2015 AULA2-InTRODUÇÃO- Processo Fermentativo e Cultivo de Células Em Batelada
Aula Prática Avaliação do Processo fermentativo
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Aula Prática: Avaliação do Rendimento do Processo Fermentativo
(Prof. Júlio César Ferreira)Material:
Caldo de Cana Sulfato de AmôniaFermento Biológico (fresco) Erlenmeyer de 500 mlÁgua destiladaPapel milimetrado
Como fazer:
Preparar o meio de cultura: 100 ml de caldo de cana com 1,5% de Sulfato de amônia (aliquotar e autoclavar imediatamente após a moagem). O meio pode ser preparado com alguma antecedência e guardado autoclavado.
Preparar o inóculo de levedura: 65 g de fermento fresco em 100 ml de água destilada (preparar no dia, não precisa ser assépticamente)
Procedimento:
Inocular (não precisa ser assepticamente), colocando 20 ml do inoculo de levedura no meio (100ml) e pesar imediatamente.
Inocular o Controle (não precisa ser assepticamente), colocando 20 ml de água destilada em um Erlenmeyer com 100 ml de meio e pesar imediatamente.
Agitar o erlenmeyer manualmente a cada 10 minutos e pesar, até um tempo total de 1h e 30 min. Anotar o valor de cada pesagem.
Cálculo da Liberação de Etanol:
A equação de Gay- Lussac permite o cálculo do rendimento de fermentação, considerando a relação estequiométrica entre a quantidade de matéria-prima consumida e o produto obtido. Para o Etanol,, considera-se a seguinte relação:
1 mol de glicose 2mol de etanol + 2 mol de CO2
180g 92g + 88g
O rendimento teórico (correspondente à relação estequiométrica entre glicose e etanol) seria 92/180 = 0,511 (Rendimento Gay – Lussac).
Durante a prática, você deverá confeccionar uma curva de rendimento teórico em função do tempo, desde o tempo zero (inoculo) até o tempo final de 1h e 30 min, verificando o rendimento de produção de etanol no meio de cultura (caldo de cana com sulfato de amônia inoculado com leveduras) e no controle (o mesmo meio inoculado com àgua), a partir da pesagem do CO2 liberado durante o processo fermentativo.