fase estacionária - Universidade da Madeira · Cromatografia de adsorção (coluna) L S adsorção...
14
Cromatografia Cromatografia técnica baseada nas diferenças de distribuição dos componentes a separar entre duas fases: uma fase móvel e uma fase estacionária. técnica em que os componentes duma mistura se separam de acordo com as velocidades às quais são transportados por uma fase móvel através de uma fase estacionária fase móvel (eluente) fase que se move gás - cromatografia em fase gasosa - GC) líquido - cromatografia em fase líquida - LC fase estacionária fase fixa (quer em coluna quer em superfície plana) normalmente um sólido activo pode ser um líquido depositado num suporte sólido inerte (GC) eluição processo de passagem através da fase estacionária (por acção da fase móvel)
Transcript of fase estacionária - Universidade da Madeira · Cromatografia de adsorção (coluna) L S adsorção...
Cro
ma
tog
rafi
a
Cro
ma
tog
rafi
a
técn
ica
ba
sea
da
na
s d
ife
ren
ças
de
dis
trib
uiç
ão
do
s co
mp
on
en
tes
a s
ep
ara
r e
ntr
e d
ua
s
fase
s: u
ma
fa
se m
óv
el
e u
ma
fa
se e
sta
cio
ná
ria
.
técn
ica
em
qu
e o
s co
mp
on
en
tes
du
ma
mis
tura
se
se
pa
ram
de
aco
rdo
co
m a
s ve
loci
da
de
s
às
qu
ais
sã
o t
ran
spo
rta
do
s p
or
um
a f
ase
mó
ve
l a
tra
vés
de
um
a f
ase
est
aci
on
ári
a
fase
mó
ve
l (e
lue
nte
)
fase
qu
e s
e m
ove
gá
s -
cro
ma
tog
rafi
a e
m f
ase
ga
sosa
-G
C)
líq
uid
o -
cro
ma
tog
rafi
a e
m f
ase
líq
uid
a -
LC
fase
est
aci
on
ári
a
fase
fix
a (
qu
er
em
co
lun
a q
ue
r e
m s
up
erf
ície
pla
na
)
no
rma
lme
nte
um
só
lid
o a
ctiv
o
po
de
se
r u
m l
íqu
ido
de
po
sita
do
nu
m s
up
ort
e s
óli
do
in
ert
e (
GC
)
elu
içã
o
pro
cess
o d
e p
ass
ag
em
atr
avé
s d
a f
ase
est
aci
on
ári
a (
po
r a
cçã
o d
a f
ase
mó
vel)
Cro
ma
tog
rafi
a -
Evo
luçã
o h
istó
rica
18
50
-R
un
ge
mis
tura
de
tin
tas
em
pa
pe
l m
ata
-bo
rrã
o
18
61
-S
cho
en
be
in -
Go
pp
els
rod
er
sais
, á
gu
a,
vin
ho
, le
ite
, u
rin
a,
...
/ se
pa
raçã
o p
or
cap
ila
rid
ad
e
19
06
-Ts
we
tt
pig
me
nto
s d
e p
lan
tas
/ co
lun
a d
e g
iz m
oíd
o (
carb
on
ato
de
cá
lcio
)
19
38
-Is
ma
ilo
v e
Sch
raib
er
(19
56
-S
tah
l)
pri
me
ira
de
scri
ção
do
TLC
/ C
CF
-ca
ma
da
fin
a /
uso
de
alu
min
a n
a s
ep
ara
ção
de
tin
tura
s p
rim
eir
a d
esc
riçã
o d
o T
LC /
CC
F -
cam
ad
a f
ina
/ u
so d
e a
lum
ina
na
se
pa
raçã
o d
e t
intu
ras
farm
acê
uti
cas
19
41
-M
art
in e
Sy
ng
e (
pré
mio
No
be
l e
m 1
95
2)
cro
ma
tog
rafi
a d
e p
art
ilh
a (
am
ino
áci
do
s) /
cro
ma
tog
rafi
a g
ás-
líq
uid
o
19
67
-H
ub
er
e H
uls
ma
n
de
sen
volv
ime
nto
da
cro
ma
tog
rafi
a L
íqu
ido
-Líq
uid
o (
HP
LC)
uso
de
pa
rtíc
ula
s d
e 5
a 1
0 µ
m /
pre
ssã
o e
leva
da
12 P
rém
ios
Nob
el (
entr
e 19
37 e
197
2) e
stão
dire
ctam
ente
rela
cion
ados
com
trab
alho
s em
cro
mat
ogra
fia
Cro
ma
tog
rafi
a -
cla
ssif
ica
ção
qu
an
to à
fo
rma
do
su
po
rte
colu
na
-a
fa
se e
sta
cio
ná
ria
est
á c
on
fin
ad
a n
um
tu
bo
po
r o
nd
e é
fo
rça
da
(p
ress
ão
/
gra
vid
ad
e)
a p
ass
ag
em
da
fa
se m
óve
l
pla
na
r(c
am
ad
a f
ina
/ p
ap
el)
-fa
se m
óve
l a
van
ça p
or
cap
ila
rid
ad
e o
u g
rav
ida
de
qu
an
to a
os
pro
cess
os
físi
co-q
uím
ico
s
ad
sorç
ão
-se
pa
raçã
o b
ase
ad
a n
as
dif
ere
nça
s d
e a
fin
ida
de
s a
dso
rve
nte
s d
os
com
po
ne
nte
s p
ela
su
pe
rfíc
ie d
o s
óli
do
act
ivo
pa
rtil
ha
-se
pa
raçã
o b
ase
ad
a n
as
dif
ere
nça
s d
e s
olu
bil
ida
de
do
s co
mp
on
en
tes
na
fa
se
est
aci
on
ári
a (
GC
) o
u e
ntr
e a
du
as
fase
s (L
C)
est
aci
on
ári
a (
GC
) o
u e
ntr
e a
du
as
fase
s (L
C)
pe
rmu
ta ió
nic
a -
sep
ara
ção
ba
sea
da
na
s d
ife
ren
tes
ten
dê
nci
as
do
s co
mp
on
en
tes
ión
ico
s o
u
ion
iza
do
s à
pe
rmu
ta c
om
iõ
es
da
fa
se e
sta
cio
ná
ria
qu
an
to à
na
ture
za d
a f
ase
mó
ve
l:
fase
ga
sosa
(G
C)
/ fa
se l
íqu
ida
(H
PLC
) /
flu
ido
su
pe
rcrí
tico
(S
FC
)
qu
an
to à
fo
rma
de
in
tro
du
ção
da
am
ost
ra
fro
nta
l -
con
tín
ua
(e
luiç
ão
ap
ós
a s
atu
raçã
o d
a f
ase
est
aci
on
ári
a)
nã
o p
erm
ite
a s
ep
ara
ção
en
tre
to
do
s o
s co
mp
on
en
tes
da
mis
tura
zon
al
-d
esc
on
tín
ua
(p
erm
ite
a s
ep
ara
ção
to
tal)
AA
+B
A+
B+
C
Cro
ma
tog
rafi
a -
cla
ssif
ica
ção
qu
an
to a
o o
bje
ctiv
o d
a s
ep
ara
ção
an
alí
tica
-co
ntr
olo
de
qu
ali
da
de
(im
pu
reza
s /
pu
reza
/ d
ose
am
en
tos)
pre
pa
rati
va
-p
rod
uçã
o /
pu
rifi
caçã
o (
ev
ita
as
técn
ica
s d
e e
xtra
cçã
o q
uím
ica
)
qu
an
to à
co
mp
osi
ção
da
fa
se m
óv
el
iso
crá
tica
-co
mp
osi
ção
do
elu
en
te c
on
sta
nte
ao
lo
ng
o d
a e
luiç
ão
gra
die
nte
-co
mp
osi
ção
do
elu
en
te v
ari
a d
e f
orm
a c
on
tín
ua
qu
an
to a
o m
od
o d
e o
pe
raçã
o
an
áli
se p
or
de
slo
cam
en
to
fase
mó
ve
l sa
tura
da
co
m s
ub
stâ
nci
a d
e m
aio
r a
fin
ida
de
pa
ra c
om
a f
ase
est
aci
on
ári
a,
fase
mó
ve
l sa
tura
da
co
m s
ub
stâ
nci
a d
e m
aio
r a
fin
ida
de
pa
ra c
om
a f
ase
est
aci
on
ári
a,
de
slo
can
do
os
com
po
ne
nte
s d
a a
mo
stra
de
aco
rdo
co
m o
s re
spe
ctiv
os
gra
us
de
afi
nid
ad
e.
an
áli
se p
or
elu
içã
o
a f
ase
mó
ve
l p
ass
a c
on
tin
ua
me
nte
na
co
lun
a a
rra
sta
nd
o a
am
ost
ra e
pro
vo
can
do
o p
roce
sso
de
se
pa
raçã
o.
A s
ep
ara
ção
do
s co
mp
on
en
tes
da
mis
tura
de
pe
nd
e a
pe
na
s d
o s
eu
co
efi
cie
nte
de
p
art
ilh
a e
ntr
e a
s fa
ses
mó
ve
l e
est
aci
on
ári
a
an
áli
se p
or
gra
die
nte
de
te
mp
era
tura
a s
ep
ara
ção
é f
eit
a p
or
um
gra
die
nte
té
rmic
o n
o s
en
tid
o d
a e
luiç
ão
da
am
ost
ra
iso
térm
ica
/ t
em
pe
ratu
ra e
sca
lon
ad
a /
te
mp
era
tura
pro
gra
ma
da
lin
ea
rme
nte
Mé
tod
os
cro
ma
tog
ráfi
cos
Cro
mat
og
rafi
a -
proc
esso
de
sepa
raçã
o qu
e ex
ige
um e
quilí
brio
com
petit
ivo
entr
e a
fase
est
acio
nária
a fa
se m
óvel
e a
s m
oléc
ulas
da
amos
tra.
Cro
mat
og
ram
a -
regi
sto
da c
once
ntra
ção
do s
olut
o vs.
tem
po (
volu
me)
de
elui
ção
Cro
mat
óg
rafo
-eq
uipa
men
to c
onst
ituíd
o po
r si
stem
a de
inje
cção
, col
una
e de
tect
or a
dequ
ado
para
a
real
izaç
ão d
e se
para
ção
(aná
lise)
e q
uant
ifica
ção
de m
istu
ras.
Tip
o de
cro
mat
ogra
fiafa
se m
óve
lfa
se e
stac
ioná
riapr
oce
sso
de d
istr
ibui
ção
Cro
mat
ogra
fia d
e pa
rtilh
a (c
olun
a)L
Lpa
rtilh
a
Cro
mat
ogra
fia d
e pa
pel
LL
part
ilha
Cro
mat
ogra
fia g
ás-lí
quid
o (G
LC)
GL
part
ilha
Cro
mat
ogra
fia d
e ad
sorç
ão (
colu
na)
LS
adso
rção
Cro
mat
ogra
fia e
m c
amad
a fin
a (T
LC)
LS
adso
rção
Cro
mat
ogra
fia g
ás-s
ólid
o (G
SC
)G
Sad
sorç
ão
Cro
mat
ogra
fia p
erm
uta
ióni
caL
Sre
acçã
o qu
ímic
a re
vers
ível
Cro
mat
ogra
fia d
e pe
rmea
ção
gel
LS
criv
agem
mol
ecul
ar
Co
nce
ito
s e
eq
ua
çõe
s b
ási
cas
Se
pa
raçã
o d
os
com
po
ne
nte
sse
pa
raçã
o a
um
en
ta c
om
o t
em
po
de
elu
içã
o (
de
vid
o à
s d
ife
ren
ças
de
afi
nid
ad
es)
Ala
rga
me
nto
do
s p
ico
s (b
an
da
s)o
s p
ico
s te
nd
em
a a
larg
ar
com
o t
em
po
de
elu
içã
o (
dim
inu
içã
o d
a e
fici
ên
cia
de
se
pa
raçã
o)
Co
efi
cie
nte
de
pa
rtil
ha
(K
)ra
zão
en
tre
a c
on
cen
tra
ção
na
fa
se e
sta
cio
ná
ria
(C
S) e
a c
on
cen
tra
ção
na
fa
se m
óve
l (C
M)
ide
alm
en
te,
K é
co
nst
an
te !
!
A e
ficiê
ncia
da
sepa
raçã
o cr
omat
ográ
fica
depe
nde
das
velo
cida
des
rela
tivas
de
elui
ção
e, c
onse
quen
tem
ente
, dos
res
pect
ivos
coe
ficie
ntes
de
part
ilha
Co
efi
cie
nte
de
re
ten
ção
(R
r)ra
zão
en
tre
a v
elo
cid
ad
e m
éd
ia d
o s
olu
to e
a v
elo
cid
ad
e m
éd
ia d
o e
lue
nte
Fact
or
de
re
ten
ção
(R
f) -
mu
ito
usa
do
em
TLC
razã
o e
ntr
e a
dis
tân
cia
pe
rco
rrid
a p
ela
ba
nd
a e
a d
istâ
nci
a p
erc
orr
ida
pe
la f
ren
te d
o e
lue
nte
no
me
smo
te
mp
o.
Qu
est
ão
: u
m s
olv
en
te a
tra
vess
a u
ma
co
lun
a e
m 3
min
uto
s m
as
o s
olu
to d
em
ora
9 m
inu
tos
a e
luir
! Q
ua
l a
fra
ção
do
te
mp
o q
ue
o s
olu
to p
ass
a n
a f
ase
mó
vel?
KC C
S M
=
Co
nce
ito
s e
eq
ua
çõe
s b
ási
cas
Tem
po
mo
rto
(tm
)
tem
po
ne
cess
ári
o p
ara
um
pro
du
to “
nã
o r
eti
do
” a
tra
ve
ssa
r a
co
lun
a
Tem
po
de
re
ten
ção
(t r)
tem
po
qu
e d
eco
rre
de
sde
a i
nje
cçã
o a
té m
eia
elu
içã
o
Tem
po
de
re
ten
ção
re
lati
vo
(t rr
)
tem
po
de
re
ten
ção
ca
lcu
lad
o e
m r
ela
ção
ao
pic
o
pri
nci
pa
l (o
u d
e r
efe
rên
cia
)
Vo
lum
e d
e r
ete
nçã
o (
Vr)
volu
me
de
elu
en
te i
ntr
od
uzi
do
de
sde
a i
nje
cçã
o a
té m
eia
elu
içã
o
t mt r1
volu
me
de
elu
en
te i
ntr
od
uzi
do
de
sde
a i
nje
cçã
o a
té m
eia
elu
içã
o
Ve
loci
da
de
mé
dia
de
elu
içã
o
Fact
or
de
ca
pa
cid
ad
e (
k’)
de
scre
ve a
ve
loci
da
de
co
m q
ue
da
do
co
mp
ost
o m
igra
ao
lo
ng
o d
a c
olu
na
valo
res
típ
ico
s e
stã
o e
ntr
e 1
e 5
em
GC
, k
’ va
ria
mu
da
nd
o a
te
mp
era
tura
e o
en
chim
en
to d
a c
olu
na
em
LC
, k
’ va
ria
alt
era
nd
o a
co
mp
osi
ção
da
fa
se m
óve
l e
da
fa
se e
sta
cio
ná
ria
t r2
v =
---
----
L t rt r
-t m t m
k’ =
---
----
----
--
Co
nce
ito
s e
eq
ua
çõe
s b
ási
cas
Fact
or
de
se
lect
ivid
ad
e
razã
o e
ntr
e o
s co
efi
cie
nte
s d
e p
art
ilh
a d
o s
olu
to m
ais
re
tid
o p
elo
me
no
s re
tid
o
me
did
a d
a s
ep
ara
ção
de
do
is s
olu
tos
α α α α é
se
mp
re s
up
eri
or
a 1
Form
a d
os
pic
os
tip
ica
me
nte
ga
uss
ian
os
(sim
étr
ico
s)
ala
rga
me
nto
re
sult
a d
a v
ari
açõ
es
de
ve
loci
da
de
da
s m
olé
cula
s d
e s
olu
to a
o l
on
go
da
co
lun
a
-o
te
mp
o d
e r
esi
dê
nci
a e
m c
ad
a f
ase
nã
o é
co
nst
an
te
α=
==
− −K K
K K
tt
tt
B A
B A
rBm
rAm
' '
-o
te
mp
o d
e r
esi
dê
nci
a e
m c
ad
a f
ase
nã
o é
co
nst
an
te
Tail
ing
-a
rra
sta
me
nto
pro
voca
do
po
r co
efi
cie
nte
s d
e p
art
ilh
a n
ão
lin
ea
res
Fro
nti
ng
-p
rovo
cad
o p
or
coe
f. p
art
ilh
a n
ão
lin
ea
res
/ a
mo
stra
de
ma
sia
do
gra
nd
e
Mo
de
los
qu
e d
esc
rev
em
a s
ep
ara
ção
cro
ma
tog
ráfi
ca
Mo
de
lo d
e e
qu
ilib
rio
-m
od
elo
do
s p
rato
s te
óri
cos
Mo
de
lo d
inâ
mic
o –
mo
de
lo c
iné
tico
Mo
de
lo d
os
pra
tos
teó
rico
s
con
sid
era
tra
nsf
erê
nci
as
suce
ssiv
as
en
tre
as
qu
ais
se
est
ab
ele
ce e
qu
ilíb
rio
term
od
inâ
mic
o /
em
ve
z d
e c
on
sid
era
r o
ava
nço
re
al
da
fa
se m
óve
l
cad
a v
olu
me
ass
im d
efi
nid
o é
um
pra
to t
eó
rico
N =
L /
H
em
qu
e L
-co
mp
rim
en
to d
a c
olu
na
e H
(H
ET
P)
-a
ltu
ra d
o p
rato
te
óri
co
a e
fici
ên
cia
de
um
a c
olu
na
au
me
nta
co
m o
nú
me
ro d
e p
rato
s (o
u i
nv.
a H
), p
od
en
do
vari
ar
de
alg
um
as
cen
ten
as
(HP
LC)
a v
ári
as
cen
ten
as
de
mil
ha
r (G
C)
vari
ar
de
alg
um
as
cen
ten
as
(HP
LC)
a v
ári
as
cen
ten
as
de
mil
ha
r (G
C)
Co
nsi
de
ran
do
um
a d
istr
ibu
içã
o a
pro
xim
ad
am
en
te g
au
ssia
na
, N
po
de
se
r
ob
tid
o p
or:
�ω ωωω
é a
la
rgu
ra d
o p
ico
na
ba
se (
con
sid
era
nd
o t
rata
r-se
de
um
tri
ân
gu
lo)
�δ δδδ
é a
la
rgu
ra a
me
ia a
ltu
ra d
o p
ico
N =
16
(tr/ω ωωω
)2ou
N
= 5
,54(
t r/ δ
) δ)δ)δ)2 222
ω
A la
rgur
a do
pic
o re
pres
enta
um
a bo
a m
edid
a da
efic
iênc
ia d
a co
luna
(pe
rmiti
ndo
aco
mpa
raçã
o en
tre
colu
nas)
Ape
sar
do m
odel
o nã
o ca
ract
eriz
ar o
s vá
rios
parâ
met
ros
que
influ
enci
am a
se
para
ção,
a su
a si
mpl
icid
ade
favo
rece
a u
tiliz
ação
Mo
de
lo c
iné
tico
a s
ep
ara
ção
cro
ma
tog
ráfi
ca é
um
fe
nó
me
no
cin
éti
co e
nã
o e
stá
tico
a d
efo
rma
ção
do
s p
ico
s e
stá
ass
oci
ad
a a
o f
luxo
da
fa
se m
óve
l e
po
de
te
r vá
ria
s o
rig
en
s:
ex
istê
nci
a d
e v
ári
os
tra
ject
os
po
ssív
eis
(a
nis
otr
op
ia)
dif
usã
o m
ole
cula
r lo
ng
itu
din
al
resi
stê
nci
a à
tra
nsf
erê
nci
a d
e m
ass
a
An
iso
tro
pia
An
iso
tro
pia
é in
de
pe
nd
en
te d
o f
luxo
exp
rim
e o
mo
vim
en
to t
urb
ule
nto
de
dif
usã
o
da
fa
se m
óve
l a
tra
vés
da
fa
se e
sta
cio
ná
ria
refl
ect
e a
ho
mo
ge
ne
ida
de
da
fa
se e
sta
cio
ná
ria
(e
nch
ime
nto
)
dim
inu
i co
m o
diâ
me
tro
da
s p
art
ícu
las
e é
nu
la
pa
ra u
ma
co
lun
a v
azi
a
HA
= dp
λ λ λ λ =
A
dp-
diâm
etro
das
par
tícul
asl -
irreg
ular
idad
e do
enc
him
ento
Mo
de
lo c
iné
tico
Dif
usã
o l
on
git
ud
ina
l
rep
rese
nta
a d
isp
ers
ão
da
s m
olé
cula
s
inve
rsa
me
nte
pro
po
rcio
na
l a
o f
luxo
Re
sist
ên
cia
à t
ran
sfe
rên
cia
de
ma
ssa
Hb
= B
/ U
B-
difu
são
U-
velo
cida
de d
a fa
se m
óvel
Re
sist
ên
cia
à t
ran
sfe
rên
cia
de
ma
ssa
as
mo
lécu
las
colo
cad
as
no
ce
ntr
o d
o f
luxo
ava
nça
m m
ais
rap
ida
me
nte
a f
ase
est
aci
on
ári
a n
ão
te
m u
ma
fo
rma
re
gu
lar
-d
ife
ren
ças
de
re
ten
ção
da
s m
olé
cula
s
as
dif
ere
nça
s (d
esf
asa
me
nto
) a
um
en
tam
dra
stic
am
en
te c
om
o f
luxo
pro
voca
nd
o o
ala
rga
me
nto
pro
gre
ssiv
o d
o p
ico
Hc
= C
. U
C-
tran
sfer
ênci
a en
tre
fase
sU
-ve
loci
dade
da
fase
móv
el
Eq
ua
ção
de
va
n D
ee
mte
r
•H
re
pre
sen
ta a
alt
ura
eq
uiv
ale
nte
de
um
pra
to t
eó
rico
H =
A +
B /
U +
C .
U
N =
L /
HA
-
anis
otro
pia
B/U
-
difu
são
C.U
-
tran
sfer
ênci
a
A s
epar
ação
é m
áxim
a pa
ra H
mín
imo.
B d
omin
a pa
ra U
bai
xos
e C
dom
ina
para
U
ele
vado
s
A d
ifusã
o é
mui
to m
enos
sig
nific
ativ
aem
HP
LC (
líqui
do).
A é
tam
bém
men
orem
HP
LC p
elo
que
H m
in é
cer
ca d
e 10
xm
enor
que
em
GC
e o
btem
-se
par
a va
lore
s d
e U
cer
ca d
e 10
x in
ferio
res.
Os
pico
s te
ndem
a a
larg
ar m
ais
em G
Cqu
e em
HP
LC.
H
U-
velo
cida
de d
a fa
se m
óvel
Pa
rtíc
ula
s
Re
solu
ção
Re
solu
ção
de
um
a c
olu
na
me
de
a c
ap
aci
da
de
de
se
pa
rar
do
is s
olu
tos
A r
eso
luçã
o d
ep
en
de
de
3 f
act
ore
s:
sele
ctiv
ida
de
α α
α
α − −−−
de
ve s
er
sup
eri
or
a 1
(im
po
rta
nte
ma
s in
sufi
cie
nte
)
fact
or
de
ca
pa
cid
ad
e
k’
-d
eve
est
ar
com
pre
en
did
o e
ntr
e 1
e 1
0
efi
cáci
a d
a c
olu
na
N
-
de
ve s
er
a m
aio
r p
oss
íve
l (a
ind
a q
ue
se
ja p
ou
co i
nfl
ue
nte
-ra
iz
Rt
tw
wN
kk
rBrA
AB
B
B
=− +
=−
+
2
41
1(
)'
'α
αB
é o
sol
uto
mai
s le
nto
( m
aior
t r)
efi
cáci
a d
a c
olu
na
N
-
de
ve s
er
a m
aio
r p
oss
íve
l (a
ind
a q
ue
se
ja p
ou
co i
nfl
ue
nte
-ra
iz
qu
ad
rad
a)
R =
1
-se
para
ção
quas
e co
mpl
eta
R >
1,5
-se
para
ção
com
plet
a
Not
a: é
mui
tas
veze
s ex
igid
a um
R d
e 4-
5 pa
ra q
ueas
impu
reza
s ex
iste
ntes
sej
am s
epar
adas
.
