Fungos Endofíticos de Tocoyena bullata: Atividade Lipolítica e Aplicações Biotecnológicas Karla S. C. da Rocha, Maria S. R. Queiroz, Guilherme Maxwell, Ivaldo I. Junior e Ivana C. R. Leal.

INTRODUÇÃO

Lipases microbianas apresentam grande interesse industrial, Entretanto, poucos estudos tem explorado o potencial de fungos endofíticos, micro-organismos que não causam aparentemente nenhum dano a seu hospedeiro1, como fonte produtora destas enzimas. Dentre os produtos de nosso interesse, destacam-se os monoacilgliceróis (MAGs), moléculas anfifílicas que possuem aplicações biotecnológicas. O uso de processos enzimáticos, catalisados por lipases, pode conduzir a uma abordagem mais ecológica2.

OBJETIVO

O objetivo deste trabalho foi rastrear a atividade lipásica dos fungos endofíticos associados a espécie vegetal T. bullata (TB1 e TB2) e Humíria balsamífera (HB13) para aplicação como biocatalisadores em reações de hidrólise e esterificação para produção de MAGs.

METODOLOGIA

O rastreamento da atividade lipolítica foi realizada pelo método da Rodamina B. Os fungos produtores de lipases foram inoculados em um meio pré-fermentativo, e transferidos para um meio fermentativo para estimular a produção de lipase. A partir do meio fermentativo, foi realizado o método de hidrólise do palmitato de p-nitrofenila, conforme esquema na figura 1. A atividade enzimática foi definida pela concentração de p-nitrofenol em mol/L, baseando-se no coeficiente de absortividade molar do p-nitrofenol, obtido a partir de uma curva de calibração (R2 = 0,97) à 410 nm.

Figura 1: Representação esquemática dos ensaios de triagem para determinação de atividade lipásica.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Nos ensaios de atividade lipolítica de Rodamina B, os fungos da estirpe TB1 e HB13, foram promissores para atividade lipásica, pois apresentaram o halo de fluorescência 24 horas após sua inoculação (Figura 2).

Figura 2: Meio com fungo TB1 (A) e HB13(B) contendo o corante Rodamina B apresentando halo de fluorescência após 24 h de incubação.

O fungo HB13 e o fungo TB1 apresentaram as maiores concentrações

de p-nitrofenol, conforme indicado no gráfico 1. Gráfico 1: Concentração de p-nitrofenol para os fungos HB13 (92U/mL); TB1(85U/mL) e TB2 (5 U/mL).

CONCLUSÃO

Os fungos das estirpes TB1 e HB13, apresentaram os melhores resultados para

atividade lipásica. As espécies promissoras serão investigadas quanto a

atividade de esterificação, e serão posteriormente submetidas à reações de

produção de MAGs.

REFERÊNCIAS:

1. SCHULZ, B.; BOYLE, C. (2005). Mycol Res 109:661–686;

2. 2. JUNIOR, I.I.; FLORES, M.C.; SUTILI, F.K.; LEITE, S.G.F.; MIRANDA, L.S.; LEAL, I.C.R. DE

SOUZA, R.O.M.A. (2012). Journal of Mol Cat. B, Enz., 77:53– 58.

92 U/mL

85 U/ml

5 U/ml

Rodamina B Luz UV 365 nm.

Meio Pré Fermentativo. 24 h 30

C 180rpm

Meio Pré Fermentativo. 24 h 30

C 180rpm

B A