CONTROLE DE MICRORGANISMOS

Prof. João Batista de Almeida e SilvaProf. João Batista de Almeida e Silva

Considerações Gerais

ESTERILIZAÇÃO – Destruição de todos os microrganismos presentes, incluindo os esporos

Efeitos distintos – Ação ANTIMICROBIANA

BacteriostáticoInibição do crescimentoAusência de morte celularInibidor de síntese protéica

BactericidaMorte celularAusência lise celularBactericida, Fungicida, Viricida

Bacteriolítico Morte celular por liseInibidor de síntese da parede celular

Considerações Gerais

Aspectos fundamentais que se deve aplicar aos agentes ANTIMICROBIANOS

Padrão de morte em uma população microbiana

Condições que influenciam a atividade antimicrobiana

Mecanismos de destruíção das células microbianas

Considerações Gerais

Padrão de morte em uma população microbiana

• Microbiologia – MORTE – Perda da capacidade reprodutiva

• Avaliação da eficiência – agente microbicidaCultivo de uma amostra de material tratado para determinar o número de sobreviventes

Considerações Gerais

Condições que influenciam a capacidade antimicrobiana

• Tamanho da população quanto > + tempo p morrer

• Concentração do agente Microbicida quanto < + tempo p morrer

• Tempo de exposição quanto > + cels mortas

• Temperatura quanto > - tempo p morrer

• Particularidades do microrganismo específico

Considerações Gerais

Mecanismo de destruição das células microbianas

• Predeterminar melhores condições para o agente

• Avaliar susceptibilidade das espécies para esse agente

Alteração do estado físico do citoplasma, inativação de enzimas, rompimento da membrana da parede celular

• Possíveis mecanismos associados com os principais aspectos estruturais

Agentes Antimicrobianos

Agentes Físicos• Temperatura

• Radiação

• Filtração

• Dessecação

Agentes Químicos

• Substâncias químicas

Agentes Físicos – Temperatura

Calor Úmido• Menos tempo – calor seco

• Desnaturação de proteínas

Cels Vegetativas Bactérias = 5 - 10 min / 60-70°C

Cels Vegetativas Fungos = 5 - 10 min / 50-60°C

Esporos de Fungos = 5 - 10 min / 70-80°C

• Vapor, água fervente, água aquecida a temp. abaixo do seu ponto de ebulição (100°C)

Agentes Físicos – Temperatura

• Vapor d’águaAutoclave – Vapor d’água sob pressão

• Água FerventePonto de ebulição

Endósporos podem resistir a 100° C por mais de 1 hora

• Temperatura abaixo do seu ponto de ebuliçãoAquecimento lento

Oxidação dos constituintes orgânicos celulares

Mata células vegetativas de patógenos

Agentes Físicos – Temperatura

Calor Seco• Mais tempo que o calor úmido

• Materiais que não podem ser esterilizados por calor úmido

Incineração

• Prática de rotina

• Agulhas de semeadura microbiológicas no bico de Bunsen

Agentes Físicos – Temperatura

Baixas Temperaturas• Abaixo de 0°C – microrganismos permanecem em estado latente

• Freezer doméstico: -20°C

• Freezer -70°C

• Nitrogênio líquido: -196°C

Agentes Físicos – Filtração / Dessecação

Filtração• Membranas – Poros retem microrganismos

• Bactérias: 0,5 – 1,0 μm

• Leveduras: 1,0 – 5,0 μm

Dessecação• Interrupção das atividades metabólicas

• Liofilização – desidratação extrema em temperaturas de congelamento mantidas em ampolas fechadas

Agentes Físicos – Radiação

• Energia – Ondas eletromagnéticas

• Quanto < maior a energia

• Raio X, gama e luz UV

Radiação Ionizante- Alta energia – Ionização das moléculas ( H2O ---- H+ + OH- )

- Radicais Hidroxilas destroem DNA e proteínas

- Raio X, gama – penetra pacotes de produtos e esteriliza seus interiores- Mais utilizados – esterilização alimentos e equipamentos médicos

Agentes Físicos – Radiação

Radiação Não-Ionizante

Excitação de elétrons – Maior dano - DNA

Mata apenas microorganismos de superfície

Luz Ultra-Violeta

Agentes Químicos

Aplicação de compostos químicos• Redução n° microrg. superfície – Material Inanimado

• Lesões de pele – prevenção de infecções

• Eliminação de microrg. Patogênico – água potável / piscinas

CONHECIMENTO• vantagens quando utilizados em especificas situações

• Modo de atuação nos microrganismos

• Principais categorias de agentes antimicrobianos

Agentes Químicos / Definições

• Esterilizante – Estéril (termo absoluto), mata todas as formas vivas

• Desinfetante – Mata apenas formas vegetativas patogênicas

• Germicida – Sinônimo de Desinfetante – porem não mata apenas as patogênicas

• Anti-séptico – Usualmente aplicado na superfície do corpo humano

• Saneador – matam 99,9% dos microrg. Contaminantes d uma área ( Normas de saúde pública / população microrg)

Agentes Químicos - IDEAIS

1. Atividade Antimicrobiana – capacidade de inibir ou preferencialmente matar os microrg;

2. Solubilidade – Solúvel em solventes em quantidades necessárias ao seu uso efetivo;

3. Estabilidade – Ação antimicrobiana deve permanecer durante armazenamento;

4. Ausência de toxicidade – não deve prejudicar o homem e animais;

Agentes Químicos - IDEAIS

5. Homogeneidade – Preparação uniformes em sua composição;

6. Atividade em temperatura ambiente;

7. Poder de penetração;

8. Ausência de poderes corrosivos ou tintoriais;

9. Capacidade detergente;

10.Disponibilidade a baixo custo.

Agentes Químicos - IDEAIS

Principais Grupos de Desinfetantes e Anti-sépticos

• Fenol e Compostos Fenólicos- Mata rapidamente formas vegetativas;- Tóxico e apresenta odor desagradável;- Alteram a permeabilidade da membrana, desnatura proteínas;

• Álcoois

- 70-90% - mata as formas vegetativas;- Desnaturação de proteínas, lisam estruturas lipidicas;- Agente Bactericida

- Agente Bacteriostático ou Bactericida

Agentes Químicos - IDEAIS

• Halogênios (Hipoclorito)- Iodo, Cloro e Bromo – Fortes agentes oxidantes;

- Destruição dos componentes vitais da célula microbiana;- Inativação do aminoácido tirosina;- Agente Microbicida

• Metais pesados e seus compostos- Atividade de íons metálicos – inativação de certas enzimas que combinam com o metal ( Moeda )

• Detergentes- Desnaturação de proteínas celulares, interferência com processos metabólicos e lesão da membrana citoplasmática- Agente Bactericida

Agentes Químicos - IDEAIS

Agente Químico Concentração (%) Aplicações Nível de Atividade

Compostos Fenólicos 0.5-3.0 Desinfecção de objeto inanimado Intermediário

Álcoois 70-90 Anti-sepsia da pele, desinfecção de instrumentos cirúrgicos

Intermediário

Iodo 1 Anti-sepsia da pele, pequenos cortes, desinfecção da água

Intermediário

Compostos Clorados 0.5-5.0 Desinfecção da água, superfícies não metálicas, equipamentos de laticínios,

materiais domésticos

Baixo

Mercúrio 1 Anti-sepsia da pele, desinfecção de instrumentos

Baixo

Alta – Mata todas as formas de vida microbiana

Intermediário – Mata o bacilo da Tuberculose, Fungos e vírus, mas não os esporos

Baixo – Não mata o bacilo da tuberculose, nem os esporos e vírus em um tempo aceitável

Agentes Químicos - IDEAIS

Esterilizantes químicos

• Óxido de Etileno- Inativação de enzimas e proteínas que tem átomos de hidrogênio

- Seringas

• β-Propilactona

- Bactericida, Fungicida, Esporicida e Viricida

- Propriedades carcinogênicas

Agentes Químicos - IDEAIS

• Glutaraldeído

- Instrumentos urológicos e respiratórios

- Bactericida, Esporicida, Fungicida e Viricida

• Formaldeído

- Extremamente tóxicos

- Inativação dos constituintes celulares ( Proteínas e Ácidos nucléicos)

Agentes Químicos - IDEAIS

Áreas de atuação

• Parede Celular-Fenol, Hipoclorito, Mertiolate

• Membrana Citoplasmática-Fenol, Álcoois, Detergentes

• Material Nuclear- Óxido de Etileno, Glutaraldeído, β-Propilactona

• Ribossomos- Sais de mercúrio, Glutaraldeído, fenol

• Citoplasma- Hipoclorito, Iodo, Óxido de Etileno, Metais pesados