a formao de produtos interrompida por qualquer processo. REAO DE CINTICA DE 2 PONTOS: til para diminuir tempo de reao, eliminar interferentes.



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3. LIMPEZA MATERIAL LABORATRIO VIDRARIA Deve ser imersa, logo aps o uso, em uma soluo de detergente neutro (Extran) a 2,0%, por mnimo 1hora (over night); Secar a temperatura ambiente. PIPETAS E TUBOS: Colocadas aps uso, submersas em frasco contendo soluo de detergente a 2,0% Enxaguados exaustivamente com gua de torneira e lavados no mnimo 2 x com gua destilada ou deionizada; Secar em estufa a 80C;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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PONTEIRAS: - Colocadas aps uso, submersas em frasco de boca larga contendo soluo de detergente a 2,0% ou de NaOH a 1%; - Agitar vigorosamente por cerca de 30 minutos e enxaguar exaustivamente com gua de torneira e com gua destilada; - Secar em estufa a 37C; CUBETAS: - Lavadas aps o uso com gua deionizada;



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PROCEDIMENTOS PS - ANALTICOS Clculos corretos? H linearidade do mtodo? Valores dos controles esto dentro do limite estabelecido? H valores de referncia? Resultados e quadro clnico so compatveis?



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FATORES BIOLGICOS QUE AFETAM A INTERPRETAO DOS RESULTADOSSexo; Idade; Dieta; Horrio da coleta; Estresse e ansiedade; Postura do paciente; Exerccios; Histrico mdico do paciente; Gravidez; Ciclo menstrual; Medicamentos;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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Classificao das CAUSAS DE ERROS nas dosagens bioqumicas



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ERROS INADMISSVEISENGANOS: - Troca de rtulo;

- Troca de amostras durante o processamento; - Troca de amostras ou reagentes durante a pipetagem; - Leitura incorreta de instrumentos; - Clculos errados; - Erro na transcrio de resultados;Aulas gratuitas da Professora Dra Rosi Bio-quimica.blogspot.com

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ERROS OCASIONAIS

ACIDENTAIS: - Presena de substncias interferentes na amostra; - Tubos ou pipetas contaminadas; - Diferentes tcnicos;



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ERROS SISTEMTICOS REPETITIVOS: - Tcnicas de baixa preciso e exatido; - Reagentes deteriorados ou de m qualidade; - Perda de preciso da vidraria e equipamentos; - Curva ou fator de calibrao errados;



Boa aula!!!!!!!!

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