AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE Profa. Dra. Patrícia da Fonseca Leite.
Transcript of AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE Profa. Dra. Patrícia da Fonseca Leite.
AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE
Profa. Dra. Patrícia da Fonseca Leite
CONTEÚDO
Definições importantes,
Parâmetros que interferem na ação tóxica,
Quando avaliar a toxicidade,
Quais os ensaios para medir a toxicidade
O QUE É TOXICIDADE?
Capacidade inerente a um agente tóxico
de produzir um efeito adverso ao
organismo. Ou seja, é a medida relativa
do potencial tóxico da substância.
EFEITO ADVERSO OU TÓXICO
Alteração anormal, indesejável ou
nociva após exposição a substância
potencialmente tóxica. A morte é o
efeito adverso mais drástico.
FATORES QUE INTERFEREM NA RESPOSTA TÓXICA
Composto químico/ condição de exposição
Ambiente
Indivíduo
FATORES QUE INTERFEREM NA RESPOSTA TÓXICA
Características físico-químcas,
Dose e/ou concentração,
Via de exposição,
Duração e frequência da
exposição.
Idade,Sexo,Estado nutricional,Patologias,Fatores genéticos.
FATORES QUE INTERFEREM NA RESPOSTA TÓXICA
Temperatura,Umidade,Hora do dia,Administração
simultânea de outros agentes.
FATORES QUE INTERFEREM NA RESPOSTA TÓXICA
RELAÇÃO DOSE/EFEITO E DOSE/RESPOSTA
EFEITOS GRADUAIS x EFEITOS QUANTAIS
Alteração biológica individual
Proporção da população que expressa um
efeito
Relação dose/efeitoRelação dose/efeito Relação dose/respostaRelação dose/resposta
CURVA DOSE-RESPOSTA
Relação dose/resposta para uma substância hipotética em uma população homogênea (efeito medido: letalidade).
CURVA DOSE-RESPOSTA
Eficaz
50
% resposta
log dose (mg/kg)
Tóxico100
DL50DE50
Relação dose-resposta para o efeito eficaz e para o efeito tóxico
Relação dose/resposta de três substâncias diferentes
AB
50
log dose (mg/kg)
c
% resposta
CONSIDERAÇÕES IMPORTANTES
O efeito é decorrente da
substância?
O efeito está associado a dose?
Existe método confiável de se
medir o efeito?
Classificação da toxicidade
DL50 (mg/kg) oral em
ratosMuito tóxica < 25
Tóxica 25 - 200Nociva > 200
CLASSIFICAÇÃO
AGENTE DL50 (mg/kg)
Etanol 10.000Cloreto de sódio 4.000Sulfato ferroso 1.500Morfina 900Estricnina 2Nicotina 1Dioxina (TCDD) 0,001Toxina botulínica 0,00001
CLASSIFICAÇÃO
RISCO
Risco = Toxicidade x Exposição
Termo que traduz a probabilidade estatística de uma substância química provocar efeitos nocivos em condições definidas de exposição
Substância com alta toxicidade mas baixa exposição baixa probabilidade de causar intoxicações.
QUAL A FINALIDADE DOS TESTES DE TOXICIDADE?
“Fornecer dados que possam ser utilizados para
avaliação do risco do uso de substâncias
químicas para o homem e estabelecer limites de
segurança na exposição aos agentes químicos”
OUAIS SUBSTÂNCIAS DEVEM SER AVALIADAS NOS TESTES DE TOXICIDADE?
Substâncias que pretendem ser comercializadas
Provável de produção e emprego,
Potencial de acumulação no meio ambiente,
Tipo e magnitude das populações que estarão
expostas.
AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE
Toxicidade aguda
Estudos de toxicidade in vitro
Toxicidade sub-crônica
Toxicocinética
Reprodução/ teratogenicidade
Toxicidade crônica
Mutagenicidade/Oncogenicidade
Identificação do composto
Caracterização química
Revisão da literaturaCorrelação estrutura -
atividade
AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE
INFORMAÇÕES PRELIMINARES
Substância química caracterizada,
Grau de impureza,
Características físico-químicas,
Estimar níveis prováveis de exposição pela população,
Estabelecimento de correlação estrutura - atividade
PARÂMETROS AVALIADOS
Sinais
Consumo ração,
Peso,
Cor e textura pelagem,
Alterações circulatórias e
respiratórias,
Anormalidades motoras e
de comportamento,
Aumento de massas de
tecidos.
Anátomo-patológico,
Avaliação
hematológica e
bioquímica,
Exame de urina.
Exames
TOXICIDADE AGUDA
Dose/ período
Via de administração
Espécies
Sexo
Observação
Única ou múltiplas em 24 horas
Uma ou mais, oral ou a via pretendida
Ao menos uma
Ambos
14 dias
INTERPRETAÇÃO DO TESTE
Estimativa da toxicidade intrínseca,
Identificar possíveis órgãos ou sistemas sensíveis,
Severidade dos efeitos,
Avaliar a suscetibilidade das espécies
Delineamento dos estudos posteriores.
Dose fixa
10 animais na dose de 500mg/kg
10 animais na dose de 50mg/kg
s/ toxicidadec/ morte
Não é classificado
c/ toxicidade
Nocivac/ toxicidade
Tóxica
c/ morte
10 animais na dose de 5mg/kg
c/ toxicidade ou morte
Muito tóxica
TOXICIDADE SUBCRÔNICA
Dose/ período
Via de administração
Espécies
Sexo
Observação
3 doses /21-90 dias
Pretendida
Duas, 1 roedora e 1 não roedora
Ambos
Ao menos um vez ao dia
TOXICIDADE SUBCRÔNICA
Estabelecer os níveis onde não se observam efeitos
tóxicos (NOAEL),
Avaliar se o efeito é devido ao acúmulo da
substância,
Identificar e caracterizar os órgãos afetados e a
severidade após exposição repetida,
Fornecer dados para a escolha das doses do estudo
de toxicidade crônica.
TOXICIDADE CRÔNICA
Dose/ período
Número de animais
3 doses – maior dose tolerada / 6 meses – anos em roedores e 1 ano em não roedores
50
PODE APRESENTAR CONSIDERAÇÕES SOBRE O POTENCIAL
CARCINOGÊNICO
ESTUDO DE MUTAGENICIDADE
Células germinativas- Problemas de fertilidade- Mutações nas gerações futuras
Células somáticas- Neuplasias- Envelhecimento
ESTUDO DE MUTAGENICIDADE
Ensaios in vivo, Danos cromossômicos em células de medula
óssea em metáfase, Aparecimento de micronúcloes em linfócitos, Teste do dominante letal.
Ensaio in vitro AMES (1975) – cepas de Salmonella typhimurim
TESTE DE AMES
Positivo quando índice de mutagenicidade > 2,0, p<0,05
EFEITOS LOCAIS SOBRE PELE E OLHOS
Coelho ou cobaia (somente pele),
Teste de Draize (1944),
Lesão não reversível: aquela que persiste por período superior a 14 dias.
Parâmetros avaliados:o pele: eritema, escara, edema e corrosão,o olhos: córnea, conjuntiva e íris
TESTES DE IRRITAÇÃO
Irritação local ou aguda,
Irritação cumulativa,
Irritação induzida fotoquimicamente.
TESTE DE DRAIZE
• Aplicação do produto (0,5g ou mL - pele, 0,1mL- olhos), • Observação 24, 48 , 72hrs e 7 dias após a aplicação,
• Escala de Draize.
TESTE DE DRAIZE
TESTE DE DRAIZE
MÉTODOS ALTERNATIVOS
- Membrana córion-alantóide de ovo embrionado de galinha,
- Teste de opacidade e permeabilidade de córnea bovina.
PONTOS IMPORTANTES
O que deve ser testado?
Seleção da dose!
Quais testes devem ser realizados?
Como interpretar os resultados?