Fertiliza__o e Pr_ - Implanta__o Em Medicina

Gâmeta feminino

Oocito secundário

Gâmeta masculino

Espermatozóide

EspermatogéneseOogénese

Gametogénese

Fertilização em mamíferos - Visão geral -

Desenvolvimento embrionário

pré-implantaçãoEm suspensão,

acessível àmanipulação

humano

ratinho

Sinalização molecular durante a implantação

Contudo por vezes

implantação ectópica

Transição da trofo-ectoderme para um fenótipo invasivo

As técnicas de contracepção libertaram o sexo da associação com a reprodução

As técnicas da Medicina da Reprodução trouxeram a autonomização da reprodução relativamente ao sexo

A vida ocidental (sbt urbana) actual veio adicionar factores de infertilidade:

a idade da gestação é adiada

Causas de infertilidade

Desenvolvimento embrionário

pré-implantaçãoEm suspensão,

acessível àmanipulação

humano

ratinho

Fertilização e desenvolvimento pré-implantação em culturaEstratégias da Reprodução Medicamente Assistida

O processo da fertilização e o desenvolvimento pré-implantação ocorrem em suspensão no interior do aparelho reprodutor feminino

Trompa de Falópio

humano

ratinho

Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaEstimulação controlada da ovulaçãoInseminação intra-uterina

Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)

Inseminação intra-uterina com esperma de dador Doação de oocitosDoação de embriões

Biópsia embrionária e diagnóstico genético pré-implantação (PGD)

As técnicas hoje disponíveis em Medicina da Reprodução permitem ultrapassar com sucesso a maioria das situações de Infertilidade Conjugal.

Técnicas de Reprodução Medicamente Assistida

Estimulação controlada da ovulação

Aumentam a possibilidade de ocorrência de fertilização in vivo

Inseminação intra-uterina

Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaFertilização in vitro (FIV)

Para ocorrer implantação:

1. Os gâmetas têm de viajar no ap. reprodutor feminino

2. Têm de interagir no processo da fertilização

3. O desenvolvimento embrionário pré-implantatório ocorre em suspensão ao longo do ap. reprodutor feminino

A FIV surgiu originalmente para fazer face a situações de infertilidade de causa feminina por oclusão tubária

A colheita de gâmetas femininos realiza-se por punção e aspiração folicular, com acesso

transvaginal, sob controlo ecográfico

+

FIV Fertilização in vitro

Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaFertilização in vitro (FIV)

Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)

Para fertilizarem o oocito, os espermatozóides:

1. Concentração total adequada

2. Fracção adequada de formas móveis

3. Fracção adequada de formas morfologicamente normais

A ICSI (Intra-Cytoplasmic Sperm Injection) surgiu para fazer face a alguns tipos de infertilidade de causa masculina

ICSIInjecção intra-citoplasmática de espermatozóide

FIV ou ICSI

Desenvolvimento pré-implantatório humano

1-célula

2-células 4-células

In vivo em suspensão... In vitro em cultura...

8-células Blastocisto

Resolução de situações de Infertilidade

Estratégias da Reprodução Medicamente Assistida


TESETEsticular Sperm Extraction

Congelamentoespermatozóides

oocitos

embriões (estadios pré-implantatórios)

TEC Transferência de embriões congelados


Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)



Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaEstimulação controlada da ovulaçãoInseminação intra-uterina

Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)



Estudos de Biologia fundamental vieram demonstrar a grande capacidade regulativa do desenvolvimento pré-implantatório:

1. Podem ser retirados algunsblastómeros, sem consequência para o desenvolvimento

2. Podem ser produzidos gémeos idênticos a partir da separação de blastómerosem fases iniciais do desenvolvimento

O diagnóstico genético pré-implantação (PGD)permite estender as indicações para Reprodução

Medicamente Assistida a casais férteis

Técnicasde análisemolecular em célula

única

A Biópsia embrionária e o diagnóstico genético pré-implantação (PGD) aproveitam estes conhecimentos da Biologia Fundamental e de técnicas de análise molecular em célula única

para estender as indicações para Reprodução Medicamente Assistida a casais férteis

PGDBiópsia embrionária eDiagnóstico genético pré-implantação

biópsiaembrionária



Definição de Diagnóstico Genético Pré-Implantação (PGD)Trata-se de um diagnóstico pré-natal muito precoce em que embriõespré-implantação (ou oocitos) são biopsados durante a cultura, sendo

depois transferidos para a cavidade uterina os embriões livres dadoença genética em causa

biópsia embrionária

ICSI


blastómeros

diagnóstico (PCR / FISH)

afectados não afectados

não transferidos

transferidos congelados

Embrião biopsado


Existem hoje técnicas de Medicina da Reprodução indicadas para

situações de Fertilidade

Indicações para Diagnóstico Genético Pré-Implantação(PGD)

Semelhantes às para diagnóstico pré-natal por BVC ou amniocentese(se possíveis em célula única, evita-se ITG, mas necessita RMA):

1. Risco aumentado para anomalias cromossómicas(translocações e microdelecções)

2. Doenças monogénicas(ligadas ao X, autossómicas recessivas, autossómicas dominantes)

Capacidade regulativa do desenvolvimento pré-implantação:

Quimeras de agregação resultantes da agregação mórulasde 8-células originam apenas 1 blastocisto

Células estaminais embrionárias (células ES)

O botão embrionário de blastocistos isolado e colocado em cultura origina células ES.

Para manterem a pluripotencialidade as células ES devem ser

cultivadas em condições particulares, ainda mal

caracterizadas.


Produção de animais “Knock-out”


Para obterem especificidade as células ES devem ser

cultivadas noutras condições particulares, ainda menos

caracterizadas.

Exemplo de células ES de ratinho

Transferência nuclear em zigotos

Transferência nuclear em zigotos

Os pronúcleos masculino e feminino não são equivalentes

“Genomicimprinting”

Os cromossomas maternos regulam o desenvolvimento do embrião.

Os cromossomas paternos regulam o desenvolvimento dos anexos embrionários.

Alguma expressão genética precoce depende do “genomicimprinting”

Mecanismos de formação de molas hidatiformes completas As molas hidatiformes completas contém 46 cromossomas, sempre de origem paterna.

Geralmente o cariotipo é 46-XX, sendo por vezes 46-XY.

Mecanismo de formação de molas hidatiformesparciais As molas hidatiformes parciais contém 69 cromossomas (triploidia), com dose dupla de cromossomas paternos, podendo o cariotipo ser 96-XXX, 96-XXY ou 96-XYY.

Mecanismos de formação de gémeos verdadeiros

Clonagem

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