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CONTROLE DE POPULAÇÕES
MICROBIANAS
Prof. Ary Fernandes Junior
Departamento de Microbiologia e Imunologia
Instituto de Biociências - UNESP
Distrito de Rubião Júnior s/n
CEP 18618-000/ Botucatu/ SP /Brasil
Tel. 14 3811. 6240/6058 - fax 14 3815 3744
Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em operações cirúrgicas (uso de fenol para reduzir
incidência de infecção)
Controle de Populações Microbianas: ????
Alguns princípios importantes
Levar em conta o número e natureza dos microrganismos presentes no material.
O efeito normalmente não é instantâneo (tempo de exposição);
O agente deve afetar diretamente o microrganismo;
Destruir, inibir ou
remover
microrganismos
Microrganismos em números aceitáveis ou
ausência
dos mesmos
Controle da
população
microbiana
Agentes físicos Agentes químicos
Algumas Definições
Esterilização: Destruição de toda e qualquer
forma de vida (formas vegetativas, esporos,
fungos, vírus, etc) de um material
Desinfecção: Destruição de microrganismos
patogênicos presentes num material inanimado
(Desinfetantes)
Anti-sepsia: Destruição de microrganismos
patogênicos num tecido vivo (Antissépticos)
(Caracteristicas ??)
Assepsia: Conjunto de medidas para prevenir a
entrada de microrganismos num material (vivo
ou não) ou reduzir o número dos já presentes
(Profilaxia)
AGENTES FÍSICOS
Calor (Seco e Úmido)
-Tempo de Redução Decimal (TRD ou D): Tempo
(minutos) em que 90 % de uma população microbiana
em uma determinada temperatura será morta
-Ponto de Morte Térmica (PMT): Menor temperatura em
que todos os microrganismos em uma suspensão líquida
serão mortos por calor em 10 minutos
-Tempo de Morte Térmica (TMT): Período mínimo de
tempo em que todos os microrganismos serão mortos
D é o tempo, em minutos, em uma determinada temperatura, capaz de
causar uma redução em 90% no número de células ou esporos
presentes numa suspensão, ou, número de minutos necessários para a
curva de sobreviventes atravessar 1 ciclo log.
D = 5 min
101
102
103
Autoclavação: Vapor
d’água sob pressão
(121C/15’)
(Autoclave) Uso
para esterilização de
materiais
(Meios de cultura,
instrumento
cirúrgicos, vidrarias,
etc).
Pasteurização:
Eliminar microrganismos patogênicos de
substâncias que não suportam temperaturas
elevadas.
Tipos Lenta (62,8C/30 min) 5C.
Rápida (71,7C/15 seg.) 5C
(Reduz contagem entre 97 e 99%)
UHT – Ultra High Temperature
ESQUEMA DE PASTEURIZAÇÃO DO LEITE
(1)-Leite Crú; (2)-Bomba; (3)-Água Fria; (4)-Água Quente; (5)-Homogeneizador; (6)-Serpentina de Controle; (7)-Água Superaquecida; (8)-Vapor de Aquecimento; (9)-Leite
Pasteurizado
Pasteurização: O leite é aquecido a 65ºC e depois
resfriado a 0ºC em banho-maria, para eliminar os
microorganismos
Tindalização (= Esterilização fracionada)
(Uso para meios nutritivos)
70 a 100C/30 min. Incubação
100oC/30 min – 1º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 2º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 3º dia
Filtração: Separa microrganismos de materiais
fluídos (Remoção mecânica).
Eficiência - Depende da malha do filtro
( 1 m)
Ex. : Tampão de algodão até tipos especiais
(Berkefeld , Seitz , Ésteres de celulose, etc.)
Baixo Poder de Penetração Usos ???
UV = 210 a 328 nm (240 a 280 nm)
(Absorvida pelo DNA e proteínas)
Efeitos Indiretos Formação de O3 no ar e
H2O2 na água.
Efeitos Diretos Mutação,
Formação de Dímeros de
Timina e Inibição de Enzimas;
Aparelhagem dispendiosa
(Uso para substâncias e materiais sensíveis
ao calor)
Radiações Ionizantes (X, e Gama)
(Elevado poder de penetração Alimentos
embalados)
Ioniza macromoléculas Altera composição
química da célula
Na fonte de cobalto tipo panorâmica, os materiais, já em
sua embalagem final, são submetidos à radiação gama
Vibrações Sônicas: 200.000 Hz
Mecanismo: Gases em solução na célula
Microbolhas Choques com a parede
Lise da célula bacteriana (Cavitação)
AGENTES QUÍMICOS
Agem sobre estruturas da célula. Dificilmente
as bactérias tornam-se resistentes.
Agem sobre rotas metabólicas e estruturas da
célula bacteriana. São os antibióticos e
quimioterápicos.
Antissépticos, Desinfetantes e Detergentes
Drogas Antimicrobianas
Síntese de
lipídeos
Streptomyces platensis
Platensimicina
Azitromicina
Claritromicina
Estreptograminas
(Quinopristina/
Dalfopristina)
Tigeciclina
Mecanismos de Ação
Álcoois: Etanol (Desinfetante e/ou Antisséptico),
Isopropílico (+ eficiente)
DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS
Soluções aquosas (50 a 70%) são mais eficientes.
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR (Fungos,
Vírus) (Pouco ativo contra esporos)
Tempo de exposição: 10 a 15 min.
Antisséptico : Uso limitado (Hexaclorofeno)
Fenóis e Derivados
Desinfetante: (5%) (Duplofen)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR.
Tempo de exposição: Efeito é imediato.
ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE
DA MEMBRANA CELULAR
Catiônicos: Carga positiva (Quaternários de Amônio)
Aniônicos: Carga negativa ( Elevadas concentrações)
Não iônicos: Sem cargas (Só capacidade limpadora)
Detergentes (Surfactantes)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: 10 a 30 min.
Produto com atividade
antimicrobiana e de
detergência. É formulado a
partir do princípio ativo
Cloreto de Alquil
Dimetil Benzil Amônio,
que lhe confere a ação
antimicrobiana e o Nonil
Fenol Etoxilado (Tensoativo
não iônico), que lhe confere
a ação de detergência.
INATIVAÇÃO DE ENZIMAS
R-SH -2H
R-S-S-R
R-SH
H2O2 (Ação Antisséptica), Iodo (Antisséptico (PVPI),
Iodoforos, Cloro (Antisséptico - Clorohexidina),
Sanitizador (Hipoclorito), KMnO4 (Antisséptico (1:1000)
Oxidam Grupamentos Sulfidrilas:
Agem sobre grupamentos sulfidrilas livres (R-SH)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR
(Pouco ativos sobre esporos)
Tempo de exposição: Efeito imediato
O princípio ativo do PVPI
(polivinilpirrolidona-iodo) é o iodo
que com suas propriedades
germicidas amplamente
conhecidas, reduz a flora
bacteriana em curto espaço de
tempo
Substituem Grupamentos Sulfidrilas:
Metais Pesados: Mertiolate, Mercúrio Cromo, Prata -
Prata coloidal, Nitrato de prata (AgNO3) (oftalmia
gonocócica) (1%), Argirol (Proteinato de prata)
Cl
R-SH R-S
+ Hg Hg + 2 HCl
R-SH R-S
Cl
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: Só agem enquanto em contato
Óxido de Etileno Gás Tóxico e Explosivo.
AGENTES ALQUILANTES Substituem átomos de hidrogênio em radicais
(R-NH2, OH, R-SH, R-COOH)
Formaldeído Usado na forma gasosa (Fumegação)
Glutaraldeído Solução Aquosa (Glutarex)
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR e esporos.
Tempo de exposição: Curto sobre formas vegetativas
Prolongado sobre esporos
UM BOM DESINFETANTE.
Não provocar danos ao homem e animais durante aplicação,
Econômico.
Fácil aplicação,
Tolerado por materiais,
Estabilidade em sua composição química,
Perda mínima de potência por ação do ambiente,
Ação rápida e irreversível
Espectro de ação amplo,
Lavar as mãos
ainda continua
sendo uma das
soluções para
os problemas
enfrentados
pela
Microbiologia
Clínica