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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARANAacute - UNIOESTE

CAMPUS DE CASCAVEL

CENTRO DE CIEcircNCIAS AGRAacuteRIAS

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM ENGENHARIA AGRIacuteCOLA - PGEAGRI

ARIANE SPIASSI

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

CASCAVEL ndash PARANAacute ndash BRASIL 2011

1

ARIANE SPIASSI

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Agriacutecola em cumprimento aos requisitos para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Engenharia Agriacutecola aacuterea de concentraccedilatildeo Sistemas Bioloacutegicos e Agroindustriais ndash SBA

Orientadora Prof Dra Luacutecia Helena Pereira Noacutebrega

CASCAVEL ndash PARANAacute - BRASIL

2011

2

Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo elaborada pela Biblioteca Universitaacuteria UNIOESTECampus de Toledo Bibliotecaacuteria Marilene de Faacutetima Donadel - CRB ndash 9924 Spiassi Ariane

S754a Aleopatia de fungos fitopatogecircnicos sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho Ariane Spiassi -- Cascavel PR [s n] 2011

61 f il

Orientadora Dra Luacutecia Helena Pereira Noacutebrega Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Agriacutecola) ndash

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute Campus de Cascavel Centro de Ciecircncias Exatas e Tecnoloacutegicas

1 Alelopatia 2 Fungos fitopatogecircnicos 3 Plantas

daninhas 4 Controle bioloacutegico (Fitossanidade) 5 Doenccedilas de plantas 6 Herbicida natural 7 Aleloquiacutemicos 8 Soja ndash Doenccedilas e pragas ndash Controle 9 Milho ndash Doenccedilas e pragas ndash Controle I Noacutebrega Luacutecia Helena Pereira OrIII T

CDD 20 ed 63296

Revisatildeo do texto Dhandara Soares de Lima 13 de dezembro de 2011

3

BIOGRAFIA

ARIANE SPIASSI nascida em 28 de Janeiro de 1986 filha de Antenor Spiassi e Marinecircs Facchim Spiassi natural do municiacutepio de Maximiliano de Almeida ndash RS Concluiu o ensino fundamental e meacutedio em coleacutegio puacuteblico nessa mesma cidade Possui graduaccedilatildeo em Licenciatura em Ciecircncias Bioloacutegicas (2007) e Especializaccedilatildeo em Docecircncia no Ensino Superior (2008) pela Faculdade Assis Gurgacz ndash FAG (Cascavel PR) Trabalhou durante quatro anos (2005 a 2008) como auxiliar de laboratoacuterio de Microbiologia e Biologia Celular na FAG Atualmente eacute mestranda na Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Agriacutecola na aacuterea de concentraccedilatildeo de Sistemas Bioloacutegicos e Agroindustriais ndash SBA e bolsista CNPq do projeto ldquoBioprospecccedilatildeo da microbiota fuacutengica das florestas de Mata Atlacircntica da regiatildeo Oeste do Paranaacuterdquo sob coordenaccedilatildeo da Profa Dra Marina Kimiko Kadowaki da Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

ii

4

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus e agrave Nossa Senhora pela benccedilatildeo recebida acompanhada de Forccedila

Luz Coragem e Paz para enfrentar os obstaacuteculos da vida nos caminhos que escolhi

Aos meus pais Antenor e Marinecircs e ao meu irmatildeo Igor exemplos de coragem

trabalho e dignidade por acreditarem em mim e me apoiarem em mais esta conquista

Agrave toda minha famiacutelia especialmente agrave minha madrinha que mesmo estando longe

sempre me deu forccedilas para continuar

Agrave professora Luacutecia pela oportunidade paciecircncia e orientaccedilatildeo para a conclusatildeo deste

trabalho

Aos professores que contribuiacuteram com conhecimento humildade e respeito sem os

quais eu natildeo estaria onde estou hoje

Aos amigos dos laboratoacuterios da UNIOESTE e FAG Faacutebio Jaqueline Danielle

Rodrigo Francielle Gislaine Maacutercia M Maacutercia S Maacutercia K Michelle Adriana Joseli

Carolina Dieguinho Flaacutevio Clair Luan Diohatildene Rose Elaininha Elaine (chefa) Edi ndash

pela ajuda durante as anaacutelises e pela companhia apoio e amizade durante nossa

convivecircncia

Agrave UNIOESTE pelo programa de poacutes-graduaccedilatildeo por disponibilizar a estrutura os

laboratoacuterios e o material necessaacuterio para a conclusatildeo da pesquisa

Ao Gilmar e agrave Clair da UNIOESTE de Marechal pelo fornecimento das cepas dos

fungos usados neste estudo e o esclarecimento de duacutevidas

Ao professor Dr Luis Francisco Angeli Alves pelo empreacutestimo da casa de

vegetaccedilatildeo

Agrave FAG por disponibilizar o laboratoacuterio de Microbiologia para desenvolvimento de

parte do trabalho

Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pela

concessatildeo da bolsa de estudos

Expresso reconhecimento a todas as pessoas que de forma direta ou indiretamente

contribuiacuteram para a concretizaccedilatildeo deste estudo

iii

5

RESUMO

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS

DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Plantas invasoras causam problemas agrave exploraccedilatildeo da agricultura mundial e o controle quiacutemico dessas plantas tem gerado diversos problemas ambientais como contaminaccedilatildeo de recursos naturais comprometimento da qualidade de alimentos intoxicaccedilatildeo de agricultores resistecircncia de plantas invasoras entre outros desequiliacutebrios Uma das alternativas para reduzir o uso de agrotoacutexicos eacute a utilizaccedilatildeo do controle alternativo empregando fungos fitopatogecircnicos que produzem uma variedade de compostos secundaacuterios em meio de cultivo os quais exibem atividade fitotoacutexica Assim o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por fungos fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho (Fusarium graminearum e Diplodia maydis) Foram avaliados os efeitos in vitro dos filtrados fuacutengicos nas concentraccedilotildees de 0 1 5 10 15 e 20 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de buva (Conyza canadensis (L) Cronq) picatildeo-preto (Bidens pilosa L) e amendoim bravo (Euphorbia heterophylla L) Tambeacutem foi testado este efeito sobre as plantas cultivadas (soja e milho) O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com vinte e um tratamentos e quatro repeticcedilotildees Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia e de regressatildeo polinomial Os resultados indicaram que o filtrado de cultura de Fusarium solani apresentou efeitos negativos sobre buva picatildeo-preto e amendoim bravo sem afetar negativamente a soja Diplodia maydis proporcionou reduccedilatildeo de

crescimento de buva e amendoim bravo sem causar prejuiacutezo agrave cultura do milho Finalmente o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de placircntulas de amendoim bravo sem afetar negativamente o milho sugerindo que esses filtrados possam ser utilizados para controle das plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente

Palavras-chave controle alternativo aleloquiacutemicos filtrado fuacutengico

iv

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

1

ARIANE SPIASSI

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Agriacutecola em cumprimento aos requisitos para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Engenharia Agriacutecola aacuterea de concentraccedilatildeo Sistemas Bioloacutegicos e Agroindustriais ndash SBA

Orientadora Prof Dra Luacutecia Helena Pereira Noacutebrega

CASCAVEL ndash PARANAacute - BRASIL

2011

2

Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo elaborada pela Biblioteca Universitaacuteria UNIOESTECampus de Toledo Bibliotecaacuteria Marilene de Faacutetima Donadel - CRB ndash 9924 Spiassi Ariane

S754a Aleopatia de fungos fitopatogecircnicos sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho Ariane Spiassi -- Cascavel PR [s n] 2011

61 f il

Orientadora Dra Luacutecia Helena Pereira Noacutebrega Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Agriacutecola) ndash

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute Campus de Cascavel Centro de Ciecircncias Exatas e Tecnoloacutegicas

1 Alelopatia 2 Fungos fitopatogecircnicos 3 Plantas

daninhas 4 Controle bioloacutegico (Fitossanidade) 5 Doenccedilas de plantas 6 Herbicida natural 7 Aleloquiacutemicos 8 Soja ndash Doenccedilas e pragas ndash Controle 9 Milho ndash Doenccedilas e pragas ndash Controle I Noacutebrega Luacutecia Helena Pereira OrIII T

CDD 20 ed 63296

Revisatildeo do texto Dhandara Soares de Lima 13 de dezembro de 2011

3

BIOGRAFIA

ARIANE SPIASSI nascida em 28 de Janeiro de 1986 filha de Antenor Spiassi e Marinecircs Facchim Spiassi natural do municiacutepio de Maximiliano de Almeida ndash RS Concluiu o ensino fundamental e meacutedio em coleacutegio puacuteblico nessa mesma cidade Possui graduaccedilatildeo em Licenciatura em Ciecircncias Bioloacutegicas (2007) e Especializaccedilatildeo em Docecircncia no Ensino Superior (2008) pela Faculdade Assis Gurgacz ndash FAG (Cascavel PR) Trabalhou durante quatro anos (2005 a 2008) como auxiliar de laboratoacuterio de Microbiologia e Biologia Celular na FAG Atualmente eacute mestranda na Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Agriacutecola na aacuterea de concentraccedilatildeo de Sistemas Bioloacutegicos e Agroindustriais ndash SBA e bolsista CNPq do projeto ldquoBioprospecccedilatildeo da microbiota fuacutengica das florestas de Mata Atlacircntica da regiatildeo Oeste do Paranaacuterdquo sob coordenaccedilatildeo da Profa Dra Marina Kimiko Kadowaki da Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

ii

4

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus e agrave Nossa Senhora pela benccedilatildeo recebida acompanhada de Forccedila

Luz Coragem e Paz para enfrentar os obstaacuteculos da vida nos caminhos que escolhi

Aos meus pais Antenor e Marinecircs e ao meu irmatildeo Igor exemplos de coragem

trabalho e dignidade por acreditarem em mim e me apoiarem em mais esta conquista

Agrave toda minha famiacutelia especialmente agrave minha madrinha que mesmo estando longe

sempre me deu forccedilas para continuar

Agrave professora Luacutecia pela oportunidade paciecircncia e orientaccedilatildeo para a conclusatildeo deste

trabalho

Aos professores que contribuiacuteram com conhecimento humildade e respeito sem os

quais eu natildeo estaria onde estou hoje

Aos amigos dos laboratoacuterios da UNIOESTE e FAG Faacutebio Jaqueline Danielle

Rodrigo Francielle Gislaine Maacutercia M Maacutercia S Maacutercia K Michelle Adriana Joseli

Carolina Dieguinho Flaacutevio Clair Luan Diohatildene Rose Elaininha Elaine (chefa) Edi ndash

pela ajuda durante as anaacutelises e pela companhia apoio e amizade durante nossa

convivecircncia

Agrave UNIOESTE pelo programa de poacutes-graduaccedilatildeo por disponibilizar a estrutura os

laboratoacuterios e o material necessaacuterio para a conclusatildeo da pesquisa

Ao Gilmar e agrave Clair da UNIOESTE de Marechal pelo fornecimento das cepas dos

fungos usados neste estudo e o esclarecimento de duacutevidas

Ao professor Dr Luis Francisco Angeli Alves pelo empreacutestimo da casa de

vegetaccedilatildeo

Agrave FAG por disponibilizar o laboratoacuterio de Microbiologia para desenvolvimento de

parte do trabalho

Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pela

concessatildeo da bolsa de estudos

Expresso reconhecimento a todas as pessoas que de forma direta ou indiretamente

contribuiacuteram para a concretizaccedilatildeo deste estudo

iii

5

RESUMO

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS

DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Plantas invasoras causam problemas agrave exploraccedilatildeo da agricultura mundial e o controle quiacutemico dessas plantas tem gerado diversos problemas ambientais como contaminaccedilatildeo de recursos naturais comprometimento da qualidade de alimentos intoxicaccedilatildeo de agricultores resistecircncia de plantas invasoras entre outros desequiliacutebrios Uma das alternativas para reduzir o uso de agrotoacutexicos eacute a utilizaccedilatildeo do controle alternativo empregando fungos fitopatogecircnicos que produzem uma variedade de compostos secundaacuterios em meio de cultivo os quais exibem atividade fitotoacutexica Assim o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por fungos fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho (Fusarium graminearum e Diplodia maydis) Foram avaliados os efeitos in vitro dos filtrados fuacutengicos nas concentraccedilotildees de 0 1 5 10 15 e 20 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de buva (Conyza canadensis (L) Cronq) picatildeo-preto (Bidens pilosa L) e amendoim bravo (Euphorbia heterophylla L) Tambeacutem foi testado este efeito sobre as plantas cultivadas (soja e milho) O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com vinte e um tratamentos e quatro repeticcedilotildees Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia e de regressatildeo polinomial Os resultados indicaram que o filtrado de cultura de Fusarium solani apresentou efeitos negativos sobre buva picatildeo-preto e amendoim bravo sem afetar negativamente a soja Diplodia maydis proporcionou reduccedilatildeo de

crescimento de buva e amendoim bravo sem causar prejuiacutezo agrave cultura do milho Finalmente o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de placircntulas de amendoim bravo sem afetar negativamente o milho sugerindo que esses filtrados possam ser utilizados para controle das plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente

Palavras-chave controle alternativo aleloquiacutemicos filtrado fuacutengico

iv

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

2

Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo elaborada pela Biblioteca Universitaacuteria UNIOESTECampus de Toledo Bibliotecaacuteria Marilene de Faacutetima Donadel - CRB ndash 9924 Spiassi Ariane

S754a Aleopatia de fungos fitopatogecircnicos sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho Ariane Spiassi -- Cascavel PR [s n] 2011

61 f il

Orientadora Dra Luacutecia Helena Pereira Noacutebrega Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Agriacutecola) ndash

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute Campus de Cascavel Centro de Ciecircncias Exatas e Tecnoloacutegicas

1 Alelopatia 2 Fungos fitopatogecircnicos 3 Plantas

daninhas 4 Controle bioloacutegico (Fitossanidade) 5 Doenccedilas de plantas 6 Herbicida natural 7 Aleloquiacutemicos 8 Soja ndash Doenccedilas e pragas ndash Controle 9 Milho ndash Doenccedilas e pragas ndash Controle I Noacutebrega Luacutecia Helena Pereira OrIII T

CDD 20 ed 63296

Revisatildeo do texto Dhandara Soares de Lima 13 de dezembro de 2011

3

BIOGRAFIA

ARIANE SPIASSI nascida em 28 de Janeiro de 1986 filha de Antenor Spiassi e Marinecircs Facchim Spiassi natural do municiacutepio de Maximiliano de Almeida ndash RS Concluiu o ensino fundamental e meacutedio em coleacutegio puacuteblico nessa mesma cidade Possui graduaccedilatildeo em Licenciatura em Ciecircncias Bioloacutegicas (2007) e Especializaccedilatildeo em Docecircncia no Ensino Superior (2008) pela Faculdade Assis Gurgacz ndash FAG (Cascavel PR) Trabalhou durante quatro anos (2005 a 2008) como auxiliar de laboratoacuterio de Microbiologia e Biologia Celular na FAG Atualmente eacute mestranda na Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Agriacutecola na aacuterea de concentraccedilatildeo de Sistemas Bioloacutegicos e Agroindustriais ndash SBA e bolsista CNPq do projeto ldquoBioprospecccedilatildeo da microbiota fuacutengica das florestas de Mata Atlacircntica da regiatildeo Oeste do Paranaacuterdquo sob coordenaccedilatildeo da Profa Dra Marina Kimiko Kadowaki da Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

ii

4

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus e agrave Nossa Senhora pela benccedilatildeo recebida acompanhada de Forccedila

Luz Coragem e Paz para enfrentar os obstaacuteculos da vida nos caminhos que escolhi

Aos meus pais Antenor e Marinecircs e ao meu irmatildeo Igor exemplos de coragem

trabalho e dignidade por acreditarem em mim e me apoiarem em mais esta conquista

Agrave toda minha famiacutelia especialmente agrave minha madrinha que mesmo estando longe

sempre me deu forccedilas para continuar

Agrave professora Luacutecia pela oportunidade paciecircncia e orientaccedilatildeo para a conclusatildeo deste

trabalho

Aos professores que contribuiacuteram com conhecimento humildade e respeito sem os

quais eu natildeo estaria onde estou hoje

Aos amigos dos laboratoacuterios da UNIOESTE e FAG Faacutebio Jaqueline Danielle

Rodrigo Francielle Gislaine Maacutercia M Maacutercia S Maacutercia K Michelle Adriana Joseli

Carolina Dieguinho Flaacutevio Clair Luan Diohatildene Rose Elaininha Elaine (chefa) Edi ndash

pela ajuda durante as anaacutelises e pela companhia apoio e amizade durante nossa

convivecircncia

Agrave UNIOESTE pelo programa de poacutes-graduaccedilatildeo por disponibilizar a estrutura os

laboratoacuterios e o material necessaacuterio para a conclusatildeo da pesquisa

Ao Gilmar e agrave Clair da UNIOESTE de Marechal pelo fornecimento das cepas dos

fungos usados neste estudo e o esclarecimento de duacutevidas

Ao professor Dr Luis Francisco Angeli Alves pelo empreacutestimo da casa de

vegetaccedilatildeo

Agrave FAG por disponibilizar o laboratoacuterio de Microbiologia para desenvolvimento de

parte do trabalho

Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pela

concessatildeo da bolsa de estudos

Expresso reconhecimento a todas as pessoas que de forma direta ou indiretamente

contribuiacuteram para a concretizaccedilatildeo deste estudo

iii

5

RESUMO

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS

DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Plantas invasoras causam problemas agrave exploraccedilatildeo da agricultura mundial e o controle quiacutemico dessas plantas tem gerado diversos problemas ambientais como contaminaccedilatildeo de recursos naturais comprometimento da qualidade de alimentos intoxicaccedilatildeo de agricultores resistecircncia de plantas invasoras entre outros desequiliacutebrios Uma das alternativas para reduzir o uso de agrotoacutexicos eacute a utilizaccedilatildeo do controle alternativo empregando fungos fitopatogecircnicos que produzem uma variedade de compostos secundaacuterios em meio de cultivo os quais exibem atividade fitotoacutexica Assim o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por fungos fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho (Fusarium graminearum e Diplodia maydis) Foram avaliados os efeitos in vitro dos filtrados fuacutengicos nas concentraccedilotildees de 0 1 5 10 15 e 20 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de buva (Conyza canadensis (L) Cronq) picatildeo-preto (Bidens pilosa L) e amendoim bravo (Euphorbia heterophylla L) Tambeacutem foi testado este efeito sobre as plantas cultivadas (soja e milho) O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com vinte e um tratamentos e quatro repeticcedilotildees Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia e de regressatildeo polinomial Os resultados indicaram que o filtrado de cultura de Fusarium solani apresentou efeitos negativos sobre buva picatildeo-preto e amendoim bravo sem afetar negativamente a soja Diplodia maydis proporcionou reduccedilatildeo de

crescimento de buva e amendoim bravo sem causar prejuiacutezo agrave cultura do milho Finalmente o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de placircntulas de amendoim bravo sem afetar negativamente o milho sugerindo que esses filtrados possam ser utilizados para controle das plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente

Palavras-chave controle alternativo aleloquiacutemicos filtrado fuacutengico

iv

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

3

BIOGRAFIA

ARIANE SPIASSI nascida em 28 de Janeiro de 1986 filha de Antenor Spiassi e Marinecircs Facchim Spiassi natural do municiacutepio de Maximiliano de Almeida ndash RS Concluiu o ensino fundamental e meacutedio em coleacutegio puacuteblico nessa mesma cidade Possui graduaccedilatildeo em Licenciatura em Ciecircncias Bioloacutegicas (2007) e Especializaccedilatildeo em Docecircncia no Ensino Superior (2008) pela Faculdade Assis Gurgacz ndash FAG (Cascavel PR) Trabalhou durante quatro anos (2005 a 2008) como auxiliar de laboratoacuterio de Microbiologia e Biologia Celular na FAG Atualmente eacute mestranda na Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Agriacutecola na aacuterea de concentraccedilatildeo de Sistemas Bioloacutegicos e Agroindustriais ndash SBA e bolsista CNPq do projeto ldquoBioprospecccedilatildeo da microbiota fuacutengica das florestas de Mata Atlacircntica da regiatildeo Oeste do Paranaacuterdquo sob coordenaccedilatildeo da Profa Dra Marina Kimiko Kadowaki da Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

ii

4

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus e agrave Nossa Senhora pela benccedilatildeo recebida acompanhada de Forccedila

Luz Coragem e Paz para enfrentar os obstaacuteculos da vida nos caminhos que escolhi

Aos meus pais Antenor e Marinecircs e ao meu irmatildeo Igor exemplos de coragem

trabalho e dignidade por acreditarem em mim e me apoiarem em mais esta conquista

Agrave toda minha famiacutelia especialmente agrave minha madrinha que mesmo estando longe

sempre me deu forccedilas para continuar

Agrave professora Luacutecia pela oportunidade paciecircncia e orientaccedilatildeo para a conclusatildeo deste

trabalho

Aos professores que contribuiacuteram com conhecimento humildade e respeito sem os

quais eu natildeo estaria onde estou hoje

Aos amigos dos laboratoacuterios da UNIOESTE e FAG Faacutebio Jaqueline Danielle

Rodrigo Francielle Gislaine Maacutercia M Maacutercia S Maacutercia K Michelle Adriana Joseli

Carolina Dieguinho Flaacutevio Clair Luan Diohatildene Rose Elaininha Elaine (chefa) Edi ndash

pela ajuda durante as anaacutelises e pela companhia apoio e amizade durante nossa

convivecircncia

Agrave UNIOESTE pelo programa de poacutes-graduaccedilatildeo por disponibilizar a estrutura os

laboratoacuterios e o material necessaacuterio para a conclusatildeo da pesquisa

Ao Gilmar e agrave Clair da UNIOESTE de Marechal pelo fornecimento das cepas dos

fungos usados neste estudo e o esclarecimento de duacutevidas

Ao professor Dr Luis Francisco Angeli Alves pelo empreacutestimo da casa de

vegetaccedilatildeo

Agrave FAG por disponibilizar o laboratoacuterio de Microbiologia para desenvolvimento de

parte do trabalho

Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pela

concessatildeo da bolsa de estudos

Expresso reconhecimento a todas as pessoas que de forma direta ou indiretamente

contribuiacuteram para a concretizaccedilatildeo deste estudo

iii

5

RESUMO

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS

DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Plantas invasoras causam problemas agrave exploraccedilatildeo da agricultura mundial e o controle quiacutemico dessas plantas tem gerado diversos problemas ambientais como contaminaccedilatildeo de recursos naturais comprometimento da qualidade de alimentos intoxicaccedilatildeo de agricultores resistecircncia de plantas invasoras entre outros desequiliacutebrios Uma das alternativas para reduzir o uso de agrotoacutexicos eacute a utilizaccedilatildeo do controle alternativo empregando fungos fitopatogecircnicos que produzem uma variedade de compostos secundaacuterios em meio de cultivo os quais exibem atividade fitotoacutexica Assim o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por fungos fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho (Fusarium graminearum e Diplodia maydis) Foram avaliados os efeitos in vitro dos filtrados fuacutengicos nas concentraccedilotildees de 0 1 5 10 15 e 20 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de buva (Conyza canadensis (L) Cronq) picatildeo-preto (Bidens pilosa L) e amendoim bravo (Euphorbia heterophylla L) Tambeacutem foi testado este efeito sobre as plantas cultivadas (soja e milho) O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com vinte e um tratamentos e quatro repeticcedilotildees Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia e de regressatildeo polinomial Os resultados indicaram que o filtrado de cultura de Fusarium solani apresentou efeitos negativos sobre buva picatildeo-preto e amendoim bravo sem afetar negativamente a soja Diplodia maydis proporcionou reduccedilatildeo de

crescimento de buva e amendoim bravo sem causar prejuiacutezo agrave cultura do milho Finalmente o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de placircntulas de amendoim bravo sem afetar negativamente o milho sugerindo que esses filtrados possam ser utilizados para controle das plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente

Palavras-chave controle alternativo aleloquiacutemicos filtrado fuacutengico

iv

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

4

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus e agrave Nossa Senhora pela benccedilatildeo recebida acompanhada de Forccedila

Luz Coragem e Paz para enfrentar os obstaacuteculos da vida nos caminhos que escolhi

Aos meus pais Antenor e Marinecircs e ao meu irmatildeo Igor exemplos de coragem

trabalho e dignidade por acreditarem em mim e me apoiarem em mais esta conquista

Agrave toda minha famiacutelia especialmente agrave minha madrinha que mesmo estando longe

sempre me deu forccedilas para continuar

Agrave professora Luacutecia pela oportunidade paciecircncia e orientaccedilatildeo para a conclusatildeo deste

trabalho

Aos professores que contribuiacuteram com conhecimento humildade e respeito sem os

quais eu natildeo estaria onde estou hoje

Aos amigos dos laboratoacuterios da UNIOESTE e FAG Faacutebio Jaqueline Danielle

Rodrigo Francielle Gislaine Maacutercia M Maacutercia S Maacutercia K Michelle Adriana Joseli

Carolina Dieguinho Flaacutevio Clair Luan Diohatildene Rose Elaininha Elaine (chefa) Edi ndash

pela ajuda durante as anaacutelises e pela companhia apoio e amizade durante nossa

convivecircncia

Agrave UNIOESTE pelo programa de poacutes-graduaccedilatildeo por disponibilizar a estrutura os

laboratoacuterios e o material necessaacuterio para a conclusatildeo da pesquisa

Ao Gilmar e agrave Clair da UNIOESTE de Marechal pelo fornecimento das cepas dos

fungos usados neste estudo e o esclarecimento de duacutevidas

Ao professor Dr Luis Francisco Angeli Alves pelo empreacutestimo da casa de

vegetaccedilatildeo

Agrave FAG por disponibilizar o laboratoacuterio de Microbiologia para desenvolvimento de

parte do trabalho

Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pela

concessatildeo da bolsa de estudos

Expresso reconhecimento a todas as pessoas que de forma direta ou indiretamente

contribuiacuteram para a concretizaccedilatildeo deste estudo

iii

5

RESUMO

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS

DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Plantas invasoras causam problemas agrave exploraccedilatildeo da agricultura mundial e o controle quiacutemico dessas plantas tem gerado diversos problemas ambientais como contaminaccedilatildeo de recursos naturais comprometimento da qualidade de alimentos intoxicaccedilatildeo de agricultores resistecircncia de plantas invasoras entre outros desequiliacutebrios Uma das alternativas para reduzir o uso de agrotoacutexicos eacute a utilizaccedilatildeo do controle alternativo empregando fungos fitopatogecircnicos que produzem uma variedade de compostos secundaacuterios em meio de cultivo os quais exibem atividade fitotoacutexica Assim o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por fungos fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho (Fusarium graminearum e Diplodia maydis) Foram avaliados os efeitos in vitro dos filtrados fuacutengicos nas concentraccedilotildees de 0 1 5 10 15 e 20 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de buva (Conyza canadensis (L) Cronq) picatildeo-preto (Bidens pilosa L) e amendoim bravo (Euphorbia heterophylla L) Tambeacutem foi testado este efeito sobre as plantas cultivadas (soja e milho) O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com vinte e um tratamentos e quatro repeticcedilotildees Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia e de regressatildeo polinomial Os resultados indicaram que o filtrado de cultura de Fusarium solani apresentou efeitos negativos sobre buva picatildeo-preto e amendoim bravo sem afetar negativamente a soja Diplodia maydis proporcionou reduccedilatildeo de

crescimento de buva e amendoim bravo sem causar prejuiacutezo agrave cultura do milho Finalmente o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de placircntulas de amendoim bravo sem afetar negativamente o milho sugerindo que esses filtrados possam ser utilizados para controle das plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente

Palavras-chave controle alternativo aleloquiacutemicos filtrado fuacutengico

iv

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

5

RESUMO

ALELOPATIA DE FUNGOS FITOPATOGEcircNICOS SOBRE PLANTAS INVASORAS

DAS CULTURAS DE SOJA E MILHO

Plantas invasoras causam problemas agrave exploraccedilatildeo da agricultura mundial e o controle quiacutemico dessas plantas tem gerado diversos problemas ambientais como contaminaccedilatildeo de recursos naturais comprometimento da qualidade de alimentos intoxicaccedilatildeo de agricultores resistecircncia de plantas invasoras entre outros desequiliacutebrios Uma das alternativas para reduzir o uso de agrotoacutexicos eacute a utilizaccedilatildeo do controle alternativo empregando fungos fitopatogecircnicos que produzem uma variedade de compostos secundaacuterios em meio de cultivo os quais exibem atividade fitotoacutexica Assim o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por fungos fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho (Fusarium graminearum e Diplodia maydis) Foram avaliados os efeitos in vitro dos filtrados fuacutengicos nas concentraccedilotildees de 0 1 5 10 15 e 20 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de buva (Conyza canadensis (L) Cronq) picatildeo-preto (Bidens pilosa L) e amendoim bravo (Euphorbia heterophylla L) Tambeacutem foi testado este efeito sobre as plantas cultivadas (soja e milho) O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com vinte e um tratamentos e quatro repeticcedilotildees Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia e de regressatildeo polinomial Os resultados indicaram que o filtrado de cultura de Fusarium solani apresentou efeitos negativos sobre buva picatildeo-preto e amendoim bravo sem afetar negativamente a soja Diplodia maydis proporcionou reduccedilatildeo de

crescimento de buva e amendoim bravo sem causar prejuiacutezo agrave cultura do milho Finalmente o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de placircntulas de amendoim bravo sem afetar negativamente o milho sugerindo que esses filtrados possam ser utilizados para controle das plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente

Palavras-chave controle alternativo aleloquiacutemicos filtrado fuacutengico

iv

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

6

ABSTRACT

ALLELOPATHY OF PLANT PATHOGENIC FUNGI ON INVASIVE PLANTS ON THE CULTURES OF SOYBEAN AND CORN

Invasive plants can cause problems to the exploitation of agriculture worldwide The

chemical control of these plants has generated several environmental problems such as the

contamination of natural resources the compromising the food quality the poisoning of

farmers the development of the weedrsquos resistance among others An alternative to reduce

the use of pesticides is the use of biological control using pathogenic fungi that produce a

variety of secondary compounds in culture medium which exhibit phytotoxicity Thus the

objective of this study was to determine the allelopathic activity of culture filtrate produced by

pathogenic fungi that attack soybeans (Fusarium solani Macrophomina phaseolina) and

maize (Fusarium graminearum Diplodia maydis) We evaluated the effects of fungal filtrates

at concentrations of 0 1 5 10 15 and 20 on seed germination and on the developments

of both radicle and hypocotyl of Canadian horseweed (Conyza canadensis (L) Cronq)

broomstick (Bidens pilosa L) and milkweed (Euphorbia heterophylla L) Such effects were

also tested on cultivated plants (soy and corn) The design of the experiment was completely

randomized with six treatments and four replications The results indicate that the filtered

solution of the Fusarium solani culture presented negative effect on Canadian horseweed

broomstick and milkweed without affecting the soy negatively Diplodia maydis provided the

reduction of growth of horseweed and milkweed without causing damage to the maize

culture Finally the one of Macrophomina phaseolina decreased the growth of milkweed

plantules without affecting the maize negatively suggesting that these filtered solutions can

be used for controlling invasive plants being an ecologically friendly alternative for the

reduction of the herbicides use and for protecting the environment

Key-words alternative control allelochemicals fungal filtrate

v

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

7

SUMAacuteRIO

RESUMO iv

ABSTRACT v

LISTA DE TABELAS viii

LISTA DE FIGURAS x

1 INTRODUCcedilAtildeO 12

2 OBJETIVOS 13

21 Objetivo geral 13

22 Objetivos especiacuteficos 13

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 14

31 As plantas invasoras e sua importacircncia 14

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente 14

33 Controle alternativo 15

34 A alelopatia 16

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos 17

3411 Fusarium solani 18

3412 Macrophomina phaseolina 19

3413 Fusarium graminearum 19

3414 Diplodia maydis 19

35 Resintecircncia de plantas invasoras a herbicidas 20

351 Amendoim bravo ou leiteiro 20

352 Buva 21

353 Picatildeo-preto 22

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 23

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho 23

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre invasoras de soja e milho em laboratoacuterio 23

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto 24

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG) 24

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG) 25

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras 25

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas em laboratoacuterio 26

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho 26

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho 26

vi

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

8

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo 27

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo 27

442 Paracircmetros avaliados em soja 28

443 Paracircmetros avaliados em milho 28

45 Delineamento experimental 28

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 30

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido

BD (batata dextrose) 30

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla

(amendoim-bravo) 30

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva) 35

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto) 39

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja 43

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio

liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho 47

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa

de vegetaccedilatildeo 50

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em

casa de vegetaccedilatildeo 53

6 CONCLUSOtildeES 54

7 REFEREcircNCIAS 56

vii

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

9

LISTA DE TABELAS Tabela 1 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

201127

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos bioensaios 30

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo 31

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 32

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 33

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 34

Tabela 7 Variaacuteveis avaliadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 35

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com buva 36

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 37

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura em diferentes concentraccedilotildees CascavelPR 2011 38

Tabela 11 Variaacuteveis avaliadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 38

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto 39

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamentocom filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 40

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 41

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 42

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 43

viii

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

10

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com soja 44

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de soja tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 44

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 46

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 47

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis avaliadas nos ensaios com milho 47

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 48

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura em diferentes concentraccedilotildees sobre a massa

fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011 48

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees (0 1 5 10 15 e 20) dos filtrados de cultura 50 Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 500

Tabela 26 Meacutedias de teor de clorofila total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 51 Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 52 Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees 53 Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011 533 Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011 54

ix

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

11

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Euphorbia heterophylla 21

Figura 2 Conyza canadensis 21 Figura 3 Bidens pilosa 22

x

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

12

1 INTRODUCcedilAtildeO

As culturas de soja (Glicine max) e milho (Zea mays) satildeo exploradas em todas as

regiotildees do Brasil e amplamente difundidas no estado do Paranaacute Essas culturas podem ser

afetadas pelo aparecimento de plantas invasoras como a buva (Conyza bonariensis) a

brachiaria (Brachiaria plantaginea (Link) Hitchc) o amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla

L) e o picatildeo preto (Bidens pilosa L) entre as vaacuterias que causam prejuiacutezos na produtividade

e durante todo o desenvolvimento da cultura

Tradicionalmente o controle dessas plantas invasoras tem sido feito com o emprego

de herbicidas os quais em curto prazo apresentam vantagens mas a longo prazo podem

causar problemas devido aos resiacuteduos acumulados no solo poluindo o ambiente Em

funccedilatildeo disso eacute necessaacuterio o desenvolvimento de meacutetodos alternativos de controle os quais

aleacutem de diminuir os impactos negativos ao ambiente satildeo mais baratos que o controle

quiacutemico

Um dado importante em relaccedilatildeo ao uso de agrotoacutexicos jaacute que o Paranaacute possui 80

de seu territoacuterio ocupado pela produccedilatildeo agropecuaacuteria eacute que utiliza 12 kg de agrotoacutexico por

hectare ao ano enquanto a meacutedia brasileira de consumo eacute um terccedilo menor de 4 kg ha-1

ano-1 Os agrotoacutexicos utilizados no estado satildeo considerados muito perigosos numa

classificaccedilatildeo que vai de pouco a altamente perigoso Destes agrotoacutexicos 60 satildeo

herbicidas As regiotildees que mais consomem satildeo as de Cascavel (23 kg ha-1 ano-1) Londrina

(21 kg ha-1 ano-1) e Ponta Grossa (20 kg ha-1 ano-1) Nestas regiotildees haacute tambeacutem o uso de

agrotoacutexico com o maacuteximo niacutevel de periculosidade (IPARDES online 2010)

Os fungos fitopatogecircnicos tambeacutem chamados de aleloquiacutemicos por produzirem

toxinas podem ser utilizados como controle alternativo de plantas invasoras no qual se

inclui o controle bioloacutegico que eacute um dos enfoques da agricultura sustentaacutevel que trabalha

sem o uso de agrotoacutexicos

A atividade dos aleloquiacutemicos tem sido usada como alternativa ao uso de herbicidas

inseticidas e nematicidas (defensivos agriacutecolas) A maioria destas substacircncias proveacutem do

metabolismo secundaacuterio porque na evoluccedilatildeo das plantas representaram alguma vantagem

contra a accedilatildeo de microrganismos viacuterus insetos e outros patoacutegenos ou predadores seja

inibindo a accedilatildeo destes ou estimulando o crescimento ou o desenvolvimento das plantas

(WALLER 1999) Entre os fungos produtores de toxinas estatildeo os fitopatogecircnicos que

atacam a cultura da soja (Fusarium solani Sclerotium rolfsii) e do milho (Penicillium

oxalicum Exserohilum turcicum)

Neste contexto esta pesquisa visou buscar o controle alternativo de plantas

invasoras os quais satildeo menos agressivos ao ambiente que os tradicionais meacutetodos de

controle quiacutemico feito por herbicidas

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

13

2 OBJETIVOS

21 Objetivo geral

Avaliar a atividade alelopaacutetica dos filtrados de cultura produzidos por fungos

fitopatogecircnicos que atacam a soja (Fusarium solani e Macrophomina phaseolina) e o milho

(Fusarium graminearum e Diplodia maydis) sobre plantas invasoras comuns a essas

culturas

22 Objetivos especiacuteficos

a) Identificar a atividade alelopaacutetica in vitro de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos contra as invasoras buva (Conyza canadensis (L) amendoim-bravo

(Euphorbia heterophylla L) e picatildeo preto (Bidens pilosa L) por meio de ensaios de

germinaccedilatildeo de sementes e de crescimento inicial de placircntulas

b) Verificar se esses filtrados de cultura interferem no desenvolvimento inicial das

plantas cultivadas soja e milho in vitro e in vivo

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

14

3 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

31 As plantas invasoras e sua importacircncia

Em uma lavoura podem aparecer inuacutemeras plantas estranhas agrave espeacutecie cultivada as

quais satildeo chamadas de plantas daninhas ervas daninhas plantas invasoras ou mato As

plantas invasoras satildeo vegetais que crescem onde natildeo satildeo desejados ou seja um grupo de

plantas que cresce espontaneamente em todos os solos agriacutecolas e em outras aacutereas de

interesse do homem Essas plantas desenvolveram mecanismos para sua sobrevivecircncia

como grande produccedilatildeo facilidade de dispersatildeo e grande longevidade de sementes aleacutem

de grande agressividade e capacidade competitiva Um dos principais problemas na

agricultura tem sido o controle dessas plantas que prejudicam a cultura pela competiccedilatildeo por

luz aacutegua espaccedilo e nutrientes (LORENZI 2006) e tambeacutem dificultam o uso e o manejo do

solo pelos agricultores incentivado o uso de herbicidas causando desequiliacutebrios no

ecossistema (FONTANEacuteTTI et al 2004)

Pode-se dizer que quanto maior for o periacuteodo de convivecircncia de plantas cultivadas

com invasoras maior seraacute o grau de interferecircncia o qual dependeraacute de fatores como

comunidade infestante composiccedilatildeo especiacutefica densidade e distribuiccedilatildeo a proacutepria cultura

espeacutecie ou variedade espaccedilamento e densidade de plantio e eacutepoca e extensatildeo da

convivecircncia entre ambas que tambeacutem pode ser alterado pelas condiccedilotildees do solo do clima

e do manejo (SILVA et al 2007)

A grande demanda de alimentos e energia para uma populaccedilatildeo crescente de

consumidores exige aumento de aacuterea cultivada ou de produtividade Nos dois casos o

manejo inadequado de plantas invasoras eacute um entrave Os produtores optam por

tecnologias que reduzam os custos de produccedilatildeo como o controle com herbicidas jaacute que eacute

uma praacutetica eficiente Poreacutem toda teacutecnica de manejo de plantas invasoras somente teraacute

sucesso se forem considerados aspectos econocircmicos e a sustentabilidade do sistema

agriacutecola (SILVA SILVA 2007)

32 O controle quiacutemico e a degradaccedilatildeo do ambiente

O controle de plantas invasoras eacute importante para a obtenccedilatildeo de altos rendimentos

em qualquer exploraccedilatildeo agriacutecola e eacute tatildeo antiga quanto a proacutepria agricultura Na busca de

maior produtividade e de conservaccedilatildeo do solo aleacutem de procedimentos adotados no manejo

das culturas tem-se o controle das plantas invasoras que estatildeo continuamente disputando

por aacutegua luz e nutrientes reduzindo a produtividade e tornando maior o custo de produccedilatildeo

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

15

por interferirem tambeacutem nas operaccedilotildees de colheita e misturarem suas sementes com as da

cultura reduzindo a qualidade (COSTA 1996)

A inserccedilatildeo de herbicidas no mercado agriacutecola aumentou gradativamente e o uso

indiscriminado contamina o ambiente com seacuterias consequecircncias aos seres vivos e tambeacutem

propiciou o desenvolvimento de muitos relatos de resistecircncia o que eacute consequecircncia na

maioria das vezes de mutaccedilotildees ou da preacute-existecircncia de genes que conferem resistecircncia agrave

populaccedilatildeo (RIZZARDI et al 2002 AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A aplicaccedilatildeo errada de produtos quiacutemicos eacute sinocircnimo de prejuiacutezo pois aleacutem de gerar

desperdiacutecio aumenta consideravelmente os riscos de contaminaccedilatildeo das pessoas e do

ambiente De forma geral ateacute 70 dos produtos pulverizados nas lavouras podem ser

perdidos por escorrimento deriva descontrolada e maacute aplicaccedilatildeo Para melhorar este

desempenho satildeo essenciais a utilizaccedilatildeo correta e segura dos produtos fitossanitaacuterios e a

capacitaccedilatildeo da matildeo-de-obra para o uso eficaz dos equipamentos de aplicaccedilatildeo (ANDEF

2004)

Aproximadamente meio milhatildeo de toneladas de pesticidas e herbicidas satildeo

produzidas anualmente para aplicaccedilatildeo em culturas apenas nos Estados Unidos Desse

total estimou-se que apenas cerca de 1 de fato alcanccedila o organismo alvo A maior parte

pode chegar ao solo agrave aacutegua ou a organismos que natildeo se deseja atingir no ecossistema

Assim buscam-se meacutetodos menos danosos para melhorar os rendimentos agriacutecolas

(RAVEN et al 2001)

33 Controle alternativo

Meacutetodos alternativos de manejo de plantas invasoras satildeo geralmente utilizados em

conjunto com os herbicidas sinteacuteticos para que de forma sustentaacutevel estas plantas sejam

controladas na agricultura Dentre os meacutetodos alternativos destacam-se meacutetodos

supressivos da infestaccedilatildeo tais como culturas que apresentam alta habilidade competitiva

rotaccedilatildeo de culturas culturas intercalares culturas de cobertura cobertura vegetal morta

entre outras (SOUZA FILHO 2008)

Oliveira et al (2006) relataram que o controle bioloacutegico pode ser de trecircs tipos

claacutessico (introduccedilatildeo de organismos para controle de uma praga numa dada regiatildeo) natural

(favorecer as populaccedilotildees de inimigos naturais por exemplo natildeo usando produtos quiacutemicos

que os afetem) e aplicado (multiplicaccedilatildeo em laboratoacuterio dos inimigos naturais e aplicaccedilatildeo

em campo)

A praacutetica de controle alternativo natildeo faz uso de defensivos agriacutecolas embora

possam estar associadas de maneira integrada aos meacutetodos tradicionais de controle

quiacutemico eou praacuteticas culturais a fim de aumentar sua eficiecircncia (MORAES 1992)

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

16

34 A alelopatia

O termo alelopatia eacute usado para indicar qualquer efeito causado por um ser vivo de

forma beneacutefica eou prejudicial sobre outro por meio da liberaccedilatildeo de substacircncias quiacutemicas

denominadas aleloquiacutemicos Existem mais de 300 compostos secundaacuterios vegetais e

microbioloacutegicos pertencentes a muitas classes de produtos quiacutemicos como aminoaacutecidos e

polipeptiacutedeos (marasmina e victorina) purinas e nucleosiacutedeos (cordicepina teofilina e

paraxantina) fenoacuteis simples aacutecido benzoacuteico e derivados (aacutecido gaacutelico vaniacutelico e

hidroquinona) entre outros (RICE 1984)

Os aleloquiacutemicos podem interferir no metabolismo de plantas de vaacuterias maneiras

como reguladores de crescimento vegetal inibidores de fotossiacutentese desreguladores de

respiraccedilatildeo e de transporte na membrana celular e inibidores de atividade enzimaacutetica e

proteacuteica (EINHELLIG 1986) A mucuna-preta por exemplo exerce forte e persistente accedilatildeo

inibidora sobre a tiririca (Cyperus rotundus) e o picatildeo-preto (Bidens pilosa L) (LORENZI

1984 CARVALHO et al 2002)

Essa capacidade das plantas de produzirem substacircncias alelopaacuteticas eacute diferente

entre as espeacutecies da mesma forma que a sua suscetibilidade aos aleloquiacutemicos liberados

por outras plantas Em funccedilatildeo disso algumas espeacutecies satildeo beneficiadas e outras satildeo

prejudicadas o que influencia a composiccedilatildeo floriacutestica de determinado meio A alelopatia

pode ocorrer entre espeacutecies de plantas cultivadas entre plantas silvestres ou ambas

(FERREIRA SCHWARZ STRECK 2000)

Haacute aumento no interesse na exploraccedilatildeo da alelopatia como alternativa estrateacutegica

principalmente para o controle de plantas invasoras mas tambeacutem de insetos e de doenccedilas

Plantas invasoras podem ser controladas pelo crescimento de plantas capazes de exudar

aleloquiacutemicos ou pela incorporaccedilatildeo de resiacuteduos de plantas com alto teor de aleloquiacutemicos

no solo (FERNANDES et al 2003)

De acordo com Weih et al (2008) ressalta-se a possibilidade de utilizar a atividade

alelopaacutetica como alternativa ao uso de controle quiacutemico para supressatildeo de plantas

invasoras no agroecossistema

Em experimento realizado por Tokura e Noacutebrega (2006) avaliando o potencial

alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal de trigo aveia preta milheto nabo forrageiro e

colza sobre o desenvolvimento de plantas infestantes observou-se que as coberturas que

apresentaram melhor controle do total de plantas invasoras foram aveia preta colza nabo

forrageiro e milheto

As culturas vegetais tambeacutem podem apresentar compostos aleloquiacutemicos capazes

de interferir nas culturas subsequentes comprometendo a produccedilatildeo Assim Noacutebrega et al

(2009) analisaram o potencial alelopaacutetico de aveia-preta (Avena strigosa) (AP) nabo

forrageiro (Raphanus sativus L) (NF) ervilhaca (Vicia sativa L) (ER) azeveacutem (Lolium

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

17

multiflorum Lam) (AZ) e consoacutercio (CO - AP+ER+NF) na germinaccedilatildeo de sementes e no

crescimento de placircntulas de soja e observaram reduccedilatildeo na emergecircncia de placircntulas de soja

sob CO AZ e AP O iacutendice de velocidade de emergecircncia a porcentagem de emergecircncia em

areia e a massa fresca de hipocoacutetilo foram afetados negativamente pelas plantas de

cobertura

As substacircncias alelopaacuteticas podem agir indireta ou diretamente Quando

indiretamente as alteraccedilotildees ocorrem nas propriedades do solo nas suas condiccedilotildees

nutricionais na variaccedilatildeo de populaccedilotildees e na atividade dos microrganismos Quando

diretamente agem sobre as membranas do vegetal receptor permitindo tanto a ligaccedilatildeo

quanto a penetraccedilatildeo dos compostos nas ceacutelulas e assim interferindo no seu metabolismo

Tais accedilotildees podem afetar estruturas citoloacutegicas e ultra-estruturais hormocircnios membrana e

sua permeabilidade absorccedilatildeo de minerais movimento dos estocircmatos siacutentese de pigmentos

e fotossiacutentese respiraccedilatildeo siacutentese de proteiacutenas atividade enzimaacutetica relaccedilotildees hiacutedricas e

conduccedilatildeo material geneacutetico (FERREIRA AQUILA 2000)

341 Alelopatia e os fungos fitopatogecircnicos

Aparentemente todos os fungos fitopatogecircnicos produzem enzimas hormocircnios e

toxinas As enzimas promovem a desintegraccedilatildeo dos componentes estruturais das ceacutelulas do

hospedeiro degradam substacircncias presentes nas ceacutelulas ou afetam o protoplasto As

toxinas agem diretamente no protoplasto e interferem na permeabilidade da membrana Os

hormocircnios alteram a divisatildeo e o crescimento celulares (BERGAMIN FILHO et al1995)

O uso de agroquiacutemicos causa danos ambientais atuando no balanccedilo de

microrganismos do solo deficiecircncia de nutrientes e mudanccedilas nas propriedades fiacutesico-

quiacutemicas do solo resultando na diminuiccedilatildeo da produtividade da colheita A incorporaccedilatildeo de

substacircncias com atividade alelopaacutetica na agricultura pode reduzir o uso de herbicidas

sinteacuteticos e fungicidas sem causar danos ao ambiente (CHOU 1999)

Assim os aleloquiacutemicos isolados de plantas ou microrganismos satildeo fonte potencial

para modelos de novos tipos estruturais de herbicidas Esses herbicidas naturais podem ser

mais especiacuteficos com novos modos de accedilatildeo e de maior potencial que aqueles jaacute usados na

agricultura (MIZUTANI 1999 DUKE et al 2000)

Santos et al (2008) afirmaram que muitas substacircncias quiacutemicas disponiacuteveis na

natureza produzidas por plantas ou por microrganismos podem oferecer novas e

excelentes oportunidades para diversificar o controle de pragas na agricultura e na praacutetica

agriacutecola e nesse sentido os fungos podem contribuir de forma positiva

Muitos patoacutegenos produzem substacircncias toacutexicas as quais satildeo responsaacuteveis por

muitos dos efeitos nocivos diretos nas espeacutecies cultivadas Essas toxinas podem agir

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

18

sinergicamente com outras atividades do patoacutegeno desde que invadam o tecido das

plantas Suas utilizaccedilotildees diretas como bio-herbicidas ou como estrutura baacutesica para o

desenvolvimento de novas classes de herbicidas vecircm recebendo cada vez mais atenccedilatildeo

natildeo soacute por parte da comunidade cientiacutefica mas tambeacutem pelas empresas que se dedicam agrave

produccedilatildeo de defensivos agriacutecolas (DUKE e ABBAS 1995 HOAGLAND 1990)

Para Bergamin Filho et al (1995) toxinas satildeo produtos de patoacutegenos microbianos

produtos esses que causam danos aos tecidos vegetais e que estatildeo envolvidos no

desenvolvimento da doenccedila Tambeacutem denominadas de fitotoxinas satildeo geralmente de baixo

peso molecular (lt1000 daltons) moacuteveis e natildeo apresentam caracteriacutesticas enzimaacuteticas

hormonais ou de aacutecidos nucleacuteicos

Espeacutecies patogecircnicas produtoras de toxinas ocorrem em todos os principais grupos

taxonocircmicos de fungos e as mais estudadas satildeo as dos gecircneros Aspergillus Penicillium

Fusarium Claviceps Alternaria Strachybotry Myrothcium Phoma e Diplodia (SAXENA

PANDEY 2001)

O efeito de toxinas presentes no filtrado de cultura de F solani foi avaliado nas

concentraccedilotildees de 1 e 4 sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o desenvolvimento da

radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto (Senna obstusifolia L)

e os resultados mostraram atividade alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na

concentraccedilatildeo de 4 (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

Trabalhos foram desenvolvidos visando identificar e caracterizar a atividade bioloacutegica

de toxinas produzidas por fungos (STROBEL et al 1991 GERWICK et al 1997 METHA e

BROGNIN 2000 DUKE et al 2002) Dentre as caracteriacutesticas importantes dessas toxinas

podem-se destacar a alta atividade especiacutefica e a alta seletividade aleacutem de serem ainda

biodegradaacuteveis (CUTLER 1988) Tem merecido menccedilatildeo tambeacutem o fato de essas toxinas

possibilitarem a exploraccedilatildeo de siacutetios moleculares de accedilatildeo que ainda natildeo foram cobertos

pelos produtos sinteacuteticos (AMAGASA et al 1994) o que permite o controle de plantas

resistentes aos produtos de uso corrente (SOUZA FILHO DUARTE 2007)

3411 Fusarium solani

Este patoacutegeno tem sido amplamente relatado no Brasil como agente causal de

doenccedilas radiculares no feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) e na soja (Glycine max L)

Na soja causa a podridatildeo vermelha da raiz ou siacutendrome da morte suacutebita Os sintomas satildeo o

apodrecimento das raiacutezes secundaacuterias da planta em solo uacutemido necrose da base da planta

e clorose interneval das folhas A doenccedila pode exterminar ateacute 100 da plantaccedilatildeo (KIMATI

et al 2005)

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

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4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

19

Segundo Henning et al (2010) quando as condiccedilotildees edafoclimaacuteticas durante a

semeadura satildeo desfavoraacuteveis agrave germinaccedilatildeo e agrave raacutepida emergecircncia da soja a semente fica

exposta por mais tempo a fungos principalmente F solani o qual pode causar a

deterioraccedilatildeo da semente no solo ou a morte de placircntulas

3412 Macrophomina phaseolina

Eacute uma espeacutecie capaz de infectar inuacutemeras espeacutecies botacircnicas Na soja causa a

podridatildeo de raiacutezes e a infecccedilatildeo pode ocorrer desde o iniacutecio da germinaccedilatildeo (KIMATI et al

2005) Como resultado de sua accedilatildeo parasitaacuteria o patoacutegeno pode infectar tambeacutem a

semente cuja associaccedilatildeo pode resultar em baixo poder germinativo (BARROS 1981)

O fungo (Macrophomina phaseolina) eacute um habitante natural dos solos e soacute causa

problemas com apodrecimento de raiacutezes e morte de plantas quando ocorrem veranicos e

especialmente em solos compactados ou rasos que dificultam a penetraccedilatildeo das raiacutezes Em

solos arenosos muitas vezes tambeacutem compactados o problema tambeacutem se acentua devido

agrave sua baixa capacidade de retenccedilatildeo de aacutegua Durante o enchimento da vagem as plantas

mortas prematuramente produzem gratildeos pequenos sementes verdes ou deterioradas que

reduzem a qualidade do lote de semente (HENNING 2009)

3413 Fusarium graminearum

Este fungo infecta a flor colonizando todos os componentes da espiga o sistema

radicular e as porccedilotildees basais da planta causando a morte de placircntulas cuja doenccedila eacute

conhecida como podridatildeo comum de raiacutezes (SUTTON 1982)

A fonte de inoacuteculo mais importante para infecccedilatildeo das espigas satildeo os periteacutecios

(envelope de frutificaccedilatildeo de alguns fungos) formados sobre restos culturais na superfiacutecie do

solo que favorece a sobrevivecircncia do patoacutegeno a liberaccedilatildeo do inoacuteculo e a inoculaccedilatildeo (REIS

1988)

3414 Diplodia maydis

Causa a podridatildeo do colmo em milho frequentemente antes do florescimento e sob

deficiecircncia hiacutedrica seguida de periacuteodo chuvoso O patoacutegeno ataca os internoacutedios inferiores

da planta mas causa tambeacutem a podridatildeo da espiga (KIMATI et al 2005)

Em meio de cultivo as colocircnias de D maydis adquirem coloraccedilatildeo pardo-escura a

escura com formaccedilatildeo de picniacutedios na superfiacutecie da massa miceliana (MARIO REIS 2001)

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

20

Esse fungo produz toxinas as quais podem causar problemas agrave sauacutede humana ou animal

por meio do consumo de gratildeos ou de alimentos derivados de gratildeos contaminados (DE

LEON PERZ 1970 PROZESKY et al 1994)

35 Resistecircncia de plantas invasoras a herbicidas

As plantas daninhas satildeo organismos bioloacutegicos evoluindo em resposta agraves mudanccedilas

ambientais (distuacuterbio e estresse) que resulta na mudanccedila de espeacutecies e na resistecircncia de

plantas daninhas a herbicidas Neste caso o uso intensivo de herbicidas na agricultura eacute

uma das maiores causas da pressatildeo de seleccedilatildeo proporcionando os fenocircmenos de

mudanccedila de espeacutecies na aacuterea e resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas devido agrave

eficaacutecia e ao controle seletivo recomendado (CHRISTOFFOLETI et al 2008)

Resistecircncia eacute a capacidade adquirida de uma planta em sobreviver agrave dose de

registro (descrita na bula) do herbicida que sob condiccedilotildees normais controlam os demais

integrantes da populaccedilatildeo (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

A seleccedilatildeo natural eacute amplamente aceita como explicaccedilatildeo do desenvolvimento da

resistecircncia Sendo assim bioacutetipos resistentes a herbicidas sempre estatildeo presentes em

baixa frequecircncia numa espeacutecie de planta daninha Quando o herbicida eacute aplicado o mesmo

atua como agente de pressatildeo de seleccedilatildeo as plantas suscetiacuteveis satildeo mortas e as plantas

resistentes sobrevivem e se reproduzem sem competiccedilatildeo das plantas suscetiacuteveis

(CHRISTOFFOLETI et al 2008)

A resistecircncia de plantas invasoras aos herbicidas disponiacuteveis no mercado jaacute foi

relatada para as espeacutecies picatildeo-preto (Bidens pilosa) capim-colchatildeo (Digitaria ciliares)

capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla)

(VIDAL 1997 CHRISTOFFOLETI 2001 LOPES OVEJERO et al 2005 VIDAL et al

2005) e buva (Conyza bonariensis) (VARGAS et al 2007 AGOSTINETTO VARGAS

2009)

351 Amendoim bravo ou leiteiro

A Euphorbia heterophylla conhecida popularmente como amendoim-bravo ou leiteiro

(Figura 01) eacute uma planta invasora amplamente distribuiacuteda no Brasil principalmente nas

regiotildees em que se cultiva a soja (OLIVEIRA SAacute 1998)

Os trabalhos realizados por Agostinetto e Vargas (2009) com essa espeacutecie indicaram

resistecircncia aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS) sendo que os

bioacutetipos resistentes sobreviveram a tratamentos com doses superiores a dez vezes a dose

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

21

recomendada em campo e que a taxa de crescimento e a produccedilatildeo de biomassa satildeo

semelhantes entre os bioacutetipos resistentes e sensiacuteveis

Figura 01 Euphorbia heterophylla

352 Buva

A buva (Conyza sp) (Figura 02) eacute uma espeacutecie invasora comum nos estados da

regiatildeo Sul do Brasil e tradicionalmente controlada com uso de glyphosate mas tecircm

apresentado poucos sintomas de toxicidade em resposta a esse tratamento sugerindo que

estas plantas satildeo resistentes ao herbicida (VARGAS et al 2007)

Os bioacutetipos resistentes apresentam menor eficiecircncia em translocar o glyphosate para

as raiacutezes e distribuir o mesmo pela planta ficando concentrado no ponto de aplicaccedilatildeo

Estudos evidenciam que a resistecircncia provavelmente deve ser uma alteraccedilatildeo nos tecidos

que resulta em impedimento do carregamento do floema e a consequente reduccedilatildeo da

distribuiccedilatildeo do herbicida na planta (AGOSTINETTO VARGAS 2009)

Eacute colonizadora agressiva de solos perturbados particularmente em periacuteodos de entre-

safra A germinaccedilatildeo das sementes ocorre em todo o ano mais intensamente na primavera

Produz compostos de poliacetileno liberados especialmente na decomposiccedilatildeo de restos das

plantas os quais possuem forte efeito inibidor de germinaccedilatildeo conferindo agrave planta efeito

alelopaacutetico (KISSMANN GROTH 1999)

Figura 02 Conyza canadensis

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

22

353 Picatildeo-preto

Segundo Lorenzi (2000) a espeacutecie Bidens pilosa L (Figura 03) eacute uma planta

infestante encontrada em lavouras anuais e perenes apresenta ciclo curto sendo capaz de

produzir ateacute trecircs geraccedilotildees por ano formando densas infestaccedilotildees reduzindo a produccedilatildeo de

gratildeos A grande adaptaccedilatildeo desta espeacutecie a ambientes agriacutecolas deve-se em parte agrave sua

grande produccedilatildeo de sementes aliada a mecanismos de dormecircncia (CARMONA VILLAS

BOcircAS 2001)

O primeiro caso de resistecircncia comprovada no Brasil foi o de picatildeo-preto relatado

por Ponchio em 1993 Essa resistecircncia eacute decorrente da alteraccedilatildeo na enzima no siacutetio de

ligaccedilatildeo do herbicida o que o torna insensiacutevel agrave accedilatildeo do mesmo (MONQUERO et al 2000)

Figura 03 Bidens pilosa

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

23

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Obtenccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos patogecircnicos de soja e milho

Os fungos isolados (Fusarium solani Fusarium graminearum Macrophomina

phaseolina e Diplodia maydis) foram fornecidos pelo Laboratoacuterio de Fitopatologia do campus

de Marechal Cacircndido Rondon do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Agronomia da

Universidade Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE

As cepas foram cultivadas em placas de petri com meio de cultura batata dextrose

agar (BDA) (batata 200 g dextrose 20 g Agar 15 g aacutegua destilada 10 L) por sete dias

em temperatura de 25 C Apoacutes esse periacuteodo trecircs discos de 10 mm de diacircmetro foram

retirados da periferia das colocircnias e transferidos assepticamente para erlenmeyers com

capacidade para 250 mL contendo 100 mL do meio liacutequido caldo batata dextrose (BD)

(batata 200 g dextrose 10 g aacutegua destilada 10 L) previamente esterilizados em autoclave

a 120 C e 1 atm durante 20 min conforme metodologia descrita por Souza Filho e Duarte

(2007)

Com objetivo de estimular a produccedilatildeo de toxinas os frascos foram mantidos em

agitaccedilatildeo (150 rpm) sob temperatura ( 26 ordmC) luz ambiente (laboratoacuterio) durante 20 dias de

incubaccedilatildeo As culturas foram filtradas em dupla gaze para eliminaccedilatildeo de miceacutelio e em

seguida esterilizadas em membrana Millipore (045 microm) usando-se sistema filtrante sob

vaacutecuo para eliminaccedilatildeo de esporos (filtrado de cultura bruto) Esta metodologia foi adaptada

de Duarte e Archer (2003) e Viecelli et al (2009)

Realizou-se teste de esterilidade de cada filtrado pipetando-se 05 ml do filtrado

sobre placas contendo meio BDA esteacuteril e incubando-se a 25 C durante cinco dias Natildeo foi

observado crescimento de colocircnias fuacutengicas indicando que os filtrados estavam livres de

contaminaccedilatildeo

Ao final desse processo tambeacutem se verificou o pH dos filtrados de cultura e de aacutegua

utilizando-se um pHmetro digital para observar se os mesmos interferiram ou natildeo sobre a

germinaccedilatildeo

42 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre plantas invasoras das culturas de soja e milho em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar a interferecircncia de filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos sobre a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento inicial de placircntulas de amendoim

bravo buva e picatildeo-preto realizou-se a atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

24

As sementes foram coletadas manualmente em aacuterea agriacutecola de Boa Vista da

Aparecida no municiacutepio de Cascavel ndash PR entre os meses de janeiro e marccedilo de 2010

Os testes foram realizados diluindo-se o filtrado bruto para concentraccedilotildees de 1 5

10 15 e 20 tendo como diluente a aacutegua destilada Foi utilizada uma testemunha contendo

apenas aacutegua destilada

421 Teste de germinaccedilatildeo de sementes de amendoim bravo buva e picatildeo preto

O teste de germinaccedilatildeo foi realizado com quatro sub-amostras de 20 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo em caixas gerbox umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia a massa do

papel em relaccedilatildeo ao volume de aacutegua (testemunha) ou dos filtrados de cultura de fungos

fitopatogecircnicos A soluccedilatildeo foi adicionada apenas uma vez no iniacutecio dos bioensaios sendo

a partir de entatildeo adicionada apenas aacutegua destilada sempre que se fez necessaacuterio Os

gerbox foram forrados com duas folhas de papel distribuiacuteram-se as sementes e em

seguida foram colocados em estufa tipo BOD

As sementes de amendoim bravo permaneceram em temperatura de 27 C sob

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas diariamente ateacute o 11o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de BRASIL 2009)

Para a buva utilizou-se tambeacutem a temperatura de 27 C sob fotoperiacuteodo de 12 h e

as contagens foram realizadas do 1o ao 30o dia de germinaccedilatildeo (adaptado de LAZAROTO et

al 2008)

As sementes de picatildeo-preto permaneceram em temperatura de 27 C com

fotoperiacuteodo de 12 h As contagens foram realizadas do 1o ao 15o dia de germinaccedilatildeo

(adaptado de CARMONA VILLAS BOcircAS 2001)

4211 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVG)

A contagem de sementes germinadas foi realizada a partir do primeiro dia apoacutes a

primeira semente germinada ateacute a estabilizaccedilatildeo do nuacutemero de placircntulas seguindo

metodologia descrita em Nakagawa (1999)

Foram consideradas germinadas as sementes que apresentaram protrusatildeo da

radiacutecula (BEWLEY BLACK 1994)

O IVG foi calculado conforme Maguire (1962)

IVG = (E1N1) + (E2N2)+ + (ENNN) (Equaccedilatildeo 01)

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

25

em que

IVG - iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de sementes germinadas na primeira contagem na segunda

contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de sementes germinadas por dia

4212 Velocidade de germinaccedilatildeo (VG)

Os dados utilizados para avaliar a VG foram os mesmos utilizados para a avaliaccedilatildeo

do IVG A VG foi calculada segundo Edmond e Drapala (1958) os quais consideram que o

tratamento com menor meacutedia levou menos dias em relaccedilatildeo agrave germinaccedilatildeo das sementes

portanto foi aquele que apresentou a maior velocidade de germinaccedilatildeo

VG = [(N1 E1) + (N2 E2) +(NnEn)](E1+E2+En) (Equaccedilatildeo 02)

em que

VG - velocidade de germinaccedilatildeo

E1 E2 EN - nuacutemero de placircntulas normais computadas na primeira contagem na

segunda contagem () ateacute a uacuteltima contagem

N1 N2 NN - nuacutemero de dias da semeadura ateacute a primeira ateacute a segunda () ateacute a

uacuteltima contagem

Os resultados foram expressos em nuacutemero de dias que as sementes levaram para germinar

422 Avaliaccedilatildeo do crescimento das placircntulas invasoras

Apoacutes o periacuteodo de crescimento conforme descrito anteriormente determinou-se o

comprimento de raiz primaacuteria (cm) comprimento de hipocoacutetilo (cm) de 10 placircntulas normais

de cada repeticcedilatildeo As mediccedilotildees foram realizadas com reacutegua graduada (precisatildeo de 10

mm) Para as placircntulas de buva determinou-se comprimento de placircntula inteira (mm) devido

ao seu pequeno tamanho Para isso foi utilizado paquiacutemetro digital marca Zaas Precisionreg

(precisatildeo 005 mm)

Em seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea de amendoim

bravo e massa fresca de placircntula inteira para picatildeo preto Para massa seca as placircntulas

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

estufa com temperatura de 60 C por 48 ho A pesagem foi realizada em balanccedila de

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

26

precisatildeo 00001 g determinando-se a massa seca total de cinco placircntulas de cada

repeticcedilatildeo

A massa de buva natildeo foi determinada devido ao seu pequeno tamanho e raacutepida

desidrataccedilatildeo

43 Anaacutelise da atividade alelopaacutetica sobre as plantas cultivadas (soja e milho) em laboratoacuterio

Com o objetivo de verificar se os filtrados de cultura interferem na germinaccedilatildeo e no

desenvolvimento inicial das placircntulas de soja e milho (plantas cultivadas) testou-se a

atividade alelopaacutetica em laboratoacuterio utilizando a soja cultivar CD 215 da COODETEC e o

milho hiacutebrido 330 da Agroeste

As concentraccedilotildees foram as mesmas utilizadas nas plantas invasoras

431 Teste padratildeo de germinaccedilatildeo de sementes de soja e milho

O teste padratildeo de germinaccedilatildeo foi feito com quatro sub-amostras de 50 sementes por

repeticcedilatildeo para cada tratamento Como substrato para a semeadura utilizou-se papel para

germinaccedilatildeo umedecido na proporccedilatildeo de duas vezes e meia o volume de aacutegua (testemunha)

ou dos filtrados de cultura em relaccedilatildeo agrave massa do papel (MARCOS FILHO et al 1987) Os

rolos foram constituiacutedos de trecircs folhas de papel tendo duas como base para a distribuiccedilatildeo

das sementes e uma folha como cobertura Em seguida foram colocados no germinador agrave

temperatura de 25 C As avaliaccedilotildees de sementes e placircntulas foram realizadas segundo os

criteacuterios das Regras para Anaacutelise de Sementes (BRASIL 2009)

432 Avaliaccedilatildeo do crescimento de placircntulas de soja e milho

Apoacutes sete e oito dias de crescimento no germinador para milho e soja

respectivamente (BRASIL 2009) determinou-se o comprimento da raiz primaacuteria (cm) e do

comprimento da parte aeacuterea (cm) de 10 placircntulas normais (cm) de cada repeticcedilatildeo Em

seguida foi determinada a massa fresca de raiz e parte aeacuterea Para massa seca foram

retirados os cotileacutedones no caso da soja e a semente que ficava na intercessatildeo entre a raiz

e a parte aeacuterea no caso do milho deixando apenas a raiz e a parte aeacuterea Em seguida

foram acondicionadas em sacos de papel devidamente identificados e conduzidos para a

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

27

estufa agrave temperatura de 65 C por 48 h A pesagem foi realizada em balanccedila de precisatildeo

00001 g determinando-se a massa seca total para cada repeticcedilatildeo

44 Cultivo de soja e milho em casa de vegetaccedilatildeo

O experimento foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo modelo arco na Universidade

Estadual do Oeste do Paranaacute ndash UNIOESTE campus de Cascavel ndash PR localizada a 24deg 57rsquo

21rdquoS de latitude 53deg 27rsquo 19rdquoW de longitude e com altitude meacutedia de 785 m O experimento

foi conduzido em casa de vegetaccedilatildeo sob temperatura meacutedia controlada de 25 C

As unidades experimentais foram vasos plaacutesticos com capacidade para 55 L O

substrato utilizado foi constituiacutedo de solo coletado da camada araacutevel classificado como

LATOSSOLO Vermelho distroacutefico (EMBRAPA 2006) ocorrente na regiatildeo O solo foi

enviado para anaacutelise quiacutemica e os resultados satildeo apresentados na Tabela 01 O solo foi

adubado com 62 kg ha -1 de nitrogecircnio 62 kg ha-1 foacutesforo e 72 kg ha-1 de potaacutessio

Tabela 01 Resultados da anaacutelise quiacutemica do solo utilizado como substrato CascavelPR

2011

Prof (cm)

pH CaCl2

Ca Mg K C g dm-3

P mg dm-3

V

----------- cmolc dm3 ---------

0-20 62 455 138 011 779 220 7040 Cooperativa Central de Pesquisa Agriacutecola (COODETEC) - Cascavel 2011 Prof Profundidade Ca Caacutelcio Mg Manganecircs K Potaacutessio

441 Aplicaccedilatildeo dos tratamentos em casa de vegetaccedilatildeo

Os tratamentos foram os mesmos aplicados nos ensaios realizados no laboratoacuterio

filtrado de cultura de M phaseolina F graminearum F solani e D maydis nas

concentraccedilotildees 1 5 10 15 e 20 mais a testemunha os quais foram aplicados por

aspersatildeo em toda a planta (ateacute que a planta estivesse totalmente molhada)

Utilizou-se a cultivar de soja CD 215 da COODETEC e o milho hiacutebrido 330 da

Agroeste A semeadura foi realizada manualmente no dia 17 de marccedilo de 2011

Foram realizadas duas aplicaccedilotildees dos filtrados de cultura sobre as plantas A

primeira foi aos 25 dias apoacutes a semeadura (DAS) e a segunda aos 40 DAS A avaliaccedilatildeo foi

realizada aos 50 dias apoacutes a semeadura (25 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para a soja e

56 dias apoacutes a semeadura (30 dias apoacutes a primeira aplicaccedilatildeo) para o milho

28

442 Paracircmetros avaliados em soja

A fitointoxicaccedilatildeo foi avaliada atraveacutes de escala visual em porcentagem aos 10 e 25

dias apoacutes a aplicaccedilatildeo (DAA) em que 0 corresponde agrave ausecircncia de injuacuterias e 100 agrave

morte total das plantas (Sociedade Brasileira da Ciecircncia das Plantas Daninhas - SBCPD

1995)

O iacutendice de clorofila (ICL) foi verificado no trifoacutelio mais jovem totalmente expandido

utilizando clorofilocircmetro portaacutetil modelo Falkerreg Segundo Cunha e Cabral (1999) essas

folhas satildeo consideradas as mais ativas entre as folhas adultas e utilizadas para avaliaccedilatildeo de

teores nutricionais e medidas de crescimento Em cada parcela foram feitas 20 mediccedilotildees no

mesmo trifoacutelio de uma planta sendo utilizada a meacutedia para interpretaccedilatildeo dos resultados

conforme Argenta et al (2001)

Foi avaliada a aacuterea foliar do trifoacutelio em que se determinou o teor de clorofila

utilizando o medidor Area Meter Li-3100Creg As medidas foram expressas em cm2

Para massa fresca pesou-se cada planta em balanccedila de precisatildeo Tambeacutem

determinou-se a massa seca de cada planta sendo estas submetidas agrave secagem a 70 C

por 72 horas em estufa de circulaccedilatildeo de ar forccedilado

443 Paracircmetros avaliados em milho

A fitointoxicaccedilatildeo foi avaliada por meio de escala visual em porcentagem aos 10 e

25 dias apoacutes a aplicaccedilatildeo (DAA) em qual 0 corresponde agrave ausecircncia de injuacuterias e 100 agrave

morte total das plantas (Sociedade Brasileira da Ciecircncia das Plantas Daninhas ndash SBCPD

1995)

A aacuterea foliar total foi determinada em cm2 utilizando o medidor Area Meter Li-

3100Creg

Para massa fresca pesou-se cada planta em balanccedila de precisatildeo Tambeacutem

determinou-se a massa seca de cada planta sendo estas submetidas a secagem a 70 ordmC

por 72 h em estufa de circulaccedilatildeo de ar forccedilado

45 Delineamento experimental

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado (DIC) com 21 tratamentos

(quatro espeacutecies de fungos e cinco diluiccedilotildees mais a testemunha) em quatro repeticcedilotildees Os

dados foram submetidos agrave anaacutelise estatiacutestica descritiva e de normalidade pelo programa

Minitab 14 Os dados que apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram

29

transformados por x+05 Os dados expressos em porcentagem foram transformados por

arco seno x100 (BANZATTO KRONKA 1995 BRASIL 2009)

As anaacutelises de variacircncia (ANOVA) e a transformaccedilatildeo dos dados que se

apresentaram anormais foram realizadas por meio do programa estatiacutestico SISVAR

(FERREIRA 2000) A comparaccedilatildeo das meacutedias dos tratamentos foi realizada com a

aplicaccedilatildeo do teste de Skott-Knott em niacutevel de 5 de probabilidade Os dados das variaacuteveis

que apresentaram diferenccedila significativa foram submetidos a anaacutelise de regressatildeo pelo

programa editor de planilhas eletrocircnicas Microsoft Office Excel 2007

A classificaccedilatildeo dos valores do coeficiente de variaccedilatildeo (CV) foi determinada de

acordo com Gomes (2000) sendo estes considerados baixos ateacute 10 meacutedios entre 10 e

20 altos entre 20 e 30 e muito altos acima de 30

30

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose)

Foi verificado o pH dos filtrados de cultura para as concentraccedilotildees de 1 5 10 15

20 para o filtrado bruto (100) e aacutegua destilada (testemunha 0) os quais se

mantiveram entre 52 e 40 (Tabela 2)

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos

bioensaios

Concentraccedilatildeo () F graminearum F solani M phaseolina D maydis

0 52 52 52 52

1 50 44 47 48

5 49 42 45 45

10 49 42 43 46

15 48 41 43 45

20 48 41 42 44

100 48 40 42 44 pH Potencial Hidrogecircnio

Pode-se considerar que o pH dos extratos foi moderadamente aacutecido sendo que o

meio BD preparado antes da inoculaccedilatildeo dos fungos manteve-se em torno de 51 conforme

recomendaccedilatildeo do fabricante

Segundo Ferreira e Borguetti (2004) o controle do pH e da concentraccedilatildeo dos

extratos eacute fundamental pois pode haver neles substacircncias como accediluacutecares aminoaacutecidos e

aacutecidos orgacircnicos que influem na concentraccedilatildeo iocircnica e satildeo osmoticamente ativos Tanto a

germinaccedilatildeo como o desenvolvimento de plantas satildeo afetados negativamente apenas em

condiccedilotildees em que o meio eacute extremamente aacutecido ou extremamente alcalino (SOUZA FILHO

1997)

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla (amendoim-bravo)

Na Tabela 3 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

nos ensaios realizados na planta invasora amendoim-bravo Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05 (BANZATTO

KRONKA 1995)

29

transformados por x+05 Os dados expressos em porcentagem foram transformados por

arco seno x100 (BANZATTO KRONKA 1995 BRASIL 2009)

As anaacutelises de variacircncia (ANOVA) e a transformaccedilatildeo dos dados que se

apresentaram anormais foram realizadas por meio do programa estatiacutestico SISVAR

(FERREIRA 2000) A comparaccedilatildeo das meacutedias dos tratamentos foi realizada com a

aplicaccedilatildeo do teste de Skott-Knott em niacutevel de 5 de probabilidade Os dados das variaacuteveis

que apresentaram diferenccedila significativa foram submetidos a anaacutelise de regressatildeo pelo

programa editor de planilhas eletrocircnicas Microsoft Office Excel 2007

A classificaccedilatildeo dos valores do coeficiente de variaccedilatildeo (CV) foi determinada de

acordo com Gomes (2000) sendo estes considerados baixos ateacute 10 meacutedios entre 10 e

20 altos entre 20 e 30 e muito altos acima de 30

30

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose)

Foi verificado o pH dos filtrados de cultura para as concentraccedilotildees de 1 5 10 15

20 para o filtrado bruto (100) e aacutegua destilada (testemunha 0) os quais se

mantiveram entre 52 e 40 (Tabela 2)

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos

bioensaios

Concentraccedilatildeo () F graminearum F solani M phaseolina D maydis

0 52 52 52 52

1 50 44 47 48

5 49 42 45 45

10 49 42 43 46

15 48 41 43 45

20 48 41 42 44

100 48 40 42 44 pH Potencial Hidrogecircnio

Pode-se considerar que o pH dos extratos foi moderadamente aacutecido sendo que o

meio BD preparado antes da inoculaccedilatildeo dos fungos manteve-se em torno de 51 conforme

recomendaccedilatildeo do fabricante

Segundo Ferreira e Borguetti (2004) o controle do pH e da concentraccedilatildeo dos

extratos eacute fundamental pois pode haver neles substacircncias como accediluacutecares aminoaacutecidos e

aacutecidos orgacircnicos que influem na concentraccedilatildeo iocircnica e satildeo osmoticamente ativos Tanto a

germinaccedilatildeo como o desenvolvimento de plantas satildeo afetados negativamente apenas em

condiccedilotildees em que o meio eacute extremamente aacutecido ou extremamente alcalino (SOUZA FILHO

1997)

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla (amendoim-bravo)

Na Tabela 3 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

nos ensaios realizados na planta invasora amendoim-bravo Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05 (BANZATTO

KRONKA 1995)

30

5 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO

51 pH dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose)

Foi verificado o pH dos filtrados de cultura para as concentraccedilotildees de 1 5 10 15

20 para o filtrado bruto (100) e aacutegua destilada (testemunha 0) os quais se

mantiveram entre 52 e 40 (Tabela 2)

Tabela 2 Valores do pH para as concentraccedilotildees dos filtrados de cultura e aacutegua utilizados nos

bioensaios

Concentraccedilatildeo () F graminearum F solani M phaseolina D maydis

0 52 52 52 52

1 50 44 47 48

5 49 42 45 45

10 49 42 43 46

15 48 41 43 45

20 48 41 42 44

100 48 40 42 44 pH Potencial Hidrogecircnio

Pode-se considerar que o pH dos extratos foi moderadamente aacutecido sendo que o

meio BD preparado antes da inoculaccedilatildeo dos fungos manteve-se em torno de 51 conforme

recomendaccedilatildeo do fabricante

Segundo Ferreira e Borguetti (2004) o controle do pH e da concentraccedilatildeo dos

extratos eacute fundamental pois pode haver neles substacircncias como accediluacutecares aminoaacutecidos e

aacutecidos orgacircnicos que influem na concentraccedilatildeo iocircnica e satildeo osmoticamente ativos Tanto a

germinaccedilatildeo como o desenvolvimento de plantas satildeo afetados negativamente apenas em

condiccedilotildees em que o meio eacute extremamente aacutecido ou extremamente alcalino (SOUZA FILHO

1997)

52 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis analisadas em Euphorbia heterophylla (amendoim-bravo)

Na Tabela 3 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

nos ensaios realizados na planta invasora amendoim-bravo Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05 (BANZATTO

KRONKA 1995)

31

Tabela 3 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com amendoim bravo

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 08841 ns 1497 95 0005

IVG 01306 ns 927 844 0582

VG 00062 404 239 0005

Comprimento de Raiz 00000 1370 845 0899

Comprimento de PA 00000 898 669 0157

Massa Fresca de Raiz 00000 1886 080 0387

Massa Fresca de PA 00000 1220 022 0271

Massa Seca de Raiz 00000 2062 0007 0005

Massa seca de PA 00000 1622 00161 0005 Significativo NS natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados

(arco seno x100) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo PA Parte aeacuterea IGV Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade de germinaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para a massa fresca e seca de raiz (1886 e 2062)

apresentaram meacutedia e baixa homogeneidade respectivamente Para as demais variaacuteveis os

dados apresentaram alta homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

Para as variaacuteveis porcentagem de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo apoacutes onze dias de cultivo natildeo se observou diferenccedila estatisticamente

significativa para as sementes de amendoim-bravo tratadas com os filtrados de cultura

obtidos de F graminearum F solani M phaseolina e D maydis conforme se observa na

Tabela 4 Para Ferreira e Borguetti (2004) a germinaccedilatildeo eacute menos sensiacutevel aos

aleloquiacutemicos que o crescimento da placircntula

A velocidade de germinaccedilatildeo corresponde aos dias que as sementes demoram para

germinar Quanto mais dias demoram menor eacute o vigor das sementes A velocidade de

germinaccedilatildeo natildeo sofreu efeitos negativos dos filtrados de cultura As espeacutecies F

graminearum e F solani anteciparam a germinaccedilatildeo das sementes comparando-se com a

testemunha ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Skott-Knott bem como M

phaseolina e D maydis na concentraccedilatildeo 20 e 10 respectivamente

Resultados diferentes foram obtidos por Magiero et al (2009) em que para o

amendoim-bravo a germinaccedilatildeo foi totalmente inibida com o uso de extrato aquoso da planta

Artemisia annua (erva-de-satildeo-joatildeo) a partir da concentraccedilatildeo de 75 Esses autores

observaram que natildeo houve reduccedilatildeo significativa na velocidade meacutedia de germinaccedilatildeo do

leiteiro nos tratamentos ateacute a concentraccedilatildeo 20

Natildeo foram encontrados trabalhos semelhantes utilizando filtrados de cultura sobre

germinaccedilatildeo e crescimento inicial de amendoim-bravo o que levou a buscar trabalhos que

utilizaram extratos vegetais como alternativa de controle de plantas invasoras

32

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns IVGns VG

Testemunha 0 95 796 262 a

Fusarium graminearum

1 98 879 227 b

5 93 831 232 b

10 93 838 230 b

15 92 859 214 b

20 91 844 223 b

Fusaruim solani

1 98 927 215 b

5 96 890 224 b

10 99 903 238 b

15 95 918 212 b

20 98 911 224 b

Macrophomina phaseolina

1 94 799 254 a

5 98 775 270 a

10 96 818 252 a

15 96 800 247 a

20 93 841 226 b

Diplodia maydis

1 96 830 247 a

5 94 791 269 a

10 99 865 239 b

15 93 770 261 a

20 98 846 248 a

CV () geral

1497 927 1013 Meacutedia geral

95 844 239

Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade NS natildeo significativo

Na Tabela 5 observa-se os resultados dos filtrados de cultura de fungos sobre o

crescimento inicial de amendoim bravo em que o obtido de F graminearum promoveu

menor crescimento de raiz e de parte aeacuterea nas concentraccedilotildees 15 e 20 quando

comparadas com a testemunha

Houve accedilatildeo inibitoacuteria de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 quando se utilizou o filtrado de F solani

O experimento desenvolvido por Maller et al (2010a) mostrou que o tratamento com

100 de extrato aquoso de Titonia diversifolia (girassol mexicano) apresentou o melhor

potencial de controle de amendoim bravo pois afetou o crescimento do hipocoacutetilo e radiacutecula

das placircntulas Os tratamentos 6 12 e 24 CH (Centesimal Hahnemanniana) provenientes da

dinamizaccedilatildeo do extrato estimularam o crescimento de parte aeacuterea e raiz e portanto natildeo

podem ser utilizados para o controle destas espeacutecies invasoras

33

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas

ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 851 b 836 a

Fusarium graminearum

1 870 b 733 a

5 893 b 746 a

10 843 b 714 a

15 714 c 610 b

20 613 c 590 b

Fusaruim solani

1 1145 a 689 a

5 915 b 640 b

10 943 b 560 b

15 642 c 631 b

20 691 c 561 b

Macrophomina phaseolina

1 821 b 751 a

5 969 a 554 b

10 845 b 688 a

15 973 a 583 b

20 910 b 753 a

Diplodia maydis

1 1021 a 779 a

5 787 c 593 b

10 799 c 724 a

15 691 c 636 b

20 823 b 683 b

CV () Geral

137 898

Meacutedia Geral 845 669 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott

Estes resultados foram semelhantes aos obtidos utilizando o filtrado de cultura de F

solani em concentraccedilotildees menores (15 e 20) o que envolve maior eficiecircncia em termos de

concentraccedilatildeo e economia do extrato bruto

O filtrado de M phaseolina natildeo apresentou inibiccedilatildeo significativa com relaccedilatildeo ao

comprimento de raiz mas proporcionou menor crescimento de parte aeacuterea nas

concentraccedilotildees 5 15 e 20

Houve menor crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 5 10 e 15 do filtrado de D

maydis e de parte aeacuterea nas concentraccedilotildees 5 15 e 20

Magiero et al (2009) concluiacuteram que o extrato aquoso de plantas de Artemisia annua

L (erva-de-satildeo-joatildeo) apresentou efeito alelopaacutetico sobre o crescimento radicular de

placircntulas de amendoim bravo reduzindo significativamente o comprimento radicular nas

concentraccedilotildees de 25 e 50 e inibindo totalmente em 75 e 100

Em bioensaios realizados por Souza et al (1997) utilizando extratos de trecircs

leguminosas forrageiras sobre o desenvolvimento de trecircs invasoras de pastagens

34

evidenciou-se que a raiz eacute um indicador mais sensiacutevel do que a germinaccedilatildeo aos extratos

aquosos destacando que esta variaacutevel eacute um aspecto ecoloacutegico importante uma vez que a

inibiccedilatildeo do sistema radicular seria determinante pois impediria o desenvolvimento normal

da planta afetada pelos aleloquiacutemicos

Na Tabela 6 percebe-se que o filtrado de F graminearum natildeo apresentou diferenccedila

significativa para o paracircmetro massa fresca de raiz e para a parte aeacuterea mas apresentou

menor massa seca de raiz em todas as concentraccedilotildees quando comparados com a

testemunha

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de leiteiro

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 0082 b 0284 a 0008 a 0021 a

Fusarium graminearum

1 0075 b 0214 a 0007 b 0013 b

5 0076 b 0246 a 0006 b 0017 a

10 0080 b 0240 a 0005 b 0018 a

15 0064 b 0224 a 0006 b 0017 a

20 0055 b 0233 a 0005 b 0017 a

Fusarium solani

1 0079 b 0213 b 0007 b 0011 b

5 0066 b 0174 b 0005 b 0010 b

10 0083 b 0176 b 0005 b 0011 b

15 0065 b 0194 b 0007 b 0016 a

20 0066 b 0188 b 0006 b 0012 b

Macrophomina phaseolina

1 0079 b 0223 a 0009 a 0019 a

5 0116 a 0193 b 0012 a 0020 a

10 0100 a 0234 a 0009 a 0017 a

15 0071 b 0189 b 0008 a 0018 a

20 0074 b 0222 a 0008 a 0018 a

Diplodia maydis

1 0080 b 0245 a 0008 a 0019 a

5 0099 a 0212 b 0010 a 0018 a

10 0089 a 0244 a 0008 a 0017 a

15 0078 b 0203 b 0007 b 0015 b

20 0099 a 0215 b 0008 a 0017 a

CV () 1886 1220 015 1622

Meacutedia Geral 0080 0217 0007 0016 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Nas concentraccedilotildees 5 e 15 M phaseolina apresentou menor massa fresca de parte

aeacuterea Na concentraccedilatildeo de 15 D Maydis apresentou menor massa seca de raiz e parte

aeacuterea as demais variaacuteveis mantiveram-se iguais ou maiores estatisticamente quando

comparadas com a testemunha

35

Na Tabela 7 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia Na regressatildeo confirma-se que o filtrado de cultura de F graminearum

diminuiu o crescimento e a massa seca e fresca de raiz conforme aumentaram as

concentraccedilotildees pois possuem um coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto

Tabela 7 Variaacuteveis analisadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

VG y = 0001x

2 - 0037x

+ 2478 y = 0000x

2 - 0026x

+ 2409 y = -0001x

2 + 0013x

+2592 y = -1E-05x

2 - 0003x

+ 2573

Rsup2 = 056 Rsup2 = 022 Rsup2 = 087 Rsup2 = 006

Raiz (cm) y = -0010x

2 + 0076x

+ 8623 y = -0004x

2 - 0084x

+ 9937 y = -0004x

2 + 0124x

+ 8438 y = 0011x

2 - 0303x

+ 9403

Rsup2 = 097 Rsup2 = 058 Rsup2 = 032 Rsup2 = 055

PA (cm) y = 9E-05x

2 - 0108x

+ 7960 y = 0009x

2 - 0281x

+ 7730 y = 0018x

2 - 0397x

+ 7982 y = 0010x

2 - 0262x

+ 8009

Rsup2 = 086 Rsup2 = 074 Rsup2 = 063 Rsup2 = 054

M Fresca Raiz y = -9E-05x

2 + 0000x

+ 0078 y = -1E-06x

2 - 0000x

+ 0079 y = -0000x

2 + 0004x

+ 0083 y = 3E-06x

2 + 0000x

+ 0084

Rsup2 = 087 Rsup2 = 038 Rsup2 = 048 Rsup2 = 013

M Seca Raiz y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = -2E-05x

2 + 0000x

+0008 y = -4E-06x

2 + 4E-05x

+ 0008

Rsup2 = 079 Rsup2 = 048 Rsup2 = 035 Rsup2 = 015

M Fresca PA y = 0000x

2 - 0003x

+ 0254 y = 0000x

2 - 0013x

+ 0251 y = 0000x

2 - 0009x

+ 0255 y = 0000x

2 - 0007x

+ 0264

Rsup2 = 019 066 Rsup2 = 044 Rsup2 = 059

M seca PA y = 2E-06x

2 - 5E-05x

+ 0017 y = 4E-05x

2 - 0000x

+ 0015 y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0020 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0020

Rsup2 = 000 Rsup2 = 019 Rsup2 = 065 Rsup2 = 088 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 VG Velocidade de germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca

Raiz Massa Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

O filtrado de F solani apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo regular para

crescimento de raiz (Rsup2 = 058) e bom para crescimento de parte aeacuterea (R2= 074) e para

massa fresca de parte aeacuterea (Rsup2 = 066) (BANZATTO KRONKA 1995)

O filtrado de M phaseolina e Dmaydis diminuiacuteram o crescimento da parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo apresentando coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) regulares

063 e 054

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo de crescimento de raiz crescimento de

parte aeacuterea e massa fresca de parte aeacuterea eacute explicada em parte pelo aumento da

concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva)

Na Tabela 8 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

com os ensaios realizados na planta invasora buva Os dados que apresentaram

36

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com buva

Variaacuteveis p-valor (ANOVA) CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00513ns 1588 60 0005

IVG 00000 2397 156 0018

VG 00000 1648 885 0321

Comprimento 00000 943 546 0110 Significativo NS natildeo significativo CV Coeficiente de variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

dados transformados (arco seno x100) IVG iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

Trinta dias apoacutes a semeadura a porcentagem meacutedia de germinaccedilatildeo das sementes

de buva natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa entre os tratamentos (Tabela 9)

com porcentagem meacutedia de 60 de germinaccedilatildeo apresentando a menor porcentagem

quando comparada com as demais invasoras avaliadas neste trabalho

Jaacute nos resultados obtidos com o IVG percebem-se as menores meacutedias quando se

utilizou os tratamentos com os filtrados D maydis e F solani a 20 (097 e 098

respectivamente) O filtrado de cultura obtido de F solani a partir da concentraccedilatildeo de 10

promoveu IVG menor quando comparado com a testemunha D maidys apresentou

comportamento semelhante sendo que a partir da concentraccedilatildeo de 5 se observa

diminuiccedilatildeo do IVG indicando assim que essas duas espeacutecies de fungos diminuem o

nuacutemero de sementes germinadas no dia

A velocidade de germinaccedilatildeo foi afetada negativamente pelos filtrados de

Fgraminearum a partir da concentraccedilatildeo 10 F solani nas concentraccedilotildees 15 e 20 e

Dmaidys a partir da concentraccedilatildeo 5 Quanto maior a concentraccedilatildeo desses filtrados de

cultura mais lenta foi a germinaccedilatildeo das sementes de buva

Segundo Ferreira e Borghetti (2004) muitas vezes o efeito alelopaacutetico natildeo se daacute

sobre a porcentagem de germinaccedilatildeo mas sobre a velocidade de germinaccedilatildeo fato que se

observou neste trabalho

O efeito positivo ou estimulante de compostos produzidos por microrganismos ou

plantas sobre outras plantas jaacute foi observado por Rice (1984)

Existem dificuldades em encontrar trabalhos semelhantes utilizando filtrados de

cultura ou extratos vegetais como controle alternativo de plantas de buva

Como exemplo de controle quiacutemico dessa planta Oliveira Neto et al (2010)

avaliaram a eficiecircncia de estrateacutegias de manejo de inverno apoacutes a colheita do milho

safrinha e de veratildeo antecedendo agrave semeadura da soja sobre o controle de buva utilizando

uma mistura de glyphosate + 24-D associada ou natildeo com herbicidas residuais Os autores

37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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32

Tabela 4 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de amendoim bravo submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns IVGns VG

Testemunha 0 95 796 262 a

Fusarium graminearum

1 98 879 227 b

5 93 831 232 b

10 93 838 230 b

15 92 859 214 b

20 91 844 223 b

Fusaruim solani

1 98 927 215 b

5 96 890 224 b

10 99 903 238 b

15 95 918 212 b

20 98 911 224 b

Macrophomina phaseolina

1 94 799 254 a

5 98 775 270 a

10 96 818 252 a

15 96 800 247 a

20 93 841 226 b

Diplodia maydis

1 96 830 247 a

5 94 791 269 a

10 99 865 239 b

15 93 770 261 a

20 98 846 248 a

CV () geral

1497 927 1013 Meacutedia geral

95 844 239

Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade NS natildeo significativo

Na Tabela 5 observa-se os resultados dos filtrados de cultura de fungos sobre o

crescimento inicial de amendoim bravo em que o obtido de F graminearum promoveu

menor crescimento de raiz e de parte aeacuterea nas concentraccedilotildees 15 e 20 quando

comparadas com a testemunha

Houve accedilatildeo inibitoacuteria de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 quando se utilizou o filtrado de F solani

O experimento desenvolvido por Maller et al (2010a) mostrou que o tratamento com

100 de extrato aquoso de Titonia diversifolia (girassol mexicano) apresentou o melhor

potencial de controle de amendoim bravo pois afetou o crescimento do hipocoacutetilo e radiacutecula

das placircntulas Os tratamentos 6 12 e 24 CH (Centesimal Hahnemanniana) provenientes da

dinamizaccedilatildeo do extrato estimularam o crescimento de parte aeacuterea e raiz e portanto natildeo

podem ser utilizados para o controle destas espeacutecies invasoras

33

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas

ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 851 b 836 a

Fusarium graminearum

1 870 b 733 a

5 893 b 746 a

10 843 b 714 a

15 714 c 610 b

20 613 c 590 b

Fusaruim solani

1 1145 a 689 a

5 915 b 640 b

10 943 b 560 b

15 642 c 631 b

20 691 c 561 b

Macrophomina phaseolina

1 821 b 751 a

5 969 a 554 b

10 845 b 688 a

15 973 a 583 b

20 910 b 753 a

Diplodia maydis

1 1021 a 779 a

5 787 c 593 b

10 799 c 724 a

15 691 c 636 b

20 823 b 683 b

CV () Geral

137 898

Meacutedia Geral 845 669 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott

Estes resultados foram semelhantes aos obtidos utilizando o filtrado de cultura de F

solani em concentraccedilotildees menores (15 e 20) o que envolve maior eficiecircncia em termos de

concentraccedilatildeo e economia do extrato bruto

O filtrado de M phaseolina natildeo apresentou inibiccedilatildeo significativa com relaccedilatildeo ao

comprimento de raiz mas proporcionou menor crescimento de parte aeacuterea nas

concentraccedilotildees 5 15 e 20

Houve menor crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 5 10 e 15 do filtrado de D

maydis e de parte aeacuterea nas concentraccedilotildees 5 15 e 20

Magiero et al (2009) concluiacuteram que o extrato aquoso de plantas de Artemisia annua

L (erva-de-satildeo-joatildeo) apresentou efeito alelopaacutetico sobre o crescimento radicular de

placircntulas de amendoim bravo reduzindo significativamente o comprimento radicular nas

concentraccedilotildees de 25 e 50 e inibindo totalmente em 75 e 100

Em bioensaios realizados por Souza et al (1997) utilizando extratos de trecircs

leguminosas forrageiras sobre o desenvolvimento de trecircs invasoras de pastagens

34

evidenciou-se que a raiz eacute um indicador mais sensiacutevel do que a germinaccedilatildeo aos extratos

aquosos destacando que esta variaacutevel eacute um aspecto ecoloacutegico importante uma vez que a

inibiccedilatildeo do sistema radicular seria determinante pois impediria o desenvolvimento normal

da planta afetada pelos aleloquiacutemicos

Na Tabela 6 percebe-se que o filtrado de F graminearum natildeo apresentou diferenccedila

significativa para o paracircmetro massa fresca de raiz e para a parte aeacuterea mas apresentou

menor massa seca de raiz em todas as concentraccedilotildees quando comparados com a

testemunha

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de leiteiro

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 0082 b 0284 a 0008 a 0021 a

Fusarium graminearum

1 0075 b 0214 a 0007 b 0013 b

5 0076 b 0246 a 0006 b 0017 a

10 0080 b 0240 a 0005 b 0018 a

15 0064 b 0224 a 0006 b 0017 a

20 0055 b 0233 a 0005 b 0017 a

Fusarium solani

1 0079 b 0213 b 0007 b 0011 b

5 0066 b 0174 b 0005 b 0010 b

10 0083 b 0176 b 0005 b 0011 b

15 0065 b 0194 b 0007 b 0016 a

20 0066 b 0188 b 0006 b 0012 b

Macrophomina phaseolina

1 0079 b 0223 a 0009 a 0019 a

5 0116 a 0193 b 0012 a 0020 a

10 0100 a 0234 a 0009 a 0017 a

15 0071 b 0189 b 0008 a 0018 a

20 0074 b 0222 a 0008 a 0018 a

Diplodia maydis

1 0080 b 0245 a 0008 a 0019 a

5 0099 a 0212 b 0010 a 0018 a

10 0089 a 0244 a 0008 a 0017 a

15 0078 b 0203 b 0007 b 0015 b

20 0099 a 0215 b 0008 a 0017 a

CV () 1886 1220 015 1622

Meacutedia Geral 0080 0217 0007 0016 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Nas concentraccedilotildees 5 e 15 M phaseolina apresentou menor massa fresca de parte

aeacuterea Na concentraccedilatildeo de 15 D Maydis apresentou menor massa seca de raiz e parte

aeacuterea as demais variaacuteveis mantiveram-se iguais ou maiores estatisticamente quando

comparadas com a testemunha

35

Na Tabela 7 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia Na regressatildeo confirma-se que o filtrado de cultura de F graminearum

diminuiu o crescimento e a massa seca e fresca de raiz conforme aumentaram as

concentraccedilotildees pois possuem um coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto

Tabela 7 Variaacuteveis analisadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

VG y = 0001x

2 - 0037x

+ 2478 y = 0000x

2 - 0026x

+ 2409 y = -0001x

2 + 0013x

+2592 y = -1E-05x

2 - 0003x

+ 2573

Rsup2 = 056 Rsup2 = 022 Rsup2 = 087 Rsup2 = 006

Raiz (cm) y = -0010x

2 + 0076x

+ 8623 y = -0004x

2 - 0084x

+ 9937 y = -0004x

2 + 0124x

+ 8438 y = 0011x

2 - 0303x

+ 9403

Rsup2 = 097 Rsup2 = 058 Rsup2 = 032 Rsup2 = 055

PA (cm) y = 9E-05x

2 - 0108x

+ 7960 y = 0009x

2 - 0281x

+ 7730 y = 0018x

2 - 0397x

+ 7982 y = 0010x

2 - 0262x

+ 8009

Rsup2 = 086 Rsup2 = 074 Rsup2 = 063 Rsup2 = 054

M Fresca Raiz y = -9E-05x

2 + 0000x

+ 0078 y = -1E-06x

2 - 0000x

+ 0079 y = -0000x

2 + 0004x

+ 0083 y = 3E-06x

2 + 0000x

+ 0084

Rsup2 = 087 Rsup2 = 038 Rsup2 = 048 Rsup2 = 013

M Seca Raiz y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = -2E-05x

2 + 0000x

+0008 y = -4E-06x

2 + 4E-05x

+ 0008

Rsup2 = 079 Rsup2 = 048 Rsup2 = 035 Rsup2 = 015

M Fresca PA y = 0000x

2 - 0003x

+ 0254 y = 0000x

2 - 0013x

+ 0251 y = 0000x

2 - 0009x

+ 0255 y = 0000x

2 - 0007x

+ 0264

Rsup2 = 019 066 Rsup2 = 044 Rsup2 = 059

M seca PA y = 2E-06x

2 - 5E-05x

+ 0017 y = 4E-05x

2 - 0000x

+ 0015 y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0020 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0020

Rsup2 = 000 Rsup2 = 019 Rsup2 = 065 Rsup2 = 088 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 VG Velocidade de germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca

Raiz Massa Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

O filtrado de F solani apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo regular para

crescimento de raiz (Rsup2 = 058) e bom para crescimento de parte aeacuterea (R2= 074) e para

massa fresca de parte aeacuterea (Rsup2 = 066) (BANZATTO KRONKA 1995)

O filtrado de M phaseolina e Dmaydis diminuiacuteram o crescimento da parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo apresentando coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) regulares

063 e 054

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo de crescimento de raiz crescimento de

parte aeacuterea e massa fresca de parte aeacuterea eacute explicada em parte pelo aumento da

concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva)

Na Tabela 8 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

com os ensaios realizados na planta invasora buva Os dados que apresentaram

36

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com buva

Variaacuteveis p-valor (ANOVA) CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00513ns 1588 60 0005

IVG 00000 2397 156 0018

VG 00000 1648 885 0321

Comprimento 00000 943 546 0110 Significativo NS natildeo significativo CV Coeficiente de variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

dados transformados (arco seno x100) IVG iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

Trinta dias apoacutes a semeadura a porcentagem meacutedia de germinaccedilatildeo das sementes

de buva natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa entre os tratamentos (Tabela 9)

com porcentagem meacutedia de 60 de germinaccedilatildeo apresentando a menor porcentagem

quando comparada com as demais invasoras avaliadas neste trabalho

Jaacute nos resultados obtidos com o IVG percebem-se as menores meacutedias quando se

utilizou os tratamentos com os filtrados D maydis e F solani a 20 (097 e 098

respectivamente) O filtrado de cultura obtido de F solani a partir da concentraccedilatildeo de 10

promoveu IVG menor quando comparado com a testemunha D maidys apresentou

comportamento semelhante sendo que a partir da concentraccedilatildeo de 5 se observa

diminuiccedilatildeo do IVG indicando assim que essas duas espeacutecies de fungos diminuem o

nuacutemero de sementes germinadas no dia

A velocidade de germinaccedilatildeo foi afetada negativamente pelos filtrados de

Fgraminearum a partir da concentraccedilatildeo 10 F solani nas concentraccedilotildees 15 e 20 e

Dmaidys a partir da concentraccedilatildeo 5 Quanto maior a concentraccedilatildeo desses filtrados de

cultura mais lenta foi a germinaccedilatildeo das sementes de buva

Segundo Ferreira e Borghetti (2004) muitas vezes o efeito alelopaacutetico natildeo se daacute

sobre a porcentagem de germinaccedilatildeo mas sobre a velocidade de germinaccedilatildeo fato que se

observou neste trabalho

O efeito positivo ou estimulante de compostos produzidos por microrganismos ou

plantas sobre outras plantas jaacute foi observado por Rice (1984)

Existem dificuldades em encontrar trabalhos semelhantes utilizando filtrados de

cultura ou extratos vegetais como controle alternativo de plantas de buva

Como exemplo de controle quiacutemico dessa planta Oliveira Neto et al (2010)

avaliaram a eficiecircncia de estrateacutegias de manejo de inverno apoacutes a colheita do milho

safrinha e de veratildeo antecedendo agrave semeadura da soja sobre o controle de buva utilizando

uma mistura de glyphosate + 24-D associada ou natildeo com herbicidas residuais Os autores

37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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33

Tabela 5 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de amendoim bravo submetidas

ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 851 b 836 a

Fusarium graminearum

1 870 b 733 a

5 893 b 746 a

10 843 b 714 a

15 714 c 610 b

20 613 c 590 b

Fusaruim solani

1 1145 a 689 a

5 915 b 640 b

10 943 b 560 b

15 642 c 631 b

20 691 c 561 b

Macrophomina phaseolina

1 821 b 751 a

5 969 a 554 b

10 845 b 688 a

15 973 a 583 b

20 910 b 753 a

Diplodia maydis

1 1021 a 779 a

5 787 c 593 b

10 799 c 724 a

15 691 c 636 b

20 823 b 683 b

CV () Geral

137 898

Meacutedia Geral 845 669 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott

Estes resultados foram semelhantes aos obtidos utilizando o filtrado de cultura de F

solani em concentraccedilotildees menores (15 e 20) o que envolve maior eficiecircncia em termos de

concentraccedilatildeo e economia do extrato bruto

O filtrado de M phaseolina natildeo apresentou inibiccedilatildeo significativa com relaccedilatildeo ao

comprimento de raiz mas proporcionou menor crescimento de parte aeacuterea nas

concentraccedilotildees 5 15 e 20

Houve menor crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 5 10 e 15 do filtrado de D

maydis e de parte aeacuterea nas concentraccedilotildees 5 15 e 20

Magiero et al (2009) concluiacuteram que o extrato aquoso de plantas de Artemisia annua

L (erva-de-satildeo-joatildeo) apresentou efeito alelopaacutetico sobre o crescimento radicular de

placircntulas de amendoim bravo reduzindo significativamente o comprimento radicular nas

concentraccedilotildees de 25 e 50 e inibindo totalmente em 75 e 100

Em bioensaios realizados por Souza et al (1997) utilizando extratos de trecircs

leguminosas forrageiras sobre o desenvolvimento de trecircs invasoras de pastagens

34

evidenciou-se que a raiz eacute um indicador mais sensiacutevel do que a germinaccedilatildeo aos extratos

aquosos destacando que esta variaacutevel eacute um aspecto ecoloacutegico importante uma vez que a

inibiccedilatildeo do sistema radicular seria determinante pois impediria o desenvolvimento normal

da planta afetada pelos aleloquiacutemicos

Na Tabela 6 percebe-se que o filtrado de F graminearum natildeo apresentou diferenccedila

significativa para o paracircmetro massa fresca de raiz e para a parte aeacuterea mas apresentou

menor massa seca de raiz em todas as concentraccedilotildees quando comparados com a

testemunha

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de leiteiro

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 0082 b 0284 a 0008 a 0021 a

Fusarium graminearum

1 0075 b 0214 a 0007 b 0013 b

5 0076 b 0246 a 0006 b 0017 a

10 0080 b 0240 a 0005 b 0018 a

15 0064 b 0224 a 0006 b 0017 a

20 0055 b 0233 a 0005 b 0017 a

Fusarium solani

1 0079 b 0213 b 0007 b 0011 b

5 0066 b 0174 b 0005 b 0010 b

10 0083 b 0176 b 0005 b 0011 b

15 0065 b 0194 b 0007 b 0016 a

20 0066 b 0188 b 0006 b 0012 b

Macrophomina phaseolina

1 0079 b 0223 a 0009 a 0019 a

5 0116 a 0193 b 0012 a 0020 a

10 0100 a 0234 a 0009 a 0017 a

15 0071 b 0189 b 0008 a 0018 a

20 0074 b 0222 a 0008 a 0018 a

Diplodia maydis

1 0080 b 0245 a 0008 a 0019 a

5 0099 a 0212 b 0010 a 0018 a

10 0089 a 0244 a 0008 a 0017 a

15 0078 b 0203 b 0007 b 0015 b

20 0099 a 0215 b 0008 a 0017 a

CV () 1886 1220 015 1622

Meacutedia Geral 0080 0217 0007 0016 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Nas concentraccedilotildees 5 e 15 M phaseolina apresentou menor massa fresca de parte

aeacuterea Na concentraccedilatildeo de 15 D Maydis apresentou menor massa seca de raiz e parte

aeacuterea as demais variaacuteveis mantiveram-se iguais ou maiores estatisticamente quando

comparadas com a testemunha

35

Na Tabela 7 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia Na regressatildeo confirma-se que o filtrado de cultura de F graminearum

diminuiu o crescimento e a massa seca e fresca de raiz conforme aumentaram as

concentraccedilotildees pois possuem um coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto

Tabela 7 Variaacuteveis analisadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

VG y = 0001x

2 - 0037x

+ 2478 y = 0000x

2 - 0026x

+ 2409 y = -0001x

2 + 0013x

+2592 y = -1E-05x

2 - 0003x

+ 2573

Rsup2 = 056 Rsup2 = 022 Rsup2 = 087 Rsup2 = 006

Raiz (cm) y = -0010x

2 + 0076x

+ 8623 y = -0004x

2 - 0084x

+ 9937 y = -0004x

2 + 0124x

+ 8438 y = 0011x

2 - 0303x

+ 9403

Rsup2 = 097 Rsup2 = 058 Rsup2 = 032 Rsup2 = 055

PA (cm) y = 9E-05x

2 - 0108x

+ 7960 y = 0009x

2 - 0281x

+ 7730 y = 0018x

2 - 0397x

+ 7982 y = 0010x

2 - 0262x

+ 8009

Rsup2 = 086 Rsup2 = 074 Rsup2 = 063 Rsup2 = 054

M Fresca Raiz y = -9E-05x

2 + 0000x

+ 0078 y = -1E-06x

2 - 0000x

+ 0079 y = -0000x

2 + 0004x

+ 0083 y = 3E-06x

2 + 0000x

+ 0084

Rsup2 = 087 Rsup2 = 038 Rsup2 = 048 Rsup2 = 013

M Seca Raiz y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = -2E-05x

2 + 0000x

+0008 y = -4E-06x

2 + 4E-05x

+ 0008

Rsup2 = 079 Rsup2 = 048 Rsup2 = 035 Rsup2 = 015

M Fresca PA y = 0000x

2 - 0003x

+ 0254 y = 0000x

2 - 0013x

+ 0251 y = 0000x

2 - 0009x

+ 0255 y = 0000x

2 - 0007x

+ 0264

Rsup2 = 019 066 Rsup2 = 044 Rsup2 = 059

M seca PA y = 2E-06x

2 - 5E-05x

+ 0017 y = 4E-05x

2 - 0000x

+ 0015 y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0020 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0020

Rsup2 = 000 Rsup2 = 019 Rsup2 = 065 Rsup2 = 088 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 VG Velocidade de germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca

Raiz Massa Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

O filtrado de F solani apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo regular para

crescimento de raiz (Rsup2 = 058) e bom para crescimento de parte aeacuterea (R2= 074) e para

massa fresca de parte aeacuterea (Rsup2 = 066) (BANZATTO KRONKA 1995)

O filtrado de M phaseolina e Dmaydis diminuiacuteram o crescimento da parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo apresentando coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) regulares

063 e 054

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo de crescimento de raiz crescimento de

parte aeacuterea e massa fresca de parte aeacuterea eacute explicada em parte pelo aumento da

concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva)

Na Tabela 8 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

com os ensaios realizados na planta invasora buva Os dados que apresentaram

36

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com buva

Variaacuteveis p-valor (ANOVA) CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00513ns 1588 60 0005

IVG 00000 2397 156 0018

VG 00000 1648 885 0321

Comprimento 00000 943 546 0110 Significativo NS natildeo significativo CV Coeficiente de variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

dados transformados (arco seno x100) IVG iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

Trinta dias apoacutes a semeadura a porcentagem meacutedia de germinaccedilatildeo das sementes

de buva natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa entre os tratamentos (Tabela 9)

com porcentagem meacutedia de 60 de germinaccedilatildeo apresentando a menor porcentagem

quando comparada com as demais invasoras avaliadas neste trabalho

Jaacute nos resultados obtidos com o IVG percebem-se as menores meacutedias quando se

utilizou os tratamentos com os filtrados D maydis e F solani a 20 (097 e 098

respectivamente) O filtrado de cultura obtido de F solani a partir da concentraccedilatildeo de 10

promoveu IVG menor quando comparado com a testemunha D maidys apresentou

comportamento semelhante sendo que a partir da concentraccedilatildeo de 5 se observa

diminuiccedilatildeo do IVG indicando assim que essas duas espeacutecies de fungos diminuem o

nuacutemero de sementes germinadas no dia

A velocidade de germinaccedilatildeo foi afetada negativamente pelos filtrados de

Fgraminearum a partir da concentraccedilatildeo 10 F solani nas concentraccedilotildees 15 e 20 e

Dmaidys a partir da concentraccedilatildeo 5 Quanto maior a concentraccedilatildeo desses filtrados de

cultura mais lenta foi a germinaccedilatildeo das sementes de buva

Segundo Ferreira e Borghetti (2004) muitas vezes o efeito alelopaacutetico natildeo se daacute

sobre a porcentagem de germinaccedilatildeo mas sobre a velocidade de germinaccedilatildeo fato que se

observou neste trabalho

O efeito positivo ou estimulante de compostos produzidos por microrganismos ou

plantas sobre outras plantas jaacute foi observado por Rice (1984)

Existem dificuldades em encontrar trabalhos semelhantes utilizando filtrados de

cultura ou extratos vegetais como controle alternativo de plantas de buva

Como exemplo de controle quiacutemico dessa planta Oliveira Neto et al (2010)

avaliaram a eficiecircncia de estrateacutegias de manejo de inverno apoacutes a colheita do milho

safrinha e de veratildeo antecedendo agrave semeadura da soja sobre o controle de buva utilizando

uma mistura de glyphosate + 24-D associada ou natildeo com herbicidas residuais Os autores

37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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34

evidenciou-se que a raiz eacute um indicador mais sensiacutevel do que a germinaccedilatildeo aos extratos

aquosos destacando que esta variaacutevel eacute um aspecto ecoloacutegico importante uma vez que a

inibiccedilatildeo do sistema radicular seria determinante pois impediria o desenvolvimento normal

da planta afetada pelos aleloquiacutemicos

Na Tabela 6 percebe-se que o filtrado de F graminearum natildeo apresentou diferenccedila

significativa para o paracircmetro massa fresca de raiz e para a parte aeacuterea mas apresentou

menor massa seca de raiz em todas as concentraccedilotildees quando comparados com a

testemunha

Tabela 6 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de leiteiro

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 0082 b 0284 a 0008 a 0021 a

Fusarium graminearum

1 0075 b 0214 a 0007 b 0013 b

5 0076 b 0246 a 0006 b 0017 a

10 0080 b 0240 a 0005 b 0018 a

15 0064 b 0224 a 0006 b 0017 a

20 0055 b 0233 a 0005 b 0017 a

Fusarium solani

1 0079 b 0213 b 0007 b 0011 b

5 0066 b 0174 b 0005 b 0010 b

10 0083 b 0176 b 0005 b 0011 b

15 0065 b 0194 b 0007 b 0016 a

20 0066 b 0188 b 0006 b 0012 b

Macrophomina phaseolina

1 0079 b 0223 a 0009 a 0019 a

5 0116 a 0193 b 0012 a 0020 a

10 0100 a 0234 a 0009 a 0017 a

15 0071 b 0189 b 0008 a 0018 a

20 0074 b 0222 a 0008 a 0018 a

Diplodia maydis

1 0080 b 0245 a 0008 a 0019 a

5 0099 a 0212 b 0010 a 0018 a

10 0089 a 0244 a 0008 a 0017 a

15 0078 b 0203 b 0007 b 0015 b

20 0099 a 0215 b 0008 a 0017 a

CV () 1886 1220 015 1622

Meacutedia Geral 0080 0217 0007 0016 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Nas concentraccedilotildees 5 e 15 M phaseolina apresentou menor massa fresca de parte

aeacuterea Na concentraccedilatildeo de 15 D Maydis apresentou menor massa seca de raiz e parte

aeacuterea as demais variaacuteveis mantiveram-se iguais ou maiores estatisticamente quando

comparadas com a testemunha

35

Na Tabela 7 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia Na regressatildeo confirma-se que o filtrado de cultura de F graminearum

diminuiu o crescimento e a massa seca e fresca de raiz conforme aumentaram as

concentraccedilotildees pois possuem um coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto

Tabela 7 Variaacuteveis analisadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

VG y = 0001x

2 - 0037x

+ 2478 y = 0000x

2 - 0026x

+ 2409 y = -0001x

2 + 0013x

+2592 y = -1E-05x

2 - 0003x

+ 2573

Rsup2 = 056 Rsup2 = 022 Rsup2 = 087 Rsup2 = 006

Raiz (cm) y = -0010x

2 + 0076x

+ 8623 y = -0004x

2 - 0084x

+ 9937 y = -0004x

2 + 0124x

+ 8438 y = 0011x

2 - 0303x

+ 9403

Rsup2 = 097 Rsup2 = 058 Rsup2 = 032 Rsup2 = 055

PA (cm) y = 9E-05x

2 - 0108x

+ 7960 y = 0009x

2 - 0281x

+ 7730 y = 0018x

2 - 0397x

+ 7982 y = 0010x

2 - 0262x

+ 8009

Rsup2 = 086 Rsup2 = 074 Rsup2 = 063 Rsup2 = 054

M Fresca Raiz y = -9E-05x

2 + 0000x

+ 0078 y = -1E-06x

2 - 0000x

+ 0079 y = -0000x

2 + 0004x

+ 0083 y = 3E-06x

2 + 0000x

+ 0084

Rsup2 = 087 Rsup2 = 038 Rsup2 = 048 Rsup2 = 013

M Seca Raiz y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = -2E-05x

2 + 0000x

+0008 y = -4E-06x

2 + 4E-05x

+ 0008

Rsup2 = 079 Rsup2 = 048 Rsup2 = 035 Rsup2 = 015

M Fresca PA y = 0000x

2 - 0003x

+ 0254 y = 0000x

2 - 0013x

+ 0251 y = 0000x

2 - 0009x

+ 0255 y = 0000x

2 - 0007x

+ 0264

Rsup2 = 019 066 Rsup2 = 044 Rsup2 = 059

M seca PA y = 2E-06x

2 - 5E-05x

+ 0017 y = 4E-05x

2 - 0000x

+ 0015 y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0020 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0020

Rsup2 = 000 Rsup2 = 019 Rsup2 = 065 Rsup2 = 088 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 VG Velocidade de germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca

Raiz Massa Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

O filtrado de F solani apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo regular para

crescimento de raiz (Rsup2 = 058) e bom para crescimento de parte aeacuterea (R2= 074) e para

massa fresca de parte aeacuterea (Rsup2 = 066) (BANZATTO KRONKA 1995)

O filtrado de M phaseolina e Dmaydis diminuiacuteram o crescimento da parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo apresentando coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) regulares

063 e 054

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo de crescimento de raiz crescimento de

parte aeacuterea e massa fresca de parte aeacuterea eacute explicada em parte pelo aumento da

concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva)

Na Tabela 8 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

com os ensaios realizados na planta invasora buva Os dados que apresentaram

36

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com buva

Variaacuteveis p-valor (ANOVA) CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00513ns 1588 60 0005

IVG 00000 2397 156 0018

VG 00000 1648 885 0321

Comprimento 00000 943 546 0110 Significativo NS natildeo significativo CV Coeficiente de variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

dados transformados (arco seno x100) IVG iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

Trinta dias apoacutes a semeadura a porcentagem meacutedia de germinaccedilatildeo das sementes

de buva natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa entre os tratamentos (Tabela 9)

com porcentagem meacutedia de 60 de germinaccedilatildeo apresentando a menor porcentagem

quando comparada com as demais invasoras avaliadas neste trabalho

Jaacute nos resultados obtidos com o IVG percebem-se as menores meacutedias quando se

utilizou os tratamentos com os filtrados D maydis e F solani a 20 (097 e 098

respectivamente) O filtrado de cultura obtido de F solani a partir da concentraccedilatildeo de 10

promoveu IVG menor quando comparado com a testemunha D maidys apresentou

comportamento semelhante sendo que a partir da concentraccedilatildeo de 5 se observa

diminuiccedilatildeo do IVG indicando assim que essas duas espeacutecies de fungos diminuem o

nuacutemero de sementes germinadas no dia

A velocidade de germinaccedilatildeo foi afetada negativamente pelos filtrados de

Fgraminearum a partir da concentraccedilatildeo 10 F solani nas concentraccedilotildees 15 e 20 e

Dmaidys a partir da concentraccedilatildeo 5 Quanto maior a concentraccedilatildeo desses filtrados de

cultura mais lenta foi a germinaccedilatildeo das sementes de buva

Segundo Ferreira e Borghetti (2004) muitas vezes o efeito alelopaacutetico natildeo se daacute

sobre a porcentagem de germinaccedilatildeo mas sobre a velocidade de germinaccedilatildeo fato que se

observou neste trabalho

O efeito positivo ou estimulante de compostos produzidos por microrganismos ou

plantas sobre outras plantas jaacute foi observado por Rice (1984)

Existem dificuldades em encontrar trabalhos semelhantes utilizando filtrados de

cultura ou extratos vegetais como controle alternativo de plantas de buva

Como exemplo de controle quiacutemico dessa planta Oliveira Neto et al (2010)

avaliaram a eficiecircncia de estrateacutegias de manejo de inverno apoacutes a colheita do milho

safrinha e de veratildeo antecedendo agrave semeadura da soja sobre o controle de buva utilizando

uma mistura de glyphosate + 24-D associada ou natildeo com herbicidas residuais Os autores

37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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35

Na Tabela 7 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia Na regressatildeo confirma-se que o filtrado de cultura de F graminearum

diminuiu o crescimento e a massa seca e fresca de raiz conforme aumentaram as

concentraccedilotildees pois possuem um coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto

Tabela 7 Variaacuteveis analisadas em amendoim bravo em funccedilatildeo das concentraccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

VG y = 0001x

2 - 0037x

+ 2478 y = 0000x

2 - 0026x

+ 2409 y = -0001x

2 + 0013x

+2592 y = -1E-05x

2 - 0003x

+ 2573

Rsup2 = 056 Rsup2 = 022 Rsup2 = 087 Rsup2 = 006

Raiz (cm) y = -0010x

2 + 0076x

+ 8623 y = -0004x

2 - 0084x

+ 9937 y = -0004x

2 + 0124x

+ 8438 y = 0011x

2 - 0303x

+ 9403

Rsup2 = 097 Rsup2 = 058 Rsup2 = 032 Rsup2 = 055

PA (cm) y = 9E-05x

2 - 0108x

+ 7960 y = 0009x

2 - 0281x

+ 7730 y = 0018x

2 - 0397x

+ 7982 y = 0010x

2 - 0262x

+ 8009

Rsup2 = 086 Rsup2 = 074 Rsup2 = 063 Rsup2 = 054

M Fresca Raiz y = -9E-05x

2 + 0000x

+ 0078 y = -1E-06x

2 - 0000x

+ 0079 y = -0000x

2 + 0004x

+ 0083 y = 3E-06x

2 + 0000x

+ 0084

Rsup2 = 087 Rsup2 = 038 Rsup2 = 048 Rsup2 = 013

M Seca Raiz y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0007 y = -2E-05x

2 + 0000x

+0008 y = -4E-06x

2 + 4E-05x

+ 0008

Rsup2 = 079 Rsup2 = 048 Rsup2 = 035 Rsup2 = 015

M Fresca PA y = 0000x

2 - 0003x

+ 0254 y = 0000x

2 - 0013x

+ 0251 y = 0000x

2 - 0009x

+ 0255 y = 0000x

2 - 0007x

+ 0264

Rsup2 = 019 066 Rsup2 = 044 Rsup2 = 059

M seca PA y = 2E-06x

2 - 5E-05x

+ 0017 y = 4E-05x

2 - 0000x

+ 0015 y = 1E-05x

2 - 0000x

+ 0020 y = 2E-05x

2 - 0000x

+ 0020

Rsup2 = 000 Rsup2 = 019 Rsup2 = 065 Rsup2 = 088 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 VG Velocidade de germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca

Raiz Massa Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

O filtrado de F solani apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo regular para

crescimento de raiz (Rsup2 = 058) e bom para crescimento de parte aeacuterea (R2= 074) e para

massa fresca de parte aeacuterea (Rsup2 = 066) (BANZATTO KRONKA 1995)

O filtrado de M phaseolina e Dmaydis diminuiacuteram o crescimento da parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo apresentando coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) regulares

063 e 054

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo de crescimento de raiz crescimento de

parte aeacuterea e massa fresca de parte aeacuterea eacute explicada em parte pelo aumento da

concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

53 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Conyza sp (Buva)

Na Tabela 8 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados obtidos

com os ensaios realizados na planta invasora buva Os dados que apresentaram

36

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com buva

Variaacuteveis p-valor (ANOVA) CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00513ns 1588 60 0005

IVG 00000 2397 156 0018

VG 00000 1648 885 0321

Comprimento 00000 943 546 0110 Significativo NS natildeo significativo CV Coeficiente de variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

dados transformados (arco seno x100) IVG iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

Trinta dias apoacutes a semeadura a porcentagem meacutedia de germinaccedilatildeo das sementes

de buva natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa entre os tratamentos (Tabela 9)

com porcentagem meacutedia de 60 de germinaccedilatildeo apresentando a menor porcentagem

quando comparada com as demais invasoras avaliadas neste trabalho

Jaacute nos resultados obtidos com o IVG percebem-se as menores meacutedias quando se

utilizou os tratamentos com os filtrados D maydis e F solani a 20 (097 e 098

respectivamente) O filtrado de cultura obtido de F solani a partir da concentraccedilatildeo de 10

promoveu IVG menor quando comparado com a testemunha D maidys apresentou

comportamento semelhante sendo que a partir da concentraccedilatildeo de 5 se observa

diminuiccedilatildeo do IVG indicando assim que essas duas espeacutecies de fungos diminuem o

nuacutemero de sementes germinadas no dia

A velocidade de germinaccedilatildeo foi afetada negativamente pelos filtrados de

Fgraminearum a partir da concentraccedilatildeo 10 F solani nas concentraccedilotildees 15 e 20 e

Dmaidys a partir da concentraccedilatildeo 5 Quanto maior a concentraccedilatildeo desses filtrados de

cultura mais lenta foi a germinaccedilatildeo das sementes de buva

Segundo Ferreira e Borghetti (2004) muitas vezes o efeito alelopaacutetico natildeo se daacute

sobre a porcentagem de germinaccedilatildeo mas sobre a velocidade de germinaccedilatildeo fato que se

observou neste trabalho

O efeito positivo ou estimulante de compostos produzidos por microrganismos ou

plantas sobre outras plantas jaacute foi observado por Rice (1984)

Existem dificuldades em encontrar trabalhos semelhantes utilizando filtrados de

cultura ou extratos vegetais como controle alternativo de plantas de buva

Como exemplo de controle quiacutemico dessa planta Oliveira Neto et al (2010)

avaliaram a eficiecircncia de estrateacutegias de manejo de inverno apoacutes a colheita do milho

safrinha e de veratildeo antecedendo agrave semeadura da soja sobre o controle de buva utilizando

uma mistura de glyphosate + 24-D associada ou natildeo com herbicidas residuais Os autores

37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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36

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 8 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das variaacuteveis analisadas nos ensaios com buva

Variaacuteveis p-valor (ANOVA) CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00513ns 1588 60 0005

IVG 00000 2397 156 0018

VG 00000 1648 885 0321

Comprimento 00000 943 546 0110 Significativo NS natildeo significativo CV Coeficiente de variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

dados transformados (arco seno x100) IVG iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

Trinta dias apoacutes a semeadura a porcentagem meacutedia de germinaccedilatildeo das sementes

de buva natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa entre os tratamentos (Tabela 9)

com porcentagem meacutedia de 60 de germinaccedilatildeo apresentando a menor porcentagem

quando comparada com as demais invasoras avaliadas neste trabalho

Jaacute nos resultados obtidos com o IVG percebem-se as menores meacutedias quando se

utilizou os tratamentos com os filtrados D maydis e F solani a 20 (097 e 098

respectivamente) O filtrado de cultura obtido de F solani a partir da concentraccedilatildeo de 10

promoveu IVG menor quando comparado com a testemunha D maidys apresentou

comportamento semelhante sendo que a partir da concentraccedilatildeo de 5 se observa

diminuiccedilatildeo do IVG indicando assim que essas duas espeacutecies de fungos diminuem o

nuacutemero de sementes germinadas no dia

A velocidade de germinaccedilatildeo foi afetada negativamente pelos filtrados de

Fgraminearum a partir da concentraccedilatildeo 10 F solani nas concentraccedilotildees 15 e 20 e

Dmaidys a partir da concentraccedilatildeo 5 Quanto maior a concentraccedilatildeo desses filtrados de

cultura mais lenta foi a germinaccedilatildeo das sementes de buva

Segundo Ferreira e Borghetti (2004) muitas vezes o efeito alelopaacutetico natildeo se daacute

sobre a porcentagem de germinaccedilatildeo mas sobre a velocidade de germinaccedilatildeo fato que se

observou neste trabalho

O efeito positivo ou estimulante de compostos produzidos por microrganismos ou

plantas sobre outras plantas jaacute foi observado por Rice (1984)

Existem dificuldades em encontrar trabalhos semelhantes utilizando filtrados de

cultura ou extratos vegetais como controle alternativo de plantas de buva

Como exemplo de controle quiacutemico dessa planta Oliveira Neto et al (2010)

avaliaram a eficiecircncia de estrateacutegias de manejo de inverno apoacutes a colheita do milho

safrinha e de veratildeo antecedendo agrave semeadura da soja sobre o controle de buva utilizando

uma mistura de glyphosate + 24-D associada ou natildeo com herbicidas residuais Os autores

37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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37

constataram que em todos os manejos em que o herbicida 24-D foi associado ao

glyphosate houve controle total das plantas invasoras

Tabela 9 Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em

sementes de buva submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 65ns 202 a 766 b

Fusarium graminearum

1 54 179 a 699 b

5 56 184 a 666 b

10 63 163 a 915 a

15 75 162 a 1170 a

20 69 148 a 1077 a

Fusarium solani

1 70 208 a 809 b

5 61 171 a 702 b

10 44 114 b 869 b

15 59 133 b 963 a

20 56 098 b 1099 a

Macrophomina phaseolina

1 51 142 b 882 b

5 61 154 b 966 a

10 70 175 a 847 b

15 61 187 a 632 b

20 70 194 a 759 b

Diplodia maydis

1 68 200 a 743 b

5 45 117 b 912 a

10 56 132 b 982 a

15 49 105 b 1039 a

20 50 097 b 1089 a

CV () 1588 902 1648

Meacutedia geral 60 156 885 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-

Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Devido agrave dificuldade em encontrar trabalhos que buscam controle alternativo de

buva em que natildeo se utilizem defensivos quiacutemicos destaca-se a importacircncia do presente

trabalho

O filtrado de D maydis ateacute nas menores concentraccedilotildees apresentou efeito

alelopaacutetico inibitoacuterio sobre o crescimento de placircntulas de buva (Tabela 10) Efeitos

semelhantes tambeacutem foram obtidos com o filtrado de F graminearum a partir da

concentraccedilatildeo 10 e de F solani nas concentraccedilotildees 1 10 e 20

38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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38

Tabela 10 Comprimento de placircntulas de buva submetidas ao tratamento com filtrados de

cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (mm)

Testemunha 0 647 a

Fusarium graminearum

1 529 b

5 600 a

10 524 b

15 479 c

20 546 b

Fusarium solani

1 550 b

5 652 a

10 529 b

15 570 a

20 483 c

Macrophomina phaseolina

1 593 a

5 621 a

10 624 a

15 591 a

20 600 a

Diplodia maydis

1 464 c

5 474 c

10 466 c

15 456 c

20 474 c

CV () 943

Meacutedia Geral 546 Nota letras diferentes correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Apenas o filtrado de M phaseolina natildeo apresentou diferenccedila estatiacutestica significativa

sobre o comprimento quando comparado com a testemunha indicando que este tratamento

natildeo eacute eficiente para controle de crescimento inicial de placircntulas de buva

Na Tabela 11 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila

estatiacutestica na anaacutelise de variacircncia

Tabela 11 Variaacuteveis analisadas em buva em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phaseolina D maydis

IVG y = 0000x

2 - 0029x + 1933 y = 0002x

2 - 0097x + 2088 y = 0001x

2 - 0024x + 1725 y = 0003x

2 - 0121x + 1998

Rsup2 = 085 Rsup2 = 091 Rsup2 = 029 Rsup2 = 087

VG y = 0000x

2 + 0226x + 6879 y = 0010x

2 - 0045x + 7713 y = -0005x

2 + 0038x + 8501 y = -0007x

2 + 0309x + 7478

Rsup2 = 087 Rsup2 = 091 Rsup2 = 032 Rsup2 = 097

Comp (mm) y = 3E-06x

2 - 0004x + 0205 y = -0000x

2 - 0001x + 0188 y = 0000x

2 - 0002x + 0172 y = 0000x

2 - 0006x + 0187

Rsup2 = 087 Rsup2 = 095 Rsup2 = 010 Rsup2 = 099 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 IVG Iacutendice de Velocidade de Germinaccedilatildeo VG velocidade

de germinaccedilatildeo Comp Comprimento em mm

39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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39

Estes resultados indicam que os filtrados de cultura de F graminearum F solani e

D maydis reduzem o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o

comprimento das placircntulas de buva por apresentarem coeficientes de determinaccedilatildeo altos

(R2 maior que 080) (BANZATTO KRONKA 1995)

Observa-se que M phaseolina natildeo apresentou correlaccedilatildeo em todos os paracircmetros

avaliados sendo assim natildeo houve influecircncia deste filtrado sobre a buva

54 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em Bidens pilosa (Picatildeo-preto)

Na Tabela 12 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados na planta invasora picatildeo-preto Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 12 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com picatildeo-preto

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00330 1135 70 0005

IVG 0000 1716 269 0513

VG 00085 1255 667 0957

Comp Raiz 00000 1016 267 0005

Comp PA 00000 1016 387 0086

Massa Fresca 00000 1110 082 0134

Massa Seca 00423 015 0006 0005 Significativo NS natildeo significativo CV coeficiente de germinaccedilatildeo dados anormais (transformados por

x+05) IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo Comp Raiz Comprimento de Raiz Comp PA comprimento de parte aeacuterea

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (GOMES 2000)

Na Tabela 13 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de

velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-

preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura

40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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40

Tabela 13 Porcentagem de germinaccedilatildeo iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo (IVE) e

velocidade de germinaccedilatildeo (VG) em sementes de picatildeo-preto submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () IVG VG

Testemunha 0 84 a 262 b 767 a

Fusarium graminearum

1 68 b 216 b 720 a

5 75 b 233 b 725 a

10 75 b 236 b 732 a

15 69 b 190 b 785 a

20 83 b 322 a 588 b

Fusarium solani

1 83 a 274 a 703 a

5 64 b 202 b 735 a

10 81 a 269 b 680 a

15 65 b 217 b 709 a

20 68 b 285 a 641 b

Macrophomina phaseolina

1 75 b 287 a 618 b

5 75 b 356 a 474 b

10 81 a 359 a 523 b

15 86 a 335 a 582 b

20 75 b 311 a 551 b

Diplodia maydis

1 70 b 209 b 733 a

5 73 b 230 b 814 a

10 84 a 314 a 595 b

15 76 b 243 b 711 a

20 85 a 308 a 633 b

CV () 1135 1716 1255

Meacutedia geral 70 269 668

Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott IVG Iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo VG Velocidade de germinaccedilatildeo

A germinaccedilatildeo das sementes de picatildeo-preto foi afetada negativamente em todas as

concentraccedilotildees quando se utilizou o filtrado de F graminearum e F solani nas

concentraccedilotildees 15 e 20

Corsato et al (2010) observaram que sementes de picatildeo preto apresentaram a

porcentagem de germinaccedilatildeo totalmente inibida quando aplicado o extrato aquoso de folhas

frescas de girassol a 40 indicando que a palhada de girassol poderia servir como

herbicida natural

O IVG foi maior ao se utilizar F graminearum 20 F solani 1 e 20 M phaseolina

em todas as concentraccedilotildees e D maydis 10 e 20 indicando assim que esses filtrados

aumentaram o nuacutemero de sementes germinadas no dia A velocidade de germinaccedilatildeo natildeo foi

afetada negativamente pelos tratamentos aplicados

Borella e Pastorini (2010) verificaram que os paracircmetros porcentagem de

germinaccedilatildeo velocidade de germinaccedilatildeo e iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo foram

41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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41

alterados significativamente proporcionalmente ao aumento da concentraccedilatildeo dos extratos

de frutos do umbu (Phytolacca dioica L)

Na Tabela 14 estatildeo representadas as comparaccedilotildees de meacutedias de comprimento de

raiz e de parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas aos tratamentos com filtrados

de cultura

Tabela 14 Comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de picatildeo preto submetidas ao

tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 240 c 383 b

Fusarium graminearum

1 207 c 412 b

5 184 d 405 b

10 365 b 333 c

15 210 c 406 b

20 252 c 423 b

Fusarium solani

1 219 c 407 b

5 255 c 333 c

10 173 d 297 c

15 141 d 240 d

20 105 d 298 c

Macrophomina phaseolina

1 219 c 464 a

5 279 c 468 a

10 250 c 475 a

15 320 c 493 a

20 296 c 439 a

Diplodia maydis

1 224 c 381 b

5 277 c 246 d

10 498 b 415 b

15 403 b 417 b

20 503 a 402 b

CV ()

1016 1016

Meacutedia Geral

267 387 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Observa-se que entre os tratamentos aplicados o filtrado de F solani foi o que

apresentou maior inibiccedilatildeo de crescimento de raiz nas concentraccedilotildees 15 e 20 e de parte

aeacuterea a partir da concentraccedilatildeo 5 Este efeito inibitoacuterio foi proporcional agrave concentraccedilatildeo do

extrato ou seja quanto maior a concentraccedilatildeo maior o efeito de inibiccedilatildeo do crescimento

O comprimento (radicular e da parte aeacuterea) e a biomassa (fresca e seca) das

placircntulas de alface e picatildeo-preto foram reduzidos significativamente com o aumento da

concentraccedilatildeo dos extratos aquosos de frutos de umbu (BORELLA PASTORINI 2010)

42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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42

Souza Filho e Duarte (2007) obtiveram resultados que mostraram atividade

alelopaacutetica inibitoacuteria com efeito mais intenso na concentraccedilatildeo de 4 de toxinas presentes

no filtrado de cultura produzido por F solani sobre a germinaccedilatildeo de sementes e o

desenvolvimento da radiacutecula e do hipocoacutetilo de maliacutecia (Mimosa pudica L) e mata-pasto

(Senna obstusifolia L) ndash o que tambeacutem se observou nesse trabalho com o uso do filtrado de

Fsolani na inibiccedilatildeo de crescimento de picatildeo-preto

Para biomassa fresca e seca (Tabela 15) novamente o filtrado que apresentou

maior inibiccedilatildeo foi o produzido por F solani o qual reduziu o crescimento da placircntula em

todas as concentraccedilotildees

Tabela 15 Massa fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de cinco placircntulas de picatildeo preto

submetidas ao tratamento com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Testamunha 0 0090 b 0008 a

Fusarium graminearum

1 0082 c 0006 b

5 0079 c 0006 b

10 0072 d 0005 b

15 0081 c 0005 b

20 0086 b 0007 a

Fusarium solani

1 0085 c 0005 b

5 0072 d 0005 b

10 0067 d 0006 b

15 0072 d 0006 b

20 0057 d 0006 b

Macrophomina phaseolina

1 0092 b 0006 b

5 0079 c 0005 b

10 0082 c 0007 a

15 0100 a 0008 a

20 0104 a 0006 b

Diplodia maydis

1 0081 c 0006 b

5 0075 c 0007 a

10 0091 b 0007 a

15 0101 a 0008 a

20 0082 c 0007 a

CV () 1110 015

Meacutedia Geral 0082 0006 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Ferreira e Borghetti (2004) a massa seca da raiz ou parte aeacuterea e o

comprimento das placircntulas satildeo os paracircmetros mais usados para avaliar o efeito alelopaacutetico

sobre o crescimento

43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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43

Na Tabela 16 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) Sobre as placircntulas de picatildeo-preto o filtrado de

Fgraminearum mostrou-se eficiente para inibiccedilatildeo de massa fresca e seca pois

apresentaram forte correlaccedilatildeo (Rsup2 = 081 e Rsup2 = 077 respectivamente) (BANZATTO

KRONKA 1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo fraco

natildeo sendo eficientes para o controle desta invasora

Tabela 16 Variaacuteveis analisadas em picatildeo-preto em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15

e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0083x

2 - 1518x + 7811 y = 0045x

2 - 1615x + 8220 y = -0027x

2 + 0539x + 7817 y = 0035x

2 - 0357x + 7727

Rsup2 = 030 Rsup2 = 043 Rsup2 = 006 Rsup2 = 021

IVG y = 0006x

2 - 0112x + 2528 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = -0007x

2 + 0166x + 2714 y = 1E-04x

2 + 0029x + 2347

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 089 Rsup2 = 034

VG y = -0008x

2 + 0110x + 7279 y = 0004x

2 - 0083x + 2660 y = 0013x

2 - 0326x + 6902 y = 0001x

2 - 0093x + 7699

Rsup2 = 055 Rsup2 = 034 Rsup2 = 057 Rsup2 = 041

Raiz (cm) y = -0004x

2 + 0104x + 2103 y = -0002x

2 - 0028x + 2394 y = -0001x

2 + 0064x + 2298 y = -0006x

2 + 0256x + 2149

Rsup2 = 014 Rsup2 = 089 Rsup2 = 066 Rsup2 = 081

PA (cm) y = 0004x

2 - 0077x + 4041 y = 0006x

2 - 0185x + 4051 y = -0006x

2 + 0140x + 4134 y = 0003x

2 - 0027x + 3594

Rsup2 = 038 Rsup2 = 089 Rsup2 = 064 Rsup2 = 019

M Fresca y = 0000x

2 - 0002x + 0087 y = 5E-05x

2 - 0002x + 0087 y = 0000x

2 - 0002x + 0090 y = -5E-05x

2 + 0001x + 0082

Rsup2 = 081 Rsup2 = 083 Rsup2 = 076 Rsup2 = 013

M Seca y = 2E-05x

2 - 0000x + 0007 y = 1E-05x

2 - 0000x + 0006 y = 5E-07x

2 - 7E-06x + 0006 y = -8E-07x

2 + 3E-05x + 0007

Rsup2 = 077 Rsup2 = 016 Rsup2 = 000 Rsup2 = 004 Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo IVG ldquoIndice de velocidade de germinaccedilatildeo

VG velocidade PA Parte Aeacuterea M Fresca Massa Fresca M seca Massa seca

O filtrado de F solani reduziu o crescimento de raiz e parte aeacuterea e a massa fresca

conforme o aumento da concentraccedilatildeo com altos coeficientes de determinaccedilatildeo (R2 maior que

080)

Os demais filtrados acarretaram acreacutescimo nas meacutedias das variaacuteveis analisadas o

que natildeo foi o objetivo deste estudo que visava controlar as plantas invasoras

Com isso pode-se dizer que o filtrado de F graminearum diminuiu a massa fresca e

seca e o filtrado de F solani reduziu a massa fresca e o crescimento de picatildeo preto

55 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em soja

Na Tabela 17 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados com sementes de soja Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05

44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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44

Tabela 17 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 00000 497 98 0005

Comprimento de Raiz 00000 1078 1031 0542

Comprimento de PA 00000 698 781 0929

Massa Fresca de Raiz 00000 1069 146 0362

Massa Fresca de PA 00000 951 347 0304

Massa Seca de Raiz 00000 892 112 0384

Massa seca de PA 00000 116 030 0005 Significativo dados anormais (transformados por x+05) CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados

transformados (arco seno x100)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas foi menor que 20

indicando homogeneidade dos dados (PIMENTEL GOMES 2000)

Na Tabela 18 satildeo apresentadas meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo de

sementes comprimento de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja submetidas ao tratamento

com filtrados de cultura

A germinaccedilatildeo das sementes foi reduzida com o uso dos filtrados de F graminearum

F solani e M phaseolina O comprimento de raiz de placircntulas foi menor e diferente

estatisticamente quando se utilizou o filtrado de cultura obtido de F graminearum e M

phaseolina nas concentraccedilotildees 5 e 10 Para comprimento de parte aeacuterea os tratamentos

que promoveram menor comprimento foram F solani em todas as concentraccedilotildees e D

Maydis a partir da concentraccedilatildeo 5

No trabalho realizado por Inoue et al (2010) visando ao controle de plantas

invasoras na cultura da soja em que se utilizou extratos preparados com acetato de etila e a

planta Annona rassiflora (Ariticum) observou-se que independentemente da concentraccedilatildeo

avaliada (2 e 4) natildeo houve interferecircncia no desenvolvimento de radiacutecula e hipocoacutetilo de

soja mas reduziu a germinaccedilatildeo e o desenvolvimento de radiacutecula de Brachiaria brizantha

Ipomoea grandifoliae e Euphorbia heterophylla natildeo interferindo no desenvolvimento da soja

45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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45

Tabela 18 Porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de sementes de

soja tratadas com filtrado de cultura de fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo () Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 100 a 1059 c 800 b

Fusarium graminearum

1 97 b 8885 d 914 a

5 96 b 826 d 786 b

10 96 b 863 d 793 b

15 97 b 752 d 826 b

20 100 a 699 d 871 a

Fusarium solani

1 96 b 1186 b 762 c

5 98 b 1062 c 755 c

10 100 a 1197 b 734 c

15 97 b 1051 c 772 c

20 99 a 1011 c 756 c

Macrophomina phaseolina

1 98 b 990 c 807 b

5 99 a 885 d 785 b

10 93 b 866 d 780 b

15 97 b 1037 c 832 b

20 94 b 1017 c 823 b

Diplodia maydis

1 100 a 1556 a 794 b

5 100 a 1181 b 740 c

10 99 a 1087 c 725 c

15 100 a 1259 b 673 c

20 100 a 1179 b 680 c

CV ()

497 1078 698

Meacutedia Geral

98 1031 781 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de Scott-Knott

Os filtrados de cultura de M phaseolina e D maydis diminuiacuteram significativamente a

massa fresca de raiz das placircntulas de soja (Tabela 19) Os demais tratamentos natildeo

apresentaram influecircncia negativa sobre a biomassa das placircntulas

Com o objetivo de avaliar os efeitos de manejos de palhada de capim braquiaacuteria

sobre o desenvolvimento inicial da cultura de soja e da planta invasora amendoim bravo

Maciel et al (2003) constataram que a mateacuteria seca da soja foi reduzida com a incorporaccedilatildeo

da palhada ao solo e proporcionou reduccedilatildeo significativa das placircntulas de soja em relaccedilatildeo agrave

testemunha apenas aos 15 dias apoacutes a emergecircncia (DAE)

46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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46

Tabela 19 Meacutedias de mateacuteria fresca e seca de raiz e parte aeacuterea de placircntulas de soja

submetidas aos tratamentos dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo() Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 c

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 c

5 163 a 316 b 0113 c 0253 c

10 183 a 345 b 0134 b 0253 c

15 166 a 314 b 0128 b 0259 c

20 136 b 279 b 0119 c 0258 c

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 c

5 128 b 311 b 0134 b 0259 c

10 136 b 308 b 0137 b 0276 c

15 134 b 293 b 0145 a 0257 c

20 144 b 284 b 0131 b 0252 c

CV () 1069 951 892 116

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Na Tabela 20 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2)

Pode-se observar que a germinaccedilatildeo apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto

somente para o filtrado de F graminearum (Rsup2 = 083) enquanto que as demais

concentraccedilotildees dos filtrados natildeo explicam essa variaccedilatildeo da caracteriacutestica

O filtrado de cultura de F graminearum diminuiu o comprimento de raiz (Rsup2 = 077)

de placircntulas de soja A regressatildeo tambeacutem mostrou que M phaseolina diminuiu a massa

seca de raiz (Rsup2 = 087) e D maydis de parte aeacuterea (Rsup2 = 074) (BANZATTO e KRONKA

1995) Os demais paracircmetros apresentaram coeficiente de determinaccedilatildeo baixo mostrando

a natildeo - interferecircncia negativa sobre a soja

47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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47

Tabela 20 Variaacuteveis analisadas em soja em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e 20 dos filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Germ y = 0038x

2 - 0709x + 9886 y = 0000x

2 + 0004x + 9820 y = 0013x

2 - 0514x + 9951 y = 0005x

2 - 0115x + 1001

Rsup2 = 083 Rsup2 = 001 Rsup2 = 057 Rsup2 = 038

Raiz (cm) y = 0003x

2 - 0206x + 9779 y = -0007x

2 + 0107x + 1100 y = 0013x

2 - 0261x + 1023 y = 0006x

2 - 0166x + 1282

Rsup2 = 077 Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 006

PA (cm) y = 0006x

2 - 0123x + 8529 y = 0002x

2 - 0065x + 7832 y = 0002x

2 - 0029x + 8014 y = 0002x

2 - 0121x + 8018

Rsup2 = 033 Rsup2 = 046 Rsup2 = 052 Rsup2 = 097

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0002x

2 - 0042x + 1440

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 013

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

56 Efeito dos filtrados de cultura obtidos pelo cultivo de fungos fitopatogecircnicos em meio liacutequido BD (batata dextrose) sobre as variaacuteveis avaliadas em milho

Na Tabela 21 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutesticas dos dados

obtidos com os ensaios realizados nas sementes de milho Os dados que apresentaram

anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados por x+05 Somente a

germinaccedilatildeo natildeo apresentou significacircncia

Tabela 21 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Germinaccedilatildeo 07942ns 464 99 0005

Comp Raiz 00000 826 1226 0005

Comp PA 00000 948 496 0442

Massa Fresca de Raiz 00000 1226 297 0678

Massa Fresca de PA 00000 1220 223 0905

Massa Seca de Raiz 00000 1353 042 0083

Massa seca de PA 00000 1699 023 0006 Significativo ns natildeo significativo dados anormais (transformados por x+05) dados transformados (arco

seno x100)

A porcentagem de germinaccedilatildeo das sementes de milho (Tabela 22) natildeo apresentou

diferenccedila significativa e o comprimento de raiz manteve-se igual ou superior agrave testemunha

indicando que os filtrados de cultura natildeo afetam negativamente a germinaccedilatildeo e o

48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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48

comprimento de raiz desta cultura Jaacute a parte aeacuterea foi afetada negativamente com o uso de

F graminearum na concentraccedilatildeo de 20 e com F solani a partir da concentraccedilatildeo 10

Tabela 22 Meacutedias de porcentagem de germinaccedilatildeo comprimento de raiz e parte aeacuterea de

sementes de milho tratadas com filtrado de cultura de quatro fungos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Germinaccedilatildeo ()ns Comprimento (cm)

Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 99 1130 c 521 a

Fusarium graminearum

1 99 1505 a 523 a

5 99 1421 a 527 a

10 100 1312 b 506 a

15 100 1306 b 524 a

20 99 1259 b 404 c

Fusarium solani

1 100 1542 a 508 a

5 100 1331 b 497 a

10 100 1271 b 442 b

15 99 1129 c 394 c

20 100 1101 c 401 c

Macrophomina phaseolina

1 100 985 c 466 b

5 99 1048 c 505 a

10 99 969 c 539 a

15 100 1128 c 497 a

20 100 1029 c 602 a

Diplodia maydis

1 99 1088 c 461 b

5 100 1101 c 536 a

10 100 1127 c 540 a

15 100 1130 c 568 a

20 100 1223 b 474 b

CV ()

464 847 955

Meacutedia Geral

99 1197 497 Nota letras diferentes nas colunas correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por

x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

Os resultados de massa seca e fresca podem ser observados na Tabela 23 na qual

as meacutedias diferiram entre si Houve reduccedilatildeo de massa fresca de raiz quando se utilizou o

filtrado de F graminearum F solani na concentraccedilatildeo 20 e M phaseolina e D maydis nas

concentraccedilotildees testadas Em contrapartida a massa fresca de parte aeacuterea manteve-se com

meacutedia igual ou superior agrave testemunha

A massa seca acumulada nas placircntulas de milho natildeo foi reduzida mantendo-se

semelhante ou superior para todas as espeacutecies de fungos quando comparadas agrave

testemunha

49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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49

Tabela 23 Influecircncia dos filtrados de cultura sob concentraccedilotildees sobre a massa fresca e seca

de raiz e parte aeacuterea de dez placircntulas de milho CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo () Massa fresca (g) Massa seca (g)

Raiz Parte aeacuterea Raiz Parte aeacuterea

Testemunha 0 168 a 286 b 0109 c 0252 b

Fusarium graminearum

1 125 b 424 a 0117 c 0364 a

5 138 b 388 a 0113 c 0347 a

10 152 b 375 a 0125 b 0341 a

15 168 a 391 a 0132 b 0358 a

20 114 b 368 a 0108 c 0355 a

Fusarium solani

1 180 a 344 b 0106 c 0268 b

5 163 a 316 b 0113 c 0253 b

10 183 a 345 b 0134 b 0253 b

15 166 a 314 b 0128 b 0259 b

20 136 b 279 b 0119 c 0258 b

Macrophomina phaseolina

1 135 b 394 a 0108 c 0325 b

5 140 b 404 a 0114 c 0331 b

10 133 b 366 a 0118 c 0323 b

15 142 b 408 a 0116 c 0329 b

20 139 b 391 a 0125 b 0343 a

Diplodia maydis

1 112 b 303 b 0154 a 0259 b

5 128 b 311 b 0134 b 0259 b

10 136 b 308 b 0137 b 0276 b

15 134 b 293 b 0145 a 0257 b

20 144 b 284 b 0131 b 0252 b

CV () 1069 951 892 622

Meacutedia Geral 144 347 012 0298 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de significacircncia pelo teste de

Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade

De acordo com Faria et al (2009) o extrato de milheto interferiu positivamente no

comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo de placircntulas de milho Entretanto

natildeo foram verificadas diferenccedilas significativas para o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo e

para a porcentagem de germinaccedilatildeo Ainda segundo os mesmos autores resultados

diferentes foram obtidos com doses crescentes de extrato de Pinus os quais

proporcionaram diminuiccedilatildeo no comprimento de radiacutecula e no comprimento de hipocoacutetilo do

milho

Tambeacutem Tokura e Noacutebrega (2005) verificaram que os extratos aquosos de plantas

de trigo aveia-preta milheto nabo forrageiro e colza apresentaram efeito alelopaacutetico em

placircntulas de milho

Na Tabela 24 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo (R2) para as variaacuteveis analisadas em milho

50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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50

Tabela 24 Variaacuteveis analisadas em milho em funccedilatildeo das concentraccedilotildees 0 1 5 10 15 e

20 dos filtrados de cultura

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Raiz (cm) y = -001x

2 + 0162x + 1308 y = -0007x

2 + 0027x + 1325 y = 0003x

2 - 0065x + 1062 y = 0005x

2 - 0060x + 1114

Rsup2 = 014 Rsup2 = 038 Rsup2 = 004 Rsup2 = 088

PA (cm) y = -0006x

2 + 0072x + 5146 y = 0001x

2 - 0100x + 5245 y = 0003x

2 - 0028x + 5014 y = -0006x

2 + 0138x + 4850

Rsup2 = 082 Rsup2 = 094 Rsup2 = 059 Rsup2 = 053

M Fresca Raiz

y = -0002x2 + 0032x + 1421 y = -0002x

2 + 0028x + 1690 y = 0001x

2 - 0032x + 1536 y = 0001x

2 - 003x + 1427

Rsup2 = 021 Rsup2 = 074 Rsup2 = 038 Rsup2 = 014

M Seca Raiz

y = -0000x2 + 0003x + 0108 y = -0000x

2 + 0004x + 0104 y = 4E-07x

2 + 0000x + 0108 y = -0000x

2 + 0002x + 0127

Rsup2 = 057 Rsup2 = 081 Rsup2 = 087 Rsup2 = 015

M Fresca PA

y = -0003x2 + 0086x + 3471 y = -0004x

2 + 0072x + 3065 y = -0003x

2 + 0100x + 3364 y = -0002x

2 + 0035x + 2937

Rsup2 = 017 Rsup2 = 056 Rsup2 = 036 Rsup2 = 074

M seca PA

y = -0000x2 + 0008x + 0302 y = 4E-05x

2 - 0000x + 0258 y = -0000x

2 + 0006x + 0286 y = -0000x

2 + 0003x + 0253

Rsup2 = 035 Rsup2 = 009 Rsup2 = 049 Rsup2 = 062 Modelo de regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0 Germ Germinaccedilatildeo PA Parte aeacuterea M Fresca Raiz Massa

Fresca de Raiz M Seca Raiz Massa seca de raiz M Fresca PA Massa Fresca de Parte aeacuterea M Seca PA Massa Seca de Parte aeacuterea

Esses resultados indicam que as concentraccedilotildees dos filtrados de F graminearum e F

solani diminuiacuteram o crescimento de parte aeacuterea no milho apresentando coeficientes de

determinaccedilatildeo altos (R2 =082 e R2 = 095 respectivamente)

57 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em soja em casa de vegetaccedilatildeo

Na Tabela 25 estatildeo descritos os resultados das anaacutelises estatiacutestica dos dados

obtidos com os ensaios realizados em casa de vegetaccedilatildeo na soja Os dados que

apresentaram anormalidade (p-valor menor que 005) foram transformados em x+05

Tabela 25 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com soja sob pulverizaccedilotildees com filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Iacutendice de clorofila total 00031 392 3506 0139

Aacuterea foliar 00058 2041 4928 0008

Massa fresca 00018 2666 659 0225

Massa seca 00031 2741 157 0118 Significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para o teor de clorofila (392) apresentou alta

homogeneidade jaacute para a aacuterea foliar massa fresca e massa seca (CV= 2041 2666 e

2741 respectivamente) apresentaram baixa homogeneidade (PIMENTEL GOMES 2000)

51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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51

Natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo caracterizado por manchas

foliares nos tratamentos aplicados sobre as plantas de soja

Com relaccedilatildeo ao iacutendice de clorofila total (Tabela 26) verificou-se que o filtrado de

cultura de M phaseolina apresentou menor meacutedia na menor concentraccedilatildeo aplicada (1)

diferindo estatisticamente quando comparada com a testemunha O filtrado de F solani a

partir da concentraccedilatildeo 10 e o de F graminearum a partir da concentraccedilatildeo 5 diminuiacuteram

o teor de clorofila total Jaacute o filtrado de M phaseolina diminuiu o teor de clorofila nas

concentraccedilotildees de 5 15 e 20 quando comparado com a testemunha

Tabela 26 Meacutedias de iacutendice de clorofila (ICL) total e aacuterea foliar do trifoacutelio mais jovem totalmente expandido em plantas de soja submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Clorofila total (ICL) Aacuterea foliar (cm2)

Aacutegua 0 362 a 5737 a

Macrophomina phaseolina

1 349 b 5916 a

5 361 a 5367 a

10 358 a 5099 a

15 364 a 4968 a

20 374 a 4588 b

Fusarium solani

1 354 a 5312 a

5 357 a 6593 a

10 346 b 4564 b

15 348 b 5539 a

20 339 b 3709 b

Fusarium graminearum

1 36 a 3795 b

5 347 b 4528 b

10 335 b 4117 b

15 329 b 3372 b

20 335 b 4749 b

Diplodia maydis

1 354 a 5267 a

5 347 b 5301 a

10 355 a 4949 a

15 349 b 5217 a

20 344 b 4806 b

Meacutedia Geral 351 4928

CV () 392 2041

Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott -Knott a 5de probabilidade

O teor de clorofila tem relaccedilatildeo direta com a produccedilatildeo de energia na planta ou seja

com o processo fotossinteacutetico essencial para a vida e o desenvolvimento da planta

(KERBAUY 2004)

Analisando os valores de aacuterea foliar percebe-se que os filtrados de M phaseolina S

solani e D maydis na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a aacuterea foliar Jaacute o filtrado de

52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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52

Fgraminearum em todas as concentraccedilotildees apresentou diminuiccedilatildeo na aacuterea foliar da soja

quando comparado com a testemunha

As superfiacutecies foliares permitem a interceptaccedilatildeo de luz e trocas gasosas eficientes

com a atmosfera principalmente para a aquisiccedilatildeo do CO2 que em conjunto com a aacutegua e

com a energia solar satildeo convertidos e armazenados em moleacuteculas orgacircnicas ricas em

energia (KERBAUY 2004) Assim quanto menor a superfiacutecie foliar menor eacute a capacidade

de transformar a energia luminosa em energia quiacutemica Nesse trabalho os tratamentos com

os filtrados de M phaseolina S solani e D maidys na concentraccedilatildeo de 20 diminuiacuteram a

aacuterea foliar das plantas de soja

Em relaccedilatildeo agrave massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja (Tabela 27) os

filtrados de cultura aumentaram ou mantiveram-se igual agrave testemunha natildeo apresentando

influecircncia negativa sobre essas variaacuteveis

Tabela 27 Meacutedias de massa fresca e seca de parte aeacuterea de plantas de soja submetidas a

aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Massa (g)

Fresca Seca

Aacutegua 0 735 b 181 b

Macrophomina phaseolina

1 945 b 172 b

5 740 b 173 b

10 733 b 185 b

15 708 b 226 b

20 713 b 182 b

Fusarium solani

1 690 b 163 b

5 835 b 195 b

10 613 a 144 a

15 738 b 175 b

20 773 b 097 a

Fusarium graminearum

1 555 a 129 a

5 573 a 136 a

10 435 a 108 a

15 365 a 088 a

20 400 a 168 b

Diplodia maydis

1 673 b 160 b

5 733 b 181 b

10 620 a 142 a

15 738 b 174 b

20 538 a 130 a

Meacutedia Geral 659 158

CV () 2666 2741 Nota Meacutedias seguidas de mesma letra na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Skott-Knott a 5de probabilidade

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

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Maria v 41 n 4 p 599-601 2011 YAMASHITA O M GUIMARAtildeES S C Conyza bonariensis em funccedilatildeo da disponibilidade hiacutedrica no substrato Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 2 p 309-17 2010

53

Com o objetivo de avaliar os possiacuteveis efeitos alelopaacuteticos da fraccedilatildeo aquosa de

extrato de plantas de milheto sobre plantas de soja Maller et al (2010b) observaram que a

mateacuteria seca total foi maior em plantas tratadas com o extrato na concentraccedilatildeo 500 mg L -1 e

menores nas concentraccedilotildees 250 e 1000 mg L-1

Na Tabela 28 apresentam-se as equaccedilotildees de regressatildeo polinomial e os respectivos

coeficientes de determinaccedilatildeo para os paracircmetros que apresentaram diferenccedila estatiacutestica na

anaacutelise de variacircncia

Tabela 28 Variaacuteveis analisadas em soja cultivada em casa de vegetaccedilatildeo em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees

Paracircmetro F graminearum F solani M phasealina D maydis

Teor de clorofila y = 0014x

2 - 0426x+3633 y = -3E-05x

2 - 0094x +3590 y = 0006x

2 - 0040x +3571 y = 0000x

2 - 0075x +3572

Rsup2 = 099 Rsup2 = 084 Rsup2 = 068 Rsup2 = 054

Aacuterea foliar y = 0101x

2 - 2280x+5052 y = -0081x

2 + 0740x +5629 y = 0009x

2 - 0781x +5829 y = 0011x

2 - 0546x +5531

Rsup2 = 038 Rsup2 = 056 Rsup2 = 095 Rsup2 = 066 Nota Modelo regressatildeo polinomial Y = b2x

2+b1x+ b0

Na anaacutelise de regressatildeo se confirma que o filtrado de cultura de F graminearum e F

Solani diminuiacuteram o teor de clorofila conforme aumentaram as concentraccedilotildees pois possuem

coeficiente de determinaccedilatildeo (R2) alto (099 e 084 respectivamente) (BANZATTO 1995)

O filtrado de M phaseolina apresentou coeficiente de determinaccedilatildeo alto (Rsup2 = 095)

para aacuterea foliar confirmando assim que as concentraccedilotildees do filtrado de cultura influenciam

negativamente a aacuterea foliar da soja

Estes resultados indicam que a diminuiccedilatildeo do teor de clorofila e da aacuterea foliar eacute

explicada pelo aumento da concentraccedilatildeo dos tratamentos aplicados

58 Efeito da aplicaccedilatildeo dos filtrados de cultura sobre as variaacuteveis avaliadas em milho em casa de vegetaccedilatildeo

O coeficiente de variaccedilatildeo (CV) para as variaacuteveis avaliadas em milho natildeo apresentou

homogeneidade pois estatildeo acima de 20 (PIMENTEL GOMES 2000) e tambeacutem se

observa que os dados apresentaram anormalidade sendo transformados em x+05 (Tabela

29)

Tabela 29 Resultados da anaacutelise de variacircncia (ANOVA) e anaacutelise descritiva dos dados das

variaacuteveis analisadas nos ensaios com milho em funccedilatildeo das aplicaccedilotildees de filtrados de cultura de fungos fitopatogecircnicos sob concentraccedilotildees em casa de vegetaccedilatildeo CascavelPR 2011

Variaacuteveis p-valor ANOVA CV () Meacutedia Normalidade

Aacuterea foliar 00163 4861 17125 0005

Massa fresca 01321 ns

3117 1267 0005

Massa seca 03072 ns

2747 115 0005 Significativo ns natildeo-significativo CV Coeficiente de Variaccedilatildeo dados anormais (transformados por x+05)

54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

56

7 REFEREcircNCIAS

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54

Assim como na soja natildeo foram encontrados sintomas de fitointoxicaccedilatildeo nos

tratamentos aplicados sobre as plantas de milho

Na Tabela 30 estatildeo apresentadas as meacutedias para aacuterea foliar e massa seca e fresca

em plantas de milho tratadas com filtrados de cultura sob concentraccedilotildees

Pode-se observar que a aacuterea foliar de plantas de milho tratadas com o filtrado de M

phaseolina nas concentraccedilotildees 1 10 e 15 diferiu estatisticamente e foi superior agrave

testemunha Os demais tratamentos se mantiveram estatisticamente iguais agrave testemunha

As variaacuteveis massa fresca e massa seca natildeo diferiram entre si

Tabela 30 Meacutedias de teor de aacuterea foliar massa fresca e massa seca em plantas de milho

submetidas agrave aplicaccedilatildeo de filtrados de cultura sob concentraccedilotildees CascavelPR 2011

Tratamento Concentraccedilatildeo Aacuterea foliar (cm2) Massa fresca ns Massa seca ns

Aacutegua 0 11608 b 1854 175

Macrophomina phaseolina

1 12012 b 1074 122

5 8652 b 660 081

10 20718 b 1533 167

15 13891 b 1376 144

20 19145 b 1262 138

Fusarium solani

1 16673 b 1449 164

5 14805 b 1320 156

10 14417 b 1176 129

15 16645 b 1111 130

20 10980 b 935 123

Fusarium graminearum

1 18407 b 1747 173

5 15230 b 924 101

10 14790 b 1102 114

15 13878 b 776 087

20 15506 b 926 105

Diplodia maydis

1 24736 a 1800 189

5 18264 b 1208 123

10 35634 a 2912 279

15 25925 a 1872 181

20 17717 b 1263 127

Meacutedia Geral 17125 1267 115

CV () 4861 3117 2747 Nota letras diferentes na coluna correspondem a meacutedias diferentes ao niacutevel de 5 de probabilidade pelo teste

de Scott-Knott Os dados apresentados satildeo os obtidos das observaccedilotildees originais e transformados por x+05 para os que natildeo apresentaram normalidade ns natildeo significativo

Esses resultados indicam que os filtrados de cultura aplicados natildeo apresentaram

efeitos negativos sobre as plantas de milho cultivadas em casa de vegetaccedilatildeo

55

6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

filtrados de cultura em entre safras ou como dessecante

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7 REFEREcircNCIAS

AGOSTINETTO D VARGAS L Resistecircncia de plantas daninhas a herbicidas no Brasil Passo Fundo Bethier 2009

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58

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6 CONCLUSOtildeES

Nas condiccedilotildees em que foi realizado este experimento pode-se concluir que

O filtrado de cultura de Fusarium solani reduziu o iacutendice de velocidade de

germinaccedilatildeo a velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva reduziu a

massa fresca e o crescimento de placircntulas de picatildeo-preto e parte aeacuterea e massa fresca de

parte aeacuterea de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente a soja

O filtrado de Diplodia maydis reduziu o iacutendice de velocidade de germinaccedilatildeo a

velocidade de germinaccedilatildeo e o comprimento de placircntulas de buva diminuiu o crescimento de

parte aeacuterea de amendoiacutem bravo ndash sem afetar negativamente a cultura do milho

E o filtrado de Macrophomina phaseolina diminuiu o crescimento de parte aeacuterea de

placircntulas de amendoim bravo ndash sem afetar negativamente o milho

Sugere-se neste caso que esses filtrados podem ser utilizados para controle das

plantas invasoras em questatildeo como alternativa ecologicamente correta na reduccedilatildeo do

consumo de herbicidas e na proteccedilatildeo ao ambiente Outra sugestatildeo seria a aplicaccedilatildeo dos

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FERREIRA T N SCHWARZ R A STRECK E V Solos manejo integrado e ecoloacutegico -

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GERWICK B C et al Pyridazocidin a new microbial phytotoxin with activity in the mehler reaction Weed Science v 45 p 654-57 1997

HENNING A A Manejo de doenccedilas da soja (Glycine max L Merrill) Informativo Abrates

Londrina v 19 n 3 2009 HOAGLAND R E Microbes and microbial products as herbicides an overview In HOAGLAND R E (Ed) Microbes and microbial products as herbicides Washington ACS Books p 2-52 (American Chemical Society Symposium Series 439) 1990 INOUE M H SANTANA DC SOUZA FILHO A P S POSSAMAI A C S SILVA L E PEREIRA M J B e PEREIRA K M Potencial alelopaacutetico de Annona crassiflora efeitos sobre plantas daninhas Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 3 p 489-98 2010

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1984 LORENZI H Manual de identificaccedilatildeo e controle de plantas daninhas plantio direto e

convencional 6 ed Nova Odessa Satildeo Paulo Instituto Plantarum 2006 LORENZI H Plantas daninhas do Brasil terrestres aquaacuteticas parasitas e toxicas 3 ediccedilatildeo Nova Odessa SP Instituto Plantarum 2000 MACIEL C D G CORREcircA M R ALVES E NEGRISOLI E VELINI E D RODRIGUES J D ONO E O BOARO C F Influecircncia do manejo da palhada de capim-braquiaacuteria (brachiaria decumbens) sobre o desenvolvimento inicial de soja (glycine max) e amendoim-bravo (euphorbia heterophylla) Planta Daninha Viccedilosa-MG v 21 n 3 p365-

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MAGUIRE J D Seeds of germination-aid selection and evaluation seedling emergence and vigor Crop Science Madison v 2 p 176-177 1962

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2010b - Centro de Convenccedilotildees - Ribeiratildeo Preto ndash SP MARCOS FILHO J CIacuteCERO S M SILVA W R Avaliaccedilatildeo da qualidade fisioloacutegica das sementes Piracicaba FEALQ 1987 230p MARIO J L REIS E M Meacutetodo simples para diferenciar Diplodia macrospora de D maydis em testes de patologia de sementes de milho Fitopatologia brasileira Brasiacutelia v 26 n 3 p 670-72 2001 METHA Y R BROGNIN R L Phytotoxicity of a culture filtrate produced by Stemphylium solani of cotton Plant Disease v 84 n 8 p 838-42 2000 MIZUTANI J Selected allelochemicals Critical Reviews in Plant Sciences London v 18

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SOUZA-FILHO A P S Ecologia quiacutemica a experiecircncia brasileira Beleacutem PA Embrapa

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WEIHM DIDON UME RONNBERG-WASTLJUNG A-C BJORKMAN C Integrated agricultural research and crop breeding Allelopathic weed control in cereals and long-term productivity in perennial biomass crops Agricultural Systems Wageningen v 97 n 3 p

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7 REFEREcircNCIAS

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Maria v 41 n 4 p 599-601 2011 YAMASHITA O M GUIMARAtildeES S C Conyza bonariensis em funccedilatildeo da disponibilidade hiacutedrica no substrato Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 2 p 309-17 2010

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FERREIRA A G Interferecircncia Competiccedilatildeo e Alelopatia In FERREIRA A G BORGHETTI F Germinaccedilatildeo do baacutesico ao aplicado 2a ed Porto Alegre Artmed 2004

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FERREIRA T N SCHWARZ R A STRECK E V Solos manejo integrado e ecoloacutegico -

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Londrina v 19 n 3 2009 HOAGLAND R E Microbes and microbial products as herbicides an overview In HOAGLAND R E (Ed) Microbes and microbial products as herbicides Washington ACS Books p 2-52 (American Chemical Society Symposium Series 439) 1990 INOUE M H SANTANA DC SOUZA FILHO A P S POSSAMAI A C S SILVA L E PEREIRA M J B e PEREIRA K M Potencial alelopaacutetico de Annona crassiflora efeitos sobre plantas daninhas Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 3 p 489-98 2010

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KISSMANN Kurt Gottfried GROTH Doris Plantas infestantes e nocivas 2 ediccedilatildeo ndash Satildeo

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1984 LORENZI H Manual de identificaccedilatildeo e controle de plantas daninhas plantio direto e

convencional 6 ed Nova Odessa Satildeo Paulo Instituto Plantarum 2006 LORENZI H Plantas daninhas do Brasil terrestres aquaacuteticas parasitas e toxicas 3 ediccedilatildeo Nova Odessa SP Instituto Plantarum 2000 MACIEL C D G CORREcircA M R ALVES E NEGRISOLI E VELINI E D RODRIGUES J D ONO E O BOARO C F Influecircncia do manejo da palhada de capim-braquiaacuteria (brachiaria decumbens) sobre o desenvolvimento inicial de soja (glycine max) e amendoim-bravo (euphorbia heterophylla) Planta Daninha Viccedilosa-MG v 21 n 3 p365-

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MAGIERO E C ASSMANN J M MARCHESE J A CAPELIN D PALADINI M V TREZZI M M Efeito alelopaacutetico de Artemisia annua L na germinaccedilatildeo e desenvolvimento inicial de placircntulas de alface (Lactuca sativa L) e leiteiro (Euphorbia heterophylla L) Revista Brasileira de Plantas Medicinais Botucatu v 11 n 3 p317-324 2009

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MALLER A SILVA H A REIS B MARQUES R M MOREIRA F C BONATO C M Extrato aquoso e homeopatia de titonia no crescimento de amendoim bravo XXVII Congresso Brasileiro da Ciecircncia das Plantas Daninhas 19 a 23 de julho de 2010a Centro de Convenccedilotildees Ribeiratildeo Preto - SP pag 18-21 MALLER A SILVA H A MELGES E SERT M A IWAMOTO E L I BONATO C Crescimento de plantas de soja e de amendoim-bravo tratadas com extrato aquoso de milheto XXVII Congresso Brasileiro da Ciecircncia das Plantas Daninhas 19 a 23 de julho de

2010b - Centro de Convenccedilotildees - Ribeiratildeo Preto ndash SP MARCOS FILHO J CIacuteCERO S M SILVA W R Avaliaccedilatildeo da qualidade fisioloacutegica das sementes Piracicaba FEALQ 1987 230p MARIO J L REIS E M Meacutetodo simples para diferenciar Diplodia macrospora de D maydis em testes de patologia de sementes de milho Fitopatologia brasileira Brasiacutelia v 26 n 3 p 670-72 2001 METHA Y R BROGNIN R L Phytotoxicity of a culture filtrate produced by Stemphylium solani of cotton Plant Disease v 84 n 8 p 838-42 2000 MIZUTANI J Selected allelochemicals Critical Reviews in Plant Sciences London v 18

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OLIVEIRA NETO A M CONSTANTIN J OLIVEIRA JR RS GUERRA N DAN HA ALONSO DG BLAINSKI E SANTOS G Estrateacutegias de manejo de inverno e veratildeo visando ao controle de Conyza bonariensise Bidens pilosa Planta Daninha Viccedilosa v 28

n spe p 1107-16 2010 OLIVEIRA A M MARACAJAacute P B DINIZ FILHO E T LINHARES P C F Controle bioloacutegico de pragas em cultivos comerciais como alternativa ao uso de agrotoacutexicos Revista Verde de Agroecologia e Desenvolvimento Sustentaacutevel Mossoroacute v 1 n 2 p01-09

2006 OLIVEIRA A S SAacute H B de Taxonomic studies of the Euphorbiaceae JUSS family-I Euphorbiae heterophylla L and Euphorbiae cyathophora MURR Sellowia Itajaiacute v 150 n

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PIMENTEL GOMES F Curso de estatiacutestica experimental 14ed Piracicaba Nobel 2000

477p PONCHIO J A R Resistecircncia de bioacutetipos de Bidens pilosa L a herbicidas inibidores da enzima ALSAHAS Piracicaba Escola Superior de Agricultura ldquoLuiz de Queirozrdquo 1997

120 p (Tese de DS) PROZESKY L KELLERMAN T S SWART D P Perinatal mortality in lambs of ewes exposed to cultures od Diplodia maydis during gestation A study on the central-nervous-system lesions Onderstepoort Journal of Veterinary Research Tygervalley 61247-253 1994 RAVEN P EVERT R F EICHHORN S E Biologia vegetal 6a ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2001 REIS E M Doenccedilas do trigo III ndash Giberela 2 ed revisada e ampliada 1988 13p RICE E L Allelopathy 2 ed New York Academic Press 1984 267 p

RIZZARDI M A VIDAL R A FLECK N G AGOSTINETTO D Resistecircncia de plantas aos herbicidas inibidores da acetolactato sintase Planta Daninha Viccedilosa v 20 n 1 abr

2002 SANTOS L S OLIVEIRA M N GUILHON G M S P SANTOS A S FERREIRA I C S LOPES-JUacuteNIOR M L ARRUDA M S P SAILVA M N OLIVEIRA MCF Potencial herbicida da biomassa e de substacircncias quiacutemicas produzidas pelo fungo endofiacutetico pestalotiopsis guepinii Planta Daninha Viccedilosa v 26 n 3 p 539-48 2008 SAXENA S PANDEY A K Microbial metabolites as eco- friendly agrochemicals for the next millennium Appliend Microbiology and Biotechnology Berlin v 55 n 4 p 395-403 2001 SILVA A A e SILVA J F Toacutepicos em manejo de plantas daninhas Viccedilosa Ed UFV 2007 SILVA A A FERREIRA F A FERREIRA L R SANTOS J B Biologia de plantas daninhas Cap 1 p 17-61 In SILVA A A SILVA J F Toacutepicos em manejo de plantas daninhas Viccedilosa UFV 2007 366 p

SOCIEDADE BRASILEIRA DA CIEcircNCIA DAS PLANTAS DANINHAS Procedimentos para instalaccedilatildeo avaliaccedilatildeo e anaacutelise de experimentos com herbicidas Londrina SBCPD

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1982 TOKURA L K NOacuteBREGA L H P Alelopatia de cultivos de cobertura vegetal sobre plantas Infestantes Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 28 n 3 p 379-84 2006 TOKURA L K NOacuteBREGA L H P Potencial alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal no desenvolvimento de placircntulas de milho Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 27 n 2

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MALLER A SILVA H A REIS B MARQUES R M MOREIRA F C BONATO C M Extrato aquoso e homeopatia de titonia no crescimento de amendoim bravo XXVII Congresso Brasileiro da Ciecircncia das Plantas Daninhas 19 a 23 de julho de 2010a Centro de Convenccedilotildees Ribeiratildeo Preto - SP pag 18-21 MALLER A SILVA H A MELGES E SERT M A IWAMOTO E L I BONATO C Crescimento de plantas de soja e de amendoim-bravo tratadas com extrato aquoso de milheto XXVII Congresso Brasileiro da Ciecircncia das Plantas Daninhas 19 a 23 de julho de

2010b - Centro de Convenccedilotildees - Ribeiratildeo Preto ndash SP MARCOS FILHO J CIacuteCERO S M SILVA W R Avaliaccedilatildeo da qualidade fisioloacutegica das sementes Piracicaba FEALQ 1987 230p MARIO J L REIS E M Meacutetodo simples para diferenciar Diplodia macrospora de D maydis em testes de patologia de sementes de milho Fitopatologia brasileira Brasiacutelia v 26 n 3 p 670-72 2001 METHA Y R BROGNIN R L Phytotoxicity of a culture filtrate produced by Stemphylium solani of cotton Plant Disease v 84 n 8 p 838-42 2000 MIZUTANI J Selected allelochemicals Critical Reviews in Plant Sciences London v 18

n 5 p 653-71 1999 MORAES W B C Controle alternativo de fitopatoacutegenos Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira Brasiacutelia v 27 sn p 175-90 1992 NAKAGAWA J Testes de vigor baseados no desempenho das placircntulas cap 2 In KRZYZANOWSKI FC VIEIRA RD NETO J B F (Ed) Vigor de sementes conceitos e

testes Associaccedilatildeo Brasileira de Tecnologia de Sementes Comitecirc de vigor de sementes Londrina ABRATES 1999 246 p NOacuteBREGA L H P PICCOLO-LIMA G MARTINS G I e MENEGHETTI A M Germinaccedilatildeo de sementes e crescimento de placircntulas de soja (Glycine max L Merrill) sob cobertura vegetal Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 31 n 3 p 461-5 2009

OLIVEIRA NETO A M CONSTANTIN J OLIVEIRA JR RS GUERRA N DAN HA ALONSO DG BLAINSKI E SANTOS G Estrateacutegias de manejo de inverno e veratildeo visando ao controle de Conyza bonariensise Bidens pilosa Planta Daninha Viccedilosa v 28

n spe p 1107-16 2010 OLIVEIRA A M MARACAJAacute P B DINIZ FILHO E T LINHARES P C F Controle bioloacutegico de pragas em cultivos comerciais como alternativa ao uso de agrotoacutexicos Revista Verde de Agroecologia e Desenvolvimento Sustentaacutevel Mossoroacute v 1 n 2 p01-09

2006 OLIVEIRA A S SAacute H B de Taxonomic studies of the Euphorbiaceae JUSS family-I Euphorbiae heterophylla L and Euphorbiae cyathophora MURR Sellowia Itajaiacute v 150 n

40 p5-31 1998

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PIMENTEL GOMES F Curso de estatiacutestica experimental 14ed Piracicaba Nobel 2000

477p PONCHIO J A R Resistecircncia de bioacutetipos de Bidens pilosa L a herbicidas inibidores da enzima ALSAHAS Piracicaba Escola Superior de Agricultura ldquoLuiz de Queirozrdquo 1997

120 p (Tese de DS) PROZESKY L KELLERMAN T S SWART D P Perinatal mortality in lambs of ewes exposed to cultures od Diplodia maydis during gestation A study on the central-nervous-system lesions Onderstepoort Journal of Veterinary Research Tygervalley 61247-253 1994 RAVEN P EVERT R F EICHHORN S E Biologia vegetal 6a ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2001 REIS E M Doenccedilas do trigo III ndash Giberela 2 ed revisada e ampliada 1988 13p RICE E L Allelopathy 2 ed New York Academic Press 1984 267 p

RIZZARDI M A VIDAL R A FLECK N G AGOSTINETTO D Resistecircncia de plantas aos herbicidas inibidores da acetolactato sintase Planta Daninha Viccedilosa v 20 n 1 abr

2002 SANTOS L S OLIVEIRA M N GUILHON G M S P SANTOS A S FERREIRA I C S LOPES-JUacuteNIOR M L ARRUDA M S P SAILVA M N OLIVEIRA MCF Potencial herbicida da biomassa e de substacircncias quiacutemicas produzidas pelo fungo endofiacutetico pestalotiopsis guepinii Planta Daninha Viccedilosa v 26 n 3 p 539-48 2008 SAXENA S PANDEY A K Microbial metabolites as eco- friendly agrochemicals for the next millennium Appliend Microbiology and Biotechnology Berlin v 55 n 4 p 395-403 2001 SILVA A A e SILVA J F Toacutepicos em manejo de plantas daninhas Viccedilosa Ed UFV 2007 SILVA A A FERREIRA F A FERREIRA L R SANTOS J B Biologia de plantas daninhas Cap 1 p 17-61 In SILVA A A SILVA J F Toacutepicos em manejo de plantas daninhas Viccedilosa UFV 2007 366 p

SOCIEDADE BRASILEIRA DA CIEcircNCIA DAS PLANTAS DANINHAS Procedimentos para instalaccedilatildeo avaliaccedilatildeo e anaacutelise de experimentos com herbicidas Londrina SBCPD

1995 42p SOUZA FILHO A P S DUARTE M L R Atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por Fusarium solani Planta Daninha Viccedilosa v 25 n 1 p 227-30 2007

SOUZA A P S F RODRIGUES R R A RODRIGUES T J D Efeito do potencial alelopaacutetico de trecircs leguminosas forrageiras sobre trecircs invasoras de pastagens Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira Brasiacutelia v 32 n 2 1997

SOUZA-FILHO A P S Ecologia quiacutemica a experiecircncia brasileira Beleacutem PA Embrapa

Amazocircnia Oriental 2008 STROBEL G DAISY B CASTILLO U HARPER J Natural products from endophytic microorganisms Journal of Natural Products India v 67 n 2 p 257-68 2004

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SUTTON JC Epidemiology of wheat head blight and maize ear rot caused by Fusarium graminearum Canadian Journal of Plant Pathology Canadian v 4 n 2 p195-209

1982 TOKURA L K NOacuteBREGA L H P Alelopatia de cultivos de cobertura vegetal sobre plantas Infestantes Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 28 n 3 p 379-84 2006 TOKURA L K NOacuteBREGA L H P Potencial alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal no desenvolvimento de placircntulas de milho Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 27 n 2

p 287-92 2005 VARGAS L BIANCHI MA RIZZARDI MA AGOSTINETTO D e DAL MAGRO T Buva Conyza bonariensis) resistente ao glyphosate na regiatildeo sul do Brasil Planta DaninhaViccedilosa v 25 n 3 p 573-78 2007

VIECELLI C A STANGARLIN J R KUHN O J SCHWAN-ESTRADA K R F Induccedilatildeo de resistecircncia em feijoeiro por filtrado de cultura de Pycnoporus sanguineus contra Pseudocercospora griseola Tropical Plant Pathology Brasiacutelia v 34 n 2 2009

WEIHM DIDON UME RONNBERG-WASTLJUNG A-C BJORKMAN C Integrated agricultural research and crop breeding Allelopathic weed control in cereals and long-term productivity in perennial biomass crops Agricultural Systems Wageningen v 97 n 3 p

99ndash107 2008 YAMASHITA O M GUIMARAES S C Germinaccedilatildeo de sementes de Conyza canadensis e C bonariensis em funccedilatildeo da presenccedila de alumiacutenio no substrato Ciecircncia Rural Santa

Maria v 41 n 4 p 599-601 2011 YAMASHITA O M GUIMARAtildeES S C Conyza bonariensis em funccedilatildeo da disponibilidade hiacutedrica no substrato Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 2 p 309-17 2010

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120 p (Tese de DS) PROZESKY L KELLERMAN T S SWART D P Perinatal mortality in lambs of ewes exposed to cultures od Diplodia maydis during gestation A study on the central-nervous-system lesions Onderstepoort Journal of Veterinary Research Tygervalley 61247-253 1994 RAVEN P EVERT R F EICHHORN S E Biologia vegetal 6a ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2001 REIS E M Doenccedilas do trigo III ndash Giberela 2 ed revisada e ampliada 1988 13p RICE E L Allelopathy 2 ed New York Academic Press 1984 267 p

RIZZARDI M A VIDAL R A FLECK N G AGOSTINETTO D Resistecircncia de plantas aos herbicidas inibidores da acetolactato sintase Planta Daninha Viccedilosa v 20 n 1 abr

2002 SANTOS L S OLIVEIRA M N GUILHON G M S P SANTOS A S FERREIRA I C S LOPES-JUacuteNIOR M L ARRUDA M S P SAILVA M N OLIVEIRA MCF Potencial herbicida da biomassa e de substacircncias quiacutemicas produzidas pelo fungo endofiacutetico pestalotiopsis guepinii Planta Daninha Viccedilosa v 26 n 3 p 539-48 2008 SAXENA S PANDEY A K Microbial metabolites as eco- friendly agrochemicals for the next millennium Appliend Microbiology and Biotechnology Berlin v 55 n 4 p 395-403 2001 SILVA A A e SILVA J F Toacutepicos em manejo de plantas daninhas Viccedilosa Ed UFV 2007 SILVA A A FERREIRA F A FERREIRA L R SANTOS J B Biologia de plantas daninhas Cap 1 p 17-61 In SILVA A A SILVA J F Toacutepicos em manejo de plantas daninhas Viccedilosa UFV 2007 366 p

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1995 42p SOUZA FILHO A P S DUARTE M L R Atividade alelopaacutetica do filtrado de cultura produzido por Fusarium solani Planta Daninha Viccedilosa v 25 n 1 p 227-30 2007

SOUZA A P S F RODRIGUES R R A RODRIGUES T J D Efeito do potencial alelopaacutetico de trecircs leguminosas forrageiras sobre trecircs invasoras de pastagens Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira Brasiacutelia v 32 n 2 1997

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Amazocircnia Oriental 2008 STROBEL G DAISY B CASTILLO U HARPER J Natural products from endophytic microorganisms Journal of Natural Products India v 67 n 2 p 257-68 2004

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p 287-92 2005 VARGAS L BIANCHI MA RIZZARDI MA AGOSTINETTO D e DAL MAGRO T Buva Conyza bonariensis) resistente ao glyphosate na regiatildeo sul do Brasil Planta DaninhaViccedilosa v 25 n 3 p 573-78 2007

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WEIHM DIDON UME RONNBERG-WASTLJUNG A-C BJORKMAN C Integrated agricultural research and crop breeding Allelopathic weed control in cereals and long-term productivity in perennial biomass crops Agricultural Systems Wageningen v 97 n 3 p

99ndash107 2008 YAMASHITA O M GUIMARAES S C Germinaccedilatildeo de sementes de Conyza canadensis e C bonariensis em funccedilatildeo da presenccedila de alumiacutenio no substrato Ciecircncia Rural Santa

Maria v 41 n 4 p 599-601 2011 YAMASHITA O M GUIMARAtildeES S C Conyza bonariensis em funccedilatildeo da disponibilidade hiacutedrica no substrato Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 2 p 309-17 2010

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SUTTON JC Epidemiology of wheat head blight and maize ear rot caused by Fusarium graminearum Canadian Journal of Plant Pathology Canadian v 4 n 2 p195-209

1982 TOKURA L K NOacuteBREGA L H P Alelopatia de cultivos de cobertura vegetal sobre plantas Infestantes Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 28 n 3 p 379-84 2006 TOKURA L K NOacuteBREGA L H P Potencial alelopaacutetico de cultivos de cobertura vegetal no desenvolvimento de placircntulas de milho Acta Scientiarum Agronomy Maringaacute v 27 n 2

p 287-92 2005 VARGAS L BIANCHI MA RIZZARDI MA AGOSTINETTO D e DAL MAGRO T Buva Conyza bonariensis) resistente ao glyphosate na regiatildeo sul do Brasil Planta DaninhaViccedilosa v 25 n 3 p 573-78 2007

VIECELLI C A STANGARLIN J R KUHN O J SCHWAN-ESTRADA K R F Induccedilatildeo de resistecircncia em feijoeiro por filtrado de cultura de Pycnoporus sanguineus contra Pseudocercospora griseola Tropical Plant Pathology Brasiacutelia v 34 n 2 2009

WEIHM DIDON UME RONNBERG-WASTLJUNG A-C BJORKMAN C Integrated agricultural research and crop breeding Allelopathic weed control in cereals and long-term productivity in perennial biomass crops Agricultural Systems Wageningen v 97 n 3 p

99ndash107 2008 YAMASHITA O M GUIMARAES S C Germinaccedilatildeo de sementes de Conyza canadensis e C bonariensis em funccedilatildeo da presenccedila de alumiacutenio no substrato Ciecircncia Rural Santa

Maria v 41 n 4 p 599-601 2011 YAMASHITA O M GUIMARAtildeES S C Conyza bonariensis em funccedilatildeo da disponibilidade hiacutedrica no substrato Planta Daninha Viccedilosa v 28 n 2 p 309-17 2010