Contagem Padrao Em Placas

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Microbiologia – Prof. M. Sc. Jorge Luiz Fortuna – UNEB – Ciências Biológicas – 2008 CONTAGEM PADRÃO EM PLACAS (CONTAR AS PLACAS QUE TENHAM ENTRE 15 E 150 OU 30 E 300 UFC) 1. UMA PLACA: Contar o número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) da placa e multiplicar pela diluição correspondente. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez). Exemplo: Placa diluição 10 -2 39 UFC 2. PLACAS COM AS MESMAS DILUIÇÕES: Somar o número de UFC de cada placa, calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez). Exemplo: Placa diluição 10 -2 48 UFC + Placa diluição 10 -2 63 UFC 3. PLACAS COM DIFERENTES DILUIÇÕES: a) CASO 1: Contar o número de UFC de cada placa e multiplicar pela respectiva diluição. Somar os resultados e calcular a média aritmética. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez). Exemplo1: Placa diluição 10 -2 128 UFC 128 x 100 = 12.800 + Placa diluição 10 -3 14 UFC 14 x 1.000 = 14.000 b) CASO 2: No caso da diluição maior conter um número de UFC duas vezes maior, ou mais, que a diluição menor, deve-se reportar a contagem da MENOR diluição. Exemplo2: Placa diluição 10 -2 137 UFC 137 x 100 = 13.700 + Placa diluição 10 -3 48 UFC 48 x 1.000 = 48.000 4. PLACAS SEM UFC: Se não for detectada nenhuma UFC em todas as placas, reportar o resultado considerando a maior concentração (10 -1 ). Expressar o resultado final por estimativa (Est.). Exemplo: Nenhuma UFC 111 : 2 = 55,5 x 100 = 5.550 5,6 x 10 3 UFC/mL ou g 39 x 100 = 3.900 3,9 x 10 3 UFC/mL ou g 26.800 : 2 = 13.400 1,3 x 10 4 UFC/mL ou g 13.700 1,4 x 10 4 UFC/mL ou g < 10 UFC/mL (Est.) ou < 1,0 x 10 UFC/mL ou g (Est.)

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Microbiologia – Prof. M. Sc. Jorge Luiz Fortuna – UNEB – Ciências Biológicas – 2008

CONTAGEM PADRÃO EM PLACAS (CONTAR AS PLACAS QUE TENHAM ENTRE 15 E 150 OU 30 E 300 UFC)

1. UMA PLACA:

Contar o número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) da placa e multiplicar pela diluição correspondente. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez).

Exemplo:

Placa diluição 10-2 � 39 UFC

2. PLACAS COM AS MESMAS DILUIÇÕES:

Somar o número de UFC de cada placa, calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez).

Exemplo:

Placa diluição 10-2 � 48 UFC +

Placa diluição 10-2 � 63 UFC

3. PLACAS COM DIFERENTES DILUIÇÕES:

a) CASO 1: Contar o número de UFC de cada placa e multiplicar pela respectiva diluição. Somar os resultados e calcular a média aritmética. Expressar o resultado em notação científica (potência de dez).

Exemplo1:

Placa diluição 10-2 � 128 UFC � 128 x 100 = 12.800 +

Placa diluição 10-3 � 14 UFC � 14 x 1.000 = 14.000

b) CASO 2: No caso da diluição maior conter um número de UFC duas vezes maior, ou mais, que a diluição menor, deve-se reportar a contagem da MENOR diluição.

Exemplo2:

Placa diluição 10-2 � 137 UFC � 137 x 100 = 13.700 +

Placa diluição 10-3 � 48 UFC � 48 x 1.000 = 48.000

4. PLACAS SEM UFC:

Se não for detectada nenhuma UFC em todas as placas, reportar o resultado considerando a maior concentração (10-1). Expressar o resultado final por estimativa (Est.).

Exemplo:

Nenhuma UFC

111 : 2 = 55,5 x 100 = 5.550 � 5,6 x 103 UFC/mL ou g

39 x 100 = 3.900 � 3,9 x 103 UFC/mL ou g

26.800 : 2 = 13.400 � 1,3 x 104 UFC/mL

ou g

13.700 � 1,4 x 104 UFC/mL ou g

< 10 UFC/mL (Est.) ou < 1,0 x 10 UFC/mL ou g (Est.)

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5. PLACAS COM MAIS DE 300 UFC:

Caso seja possível contar todas as UFC da placa, deve-se contar e calcular o número de UFC a partir da diluição correspondente. Expressar o resultado final por estimativa (Est.).

Exemplo1:

Placa diluição 10-2 � Incontáveis

Placa diluição 10-3 � 370 UFC � 370 x 1.000 = 370.000 � 3,7 x 105 UFC/mL ou g (Est.)

6. PLACAS COM NÚMERO DE UFC MUITO ACIMA DE 300:

Calcular o resultado observando as orientações que se seguem. Expressar o resultado final por estimativa (Est.).

a) CASO 1 � Placas com menos de 10 UFC por cm² de superfície:

Contar as UFC em 13 (treze) quadrados, selecionando 7 (sete) quadrados horizontais e 6 (seis) verticais consecutivos e em ângulo reto, sem contar o mesmo quadrado duas vezes.

Calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente e pelo fator 65 (placas com diâmetro de 9,0 cm).

Exemplo:

Placa diluição 10-2

(8+5+5+7+8+9+7+8+6+7+5+9+8) = 92:13 = 7,1x100x65 = 46.150 � 4,6 x 104 UFC/mL ou g (Est.)

OBSERVAÇÃO:

Por que ao utilizarmos placas de Petri com diâmetro de 9,0 cm devemos usar o fator 65?

Resp.: A superfície da placa é um círculo. A área (A) da superfície do círculo (placa), onde

é vertido o meio de cultura, é calculada através da fórmula� A = ππππ r2

A = 3,1416 x (4,5)2

A = 3,1416 x 20,25

A = 63,61... � 65

Contar as UFC em cada cm², somar o resultado dos 13 quadrados e calcular a média aritmética dividindo por 13.

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b) CASO 2 � Placas com mais de 10 UFC por cm² de superfície:

Contar as UFC em 4 (quatro) quadrados representativos.

Calcular a média aritmética e multiplicar pela diluição correspondente e pelo fator 65 (placas com diâmetro de 9,0 cm).

Exemplo:

Placa diluição 10-2

(15+25+21+13) = 74 : 4 = 18,5 x 100 x 65 = 120.250 � 1,2 x 105 UFC/mL ou g (Est.)

c) CASO 3 � Placas com mais de 100 UFC por cm² de superfície:

Expressar como maior que 6.500 multiplicando pela maior diluição.

Exemplo:

Placa diluição 10-2 � Incontáveis

Placa diluição 10-3 � >100 UFC/cm² � 6.500x1.000 = 6.500.000� >6,5 x 106 UFC/mL ou g (Est.)

7. PLACAS COM MENOS DE 30 UFC:

Expressar o resultado final por estimativa (Est.).

Exemplo:

Placa diluição 10-2 � 18 UFC � 18 x 100 = 1.800 +

Placa diluição 10-3 � 2 UFC � 2 x 1.000 = 2.000

REFERÊNCIAS:

CARDOSO, W. M.; SILVA, G. G.; CANO, V. Análise Microbiológica de Alimentos. Rio de Janeiro: MERCK. 1985, 64 p.

LANARA (Laboratório Nacional de Referência Animal). Métodos Analíticos Oficiais para Controle de Produtos de Origem Animal e seus Ingredientes. Métodos Microbiológicos. Brasília: Ministério da Agricultura. 1981.

SILVA, N.; JUNQUEIRA, V. C. A.; SILVEIRA, N. F. A.; TANIWAKI, M. H.; SANTOS, R. F. S.; GOMES, R. A. R. Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos. 3. ed. São Paulo: Varela. 2007, 536 p.

3.800 � 3,8 x 103 UFC/mL ou g (Est.)