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Profa. Daniele Michelin

Molculas que so levadas ao estadoexcitado no podem nele permanecer edevem necessariamente retornar aoestado fundamental, perdendo oexcedente de energia.

Coliso com outras espciesRelaxamento vibracionalEmisso de um fton

Eletroluminescncia: energia cintica de eltrons ouons acelerados por um campo eltrico transferida atomos ou molculas presentes em um gs provocando aemisso de um fton pelos tomos ou molculasexcitados.

Quemiluminescncia: reao qumica produz umaespcie excitada que emite fton de radiao para atingiro estado fundamental,mais estvel e de menor energia.

Fotoluminescncia: quando ftons so absorvidos pormolculas promovendo-as a um estado excitado. Aoretornar ao estado fundamental, as molculas emitem

radiao.FluorescnciaFosforecncia

Fluorescncia:emisso de um fton por uma espcieque atingiu o estado excitado por meio de absoro deradiao eletromagntica, ou seja, absoro de umfton.

Fosforescncia: excitao provocada por radiaoeletromagntica, porm a emisso de radiaocontinua aps a excitao haver cessado.

A maior diferena entre fluorescncia e fosforescncia o

tempo entre a absoro da energia e a emisso do fton,sendo que quando o intervalo de tempo curto, o processo

chamado fluorescncia e quando o tempo longo, o

processo chama-se fosforescncia.

COMPOSTOORGNICO

FLUORESCNCIA

Duplas conjugadas Rigidez Pares de eltrons n em heterotomos - conjugao

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Fluorescncia: transio do primeiro estadoexcitado para o estado fundamental.

Presena de conjugao:reduz a diferena de energiaentre o estado fundamental e o primeiro estado excitadoe confere maior estabilidadeao estado excitado.

Rigidez molecular:reduz a interao da molcula com omeio em que se encontra e a probabilidade dedesativao por processo no emissivos.

Substituintes que doam eltrons aumentam afluorescncia.

Grupos que retiram eltrons diminuem ou eliminamfluorescncia.

Rigidez , s vezes, conseguida por meio decomplexao com um metal de transio.

A fluorescncia pode ser obtida por meioda formao de quelatos com metais (Mg,Zn)

Compostos no-fluorescentes podem,muitas vezes, ser derivados quimicamente etornados fluorescentes com um reagentefluorognico.

EXISTNCIA /INTENSIDADE DAFLUORESCNCIA

Estrutura damolcula:

Duplas conjugadas

Rigidez

Pares de eltrons nem heterotomos -conjugao

Ambiente:

Temperatura Solvente ph do meio Presena de

impurezas Concentrao daespciefluorescente

FLUORMETRO: mede a fluorescncia

Fonte (lmpada de xennio, hidrognio, deutrio)Monocromador (filtros, primas ou redes)Cubeta (quartzo ou silica fundida)Detector (faixa visvel tubo fotomultiplicador)

FLUORMETRO Fotofluormetro

Espectrofluormetro

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A intensidade da fluorescncia proporcional concentrao da espcie

fluorescente.

Determinao da concentrao

Medies relativas ao padro comfluorescncia mais intensa.

Em solues diludas:

F = k.b.c

k = constante de proporcionalidade b = espessura da cubeta

c = concentrao da espcie fluorescente

A curva padro uma reta em concentraes baixas

Presena de apenas uma espciefluorescente (padres e amostras).

Na escolha do comprimento de ondade excitao e emisso considerar osolvente.

Melhores limites de deteco (mximo)

Condies experimentais

O analito pode sofrer decomposiopela radiao da fonte.

Tempo de exposio

Fluorescncia das cubetas

Determinao de constituintes dealimentos (traos)

Vitaminas

Frmacos

Contaminantes

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ALTASENSIBILIDADE

(partes por trilho)

ALTAESPECIFICIDADE

(fluorescncia)

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