FERAL Josette DEL TEXTO a LA ESCENA Teatro Teoria y Practica
ESCENA DEL CRIMEN
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ESCENA DEL CRIMEN
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ESCENA DEL CRIMEN. REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DE CARABOBO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA DE MEDICINA “DR. WITREMUNDO TORREALBA” DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Y FISIOLOGÍA SEDE ARAGUA. Tecnología del ADN Recombinante. - PowerPoint PPT Presentation
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ESCENA DEL
CRIMEN
Tecnología del ADN Recombinante
REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELAUNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA DE MEDICINA “DR. WITREMUNDO TORREALBA”
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Y FISIOLOGÍASEDE ARAGUA
Jefa de Investigaciones:Prof. Lic. MARTHA PERNALETE
INVESTIGADORESBr. Cillo, MARIABr. Díaz Carlos
br. García, gustavoBr. García, anndreinaNOVIEMBRE, 2012
LA ESCENA DEL CRIMEN
Ha ocurrido un Homicidio.. intriga , sangre y adn rodea este
escalofriante hecho..
El culpable se ha dado a la fuga.. O tal vez no?
Pues hay que averiguarlo.. Presten atención.. Y comencemos
a investigar ..
ADN RECOMBINANTE¿QUÉ ES?
imagen: http://intercentres.cult.gva.es
Es una molécula que proviene de la unión artificial de dos
fragmentos de ADN
Por lo tanto, la tecnología de ADN recombinante
Es el conjunto de técnicas que permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior
manipulación e inserción en otro diferente.
La Observación del lugar de los hechos
Ya sabemos que ocurrió.. Sabemos que hay una
victima.. Pero.. Debemos precisar como sucedieron los hechos.. Inspeccionemos El lugar de los hechos y sus
alrededores.. Y Veamos que encontramos
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN DEL ADN RECOMBINANTE
NucleasasSon enzimas con capacidad de
escindir los enlaces fosfodiester de la cadena polinucleotidica de los ácidos nucleicos; son, por tanto,
fosfodiesterasas.
SU ESPECIFICIDAD PUEDE ANALIZARSE CON RESPECTO A TRES CRITERIOS:
Escisión en posiciones internas o
terminales en la estructura primaria.
Actuación sobre uno de los dos tipos de enlace
fosfodiester
Reconocimiento de nucleótidos, bien por la pentosa o bien por la base
nitrogenada (solo en algunas nucleasas)
NUCLEASAS1) Escisión en posiciones internas o
terminales en la estructura primaria :
-Las exonucleasas
- Las endonucleasas
Imagen: biología molecular de José Luque
NUCLEASAS
2)Actuación sobre uno de los dos tipos de enlace
fosfodiester
Algunas nucleasas ( tipo a) actúan específicamente hidrolizando los enlaces
fosfato formados con el OH 3´, mientras que otras (tipo b) hidrolizan los formados con
OH 5´.
Imagen: biología molecular de José Luque
NUCLEASAS3) Reconocimiento de nucleótidos, bien
por la pentosa o bien por la base nitrogenada
Desoxirribonucleasas o DNasas, que actúan solo sobre DNA; ribonucleasas o RNasas, que
hidrolizan RNA
Imagen: biología molecular de José Luque
ENZIMAS DE RESTRICCIÓNEnzimas de restricción
Características
Se nombran con tres letras tomadas del
genero y especie de la bacteria de la que se
aislaron originalmente, que identifica el
serotipo.
Luego se identifica con un numero romano en el caso
de que en una misma variante se hayan
encontrado varias enzimas con distinta especificidad.
La importancia de las enzimas de restricción
radica en su gran especificidad de
reconocimiento de una secuencia de corta de
DNA
Imagen: biología molecular de José Luque
ENZIMAS DE RESTRICCIÓNL a s e n z i m a s d e re s t r i c c i ó n s e a g r u p a n e n t re s f a m i l i a s ,
d e a c u e rd o a s u s p ro p i e d a d e s :
Imagen: biología molecular de José Luque
SISTEMA DE RESTRICCIÓN-MODIFICACIÓN
Imagen: biología molecular de José Luque
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN DE TIPO II
Imagen: biología molecular de José Luque
Acción de las enzimas de restricción de tipo II
http://www.google.co.ve/imgres?q=ENZIMAS+DE+RESTRICCI%C3%93N+ANIMACION
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN DE TIPO II
Extremos resultantes de la acción de las enzimas de restricción
Imagen: biología molecular de José Luque
ADN- LIGASA
o Empalman la molécula DNA con el vector de clonación o con otro ADN.
o Utilizan ATP.
o Encargadas de cerrar las mellas que quedan entre segmentos reasociados ADN
http://www.solociencia.com/medicina/06112801.htm
o Polinucleótido quinasa.Añade un grupo fosfato al grupo OH del extremo 5´ de un polinucleótido para marcarlo o permitirle la ligación.
o Fosfatasa alcalina.Elimina fosfatos terminales del extremo 3´ ó 5´ o de ambos.
o Terminal Transferasa. Añade colas homopoliméricas, genera extremos cohesivos en un fragmento de DNA.(Cebador 3’ OH libre)
o Taq ADN polimerasaSe une a una región de la doble hélice de ADN y posibilita la síntesis de una nueva cadena de ADN a partir de otra existente.
Otras enzimas utilizadas en la obtención del ADN recombinante
Muy bien, Sabemos que fue en una
habitación.. Que hubo forcejeo,
mucha ira, sangre y Comida sin terminar..
Indicios , interrogacion e investigaciones
Al parecer hubo algunos posibles testigos… Prosigamos la investigación y veamos que mas encontramos
¿QUE ES LA CLONACION?
CLONACION DE MOLECULAS DE ADN
Y EL ADN RECOMBINATE?
• Es la producción de un gran número de copias de una región de ADN o de ADNc.
Se basa esta clonación en la realización de múltiples rondas de replicación, pero en este caso catalizada por la ADN polimerasa propia de la célula en la que se va a llevar a cabo el proceso, célula anfitriona.
Para su estudio Propiedades, función e aplicación comercial
Ingeniería de proteínasPara la alteración de sus propiedades
ESQUEMA GENERAL DEL PROCEDIMIENTO DE CLONACIÓN
Son 7 etapas:• 2 de
preparación de muestras.
• 4 sucesivas de clonación propiamente
dicha.• 1 de
expresión.
Se inocula el
fragmento de ADN
que se va a clonar
Cultivo en
placas de agar
De manera que al
dividirse la
bacteria el vector se replica
Medio de cultivo líquido
Aplican antibióticos para eliminar
bacterias que no hayan adquirido el gen de resistencia
Multiplicación bacteriana
VIDEO!
Imagen: biología molecular de José Luque
ETAPAS DE LA CLONACION
PRIMERA ETAPA
Se parte de células nucleadas,
normalmente sanguíneas.
El fragmento a clonar se aisla del
resto,mediante técnicas:
• Electroforesis en gel de agarosa.
Imagen: biología molecular de José Luque
ETAPAS DE LA CLONACION
SEGUNDA ETAPA¿Qué es un
Vector?
Molécula de ADN pequeño, fácil de aislar, con secuencia y mapa de restricción, de fácil
inducción a la célula anfitriona y con capacidad de replicación
autónoma.
Imagen: biología molecular de José Luque
ETAPAS DE LA CLONACION
TERCERA ETAPA
Imagen: biología molecular de José Luque
ETAPAS DE LA CLONACION
CUARTA ETAPA
Tipos de células anfitrionas:
• Procariotas.• Eucariotas.
Métodos de introducción
del ADN recombinante
Imagen: biología molecular de José Luque
ETAPAS DE LA CLONACION
QUINTA ETAPA
Imagen: biología molecular de José Luque
ETAPAS DE LA CLONACION
SEXTA ETAPA
SÉPTIMA ETAPA(OPCIONAL)
4ta etapa
5ta etapa
6ta etapa
¿CUAL ES LA IMPORTANCIA DE
ESTA CLONACION?
Imagen: biología molecular de José Luque
Gracias a Nuestra investigación hemos determinado que hay 2 posibles culpables
Los llamaremos sospecho 1 y Sospechoso 2
BIEN, Hemos concluido la fase de interrogaciones…
Recolección
de Evidencias
Estamos de nuevo en el lugar de los hechos.. Veamos que mas podemos encontrar
para incriminar a uno de nuestros sospechosos.. Y por supuesto.. Descubrir el arma
homicida.…
