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Camila Indiani de OliveiraSeminário de Avaliação PRODOCs 1 e 2
Responsável Institucional: Mitermayer G. dos Reis
Instituição: CPqGM/FIOCRUZ
Departamento: LIP
Área/Subárea: Parasitologia/Parasitologia Humana
Título do Projeto:Caracterização dos componentes da glândula salivar de Lutzomyia intermedia e de Lutzomyia whitmani e caracterização de suas propriedades imunomoduladoras
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Introdução I
Fonte: WHO/TDR e MS/SVSFonte: WHO/TDR e MS/SVS
Prioridade nos programas de controle da OMS
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Introdução II
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Introdução III
Lesão tecidual
Hemostasia
Vasoconstrição
Agregação Plaquetária
Coagulação
Modificação do microambiente: estabelecimento da Leishmania?
Saliva
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Introdução IV
• Vacinação com proteína da saliva protege contra a leishmaniose. (Valenzuela et al., 2002).
• Vacinação com DNA que codifica a mesma proteína protege contra a leishmaniose.
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Objetivo do Projeto
• Estudar a saliva dos flebótomos Lutzomyia whitmani e Lutzomyia intermedia, os principais vetores da Leishmania braziliensis (espécie causadora da leishmaniose tegumentar) na Bahia.
• Identificar os componentes da saliva destes vetores.
Hipótese: proteínas da saliva do vetor são capazes de proteger contra a leishmaniose causada por L. braziliensis.
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Resultados alcançados
Utilizando um modelo experimental de LTA:
• Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia.
• A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose.
• Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?
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A resposta imune contra a saliva é mista: indução de mediadores pró-inflamatórios e anti-inflamatórios.
CD4
CD8
IFN
IL4 IL10
%
% d
e c
élu
las
% d
e c
élu
las
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Resultados alcançados
Utilizando um modelo experimental de LTA:
• Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista.
• A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose?
• Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?
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A imunização com saliva não protege contra a leishmaniose.
SGS
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Resultados alcançados
Utilizando um modelo experimental de LTA:
• Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista.
• A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose? Ñão.
• Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?
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Massive Sequencing of Full-Length Salivary Gland cDNA library
Salivary gland cDNA database
Sequence Analysis
Select candidates and clone into VR2001
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Assembler output SequenceBest match to NR protein database Species
Average Result Status
LI-contig7-asb LIM P5 B07 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001
LI-contig13-asb LIL P3 B02 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001
LI-contig14-asb LIS P9 E07 D7 salivary protein Lu.longipalpis SIG VR2001
LI-contig17-asb LIS P9 F01 anticoagulant Lu.longipalpis SIG VR2001
LI-contig18-asb LIS P9 F05 SL1 protein Lu.Longipalpis SIG VR2001
LI-contig25-asb LIL P2 C06 SIG VR2001
LI-contig41-asb anticoagulant Lu.longipalpis SIG incomplete
LI-contig43-asb LIL P4 A03 antigen 5-related protein Lu.longipalpis SIG
LI-contig44-asb LIM P6 F11 SIG VR2001
LI-contig45-asb LIL P2 H08 SIG VR2001
LI-contig49-asb LIM P6 G12 anticoagulant Lu.longipalpis SIG VR2001
LI-contig53-asb LIL P2 E05 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001
LI-contig60-asb LIS P8 B10 gastric mucin (clone PGM-2A) SIG
LI-contig62-asb putative yellow related-protein Lu. longipalpis SIG incomplete
LI-contig73-asb LIS P9 C10 SIG VR2001
LI-contig85-asb putative apyrase Lu. longipalpis SIG incomplete
LI-contig100-asb LIS P8 C09 putative yellow related-protein Lu. longipalpis SIG VR2001
LI-contig103-asb LIS P9 G07 SIG VR2001
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Conclusão I
• Divulgação: Publicações
de Moura TR, Novais, FO, Oliveira, F, Clarencio, J,Noronha, A, Barral, A, Brodskyn C, de Oliveira CI. Toward anovel experimental model of infection to study Americancutaneous leishmaniasis caused by Leishmania braziliensis.Infect. Immun. (2005) 73:5827-34.
Saliva de Lu. intermedia: Resposta imune emcamundongos e ausência de proteção contra desafio comL. braziliensis.
Resposta inflamatória induzida pela saliva: modelo da bolsade ar.
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Conclusão I
• Divulgação: Publicações
•Intraspecific polymorphisms of Brazilian isolates of Leishmania amazonensis revealed by DNA sequencing, PCR-based analyses and molecular karyotyping. J.P.C. de Oliveira et al., enviado para publicação. Acta Tropica.
•Involvement of TCR V12 in the human immune response against Leishmania amazonensis. J. Clarêncio et al., aceito para publicação. Infec. Immun.
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Conclusão II
• Impactos: Formação de recursos humanos
Iniciação Científica:Fernanda Novais (concluído) Marcia Weber (em andamento)Renata Andrade (em andamento)
Mestrado:Tatiana de Moura (concluído)João Paulo S. C. de Oliveira (concluído)Fernanda Novais (em andamento)Maria José Menezes (em andamento)Sarah Falcão (em andamento)
Doutorado:Tatiana de Moura (em andamento)
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Agradecimentos
• Fiocruz – Dra. Aldina Barral et al.
• FAPESB – Bolsa de Pos Doc.
• NIAID – Dr. Jesus Valenzuela.