Imunohematologia
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James Blundell (1818): 1a transfuso com sucessoKarl Landesteiner (1901): classificao das hemcias em quatro tipos: A, B, AB e O285 Ag eritrocitrios, 29 sistemas de grupos sangneos, colees, sriesA presena ou ausncia de Ag de grupo sanguneo pode determinar a resistncia a algumas doenas
Ex: malria
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1 - de acordo com o estmuloAc naturais (iso-aglutininas): detectados a partir de 3-6 meses de idade, pico com 5-10 anos de vida, predominantemente IgM, podem ser IgG e IgAAc imunes: decorrentes de estmulo (transfuso, doena hemoltica peri-natal)
Ac regulares: a ocorrncia esperadaAc irregulares: ocorrncia no esperada
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2- de acordo com a origem do Ag que reconhecidoAlo-anticorpos: reagem com um Ag estranho, no presente nos eritrcitos do indivduoex: Ac anti-A e anti-B Auto-anticorpos: reagem com um Ag presente nas hemcias do indivduoex: auto-anticorpos associados com anemia hemoltica auto-imune
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3- De acordo com a temperatura de reaoAnticorpos frios: reao Ag-Ac mxima em temperaturas baixas, cerca de 4 CAnticorpos quentes: reagem melhor a 37 C.
4- De acordo com o comportamento em testes imuno-hematolgicosCompletos (aglutinantes): promovem aglutinao de hemcias em meio salino temperatura ambiente Ex: anticorpos IgM.Incompletos (no aglutinantes): reagem com o antgeno, porm no produzem aglutinao das hemcias, necessrio usar um meio artificial para reduzir o potencial zeta. ex: anticorpos IgG
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LISS, albumina, PEG
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Determinantes antignicos so carboidratos Controle gentico por enzimas que conjugam resduos de acar a uma substncia precursora
Gene do Ag H: codifica transferase de fucoseGene do grupo A: transferase adiciona N-acetilgalactosamina ao Ag HGene do grupo B: transferase adiciona D-galactose ao Ag H
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A1 (80%): 1 x 106 stios antignicosA2 (19%): 2,5 x 105 stios antignicos
diferena qualitativaOutros sub-grupos: A3, Ax e AmSub-grupos de B: mais comuns no Oriente: B3, Bm e BxAg encontrados tambm secrees e outros fluidos na forma solvel (saliva, lgrimas, urina, sucos digestivos, leite e lquido amnitico) e na membrana de tecidos epiteliais, linfcitos, plaquetas e rgos como medula ssea e rins
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FENTIPO BOMBAYGentipo hhAusncia do Ag HPresena de Ac anti-H, anti-A e anti-BS pode receber hemcias de outro Bombay
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Composto por mais de 45 Ag Ag mais importantes: D, C, E, c, eRh+: presena do Ag DAg D: mais de 30 eptopos (9 mais imunognicos)Controle por 2 genes no cromossomo 1: RHD e RHCEHerdado como 2 conjuntos de 3: Pai (Dce), me: dCe
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VARIANTES DE DD fraco (99%); diferena qualitativaD parcial ou incompleto (1%): falta um ou mais eptopos de DRh negativo: fazer Coombs indireto
Se der positivo, soltar resultado como: fator Rh (D): positivo (D fraco)
Rh nulo: ausncia de Ag do sistema Rh (D, C,c, E, e), instabilidade da membrana anemia hemoltica
OUTROS ANTGENOS ERITROCITRIOS: sistemas Kidd, Duffy, Kell e MNS
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Podem ser feitos em tubo, micro-placa, gel centrifugao (carto)
1 - TESTE DE COOMBSSoro de Coombs: monoclonal ou policlonal, monoespecfico ou poliespecfico
a) Coombs Direto (teste de antiglobulina direto TAD): Pesquisa Ac e/ou complemento na superfcie das hemcias do paciente (usar soro poliespecfico) Anemia hemoltica auto-imune ou induzida por droga e doena hemoltica perinatal
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Coombs direto
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B) Coombs Indireto (Pesquisa de anticorpos irregulares - PAI):
Ac livres no soroUsa hemcias do tipo O fenotipadas que apresentam Ag para os Ac irregulares mais significativos de diferentes grupos sanguneos possvel identificar a especificidade do Ac irregularPesquisa de Ac anti-D materno, D fraco e de Ac irregulares
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Coombs indireto
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2 - IDENTIFICAO DE Ag ERITROCITRIOS
ABO (mtodo convencional em tubo)
Prova direta: 100 mL de hemcias do paciente 3- 5% + 100 mL de soro anti-A e anti-BUsar soro anti-AB se soro for policlonalProva reversa: 100 mL de soro (ou plasma) + 100 mL de hm reagentes A1- e B- a 5%revercel: hemcias A1, e B, Rh negativoA2 e O so opcionaisa prova reversa no recomendada em recm-nascidos
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1- relacionados a Ac (interferem na prova reversa):ausncia ou baixa atividade da aglutinina esperada (pacientes idosos, recm-nascidos)presena de aloanticorpos irregulares (anti-H nos indivduos Bombay)2- relacionadas a Ag (interferem na prova direta):baixa expresso de Ag do sistema ABO nas hemcias de recm-nascidosalto nvel de substncias de grupo sangneo solveis associado a um tipo de cisto de ovriosubgrupos de A ou B com baixa expresso de Ag (Am, Ay).
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50 mL de suspenso de hemcias a 5% + 50 mL de Ac anti-D- fazer controle Rh: o soro anti-D usa aditivos que otimizam a reatividade dos Ac- ausncia de aglutinao fazer Coombs indireto se positivo soltar como: Rh positivo (D fraco)
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3- Testes Pr-TransfusoRecomendaes para transfuso:
Doador e receptor com mesmo grupo ABO (isogrupo) sempre que possvel.Excepcionalmente, respeitar a regra transfusional:
Fazer grupo sanguneo (sistemas ABO e Rh) e testes a seguir:
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A- PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES (PAI)suspenses de eritrcitos do tipo O (c/ Ag eritrocitrios) + soro do receptor
triacel: suspenso de glbulos humanos do grupo O fenotipados para Ag dos sistemas Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, MNS, P e Lutheran4 condies: meio protico e salina temperatura ambiente, a 37 C e fase de Coombs. observar aglutinao de hemcias e/ou hemliseidentificao de Ac irregulares: painel de 11 hemcias
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B- PROVA CRUZADA MAIOR (para transfuso de papa de hemcias):hemcias do doador + soro/plasma do receptor (4 condies)se positivo, identificar o Ac
C- PROVA CRUZADA MENOR (para transfuso de plasma):hemcias do receptor + soro/plasma do doador (4 condies)
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Presena de Ag nos eritrcitos fetais ausentes nas hemcias maternasCausas:
incompatibilidade sistema Rh: 98% dos casosoutras causas: incompatibilidade sistema ABO, Lewis, Kell, Duffy, Kidd, Lutheranincompatibilidade por ABO: de forma geral no gravepode prevenir imunizao materna por outro Ag!!!!Alo-imunizao materna: aborto, procedimentos invasivos, transfuso, nascimentoMaior transferncia de clulas fetais: 2 metade da gestao
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Acompanhamento:
durante a gravidez:Coombs indireto: determinao do ttulo de IgG anti-D na meAmniocentese: concentrao de pigmentos biliaresse necessrio transfuso de hemcias O negativo
aps o nascimento:determinar grupo sangneo do recm-nascidoteste de Coombs Direto do sangue do cordo umbilical
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Efeitos sobre o feto: hidropsia fetal, insuficincia cardaca, bilirrubinemia, anemia, kernicterus e morteTratamento:
fototerapia com luz branca ou azulex-sangneo-transfusoPreveno: doses intramusculares de IgG anti-D (Matergam, Rhogan):
at 72 h aps procedimento invasivoligao da IgG anti-D s hemcias fetais remoo por clulas no linfonodo e bao produo de clulas T supressoras da proliferao de clulas B