Hematologia Clinica 2007
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Centro Tecnológico de Atualização e Formação Profissional Ltda.
Hematologia Clínica
Prof. Jairo Alves de Oliveira, M.Sc.
2007
Programa de Hematologia Clínica
� Hematopoiese – Cinética medular � Metabolismo da Hemoglobina� Mecanismo de atuação dos neutrófilos� Leucometria global e específica� Composição do Hemograma
� Valores de referência � Leucograma de Schillihg� Fórmula Leucocitária relativa e absoluta � Principais alterações patológicas nas séries:
� Vermelha: Anisocitose, poiquilocitose, anemia ferropriva, megaloblástica, etc.
� Branca: Anomalias leucocitárias (Pelger-Huet, Chediak-Higashi,etc.)
� Desvio à esquerda e à direita � Hemograma infeccioso bacteriano, viral e parasitário. � Reação leucemóide� Atipias linfocitárias
� Leucemias Agudas: � Mieloblásticas – Aspectos Clínicos e Morfológicos � Classificação Fab – M1 a M7 � Leucemias Linfoblásticas - Aspectos Clínicos e Morfológicos
� Leucemias Crônicas: Aspectos Clínicos e Morfológicos � LLC � LMC � MMA
� SMD – Síndrome Mielodisplásica� Diferenciação morfológica, citoquímica, imunofenotípica
HematopoieseEmbrionária – Fetal – Pós natal
Hematopoiese
� Cinética medular – Compartimentos� Fatores de crescimento, diferenciação e
maturação celular � linf. T, macrófagos, cél. estroma� Interleucinas IL-1 IL-3 IL-5 IL-6� GM-CSF G-CSF M-CSF� Eritropoietina - rim� Trombopoietina - fígado
Hematopoiese – ações dos fatores de crescimento
Hematopoiese
Hematopoiese
Hematopoiese - eritropoietina
Metabolismo da hemoglobina
Síntese da hemoglobina
Glicólise (Via Embden-Meyerhof)
2,3 DPG (Difosfoglicerato)
Mecanismo de atuação dos neutrófilos
Hematologia Clínica
� Técnica para confecção de distensão sanguínea� Microscopia� Corantes
� Ácidos� Básicos
� Métodos de coloração� Contagem específica� Contagem global dos elementos morfológicos do sangue –
Câmara de Neubauer� Leucócitos� Hemácias� Plaquetas
Distensão sangüínea - Técnica
Distensão sangüínea – Padrão
Distensão sangüínea – Padrão
Distensão sangüínea – Vídeo
Laminas.avi
Microscopia
Distensão sanguínea – Erro grave
Distensão sanguínea - EDTA
Distensão sanguínea – sem anticoagulante (capilar)
Distensão sanguínea – sem anticoagulante (venoso)
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
Distensão sanguínea – normal
VHS – Velocidade de hemossedimentação
� Métodos� Wintrobe – 0-100 mm (1ª hora) Citrato de Sódio� Westergren – 0-200 mm (1ª hora)
� 3 estágios – 10 - 40 - 10 (minutos)� Dentro das primeiras duas horas
� Automação – Diesse Vés-matic (20 minutos)
� Princípios da hemossedimentação� Potencial Zeta
� Patologias relacionadas� Hiperfibrinogenemia, gamaglobulinemia, colesterol alto� Febre, anemia� Mieloma múltiplo
“roleaux”
Potencial Zeta 4230> 85 anos
3020> 50 anos
2015< 50 anos
Mulher(mm)Homem(mm)V. Referência
Corantes
� CORANTES DO TIPO ROMANOVSKY� Azul de Metileno, Azur B e Eosina� Ácidos e Básicos� May-Grunwald-Giemsa, Leishman, Jenner, MacNeal.� Wright� Giemsa pH = 7,2
� FIXADORES� PANÓPTICO� MÉTODOS DE COLORAÇÃO
� Automação� Manual� Gota espessa� “A fresco”
Corantes - Padrão
Corantes
Contagem específica
Contagem global –câmara de Neubauer
Contagem global - Câmara de Neubauer
Contagem global - câmara de Neubauer
� LeucócitosL= nlc x 10 x 20
4
� HemáciasH= nhc x 10 x 5 x 200
� PlaquetasP= npc x 10 x 5 x 50
X 50
X 10000
X 2500
Contagem global - câmara de Neubauer
� Comprimento (c) e largura (l) total = 3 mm� Altura (h) = 0,1 *área = c x l
*volume = c x l x h� Área total – 1 quadrado com 9 mm2
� Volume total – 0,9 mm3
� 9 quadrados com 1 mm2 de área� 64 quadrados com 0,0625 de área� 25 quadrados com 0,04 de área� 400 quadrados com 0,0025 de área
Hemograma – Série branca e Série Vermelha
� Leucometria global� Leucometria específica� Hematócrito – Macro e micro-hematócrito� Hemoglobina – Reativo de Drabkin� Índices hematimétricos V. referência
� VCM = hto x 10 80-96 fLhm
� HCM = hb x 10 27-32 pghm
� CHCM = hb x 100 32-36 % ou g dLhto
� Contagem de plaquetas� RDW� PDW
Observar Verificar Alterações
Hemácias
NúmeroRoleauxConteúdo de hemoglobinaForma (Poiquilocitose)Tamanho (Anisocitose)ImaturidadeInclusões
Policitemia, anemiaAusente ou presente“Hipercromia”, hipocromiaDrepanócitos,esferócitos,ovalócitoseliptócitos,esquizócitos,dacrió
citos, acantócitos, “em alvo”Micrócitos,macrócitos, megalócitos
Presença de núcleo (eritroblastos), reticulócitos,Policromatofilia, Howell-Jolly, Heinz
Leucócitos
Número aumentadoNúmero diminuídoFormas normaisFormas imaturasFormas atípicasAlterações morfológicasNúcleoCitoplasmaGrânulosInclusões
LeucocitoseLeucopenia
Blastos (Leucemias)Macronucléolo
Denteamento nuclear, granulações grosseiras, HipersegmentaçãoGranulações tóxicas, vacúolosBastonetes de AuerAnomalia de Alder---------Reilly, DohleChediak-Higashi
PlaquetasNúmero aumentadoNúmero diminuídoAlterações morfológicas
Trombocitose (hiperplaquetemia)Trombocitopenia (hipoplaquetemia)
Tamanho, forma
Outras células
AusentesPresentes Células plasmáticas
Blastos
Hematozoários
HemáciasMononucleares
Extracelulares
Plasmódio, Babesia
Leishmania
Tripanossoma, Filária, Trichinella, Leptospira, Treponema, Leishmania
Hemograma – Fórmula leucocitária
LeucometriaGlobal (mm3)
4.500a
10.000
Bas Eos Mie Met Bas Seg Lin Mon
% 0-1 1-4 0 0-1 1-5 50-70 20-35 2-8
mm3 0-100 45-400
0 0-100 45-500
2250-7000
900-3500
90-800
Valores relativos e absolutos
Hemograma – Fórmula leucocitária
LeucometriaGlobal (mm3)
2.000
Bas Eos Mie Met Bas Seg Lin Mon
% 0 1 0 0 2 15 80 2
mm3 0 20 0 0 40 300 1600 40
DIAGNÓSTICO:NEUTROPENIA SEVERA
Hemograma – Reticulócitos
Valor absoluto(mm3)
66.000
Valores relativos e absolutos
Valores de referência:Relativo - 0,5 a 1,5 % Absoluto – 25.000 a 75.000 / mm 3 (hematimetria - 5.000.000 mm 3)
Paciente – 3,0 %Hematócrito – 20 %Hematimetria – 2.200.000 / mm 3
Hemograma – Desvio à esquerda (infecção aguda)
Bas Eos Mie Met Bas Seg Lin Mon
% 0 0 2 5 25 58 8 2
mm3 0 0 440 1100 5500 12760 1760 440
LeucometriaGlobal (mm3)
22.000
Obs.: Granulações grosseiras
Vacúolos citoplasmáticosInclusões de Dohle
Hemograma – Desvio à direita
� Aumento do número de segmentosAnemia megaloblástica
� Vitamina B12 e ácido fólico
� Maior porcentagem com 4 ou 5 segmentos Infecção crônica
Fórmula de SchillingMie Met Bast Seg Seg Seg Seg
Segmentos(lóbulos)
0 0 0 2 3 4 5
% - - - 10 60 20 10
Hemograma – Princípio Coulter-Counter
Hemograma – Histograma STKS
Hemograma -Histograma Cell-Dynn
Hematologia Clínica - Anemias
� Deficiência na síntese de hemácias – Fe ou B12 e Folato� Absorção Fe - Duodeno (DMT1) e B12-Folato (FI, cobilina
e TC I, II E III)� Perda
� Aguda� Crônica
� Destruição exagerada – Mecanismo normal� SRE� Hemólise
� Mecânica � Válvulas� Fragilidade
� Auto-imune – DHRN e Teste de Coombs� Hemoglobinopatias
� Talassemias – A. Falciforme – C � Diagnóstico e interpretação clínica
Absorção de Ferro
Absorção de B12 e Folato
Hematologia Clínica – Eletroforese Hb
Hematologia Clínica - Eletroforese Hb
Hematologia Clínica - Eletroforese Hb
Leucemias
� Reação Leucemóide� Linfocítica� Granulocítica� Eosinofílica
� Leucemias� Aspectos Clínicos e Morfológicos� Citoquímica – PAS, SB, Peroxidase� Imunofenotipagem� Classificação FAB
� Leucemias agudas - M0,M1,M2,M3,M4,M5(a e b),M6 e M7� Leucemias Crônicas
� LMC – ausência do hiato leucêmico� LLC� MMA� SMD
Leucemias
Leucemias – M1
Leucemias – M1
Leucemias – M2
Leucemias – M2
Leucemias – M3
Leucemias – M3
Leucemias – M3 microgranular
Leucemias – M4
Leucemias – M5
Leucemias – M6
Leucemias – M6
Leucemias – M7
Leucemias – M7
Leucemias - Eosinofílica
Leucemias - Prólinfocítica
Leucemias - Prolinfocítica
Leucemias - LLC
Leucemias - LMC
LMC
LMC
Plasmócitos
Leucemias – Hair Leukemia
Leucemias – Hair Leukemia
Neutrófilo Plurisegmentado
Leucemias – CitoquímicaLEUCEMIAS PAS Mielop. SB ASD Alfa naftil
M0 (<3%) - + + + -
M1 (>3%) - + + + -
M2 (>85%) - + + + -
M3 (>85%) - ++ ++ ++ -
M4 +/- +/- +/- +/- +++
M5 +/- +/- + +/- +++
M6 + - - - ++
M7 + - - - +
LLA - - - - -
Leucemias – LLA
CITOLOGIA L1 L2 L3
Tamanho Pequeno Grande Grande/homog.
Cromatina Homogênea Variável Finamentepontilhado
Forma Regular Irregular Oval a redonda
Nucléolos Raros Presentes 1-3
Citoplasma Escasso Moderado Moderado
Basofilia Moderada Variável Intensa
Teste de Fragilidade Osmótica
� Osmolaridade� Soluções Hipotônicas – 0,85 a 0,10% NaCl
� HI – Hemólise inicial – 0,55% NaCl� HF – Hemólise Final – 0,45% NaCl Hb
H2O
- +
Pesquisa de Células LE
� Etapas� Obtenção do coágulo - B.M. 37 0C (30 minutos)� Maceração do coágulo� Filtração em gaze� Centrifugar – 2.000 rpm 5 minutos� Retirar o sobrenadante e transferir o restante para tubo
de Wintrobe� Centrifugar - 2.000 rpm 5 minutos� Camada cremosa de leucócitos� Confecção de lâminas - Wright
Pesquisa de Células LE
Prova do Nitroblue-tetrazolium (NBT)
� Neutrófilos� Diagnóstico de infecções bacterianas� Redução do NBT (incolor) a Formazan (pp de
coloração azul escura)� Aumento da atividade enzimática
� V.R. – 3 A 10%� Doença granulomatosa crônica da infância