CLASSIFICAÇÃO ANDROLÓGICA POR PONTOS E SUA RELAÇÃO COM O PERFIL PROTÉICO DO PLASMA SEMINAL DE TOUROS NELORE

Rogério Fonseca Guimarães Peres1; Elmo Gomes Diniz2

RESUMO O uso dos processos de avaliação e seleção andrológica baseados na Classificação

Andrológica por Pontos (CAP) demonstra que a performance de touros tem melhorado

anualmente. Nesse sentido, a busca por avaliações mais criteriosas que prediz a fertilidade

potencial individual de touros vem sendo sugerida através de provas complementares que poderia

atuar como marcadores para alta fertilidade, como o perfil protéico do plasma seminal. Portanto o

objetivo desse estudo foi verificar a relação entre a CAP e o perfil protéico do plasma seminal de

touros da raça Nelore.

Foram utilizados 56 tourinhos da raça Nelore de 25 a 36 meses. O sêmen de cada animal foi

colhido com auxílio de um aparelho de eletroejaculação e as avaliações físicas do sêmen foram

realizadas imediatamente após as colheitas e uma parte da amostra foi armazenada a -20oC.

Posteriormente o sêmen foi descongelado e centrifugado, as proteínas presentes no sobrenadante

foram precipitadas com acetona e em seguida foram submetidas a uma nova centrifugação e o

pellet obtido foi resuspendido em solução de Tris/HCl. As eletroforeses para a estimativa dos

pesos moleculares foram realizadas utilizando-se géis de poliacrilamida (SDS- PAGE). As

amostras foram preparadas e aplicadas ao gel. Após a corrida os géis foram corados numa

solução de Coomassie Brilhante Blue e descorados numa solução de ácido acético. A distância de

migração de cada padrão foi determinada de acordo com sua mobilidade relativa e a curva padrão

para a determinação do peso molecular foi traçada relacionando os logarítmos dos valores de

peso molecular dos padrões com as distâncias de migração.

Os resultados mostraram a diversidade de proteínas presentes no plasma seminal de touros,

sendo o peso molecular variável de 14 a 97 KDa. . Comparando-se os perfis eletroforéticos do

plasma seminal, não se percebe diferença entre os animais dos diferentes grupos. Os diferentes

valores de CAP não estão relacionados com diferentes perfis do plasma, não apresentando bandas

protéicas distintas. No presente trabalho, não houve correlação da fertilidade dos touros com

perfil protéico do plasma seminal.

PALAVRAS CHAVE: touros, proteínas do plasma seminal, fertilidade.

ABSTRACT

The use of avaluate process and andrologicy selection based in Andrologicy Spot

Classification (APC), to showed that performance of bulls has better annually. In this purpose

seek to more criterion avaluation that predict a individual potencial fertility of bulls has been

suggested across complementary tests that could act how marker to high fertility, how the profile

seminal plasma proteins. However the objective this study was analysis the relation among a

APC and profile seminal plasma proteins of Nelore breed bulls.

Were used 56 young bulls of Nelore breed between 25 to 36 months. The semen of each

animal has obtained across electron-ejaculation and the avaluation physiques of semen were do

immediat after crop and a portion of sample has stored - 200 C. After the semen has defrost and

centrifugation, the present proteins in the sobrenadante were precipitate with acetone and

submitted a new centrifugation and the pellet obtained was returned in solution Tris/ HCl. The

eletrophoresis to estimate of molecule weight were carried utilizing polyacrilamida gels (SDS-

PAGE). The samples were prepared and arrangement in gels. After race the gels were blushed in

solution of Comassie Brilhante Blue and discolored in solution acetic acid. The distance of

migration of each standard was determine of agreement with relative mobility and the standard

curve to determine of molecule weight was connected logaritques values of molecule weight of

standards with migration distante.

The results showed a several of present proteins in bull plasma seminal, where molecule weight

varied of 14 to 97 KDa. The comparative among plasma seminal electronphoretics profiles no

observed difference between several groups animals. The values differences no connected with

difference profiles of plasma, no showing protein band distinct. In present study no had

correspondence in fertility of bulls with profile seminal plasma proteins.

KEY WORDS: bulls, seminal plasma proteins, fertility.

INTRODUÇÃO O uso freqüente dos processos de

avaliação e seleção andrológica, baseada na

Classificação Andrológica por Pontos

(CAP), demonstra que a performance de

touros tem melhorado anualmente (Salvador,

Andrade, Vale Filho, 2001). Ainda segundo

esses autores, a busca por avaliações mais

criteriosas e predição da fertilidade potencial

individual de touros, vêm sendo sugerida

provas complementares como testes

comportamentais e exames referentes à

capacidade de fecundação do

espermatozóide, procurando-se medidas

associadas a esses eventos que pudessem

atuar como marcadores para alta fertilidade.

Wolfe, Bradley e Riddel (1993)

sugeriram que o conteúdo do plasma seminal

influi na fertilidade masculina, geralmente

baseando-se na composição do plasma de

animais férteis e inférteis.

Alguns pesquisadores relataram a

alta correlação entre perfil protéico do

plasma seminal com fertilidade de touros,

em trabalhos com raças européias (Bellin,

Hawkins e Oyarzo, 1998; Chacur et al.,

2003; Genera et al., 1998; Killian, Chapman

e Rogowski, 1993; Killian, Chapman e

Cancel, 1999; Nass et al., 1990).

Killian, Chapman e Rogowski

(1993), estudaram proteínas do plasma

seminal de bovinos e acharam a correlação

entre proteínas e fertilidade de touros.

Utilizando-se da eletroforese, associaram

touros férteis de uma determinada

população, com duas proteínas do plasma

seminal, caracterizadas por apresentarem

peso molecular de 26 KDa pI 6,2 e 55KDa

pI 4,5 como predominantes em touros de alta

fertilidade e duas proteínas, de peso

molecular 16KDa pI 4,1 e 16 KDa pI 6,7

como predominantes em animais de baixa

fertilidade. Um modelo de regressão foi

desenvolvido para determinar a fertilidade

usando essas quatro proteínas. Comparando-

se a fertilidade efetiva dos touros com o

valor calculado, observou-se uma correlação

positiva. Num trabalho posterior, Killian,

Chapman e Cancel (1999), descrevem que

talvez as duas proteínas com maior

prevalência em touros de baixa fertilidade

(16 KDa com pI 4,1 e 16 KDa com 6,7 pI)

poderiam estar associadas com Micoplasma

genitalum. Após análise da proteína de 55

KDa, Killian, Chapman e Cancel (1999)

determinaram que ela é 86% homóloga ao

precursor da osteopontina-K bovina.

Estudos de Genera et al. (1998)

estabeleceram que a proteína associada à

fertilidade 26KDa, descrita por Killian,

Chapman e Rogowski (1993), é 75%

idêntica e 86% homóloga a do tipo lipocalin

prostaglandina D Sintase (PGDS), uma das

proteínas mais prevalentes em touros de alta

fertilidade. Entretanto, não se sabe o papel

exato dessa proteína no trato genital do

macho, mas observa-se uma atuação tanto

no desenvolvimento quanto na maturação

dos espermatozóides.

Bellin, Hawkins e Oyarzo (1998)

identificaram no plasma seminal bovino

algumas proteínas ligadoras de heparina

(HBP) produzidas pelas glândulas

acessórias. Pesquisas do sêmen

reconheceram variantes da HPB, de

aproximadamente 31, 24 e 21,5 KDa,

associadas ao incremento da fertilidade de

touros, sendo que a proteína de maior peso

molecular (31 KDa) é conhecida como o

antígeno associado à fertilidade (FAA). Em

pesquisas posteriores, McCauley et al.

(1999) concluiram que a proteína FAA é

78% idêntica à proteína DNAase-like

humana, sendo consideradas da mesma

família.

Nass et al. (1990) encontraram HBPs

com peso molecular de 14, 16, 24 e 30 kDa;

afirmaram ainda que animais castrados

apresentam queda significativa nos níveis

dessas HBPs.

Em um estudo de Bellin; Hawkins;

Oyarzo.(1998) realizado com 2191 touros,

determinou-se que 88% dos touros

analisados continham no seu plasma seminal

uma proteína de peso molecular de 30 KDa e

12% não continham essa proteína. A taxa de

fertilidade foi de 88% e 79%

respectivamente. Além disso, constatou-se

que os touros mais férteis apresentaram

proteínas de 2,5 KDa, 24 KDa e 30 KDa no

plasma seminal.

Chacur et al (2003) estudaram a

correlação da fertilidade e proteínas do

plasma seminal em touros Limousin e

encontraram que proteínas de 55 e 66 kDa

estavam relacionadas com excelente quadro

espermático. No entanto, as proteínas com

16 e 36 kDa apareceram exclusivamente no

touro com pior quadro espermático.

Assumpção et al (2003) verificaram

grande variedade de bandas protéicas dentro

e entre as amostras com intensidades

diferentes entre elas. Não houveram

diferenças no perfil protéico dos touros de

alta e baixa fertilidade da raça Nelore.

Vale Filho (1988) demonstraram o

sistema CAP – Classificação Andrológica

por Pontos, baseado no BSE – Breeding

soundness evaluation. Na CAP, são

ponderados circunferência escrotal (40% do

valor total), percentual de espermatozóides

anormais (40% do valor total) e motilidade

espermática (porcentagem e vigor) valendo

20% do valor total.

O objetivo desse estudo foi verificar

a relação entre a CAP e o perfil protéico do

plasma seminal de touros da raça Nelore.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram utilizados 56 tourinhos da

raça nelore de 25 a 36 meses. O sêmen de

cada animal foi colhido com auxílio de um

aparelho de eletroejaculação e as avaliações

físicas do sêmen processadas imediatamente

após as colheitas de acordo com a

Classificação Andrológica por Pontos –

CAP (Vale Filho, 1995) e as normas do

CBRA (1998). Parte da amostra foi

armazenada a -20oC.

Cerca de 2,0 mL de sêmen foram

centrifugados a 1.500g durante 20 min a

4ºC. As proteínas presentes no sobrenadante

foram precipitadas com 3,6 mL de acetona e

em seguida foram submetidas a uma nova

centrifugação a 10.000 x g durante 10 min.

O pellet obtido foi resuspendido em 2 mL de

0,1M Tris/HCl, pH 7,5.

As eletroforeses para a estimativa

dos pesos moleculares foram realizadas

segundo o método de Laemmli (1970),

utilizando-se géis de poliacrilamida com

SDS (Dodecil Sulfato de Sódio) como

agente desnaturante. Na preparação,

utilizou-se géis a 5% (empilhamento) e 14%

(separação) conforme exposto na Tabela 1.

Tabela 1 -Soluções que foram usadas para o preparo de gel poliacrilamida com SDS a 14% e 5%.

SOLUÇÕES ESTOQUES VOLUME (µµµµL)

Gel de separação

(14%)

Gel de empilhamento

(5%)

Tris-HCl 2M pH 8,8 1.170 -

Tris-HCl 2M pH 6,8 - 167

EDTA 200Mm 63 27

Acrilamida:bis (30: 0,8) 2.920 435

Água deionizada 2015 1.990

TEMED 7,5 2,5

Persulfato de amônio (10%) 37,5 18

A solução trizma base 0,1 M, EDTA

7,8 mM, glicina 0,77 M e SDS 0,3% (m/v)

pH 8,3 foi utilizada como tampão para o

cátodo e a mesma solução, porém sem

glicina, para o ânodo.

As amostras foram dissolvidas em

água deionizada. Em seguida foi adicionado

50% do tampão de amostra (Tris-HCl 187

mM pH 6,8, SDS 6%, EDTA 6 mM, azul de

bromofenol 1% e glicerol 27%) e 10% de β-

mercaptoetanol. Posteriormente, as amostras

foram aquecidas a 100 ºC durante 3 minutos

e aplicadas ao gel de poliacrilamida.

A eletroforese foi realizada com uma

corrente constante de 25 mA (miliamperes)

até o indicador azul de bromofenol alcançar

o final do gel (cerca de 50 minutos). As

proteínas foram coradas por 30 minutos

numa solução de 0,2 % (m/v) de Coomassie

Brilhant Blue R-250 em água : metanol na

proporção de 1:1. O gel foi descorado numa

solução de ácido acético a 7 % (v/v).

A distância de migração de cada

padrão foi determinada de acordo com sua

mobilidade relativa e a curva padrão para a

determinação do peso molecular foi traçada

relacionando os logarítmos dos valores de

peso molecular dos padrões com as

distâncias de migração. Os padrões de peso

molecular que foram utilizados: fosforilase b

(97.000), soroalbumina bovina (66.000),

ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica

(30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-

lactoalbumina (14.400), numa concentração

de 3,5 mg/ml.

O peso molecular aproximado das

proteínas foi determinado traçando a curva

padrão (figura 1).

Reta Padrão para estimativa da massa molecular das proteínas presentes no plasma seminal

bovino

y = -0,0207x + 5,0327R2 = 0,9745

0

1

2

3

4

5

6

0 10 20 30 40 50

Migração Relativa (mm)

Lo

g d

o P

eso

Mo

lecu

lar

Figura 1 - Determinação dos pesos moleculares das principais proteínas presentes no plasma seminal de touros da raça Nelore, em gel de poliacrilamida pelo método de Laemmli (1990). A curva padrão foi traçada relacionando os logaritmos dos valores de peso molecular dos padrões com as distancias de migração em milímetros.

RESULTADOS E DISCUSSAO

Os dados obtidos após avaliação dos animais estão demonstrados na tabela 2.

Tabela 2 – Valores de Perímetro Escrotal (PE), Motilidade espermática (ME), Defeitos Maiores (DM), Defeitos Totais (DT) e Classificação Andrológica por Pontos (CAP) de 56 touros da raça Nelore com diferentes idades, Uberlândia-MG, 2005.

Touro Meses PE ME DM DT CAP 1 34 37.4 65 10,5 24 60 2 27 36.7 50 27,5 36,5 60 3 28 35.2 70 2 6 90 4 28 34.2 75 2,5 18 90 5 26 34.2 65 4 5 90 6 27 36.2 65 0 6 90 7 28 33.3 75 3 6,5 74 8 35 34.2 60 1,5 8,5 60 9 25 35.1 75 4,5 12 90 10 26 32.2 80 4 6 74 11 27 34.1 90 6 7 90 12 26 30.6 80 2 5 64 13 27 34.1 70 3 22 90 14 27 34.4 80 2 8,5 90 16 26 31.1 80 0,5 5,5 74 17 25 33 70 1 2 74 18 27 33.6 75 8 18 74 19 26 36.7 60 1 2,5 80 20 27 33.9 70 2 8,5 74 21 27 34.3 65 1 2 85 22 25 32.6 70 7,5 10,5 74 23 26 32.6 90 9 10 74 24 26 31.8 75 1 2 74 25 28 34.3 75 7,5 9,5 90 27 27 34.1 75 0,5 6 90 28 27 34.6 80 5,5 11,5 90 29 27 35.1 55 14,5 23 60 30 25 37.9 70 2,5 5,5 90 42 30 37.1 75 14 21 74 43 28 34.7 60 7,5 12 82 44 28 32.1 70 34 38 47 45 27 40.7 50 27 61 53 46 27 35.1 70 15 36 75 49 27 33.9 70 29 80 42 50 25 38.3 70 20 33 60 51 27 35.6 75 19 21 75 52 26 32.3 75 8,5 11 74

53 29 35.4 60 6 18 82 54 25 37.2 70 18 24 78 55 27 31.2 85 7 28 60 56 25 41.1 70 4 7 90 57 28 35.2 55 13 15 80 58 25 33.6 75 5 50,5 50 59 25 33.4 60 54,5 72,5 30 60 28 37.2 80 8,5 13 90 61 26 33.3 20 20 41,5 30 62 27 34.1 20 4 25,5 60 63 25 33.2 90 3 8,5 74 64 27 35.8 70 11,5 26,5 75 165 27 33.1 75 10,5 16 75 66 27 31.1 55 3 64 37 67 27 35.2 30 8 10 70 68 28 34.7 70 5 6,5 90 69 25 33.2 25 11 54 37 70 28 39.8 10 78 91 46 71 28 35.6 60 6 24 80

Percebe-se uma grande variabilidade

nos valores obtidos das características

analisadas. Vários animais (3, 4, 5, 6, 9, 11,

13, 14, 25, 27, 28, 30, 56, 60 e 68)

apresentaram excelente desenvolvimento

testicular quando relacionado com a idade,

excelente motilidade e baixo índice de

patologias, obtendo o índice CAP de 90

pontos. No entanto, outros demonstraram

qualidade espermática inferior (19, 21, 43,

53, 57, 67 e 71). A CAP desses últimos foi

de 80 a 89 pontos.

Os animais 7, 10, 12, 16, 17, 18, 20,

22, 23, 24, 52, 63 e 65 apresentaram baixo

Perímetro Escrotal, obtendo entre 70 e 79

pontos na CAP. A presença de patologias

totais ou maiores em grande quantidade,

isoladamente, foi observada naqueles de

números 42, 46, 50, 51, 54 e 64. Os demais

obtiveram índices de CAP igual ou abaixo

de 60 pela associação entre os fatores

pontuados (Perímetro escrotal, Motilidade

espermática e Patologias). São eles: 1, 2, 8,

29, 44, 45, 49, 55, 58, 59, 61, 62, 66, 69 e

70.

Nas figuras 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 e 9 estão

demonstrados os resultados das eletroforeses

em gel de poliacrilamida 14% em condições

desnaturantes das proteínas do plasma

seminal de touros Nelore. A figura 2 refere-

se as amostras 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7

PM 7 6 5 4 3 2 1

Figura 2 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 1 a 7, refere ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%. Na figura 3, estão representadas as amostras 08, 09, 10, 11, 12, 13 e 14. PM 14 13 12 11 10 9 8

97 66

45

30

20,1

14,4

97 66 45 30 20,1 14,4

Figura 3 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 8 a 14, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%. Na figura 4 estão representadas as amostras 16, 17, 18, 19, 20, 21 e 22. PM 22 21 20 19 18 17 16

Figura 4 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 16 a 22, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%.

As amostras 23, 24, 25, 27, 28, 29 e 30 estão demonstradas na Figura 5.

97 66 45 30 20,1 14,4

P M 30 29 28 27 25 24 23

Figura 5 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 23 a 30, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%. As amostras 42, 43, 44, 45, 46, 49 e 50 estão na Figura 6. PM 50 49 46 45 44 43 42

97 66 45 30 20,1 14,4

97 66

45

30

20,1

14,4

Figura 6 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 42 a 50, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%. Na seqüência estão as amostras 51, 52, 53, 54, 55, 56 e 57 (Figura 7). PM 57 56 55 54 53 52 51 Figura 7 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 51 a 57, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%. Na Figura 8 estão as amostras 58, 59, 60, 61, 62, 63 e 64.

97 66

45

30

20,1

14,4

PM 64 63 62 61 60 59 58 Figura 8 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 58 a 64, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%. Na Figura 9, estão as amostras 65, 66, 67, 68, 69, 70 e 71. PM 65 66 67 68 69 70 71

97 66

45

30

20,1

14,4

97 66

45

30

20,1

14,4

Figura 9 – Eletroforese em gel de poliacrilamida a 14% com agentes desnaturantes das proteínas do plasma seminal de touros Nelore. PM – Padrão de Peso Molecular LMW (Low Molecular Weight): fosforilase b (97.000), soroalbumina bovina (66.000), ovoalbumina (45.000), anidrase carbônica (30.000), inibidor de tripsina (20.100) e α-lactoalbumina (14.400). Colunas de 65 a 71, referem ao número do animal. Condições: corrente: 25mA; tempo de corrida: 50 minutos; solução fixadora: metanol 50% - ácido acético 10%; solução corante: 0,2% de Coomassie Brilhante Blue R-250 em metanol 50%; solução descorante: ácido acético a 7%.

Comparando-se os perfis

eletroforéticos do plasma seminal, não se

percebe diferença entre os animais dos

diferentes grupos. Os diferentes valores de

CAP não estão relacionados com diferentes

perfis do plasma, não apresentando bandas

protéicas distintas.

Tabela 3 – Intervalos da Classificação Andrológica por Pontos (CAP) relacionado com os touros que apresentaram tal CAP, Uberlândia – MG, 2005.

CAP Observação Animais 90 Bom 3, 4, 5, 6, 9, 11, 13, 14, 25, 27, 28, 30, 56, 60 e 68

80 – 89 Baixa motilidade 19, 21, 43, 53, 57, 67 e 71 70 – 79 Pequeno PE 7, 10, 12, 16, 17, 18, 20, 22, 23, 24, 52, 63 e 65 70 - 79 Muitas Patologias 42, 46, 50, 51, 54 e 64

< 60 Ruim 1, 2, 8, 29, 44, 45, 49, 55, 58, 59, 61, 62, 66, 69 e 70

Pela analise das figuras de 2 a 9,

podemos perceber que as amostras

apresentaram proteínas comuns. Essas

proteínas apresentam pesos moleculares

aparentes de: 97, 70,8, 32,4, 27 e 15,6 KDa.

No presente trabalho, não houve

correlação da fertilidade dos touros com

perfil protéico do plasma seminal,

concordando com Assumpção et al (2003),

que também trabalharam com touros Nelore.

As proteínas do plasma seminal

encontradas nesse estudo apresentam peso

molecular semelhante aos citados por outros

autores, como: 70,8 KDa (CHACUR et al.,

2003), 32,4 KDa (BELLIN, HAWKINS,

OYARZO, 1998; NASS et al., 1990), 27

KDa (KILLIAN, CHAPMAN,

ROGOWSKI, 1993; BELLIN, HAWKINS,

OYARZO, 1998; NASS et al., 1990) e 15,6

KDa (KILLIAN, CHAPMAN, CANCEL,

1999; NASS et al., 1990; CHACUR et al.,

2003).

Nenhum dos autores consultados

citaram a presença de proteínas de 32,4

KDa e 97 KDa.

Os resultados mostraram a

diversidade de proteínas presentes no plasma

seminal de touros, sendo o peso molecular

variável de 14 a 97 KDa.

CONCLUSOES

Nas condições em que o trabalho foi

realizado, a classificação andrológica por

pontos em touros Nelore não apresentou

relação com o perfil protéico do plasma

seminal.

6- REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

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