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Desenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular óssea Pedro Henrique Campos Cunha Gondim Orientador: André Ricardo Backes Coorientador: Bruno Augusto Nassif Travençolo Universidade Federal de Uberlândia [email protected] 16 de agosto de 2018 Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 1 / 87

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Desenvolvimento de um método para segmentação deimagens histológicas da rede vascular óssea

Pedro Henrique Campos Cunha GondimOrientador: André Ricardo Backes

Coorientador: Bruno Augusto Nassif Travençolo

Universidade Federal de Uberlândia

[email protected]

16 de agosto de 2018

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 1 / 87

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Roteiro

1 Introdução

2 Fundamentação Teórica

3 Método Proposto

4 Estudo de Casos

5 Conclusão

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Introdução

Roteiro

1 Introdução

2 Fundamentação Teórica

3 Método Proposto

4 Estudo de Casos

5 Conclusão

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Introdução

Introdução

A cada ano a computação auxilia mais a biologia:Processamento de sinais;Processamento de dados numéricos;Processamento de imagens digitais.

(a) (b) (c)

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Introdução

Introdução

Rede vascular óssea

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Introdução

Introdução

Aquisição de imagem histológica

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Introdução

Introdução

Aquisição de imagem histológica

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Introdução

Introdução

Análise de imagem histológicaDetectar características inerentes ao indivíduoDetectar anomalias no tecido;

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Introdução

Motivação

Ainda hoje feito de maneira manual;

Auxiliar especialistas da área;

Segmentação é um campo de pesquisa pouco explorado;

Utilizam Redes Neurais Artificiais;

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Introdução

Objetivo

Método de segmentação automática/semiautomática para imagenshistológicas da rede vascular óssea corada com H&E;

Aumentar a precisão de detecção de componentes histológicos(canais e osteócitos);

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Introdução

Dificuldades

Diversidade e complexidade dos tecidos analisados;

Preparação imperfeita das amostras;

Alta dimensionalidade dos dados;

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Fundamentação Teórica

Roteiro

1 Introdução

2 Fundamentação Teórica

3 Método Proposto

4 Estudo de Casos

5 Conclusão

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Fundamentação Teórica

Espaços de cores e suas transformações

XYZ

Luminosidade: referente ao brilho (intensidade);

Cromaticidade: referente a matiz e saturação (cor);

Y: brilho;

X e Z: cromaticidade;

RGB para XYZ pixel a pixel;

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Fundamentação Teórica

Espaços de cores e suas transformações

CIE L*a*b* 1976

Luminosidade: referente ao brilho (intensidade).Cromaticidade: referente a matiz e saturação (cor).L*: brilho;a* e b*: cromaticidade;RGB para CIE L*a*b* 1976, sistema de equações baseado no branco;

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Fundamentação Teórica

Normalização de imagens histológicas

Reduzir as variações nas características;

Melhorar os padrões dos tecidos biológicos;

(a) (b)

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Fundamentação Teórica

Deconvolução de cor

Separação de corantes por canais

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Fundamentação Teórica

Algoritmo de agrupamento k-means

Aprendizado não supervisionado;

Separa dados de entrada em k grupos;

Em segmentação k-means separa os grupos por similaridade deintensidade.

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Fundamentação Teórica

Operações morfológicas

Erosão;

Dilatação;

Abertura;

Fechamento;

Convex Hull;

Cálculo da circularidade através do PCA.

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Fundamentação Teórica

Segmentação

OtsuSegmentação automática baseado no histograma;

Maximizar a variância entre classes divididas pelo limiar T ;

Valley-emphasisA probabilidade do limiar T ocorrer deve ser pequena.

Neighborhood valley-emphasisConsidera a vizinhança do limiar T ;

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Fundamentação Teórica

Registro de imagem

Registro por Deformação

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Fundamentação Teórica

Registro de imagem

Registro por Deformação

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Fundamentação Teórica

Técnicas de avaliação para segmentação de imagens

Abordagem diagnóstica

Verdadeiro Positivo (VP): pixels que foram segmentados como objetoe também são objeto na imagem do especialista;

Verdadeiro Negativo (VN): pixels que foram segmentados comofundo e são parte do fundo na imagem do especialista;

Falso Positivo (FP): pixels que foram segmentados como objeto masnão são parte do objeto na imagem do especialista;

Falso Negativo(FN): pixels que foram segmentados como fundo e nãofazem parte do fundo na imagem do especialista;

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Fundamentação Teórica

Técnicas de avaliação para segmentação de imagens

Abordagem diagnóstica

Se =VP

VP + FN(1)

Es =VN

VN + FP(2)

Ac =VP + VN

VP + VN + FP + FN(3)

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Fundamentação Teórica

Técnicas de avaliação para segmentação de imagens

Coeficiente de Dice

Dice = 2|A ∩ B ||A |+ |B |

(4)

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Método Proposto

Roteiro

1 Introdução

2 Fundamentação Teórica

3 Método Proposto

4 Estudo de Casos

5 Conclusão

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Método Proposto

Descrição Geral

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Método Proposto

Pré-processamento

Normalização de imagens histológicas;Mudança de espaço de cor RGB para CIE L*a*b* 1976;Deconvolução de cor;

(a) (b)

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Método Proposto

Processamento

k-means aplicado nos canais, L*, H e HE;

Menor distância entre a media de intensidade e o branco éselecionado como região de interesse;

União entre as imagens segmentadas (J);

Crescimento de regiões guiado aplicado na imagem J;

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Método Proposto

Pós-processamento

Preenchimento de buracos;

Eliminação de objetos não circulares (elongação através do PCA);

Eliminação de grandes e pequenos objetos (baseado no tamanho daimagem);

Eliminação de objetos sem coloração branca;

Eliminação de objetos não tingidos pelo corante hematoxilina;

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Estudo de Casos

Roteiro

1 Introdução

2 Fundamentação Teórica

3 Método Proposto

4 Estudo de Casos

5 Conclusão

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Imagens cedidas pela Profa. Dra. Rejane de Faria Ribeiro-Rotta(UFG);Média de 1388 linhas por 1040 colunas, total de pixels: 1.443.520;

Conjunto Local QuantidadeP3A mandíbula posterior esquerda 13P3D mandíbula posterior direita 20S17 maxila posterior direita 12

S19F maxila posterior esquerda 10S27 mandíbula posterior direita 20

S29A maxila anterior 17S35 mandíbula posterior direita 21

S36A maxila posterior esquerda 13S37 mandíbula posterior esquerda 13

S39A mandíbula posterior direita 14Total ... 154

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Imagens relacionadas a cada grupo

P3A P3D S17

S19 S27 S29A

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Imagens relacionadas a cada grupo

S35 S36A

S37 S39A

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Alinhamento manual

(a) (b) (c)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Irregularidades encontradas nas imagens

(a) (b) (c)

(d) (e)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Normalização

(a) (b)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Mudança do espaço de cor e Deconvolução de cor

(a) (b)

(c) (d)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

k-means

(a) (b) (c)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Escolha do grupo mais próximo ao branco

(a) (b) (c)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Junção das imagens H e L*, Crescimento de regiões guiado

(a) (b)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Pós-processamento

(a) (b) (c)

(d) (e) (f)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Relação total de imagens e imagens segmentadas

Conjunto Quantidade Total Quantidade SegmentadaP3A 13 12P3D 20 20S17 12 12

S19F 10 9S27 20 20

S29A 17 15S35 21 19

S36A 13 9S37 13 12

S39A 14 8Total 154 136

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Imagens descartadas

(a) (b)

(c) (d)

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Resultado Abordagem DiagnósticaConjunto Sensibilidade Especificidade AcuráciaP3A 91,17% 99,91% 98,44%P3D 67,40% 99,40% 98,37%S17 83,59% 99,78% 98,97%S19F 62,16% 99,98% 97,20%S27 94,51% 98,74% 98,18%S29A 63,18% 94,15% 91,10%S35 85,68% 99,95% 99,41%S36A 97,86% 91,99% 94,20%S37 81,42% 99,93% 96,95%S39A 90,33% 99,21% 97,69%Média 85,99% 98,30% 97,05%

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Estudo de Casos

Maxila e mandíbula humana.

Média do coeficiente de DiceConjunto NVE Otsu VE MPP3A 90,67% 89,84% 63,93% 95,08%P3D 42,25% 43,45% 49,25% 73,58%S17 72,33% 63,48% 64,87% 88,93%S19 30,79% 19,58% 18,54% 76,21%S27 89,50% 87,61% 88,13% 93,60%S29A 51,74% 48,17% 48,23% 60,81%S35 63,52% 55,31% 56,55% 91,40%S36A 78,68% 78,75% 78,75% 92,74%S37 69,16% 64,82% 64,09% 89,11%S39A 76,50% 64,60% 64,42% 93,02%Média 61,51% 53,69% 59,76% 85,44%

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Imagens cedidas pela Profa. Dra. Paula Dechichi (UFU);Média de 7844 linhas por 7786 colunas, total de pixels: 61.073.384;Total de imagens: 168;Tiveram de ser redimensionadas para 80% do seu tamanho original;

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Remoção de objetos não conectados a matriz óssea

(a) (b)

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Aberturas morfológicas para eliminação de objetos externos amatriz óssea

(a) (b) (c)

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Operações de reconstrução da matriz óssea

(a) (b) (c)

(d) (e)

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Eliminação de partes do convex hull

(a) (b) (c)

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Aberturas morfológicas para eliminação de objetos internos amatriz óssea

(a) (b)

(c) (d)

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Resultado final do isolamento da matriz óssea

(a) (b)

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Alinhamento automático das imagens - 1

(Original) (Alinhado)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 53 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Alinhamento automático das imagens - 2

(Original) (Alinhado)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 54 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Alinhamento automático das imagens - 3

(Original) (Alinhado)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 55 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Normalização

(a) (b)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 56 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Mudança do espaço de cor e Deconvolução de cor

(L*) (H)

(E) (HE)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 57 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

k-means

(a) (b) (c)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 58 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Escolha do grupo mais próximo ao branco

(a) (b) (c)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 59 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Junção das imagens H, L* e HE; Crescimento de Regiões

(a) (b)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 60 / 87

Page 61: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Pós-processamentoResultado Processamento:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 61 / 87

Page 62: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Pós-processamentoPreenchimento de buracos:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 62 / 87

Page 63: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Pós-processamentoRemoção de objetos não circulares:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 63 / 87

Page 64: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Pós-processamentoRemoção de grandes e pequenos objetos:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 64 / 87

Page 65: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Pós-processamentoRemoção de objetos não segmentados na imagem L*:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 65 / 87

Page 66: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Pós-processamentoRemoção de objetos não segmentados na imagem H ou HE:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 66 / 87

Page 67: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Relação entre área marcada pelo especialista e artefato real

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 67 / 87

Page 68: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Resultado Abordagem Diagnóstica

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 68 / 87

Page 69: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur esquerdo de rato.

Comparação resultado Dice

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 69 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Cedidas pela Profa. Dra.Paula Dechichi (UFU);

Média de 10.700 linhas por7.133 colunas;

Total de pixels: 76.323.100;

Total de imagens: 85;

Tiveram de ser cortadas nametade;

Não foramredimensionadas;

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 70 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Eliminação de objetos pouco conectados a matriz óssea

(a) (b) (c)

(d) (e) (f)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 71 / 87

Page 72: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Eliminação de objetos muito conectados a matriz óssea

(a) (b) (c)

(d) (e) (f)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 72 / 87

Page 73: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Segmentação do interior da matriz óssea para referência decorte

(a) (b) (c)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 73 / 87

Page 74: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Tentativa alinhamento

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 74 / 87

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Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Pós-processamentoResultado Processamento:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 75 / 87

Page 76: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Pós-processamentoPreenchimento de buracos:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 76 / 87

Page 77: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Pós-processamentoRemoção de objetos não circulares:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 77 / 87

Page 78: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Pós-processamentoRemoção grandes e pequenos objetos:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 78 / 87

Page 79: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Pós-processamentoRemoção de objetos não segmentados na imagem L*:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 79 / 87

Page 80: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Pós-processamentoRemoção de objetos não segmentados na imagem H ou HE:

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 80 / 87

Page 81: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Resultado Abordagem Diagnóstica

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 81 / 87

Page 82: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Estudo de Casos

Fêmur direito de rato.

Comparação resultado Dice

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 82 / 87

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Conclusão

Roteiro

1 Introdução

2 Fundamentação Teórica

3 Método Proposto

4 Estudo de Casos

5 Conclusão

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 83 / 87

Page 84: Desenvolvimento de um método para segmentação de ...backes/publi_peq/mestrado_pedro_2018.pdfDesenvolvimento de um método para segmentação de imagens histológicas da rede vascular

Conclusão

Conclusão

Foi desenvolvido um método que pode ser usado tanto de maneiraautomática, como semiautomática para a segmentação de canaisósseos e osteócitos;

Método foi capaz de segmentar de maneira satisfatória as regiões deinteresse;

A aquisição das imagens interferem muito no resultado dasegmentação;

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 84 / 87

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Conclusão

Trabalhos Futuros

Imagens do estudo de caso 3 serão alinhadas manualmente;

Reconstrução 3D de cada estudo de caso;

Análise entre os artefatos do segundo e terceiro estudo de caso, paraavaliar o impacto da radioterapia na rede vascular óssea. (GONDIMet al., 2017)

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 85 / 87

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Conclusão

Contribuições em Produção Bibliográfica

GONDIM, P. H. C. C. et al. Automatic segmentation of the humanbone vascular network. XIII Workshop de Visão Computacional, p.41–46, 2017.

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 86 / 87

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Conclusão

Produção Bibliográfica em andamento

Está sendo desenvolvido um artigo para a revista Neurocomputing, arespeito da reconstrução 3D do Estudo de Caso do Fêmur esquerdo do

rato de laboratório.

Pedro Gondim (UFU) Desenvolvimento de um método automático... 16 de agosto de 2018 87 / 87