Diagnóstico diferencial de cocos Gram positivos: Staphylococcus spp, Streptococcus spp,...
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- Diagnstico diferencial de cocos Gram positivos: Staphylococcus spp, Streptococcus spp, Enterococcus spp Microbiologia Clnica
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- CGP em cachos, anaerbios facultativos Patgenos humanos e de animais Gnero destaque absoluto: Staphylococcus Staphy divide-se em 2 grupos com base na sua capacidade de coagular o plasma (reao de coagulase) Staphy Coag + = S. aureus (principalmente) Staphy Coag - = + de 30 sp (Destaque S. epidermidis e S. saprophyticcus) Staphylococcus
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- Morfologia Clulas esfricas que se dispem em cachos irregulares, cocos isolados, aos pares, em ttrades. Cocos jovens so fortemente Gram ( + ) e com o envelhecimento tornam-se Gram ( - ) So imveis No formam esporos Staphylococcus
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- Cultura Crescimento rpido em condies aerbicas ou microaerfilas. Em meios slidos, as colnias so redondas, lisas, elevadas e brilhantes. As colnias de S.aureus so acinzentadas a amarelo dourado intenso. As colnias de S.epidermidis apresentam colorao de cinza a branca. Staphylococcus
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- S. aureusS. epidermidis
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- Caracterstica de crescimento Fermentam carboidratos produzindo cido lctico (no gs!!!) So relativamente resistentes ao ressecamento e ao calor. Apresentam sensibilidade varivel a muitos agentes antimicrobianos (produo de B-lactamases, resistncia meticilina e oxacilina, tolerncia e plasmdios ) Staphylococcus
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- Comensais comuns da pele Oportunistas S. aureus (narinas e pele) S. epidermidis (narinas e pele) S. saprophyticcus (pele) Cepas multirresistentes S. aureus MRSA (meticilina/oxacilina resistente) S. aureus VISA (sensibilidade reduzida vancomicina) Staphylococcus
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- Restritos porta de entrada Folculo piloso e vias areas Leses, suturas, catteres Causador das seguintes infeces: Furunculose, conjuntivites, infeces epiteliais, pneumonias, abscessos profundos, endocardites, mastites, meningites, ITU (infeco trato urinrio), infeces Hospitalares. Doenas causadas pelas toxinas como sndrome do choque txico Staphylococcus aureus
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- S. aureus: Patognese Protenas de superfcie e extracelulares sendo potentes fatores de Virulncia Produo de laminina e fibronectina que so protenas que promovem a sua ligao ao hospedeiro. Fibronectina tambm atua como componente do cogulo.
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- S. aureus: Patognese Toxinas e enzimas Catalase Converso do perxido de hidrognio em gua e oxignio. Coagulase Impede a cascata normal da coagulao do plasma. Deposio de fibrina na superfcie dos estafilococos. Hialuronidase enzima que quebra acido hialurnico.
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- Toxinas e enzimas Estafiloquinase Ao semelhante a estreptoquinase, resultando em fibrinlise. Proteinases Lipases B-lactamases Exotoxinas: Causam necrose na pele S. aureus: Patognese
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- Toxinas e enzimas Exotoxinas Contm hemolisinas solveis (toxina alfa - protena capaz de lisar eritrcitos e lesar plaquetas; ao sobre musculatura lisa vascular; toxina beta; toxina gama e delta). Leucocidina Pode destruir leuccitos. So termoestveis. O gene que sintetiza essa substancia pode estar localizado no cromossomo ou ser transportado por plasmdios. S. aureus: Patognese
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- S. aureus: defesas Polissacardeo capsular (cpsula): funo de dificultar a fagocitose Protena A: protena de superfcie que se liga s molculas de IgG impedindo a fagocitose Leucocidina: toxina que age nos PMN causando danos aos leuccitos Hemolisinas: causam lise nos eritrcitos
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- Staphylococcus Coagulase negativa S. epidermidis: infeco Prteses, cateteres e o mais frequente mcgo encontrado em hemoculturas. S. saprophyticcus: ITU em mulheres Geralmente infeces subclnicas e/ou crnicas devido pequenas quantidades de fatores de virulncia e toxinas (mulheres jovens)
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- Streptococcus e Enterococcus Cocos Gram positivos com 0,5 - 1 m Imveis Crescimento na faixa de 37C Crescem com dificuldade nos meios usuais S. pneumoniae se dispe como diplococos lanceolados e infecta exclusivamente o homem No possuem a enzima catalase Maioria anaerbios facultativos e alguns anaerbios obrigatrios e microaerfilos
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- Streptococcus e Enterococcus Destaques: Streptococcus pyogenis Streptococcus agalactieae Enterococcus Cocos gram + em cadeias, imveis, no esporulados
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- Streptococcus pyogenes
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- Streptococcus agalactiae
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- Hemlise no Agar Sangue Alfa hemlise parcial Beta hemlise total Gama ausncia Rebecca Lancefield classificou os strep. beta-hemolticos em grupos de A a G de acordo com antgenos encontrados em casa um deles. Preferencialmente usa-se sangue de carneiro, pois em sangue humano alguns Strep Grupo D produzem beta-hemlise* e no produzem em sangue de carneiro. *GRUPO D no so beta-hemoliticos. Streptococcus e Enterococcus
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- Fatores de virulncia Protena R e T: marcador epidemiolgico Protena M: impede a fagocitose, existem mais de 50 tipos Cpsula: anti-fagocitria (S. pneumoniae) Estreptolisina O: citolisina lbil ao oxignio Estreptolisina S: citolisina estvel ao oxignio (Ambas leucotxicas) Estreptoquinase: lise da fibrina
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- Fatores de virulncia Exotoxinas pirognicas : A, B e C provocam a erupo cutnea da escarlatina. Difosfopiridina- nucleotidase : Relacionada com a capacidade de destruir leucocitos. Estreptoquinase (fibrinolisina) Transforma o plasminognio em plasmina (enzima que digeri a fibrina ) Estreptodornase : Despolimeriza o DNA dando viscosidade aos exsudatos. Hialuronidase : Cliva o cido hialurnico
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- Streptococcus e Enterococcus Strep B, C e G patgenos e FBN, muito associados a sepse em RN (Pesquisa-se Strep B na vagina da gestante antes do parto) Strep C, D (Enterococcus), F e G, causam doenas humanas moderadas e severas, mais associadas com infeces disseminadas profundas, endocardites
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- Streptococcus e Enterococcus Strep Grupo viridans: infeces orais, gastrointestinais, ITU, endocardites, placa dental, (S. mutans e S. sanguis = cariognicos) Strep A: febre reumtica, erisipela
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- DIAGNSTICO LABORATORIAL
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- Catalase Enzima que os Staphylococcus possuem que degrada o perxido de hidrognio Colocar uma gota de gua oxigenada (10 volumes) na lmina Pescar uma colnia da bactria e homogeneizar com a gua oxigenada Ocorrendo borbulhamento, a reao positiva. Desprendimento de oxignio e gua
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- Coagulase Enzima que o S. aureus possui e realiza a coagulao na presena de plasma sanguneo Colocar uma gota de plasma sanguneo na lmina ou tubo Pescar uma colnia da bactria e homogeneizar com o plasma sanguneo Ocorrendo aglutinaes, a reao positiva e confirma S. aureus
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- Coagulase
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- Novobiocina e Optoquina Discos de antibiticos Para Coagulase negativa, realizar a novobiocina Resistente: Staphylococcus saprophyticcus Sensvel: Staphylococcus epidermidis Para lise parcial, realizar a optoquina Resistente: Streptococcus grupo viridans Sensvel: Streptococcus pneumoniae
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- Novobiocina e Optoquina
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- Hemlise Alfa: lise parcial das hemcias ao redor da colnia no gar sangue Beta: lise total das hemcias ao redor da colnia no gar sangue Gama: ausncia de lise ao redor da colnia no gar sangue
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- PYR (pyrolidonyl aminopeptidase) O teste da PYR um procedimento qualitativo para determinao da capacidade dos estreptococos beta hemoliticos e Enterococcus para hidrolisarem enzimaticamente a L- pirrolidonil-B-Naftilamida (PYR). Kit que utiliza a reao de mudana de cor em papel filtro quando na presena de Strep. pyogenis beta hemoltico Quando ocorre a mudana de cor do papel filtro para rosa trata-se de um Strep. Beta hemoltico
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- PYR
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- Identificao - Estreptococos Teste da Bacitracina Semear em Agar sangue Incubar a 35C Qualquer zona de inibio positivo Identificao de S. pyogenes (grupo A) Teste do Sulfametoxazol Trimeptoprina (SXT) Agar sangue + disco STX Se sensvel a essa droga streptococcus no pertencente aos grupos A,B ou D de Lancefield
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- Teste da bile esculina e do NaCl 5,6% O gar bile-esculina um meio seletivo e diferencial recomendado para a diferenciao de bacterias do grupo D (enterococos e Streptococcus bovis) A esculina hidrolisada produzindo esculetina e glicose. A esculetina reage com o citrato frrico da frmula formando um complexo marrom escuro ou negro (+). NaCl 6,5% somente enterococos so (+) Identificao - Estreptococos
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- Hidrolise do Hipurato S. agalactiae (grupo B) so capazes de hidrolizar hipurato em glicina + acido benzico. Identificao presuntiva dos estreptococos beta-hemolticos grupo A, B e D. Identificao Estreptococos beta-hemolticos
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- Somente estreptococos dos grupo B (S. agalactiae) e D (Enterococcus ssp e Streptococcus bovis) podem no apresentar hemlise, denominada gama hemlise. Identificao Estreptococos gama-hemolticos
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- Identificao no deve ser feito por mtodos sorolgicos, pois a maioria no possui antgenos de Lancefield. Teste da optoquina Em gar sangue semear a bactria teste (35C) e colocar o disco de optoquina zona de inibio 14mm ou mais S. pneumoniae Teste da Bile solubilidade Indica presena de S. pneumoniae Incubar caldo + bactria teste a 35C por 3 horas Inocular suspenso de desoxicolato 10% Clareamento reflete lise bacteriana resultado + Identificao Estreptococos alfa-hemolticos