A actividade realizada dividiu-se em

quatro partes distintas:

Trabalho prático com o ovo não fecundado

da galinha.

Trabalho prático com o ovo

fecundado da galinha.

Trabalho prático de elaboração de preparações

definitivas de embriões da galinha

Acompanhamento dos pintos nascidos

O que é a Fecundação?

A fecundação é o fenómeno de união de dois gâmetas sexuais (masculino e feminino) do qual

resulta um “ovo”. No caso da galinha, esta põe constantemente ovos, no entanto, estes só serão

fecundados se anteriormente ocorrer a fecundação, isto é, a intervenção do gâmeta sexual

masculino, neste caso, do galo.

O que é um Embrião?

Um embrião é a evolução do ovo resultante da fecundação. No caso da galinha, o embrião

desenvolver-se-á dentro do ovo, se este tiver sido anteriormente fecundado.

0 que é uma Preparação Definitiva?

Uma preparação definitiva é a montagem de uma amostra de determinado material, de modo a

que se possa observar ao microscópio essa mesma amostra. Chama-se definitiva, quando a sua

montagem se torna permanente, que é o caso do embrião da galinha.

Em que consiste a Incubação?

Chama-se incubação ao processo de desenvolvimento de um ovo, desde a fecundação até à

eclosão (momento em que abandona o ovo). Como a experiência é feita sem a galinha, temos de

recorrer a uma estufa, que mantenha os ovos à temperatura indicada, de modo a que estes se

desenvolvam com viabilidade.

Para a realização deste trabalho utilizamos um ovo não

fecundado de galinha e pretendemos estudar os seguintes

tópicos:

• Conhecer a constituição interna e externa do ovo.

•Testar a função de alguns dos seus componentes.

• Compreender o ovo como célula estruturada para

o desenvolvimento embrionário.

Quando abrimos um ovo e observamos o interior da sua casca podemos

constatar a existência de duas membranas (uma mais interior e outra mais

exterior).

Estas membranas apresentam um aspecto fibroso (que pode ser confirmado

por observação miscroscópica).

A sua elasticidade é elevada, funcionando estas membranas como uma espécie

de saco amniótico (comparando ao ser humano).

Desempenham portanto função de protecção.

A albumina (a clara do ovo) é disposta em camadas concêntricas,

mais ou menos densas, partindo de uma mais fina à volta da gema. O

pH da Albumina é alcalino de modo a impedir o desenvolvimento de

bactérias.

A calaza permite conservar a posição da gema durante a descida do

ovo pelo oviduto, favorecendo o desenvolvimento do blastocisto.

Unida à gema do ovo, encontra-se uma estrutura resistente e de

consistência viscosa, que se denomina de calaza.

Quando cozemos o ovo, é-nos possível compreender um

elevado número de aspectos:

Enquanto coze o ovo perde o ar a partir dos poros da casca.

A sua casca quando em contacto com ácido clorídrico sofre alterações o que nos leva

a concluir que é composta por calcário.

A casca é uma estrutura única, resultado de um processo de evolução extraordinário.

Funções da Casca:

• Protecção do conteúdo interno do ovo contra impactos mecânicos e invasão de

microorganismos;

• Controlo da troca de gases e evaporação de água através dos poros da casca;

• Fornecimento de cálcio para o desenvolvimento embrionário.

Na composição do ovo entram diversas proteínas, cujas funções são diversas:

• Constituem uma boa reserva de água;

• Impedem o crescimento bacteriano;

• Têm funções anti-virais;

• Constituem boas reservas nutritivas.

Quando cozido o ovo, estas proteínas sofrem desnaturação.

Sabe se os ovos que come são de origem natural ou artificial?

Quando cozido, o ovo mostra-nos a sua origem!

Basta que faça um corte longitudinal sobre o ovo cozido e observe a gema.

Se esta apresentar diversas camadas concêntricas, que alternam entre cor mais clara e mais

escura, significa que o seu ovo é de origem natural!

Porquê?

Sabe-se que a produção de pigmentos carotenóides é estimulada pela luz e através da alimentação

da a fêmea armazena-os no ovo. Como as galinhas do campo sofrem a alteração de dia/noite uma

parte dos carotenos é armazenada de dia e outra parte é armazenada de noite, assim se explica a

origem do seu ovo!

O ovo é uma célula rica em proteínas de reserva e de defesa.

Possui uma casca resistente, capaz de proteger o interior do ovo de

choques mecânicos e que é constituída por uma série de poros que

permite as trocas gasosas com o meio exterior. Para além disso

esta casca é rica em cálcio, o que em conjunto com as diferentes

proteínas, permite o fornecimento de nutrientes necessários ao

desenvolvimento embrionário.

Toda a constituição do ovo, assegura de alguma

maneira o desenvolvimento embrionário!

Para a realização deste trabalho utilizamos um ovo fecundado de

galinha e pretendemos estudar os seguintes tópicos:

• Verificar a influência de factores ambientais no desenvolvimento

embrionário;

• Identificar as estruturas embrionárias e extra-embrionárias observáveis

em diferentes fases do desenvolvimento;

• Aplicar técnicas de manuseamento laboratorial de embriões;

• Observar a taxa de natalidade dos ovos postos em incubação e estudar

as razões da mortalidade dos restantes.

Ao utilizar corante alimentar na casca do ovo podemos observar

a diversidade de poros aqui existentes.

Na nossa experiência concluímos que a quantidade de poros

é maior na extremidade rômbica do ovo.

Isto leva-nos a compreender a

existência de uma câmara de ar

nessa zona, a partir de onde

ocorrem as trocas gasosas entre o

meio exterior e o meio onde se

desenvolve o embrião.

Para assegurar a viabilidade do desenvolvimento embrionário, os nossos ovos

foram postos a incubar na estufa a uma temperatura de 36,8ºC com uma tina de

água que assegure a humidade dentro da estufa.

Os ovos foram colocados na posição vertical, com a extremidade bicuda virada

para baixo (tentando simular o verdadeiro processo de desenvolvimento).

Utilizamos alguns dos ovos fecundados para realizar trabalhos laboratoriais e

observar diferentes factores do desenvolvimento embrionário.

A temperatura constitui um factor de influência do desenvolvimento do embrião,

sendo que a temperaturas inferiores a 35ºC o desenvolvimento embrionário é

interrompido e superiores a 40ºC as proteínas, presentes no embrião, sofrem

alterações.

A temperatura similar a um desenvolvimento natural deve rondar os 36,8ºC.

A humidade presente dentro da estufa impede a desidratação do embrião.

Em todo o trabalho prático foram utilizados 12 ovos fecundados, dos quais 6

serviram como objecto de estudo em diferentes fases de desenvolvimento.

3 dos 6 ovos em estudo foram abertos no dia 26 de Novembro de 2010 com

96 horas de desenvolvimento 4ºdia

Os outros 3 dos 6 ovos em estudo foram abertos

no dia 28 de Novembro de 2010 com

144 horas de desenvolvimento 6ºdia

Por observação, sobretudo ao 6ºdia de desenvolvimento,

conseguimos identificar as seguintes estruturas embrionárias:

Encéfalo

Vesícula Óptica

Alantóide(anexos embrionários)

Coração(quando se faz incidir luz sobre oembrião o coração acelera o seupulsar)

Sómitos (estrutura dorsal)

A partir das observações feitas aos embriões em

desenvolvimento, pudemos realizar preparações

definitivas do embrião da galinha, aprendendo assim

novas técnicas laboratoriais.

O processo de elaboração das preparações definitivas

compreende 6 fases distintas:

- Fixação

- Lavagem

- Coloração

- Desidratação

- Diafanização

- Preparação do meio de montagem

FIXAÇÃO

O embrião é transferido para uma caixa de Petri onde é embebido no fixador de Carnoy.

Objectivos desta fase de preparação:

- Preservação do material histológico por morte celular e consequente destruição de qualquer bactéria

que possa estar presente no embrião.

- Coagulação de proteínas ou desnaturação das suas cadeias.

- Conservação da estrutura celular.

Caixa de Petri com o Fixador de

Carnoy

LAVAGEM

Depois de fixado (mais ou menos durante 2 horas) o embrião é lavado a partir de

uma solução alcoólica a 70%

Objectivos desta fase de preparação:

- O etanol (álcool) remove o fixador e conserva o embrião por tempo indeterminado.

COLORAÇÃO

Após a lavagem, o embrião é limpo por água destilada para retirar o excesso de

etanol e de seguida é corado através de Carmim acético.

Objectivos desta fase de preparação:

- O corante (carmim acético) é um corante

nuclear, deste modo vai melhorar as condições

de observação das diferentes estruturas

celulares.

DESIDRATAÇÃO

Depois de corado, o embrião sofre um processo de desidratação em

que se retira o corante através de concentrações diferentes de

etanol.

Objectivos desta fase de preparação:

- Uma vez que o meio de montagem não é solúvel em água, é

necessário proceder à sua desidratação, garantido a viabilidade da

preparação.

Objectivos desta fase de preparação:

- A diafanização torna o embrião mais visível

posteriormente na observação, para além disso serve

de ponte entre a desidratação e a montagem, pois

mistura-se simultaneamente com o etanol e com as

substâncias do meio de montagem.

DIAFANIZAÇÃO

O embrião é mergulhado em Xileno durante dois períodos de 10 minutos.

PREPARAÇÃO DO MEIO DE MONTAGEM

É necessário montar entre a lâmina e a lamela um meio próprio para conservar o

embrião (devidamente limpo, corado, desidratado e diafanado). Este meio é feito

através de um bálsamo – Bálsamo de Canadá – deixando um espaço entre a

lâmina e lamela de modo a que esta não danifique o material a observar.

Objectivos desta fase de preparação:

- Este meio de montagem é essencial para que o embrião fique conservado, pois

uma vez que se trata de uma preparação definitiva, é necessário que o embrião

fique estabilizado e visível para observação definitivamente.

Observações feitas ao microscópio Motic

A taxa de natalidade obtida no nosso trabalho prático

foi de 50%, ou seja, nasceram 3 dos 6 pintos que

colocámos na estufa.

Porque não nasceram os outros três?Desconhecemos a razão concreta, no entanto podemos

apontar o meio envolvente e o processo de desenvolvimento

como causas possíveis. Não nos podemos esquecer que todo

o desenvolvimento foi artificial, feito em laboratório, pelo que

nos damos satisfeitos com os resultados obtidos!

Sendo menos do que

os esperados, toda

a atenção foi dada

aos nossos três

sobreviventes!

Será que me vão deixar dormir?

Mas o que é isto?

Nos fins-de-semana não os

podíamos deixar na escola!

Então, tivemos de os trazer

para casa, o que foi um

enorme prazer!

Mas não foram só facilidades…

Tivemos de manter tudo limpo e

alimentar os nossos pintos…

É chegada a altura de nos despedirmos dos nossos pintos…

Felizmente, arranjamos um novo lar onde vão poder crescer

livremente e com todas as condições:

A Quinta Pedagógica dos Olivais!