INDUCCIÓN AL DESOVE
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INDUCCIÓN AL DESOVE
Docente: Blga. Acui Carmen Yzásiga Barrera
Blga. Pesq. Eliana Zelada Mazmela
Ovulación: última fase del desarrollo normal del huevo
- Núcleo se hace excéntrico
- Breakdown. Culmina 1° división meiótica
- Folículo se rompe a nivel de granulosa y cae a cavidad
Desove: salida de óvulos al exterior. Puesta
a) Natural: necesita de sincronización: sonidos, ferohormonas
- Proximidad - Contacto lado a lado
- Sujeción - Enroscamiento del macho
Los que cortejan:< N° eggs
b) Inducido: Intervención del hombre
ovárica abdominal
Clasificación: según el tiempo que dura el desove
Clasificación: según la estación del año
1) Simple inducción ambiental:
- tanques especiales de desove carpa, silúridos
- Sustratos o redes desovadoras carpa, lucio
2) Manipulación del fotoperíodo
Modulando la liberación de GnRH por parte de la melatonina
Manipulación de T° vitelogénesis y espermatogénesis
3) Inducción hormonal con GnH
4) Extractos hipofisiarios
5) Gonadotropinas purificadas
6) Factores liberadores
7) Bloqueadores de Dopamina
8) Esteroides sexuales
DESOVE INDUCIDO
Sin tto. hormonal
con tto. hormonal
Estímulos ambientales
Hipotálamo
Horm. Liberadoras
Hipófisis
Gonadotropinas
Tejido ovárico
esteroideo
1720DHP
huevo maduro
huevo ovulado
vitelogénesis
estrógenos
H. Tiroides?
Precursoresvitelo
Higado
Corticoesteroides
Progestinas: 1720DHP
Andrógenos
Estrógenos 17 estradiol
1 2
3
4
Variables que influyen en el éxito de la inducción:
•Condición de pez,
•Estadio de madurez sexual
•Tamaño del pez,
• Historia de desoves previos,
•Temperatura del agua
•Estación del año
OBTENCIÓN DE OVAS CON TRATAMIENTOS HORMONALES
A) Extractos hipofisiarios: método más antiguo
Inyectando extractos de hipófisis se “evita” el puente entre cerebro hipófisis, actuando directamente sobre los ovarios y los testes
Se incrementa niveles de Gth en sangre que normalmente preceden al desove
Se induce
* Fase final maduración * Espermiación
* Ovulación * Desove
* Actúan en lugar de hormonas del pez
Técnica propuesta x Houssay (1930 – 1931) Argentina, Prachilodus platensis
Desarrollada por rusos y brasileños.
Dos dosis: 1° Inducir movimiento nucleo hacia la periferia (dosis pequeña)
2° Induce ovulación y puesta
En machos: una sola dosis para que ocurra la espermiación masiva
a) Extractos frescos de hipófisis:
* Primeras experiencias
* hipófisis se extraían de organismos de la misma especie.
Desventaja: sacrificar organismos
Metodología:
•Se deben utilizar inmediatamente o preservar congeladas o deshidratadas con acetona.
•Colocar en un frasco o una bolsa de plástico estéril y almacenar en un congelador hasta que se necesiten.
•Para preservar en acetona, las glándulas se colocan inmediatamente en un frasco con la acetona.
•Después de recoger el número requerido, la acetona en la cual las glándulas fueron colocadas se elimina y se substituye por la acetona fresca.
•La acetona se cambia otra vez a las 8 y 12 horas más adelante.
•Después de 24 horas en acetona, las glándulas son secadas al aire en una toalla de papel.
•Las hipófisis secadas se almacenan en un frasco limpio sellado en la temperatura ambiente o en un desecador. De este modo pueden ser almacenadas por 5 a 8 años
Extractos de hipófisis comerciales
En el mercado se encuentran disponibles los extractos de hipófisis de carpa común y del salmón
Estas son hipófisis enteras o pulverizados y preservadas en acetona.
Ojo: mientras más cercanas sean las especies donador – receptor mejor será la actuación de los extractos de hipófisis
Ventajas DesventajasSimple y requiere
pocos conocimientos pa´su aplicación
No requiere de equipamiento sofisticado
Dosis calculada fácilmente y posible de sin efecto (-)
Otras sust. en hipófisis sinergismo
Donadores peces de mercado
Costo
Dosis difícil de estandarizar desconoc. de potencia gonadotrópica donadorLa potencia varía a lo largo del año: edad, sexo, estado sexualExtracto fresco transmisor de enf.Otras hormonas interferencia en sistema neurohormonal drástica
Gran especificidad gonadotropinas de teleosteos heteroplástico > dosis
1kg maduro induce hembra 0,8 kg
Esfuerzos 1970 orientados a la búsqueda de una Gh purificada estandarizar
-Gh Salmón: SGH 100 caro, comercialización difícil
B) Gonadotropinas mamíferos:
- Se consideraban más seguras y están más disponibles:
* GCH y GH de orina yegua preñada: LH de humanos ; LH y FSH de yeguas
- Purificada
- Potencia estandarizada
- Almacenamiento
- Costo
- Diferencia estructural con las Gt peces
- Reacción inmune (año a año se pierde capacidad rpta. rpta farmacológica)
- Muerte de repro. si se inyecta dosis
- Como proviene de mamíferos pá peces, trabaja mejor, PERO dosis >res causa hinchazón vientre
* Se ha sugerido uso de progesterona GCH
Ventajas Desventajas
C) Factores Liberadores:
•Hipófisis si producía GH pero no liberaba
•Se descubrió que una sola inyección de GnRh al inicio de la maduración inducía la liberación de GH pero no la puesta
•1970 se purificó LHRH de mamíferos
•1974 Herose reprodujo peces
•Sherwood et al, 1983 aisló y caracterizó GnRH gonadal salmón
•Uso potencial: disponibilidad análogo del decapéptido de LHRH. Formas sintéticas con un AA reemplazado por otro.
Pez utiliza su propia gonad. Hip.
Ventajas Desventajas
•Análogos son + resistentes a acción enz.
•Tiempo de vida >
•Más potente que RH nativa.
•A dosis altas los análogos de peces y mamíferos son =, pero a dosis la de mamíferos es + activa
•Precio
•Sobredosis efectos opuestos
•Poca investigación
•Sensación más tensa de hipofisación
•Se han desarrollado sistemas que liberan RH en forma sostenida: implantes de polímeros y microesferas en musc. axial del pez sin efectos sobre fec, viabilidad y tasa de eclosión.
Método LINPE: Mayoría de peces de agua dulce se observó inhibidores dopaminérgicos
RHLH o GnRHs + domperidone
pimozoide
Se necesita (-) dosis, pero su valor es porque da > seguridad
Acción debida a la tasa de factor liberador antes que al nivel absoluto de gonadotropina
3-5 mg domperidone + 10 – 20 ug LHRHa/Kg
(inhibidores de la dopamina)
D) Administración de Esteroides
Gonadotropina 17 20 DHP maduración de óvulos
Estrógenos: importantes función en etapas iniciales del desarrollo ovocitario.
Khoo (1974) ovulación de Carassius administró progesterona (estrógenos, andrógenos y pregnonelona no resultaron)
Crypinus: 17 20 DHP pero previa administración de pequeñas dosis de hipófisis
Inyección de esteroides es eficaz UNICAMENTE durante las últimas etapas de la maduración hay que aplicarlo en el momento adecuado
Otros Trabajos:
* Método menos directo: con antiestrógeno: citrato de clonifeno, tamoxifen.
Fundamento: liberación de gonadotropinas están regidas por un sistema de retroalimentación negativo., en el cual los centros hipofisiarios e hipotalámicos responden al nivel d esterorides sexuales en la sangre,
Se requiere de un compuesto que compita con los esteroides gonadales para fijar los sitios hipofisiarios e hipotalámicos de modo que se libere gonadotropina independientemente del nivel de esteroides sexuales en sangre.
Breton (1975) : Carpa = dosis de 1 mg/kg libera gonadotropina
Dosis mayores causa efecto contrario
La respuesta también es dependiente del grado de maduración gonadal.
METODOS PARA LA ADMINISTRACIÓN DE HORMONAS
•Dosis necesaria varía de una sp a otra.
•Dosis “efectiva” depende del “grado de preparación de la hembra”, talla, edad, sensibilidad, etc.
•Generalmente existen dosis preparatorias y dosis finales.
10% de la dosis final
•Se debe evitar una dosis preparatoria excesiva.
•Se recomienda un lapso de 24 horas entre dosis preparatoria y final
Activa la gónada hasta la preovulación
MANEJO DEL PLANTEL DE REPRODUCTORES
Constituyen el principal componente de un hatchery.
De ellos depende la calidad de la semilla.
Considerar los siguientes factores:
T° :
•No debe existir grandes fluctuaciones de T°.
•El desarrollo normal de las gónadas necesita una determinada suma de T° expresadas en días – grado.
Luz: Necesidad de luz varía según las sps.
Bagre: afectados negativamente con ambientes iluminados
O2 : Fluctuaciones y concentraciones bajas inhiben desarrollo gonadal. Se recomienda 6 – 8 mg/l.
Densidad: Densidades diferentes a los de engorde, apiñamiento es catastrófico.
• Carpa: 1 pez / 5 m2
• Gamitana 1 pez /15 m2
• Trucha: 4 peces /m2
Alimento: cantidad y calidad adecuados
Evaluación del estado gonadal:
El éxito de la reproducción artificial y sobre todo de la inducción depende de la correcta evaluación del estado de madurez gonadal de la hembra.
Método más usado:
•Abdomen hinchado y blando.
•Coloración rojiza u oscura
•Orificio genital hinchado y prolapsado
•Biopsia ovárica: método más confiable. Pero no se puede aplicar a todos