ESCOLA SECUNDÁRIA DE JAIME MONIZ Disciplina: Biologia e Geologia – 11º ano Ano letivo: 2012/2013 Unidade 5: Crescimento e renovação celular Tema: Replicação do DNA Nome do aluno:_____________________________________ nº:___ Turma: ___ Data: __/__/__

FICHA DE TRABALHO

EXPERIÊNCIA DE MESELSON E STAHL Em 1958, Meselson e Stahl levaram a cabo uma experiência, na qual se pode considerar duas etapas e que se encontram representadas seguidamente. Experiência A

A1 – Cultivaram bactérias (Escherichia coli) em meios de cultura diferentes: um contendo um isótopo pesado de azoto (15N) e outro contendo azoto normal (14N). A2 – Extraíram o DNA das bactérias presentes em cada um dos meios de cultura e procederam à sua centrifugação.

A3 – Verificaram que as cadeias de DNA das bactérias cultivadas no meio contendo 15N eram mais densas do que as cadeias de DNA das bactérias que cresceram no meio com azoto normal (14N).

Experiência B B1 – Cultivaram E. coli num meio de cultura com 15N.

B2 – Após várias gerações de bactérias se terem desenvolvido no meio com azoto pesado, foram transferidas para um meio de cultura com azoto normal (14N). Imediatamente após a transferência, foi retirada uma amostra de onde se extraiu o DNA que foi sujeito a centrifugação.

B3 - Ao fim de 20 minutos (tempo necessário para que estas bactérias se dividam e deem origem a uma nova geração), foi retirada uma amostra, extraído o DNA e centrifugado.

B4 – Ao fim de 40 minutos, foi retirada uma nova amostra que foi sujeita ao procedimento anterior (extração e centrifugação do DNA).

1 – Que resultados da experiência permitem afirmar que o DNA das bactérias cultivadas no meio com azoto pesado tinha maior densidade?

2 – Por que razão o DNA das bactérias cultivadas no meio com azoto pesado tinha maior densidade?

3 – Em que medida os resultados desta experiência apoiam a hipótese semiconservativa?

4 – Que resultados poderá prever relativamente à densidade das moléculas de DNA que uma terceira geração destas bactérias deveria apresentar?

PROPOSTA DE SOLUÇÕES 1 – Que resultados da experiência permitem afirmar que o DNA das bactérias cultivadas no meio com azoto pesado tinha maior densidade? O DNA das bactérias cultivadas com azoto pesado é mais denso, porque após ser sujeito a centrifugação encontra-se mais próximo da base do tubo (ao contrario do DNA das bactérias que foram cultivadas com azoto normal, que se dispõe mais próximo da superfície).

2 – Por que razão o DNA das bactérias cultivadas no meio com azoto pesado tinha maior densidade?

Os nucleótidos utilizados para formar as suas cadeias de DNA incorporaram o azoto disponível no meio (azoto pesado), apresentando, por isso, maior densidade.

3 – Em que medida os resultados desta experiência apoiam a hipótese semiconservativa? Os resultados apoiam a hipótese semiconservativa, na medida em que foi obtida uma primeira geração de DNA com densidade intermédia, relativamente às bactérias cultivadas exclusivamente com 14N ou com 15N.

4 – Que resultados poderá prever relativamente à densidade das moléculas de DNA que uma terceira geração destas bactérias deveria apresentar? Na terceira geração, deverá surgir 75% do DNA com o nível de densidade correspondente ao 14N e 25% de DNA com densidade intermédia.