Contagem Padrao Em Placas
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Microbiologia – Prof. M. Sc. Jorge Luiz Fortuna – UNEB – Ciências Biológicas – 2008
CONTAGEM PADRÃO EM PLACAS (CONTAR AS PLACAS QUE TENHAM ENTRE 15 E 150 OU 30 E 300 UFC)
1. UMA PLACA:
Contar o número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) da placa e multiplicar pela diluição correspondente. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez).
Exemplo:
Placa diluição 10-2 � 39 UFC
2. PLACAS COM AS MESMAS DILUIÇÕES:
Somar o número de UFC de cada placa, calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez).
Exemplo:
Placa diluição 10-2 � 48 UFC +
Placa diluição 10-2 � 63 UFC
3. PLACAS COM DIFERENTES DILUIÇÕES:
a) CASO 1: Contar o número de UFC de cada placa e multiplicar pela respectiva diluição. Somar os resultados e calcular a média aritmética. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez).
Exemplo1:
Placa diluição 10-2 � 128 UFC � 128 x 100 = 12.800 +
Placa diluição 10-3 � 14 UFC � 14 x 1.000 = 14.000
b) CASO 2: No caso da diluição maior conter um número de UFC duas vezes maior, ou mais, que a diluição menor, deve-se reportar a contagem da MENOR diluição.
Exemplo2:
Placa diluição 10-2 � 137 UFC � 137 x 100 = 13.700 +
Placa diluição 10-3 � 48 UFC � 48 x 1.000 = 48.000
4. PLACAS SEM UFC:
Se não for detectada nenhuma UFC em todas as placas, reportar o resultado considerando a maior concentração (10-1). Expressar o resultado final por estimativa (Est.).
Exemplo:
Nenhuma UFC
111 : 2 = 55,5 x 100 = 5.550 � 5,6 x 103 UFC/mL ou g
39 x 100 = 3.900 � 3,9 x 103 UFC/mL ou g
26.800 : 2 = 13.400 � 1,3 x 104 UFC/mL
ou g
13.700 � 1,4 x 104 UFC/mL ou g
< 10 UFC/mL (Est.) ou < 1,0 x 10 UFC/mL ou g (Est.)
Microbiologia – Prof. M. Sc. Jorge Luiz Fortuna – UNEB – Ciências Biológicas – 2008
5. PLACAS COM MAIS DE 300 UFC:
Caso seja possível contar todas as UFC da placa, deve-se contar e calcular o número de UFC a partir da diluição correspondente. Expressar o resultado final por estimativa (Est.).
Exemplo1:
Placa diluição 10-2 � Incontáveis
Placa diluição 10-3 � 370 UFC � 370 x 1.000 = 370.000 � 3,7 x 105 UFC/mL ou g (Est.)
6. PLACAS COM NÚMERO DE UFC MUITO ACIMA DE 300:
Calcular o resultado observando as orientações que se seguem. Expressar o resultado final por estimativa (Est.).
a) CASO 1 � Placas com menos de 10 UFC por cm² de superfície:
Contar as UFC em 13 (treze) quadrados, selecionando 7 (sete) quadrados horizontais e 6 (seis) verticais consecutivos e em ângulo reto, sem contar o mesmo quadrado duas vezes.
Calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente e pelo fator 65 (placas com diâmetro de 9,0 cm).
Exemplo:
Placa diluição 10-2
(8+5+5+7+8+9+7+8+6+7+5+9+8) = 92:13 = 7,1x100x65 = 46.150 � 4,6 x 104 UFC/mL ou g (Est.)
OBSERVAÇÃO:
Por que ao utilizarmos placas de Petri com diâmetro de 9,0 cm devemos usar o fator 65?
Resp.: A superfície da placa é um círculo. A área (A) da superfície do círculo (placa), onde
é vertido o meio de cultura, é calculada através da fórmula� A = ππππ r2
A = 3,1416 x (4,5)2
A = 3,1416 x 20,25
A = 63,61... � 65
Contar as UFC em cada cm², somar o resultado dos 13 quadrados e calcular a média aritmética dividindo por 13.
Microbiologia – Prof. M. Sc. Jorge Luiz Fortuna – UNEB – Ciências Biológicas – 2008
b) CASO 2 � Placas com mais de 10 UFC por cm² de superfície:
Contar as UFC em 4 (quatro) quadrados representativos.
Calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente e pelo fator 65 (placas com diâmetro de 9,0 cm).
Exemplo:
Placa diluição 10-2
(15+25+21+13) = 74 : 4 = 18,5 x 100 x 65 = 120.250 � 1,2 x 105 UFC/mL ou g (Est.)
c) CASO 3 � Placas com mais de 100 UFC por cm² de superfície:
Expressar como maior que 6.500 multiplicando pela maior diluição.
Exemplo:
Placa diluição 10-2 � Incontáveis
Placa diluição 10-3 � >100 UFC/cm² � 6.500x1.000 = 6.500.000� >6,5 x 106 UFC/mL ou g (Est.)
7. PLACAS COM MENOS DE 30 UFC:
Expressar o resultado final por estimativa (Est.).
Exemplo:
Placa diluição 10-2 � 18 UFC � 18 x 100 = 1.800 +
Placa diluição 10-3 � 2 UFC � 2 x 1.000 = 2.000
REFERÊNCIAS:
CARDOSO, W. M.; SILVA, G. G.; CANO, V. Análise Microbiológica de Alimentos. Rio de Janeiro: MERCK. 1985, 64 p.
LANARA (Laboratório Nacional de Referência Animal). Métodos Analíticos Oficiais para Controle de Produtos de Origem Animal e seus Ingredientes. Métodos Microbiológicos. Brasília: Ministério da Agricultura. 1981.
SILVA, N.; JUNQUEIRA, V. C. A.; SILVEIRA, N. F. A.; TANIWAKI, M. H.; SANTOS, R. F. S.; GOMES, R. A. R. Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos. 3. ed. São Paulo: Varela. 2007, 536 p.
3.800 � 3,8 x 103 UFC/mL ou g (Est.)