LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

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LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal LMA – OMS Leucemia Promielocítica Aguda LMA M3 clássica LMA M3 variante

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LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal. LMA – OMS Leucemia Promielocítica Aguda LMA M3 clássica LMA M3 variante. Classificação da OMS. LMA 99P - LMA12. Robin Foá – Atibaia 03/2007. Vanderson Rocha – Board Review-MDAnderson/HIAE/ Junho 2007. LMA não categorizada. - PowerPoint PPT Presentation

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LMA – Diagnóstico laboratorialNydia S. Bacal

LMA – OMS

Leucemia Promielocítica AgudaLMA M3 clássicaLMA M3 variante

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Categoria Freqüência

L.M.A. com anormalidades genéticas recorrentesLMA com t(8;21)(q22;q22)/ AML1-ETO 5-12%LMA com inv(16)(p13q22) ou t(16;16)(p13;q22)/ CBF/ MYH11 10-12%LMA com t(15;17)(q22;q12)/ PML-RAR 5-8%LMA com anormalidades do 11q23 / MLL 5-6%

LMA com displasia de múltiplas linhagensPós-SMD ou doença mieloproliferativa VariávelSem antecedentes Variável

LMA/ SMD associada a tratamentoLMA/ SMD associada com agentes alquilantes VariávelLMA/ SMD associada com inibidores da topoisomerase II Variável

LMA não categorizada nos itens anterioresLMA com mínima diferenciação 5%LMA sem maturação 10%LMA com maturação 30-45%Leucemia mielomonocitária aguda 15-25%Leucemia monoblástica e monocitária aguda 3-6%Leucemia eritróide aguda 5-6%Leucemia megacariocitária aguda 3-5%Leucemia basofílica aguda RaraPan-mielose com mielofibrose aguda RaraSarcoma mielóide Rara

Classificação da OMS

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LMA 99P - LMA12

Robin Foá – Atibaia 03/2007

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Vanderson Rocha – Board Review-MDAnderson/HIAE/ Junho 2007

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LMA não categorizada

• > 60% dos casos de LMA• Base para classificação é a morfologia, grau de maturação

e citoquímica• Não existem anormalidades citogenéticas recorrentes• O critério diagnóstico é ≥20% de blastos na MO (em 500

células) ou SP (200 leucócitos)• Se houver leucopenia acentuada pode se fazer esfregaços

do buffy coat• Biópsia de MO é necessária para o diagnóstico de

leucemia aguda hipocelular em S.P. e M.O.• Recomendações para classificação são aplicáveis apenas

em amostras obtidas antes da quimioterapia.

Page 6: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

IMUNOFENOTIPAGEM

• Fundamental para o diagnóstico de:

• LMA-M0

• LMA-M7

• Pode ser importante no diagnóstico de: LMA-M6b (Leucemia eritróide pura)

• LMA-M3 (hipogranular)

Page 7: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Diagnóstico Laboratorial LMA e LPA – LMA M3

• Diagnóstico na rotinaPML-RARα qualitativo PCR e FISH – HIAEPML-RARα quantitativo - Nichols– 72horas(s/ estabilidade) FLT3 qualitativo – Nichols NPM – Exon 12 – Nichols C-Kit – qualitativo – Nichols – 72horas(s/ estabilidade)CBFβ MHY11 (inv 16) – Quali/quantitativo– Nichols – 72horas(s/ estabilidade)

FISH – envio de célulasAML1-ETO (t:8;21) – Quali e quantitativo – Nichols – 72horas(s/ estabilidade)

FISH – HIAEMLL PTD 11q23 - FISH – HIAENão Disponíveis: t(11;17) PLZF-RARα/NuMA- RARα/ t(5;17)NPM-RARα/ t(17;17)STSTSb-RARαCEBPα ; BAALC ; ERG ; NRAS ;

• Valor Prognóstico e Futuro

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Forma Clássica - LPA - LMAM3

Faggot CellsFaggot Cells

Dr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 9: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Forma Variante LPA - M3v

S. P.

Page 10: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Forma Variante LPA - M3v

Citoquímica para MPO – deve ser fortemente positivaCitoquímica para MPO – deve ser fortemente positiva

MO

Dr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 11: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Forma Hiperbasofílica

Dr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 12: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Diferenciação Granulocítica – MO normal

Painéis de anticorpos monoclonais

CD34CD34CD117CD117HLA-DRHLA-DR

I II III IV V

Mieloblasto Pro- Mielócito Meta- Neutrófilo mielócito mielócito

Bastão

CD117CD117

CD15CD15CD11CD11b b

CD15CD15CD11bCD11bCD16CD16

CD15CD15CD11b+forteCD11b+forteCD16+forteCD16+forte

CD34/CD117/CD45/CD13.33

CD16/CD13/CD45/CD11b

CD13+fortCD13+forteeCD33+fortCD33+fortee

CD13+fortCD13+forteeCD33+fortCD33+fortee

CD13+fracCD13+fracooCD33+fracCD33+fracoo

CD13+CD13+CD33+fracCD33+fracoo

CD13+fortCD13+forteeCD33+fracCD33+fracoo

CD15CD15

Dra. Maria Silvia – Florianópolis Santa Catarina

I II III IV V I II III IV V

Page 13: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Imunofenotipagem

0 256 512 768 1024

FJL.002Forward Scatter ->

10 10 10 10 100 1 2 3 4

FJL.002Anti-HLA-DR FITC ->

10 10 10 10 100 1 2 3 4

FJL.003CD7 FITC ->

10 10 10 10 100 1 2 3 4

FJL.004CD42a FITC ->

FJL.002CD13 PE ->

10 10 10 10 100 1 2 3 4

10 10 10 10 100 1 2 3 4

FJL.006CD15 FITC ->

Dr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 14: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

LMA M3

CD45xSS

HLA-DRxCD45

CD33xCD45

CD2xCD45

CD13xCD45

CD34xCD45

CD117xCD45

CD56xCD45

CD71xCD45

MPO(c)xCD45

Page 15: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

IMUNOFENOTIPAGEM

• Antígenos mielomonocíticos (CD13, CD15 e CD33) e ausência de expressão de antígenos monocíticos (CD14, incluindo My4, Leu M3 e Mo2) e ausência de HLA-DR

• Estudos iniciais - ausência de CD34 e CD7,mas Edward et al (1999) observaram que 41% dos casos

de LPA com CD34 (+).

• HLA-DR (+) em LPA e HLA-DR (-) em LMA com

morfologia não M3

Dr. Alberto Orfao – Universidade de Salamanca

Page 16: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

LMA - TRIAGEM FENOTÍPICA DE ALTERAÇÕES GENÉTICAS

t(8;21) MPO+, CD13, CD33, CD19+, CD56+ Comumente LMA-M2

t(15;17) MPO+, CD13+ heterogêneo, CD33++ homogêneo, CD15-, CD34-, HLA-DR-

LMA Promielocítica – FAB M3

Hurwitz, CA et al, Blood, 80: 3182, 1992 Orfao, A et al, Haematologica, 84:405, 1999

Page 17: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

• 111 casos de LMA de novo • 38 morfologia de M3 (34 morfologia típica e 4 M3v)

• PML-RARα - 39 dos 111 (35%)

• 34 morfologias M3 e 5 casos foram classificados como M0 (2 casos), M1(1 caso) e M2 (2 casos)

Page 18: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

ORFAO et al

• Quatro grupos conforme

Morfologia / genética molecular

1) M3 / PML- RARα + (n=34)

2) Não-M3 / PLM-RARα + (n=5)

3) M3 com PML- RARα - (n=4)

4) Não-M3 / PML- RARα – (n=68)

Page 19: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

ORFAO et al

• CD33 homogêneo nas células blásticas em 82% dos casos

• CD13 em todas as células leucêmicas com padrão heterogêneo de expressão (100%)

• Expressão de CD34/CD15 (100%) • Discriminação entre M3/PLM-RARα (+) e M3/PLM-RARα (-) :

padrão fenotípico CD34/CD15 ٭

expressão de CD13 ٭

.presença de subtipo maior de células blásticas ٭

Page 20: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

ORFAO et al

• A sensibilidade da imunofenotipagem para selecionar casos PLM-RARα foi de 100% e especificidade 99%

• HLA-DR negativo é provavelmente o achado mais

específico ( 91%)

Page 21: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

0 256 512 768 1024

Spalice R. MO 14/11/02.003FSC-Height ->

10 10 10 10 100 1 2 3 4

Spalice R. MO 14/11/02.003CD33 PE ->

APL80% Blasti CD33+

N O molecole CD33/cell = 23017

0 256 512 768 1024

Petriconi R. MO 30/12/02.003FSC-Height ->

AML M4

10 10 10 10 100 1 2 3 4

Petriconi R. MO 30/12/02.003FL3-H ->

80% Blasti CD33 +NO molecole CD33/cell =1648

0 256 512 768 1024

Caboni ext 19/12/02.003FSC-Height ->

AML M2

10 10 10 10 100 1 2 3 4

Caboni ext 19/12/02.003CD34 FITC ->

70% Blasti CD34+ CD33+NO molecole CD33/cell = 2992

Expressão e quantificação do CD33 em LMA / LPA

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 22: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

LEUCEMIA PROMIELOCÍTICA AGUDA (LPA)LEUCEMIA PROMIELOCÍTICA AGUDA (LPA)

LPA é caracterizada por uma translocação específica t(15;17)

t(15;17) envolve o gene receptor do ácido retinóico RAR-alpha no cromossomo 17 e o gene PML, um fator de transcripção, no cromossomo 15, gerando o gene quimérico PML-RAR-alpha

o resultado da proteina quimérica PML/RARα é crucial para a patogênese da LPA

Dr. Zago – Atibaia 03/2007

Page 23: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

standard-risk: median DFS = 3.2 years

years from CR

p<0.0001

standard: 85 events 47intermediate: 56 events 34high: 91 events 75

intermediate-risk: median DFS = 1.6 years

high-risk: median DFS = 0.62 years

SLD de acordo com o grupo de risco citogenético-molecular

 

Median: Standard: 3.2 years (C.I. 95%: 38,6 - 60,6) Intermediate: 1.6 years (C.I. 95%: 36,9 - 63,1) High: 0.62 years (C.I. 95%: 39,2 - 59,7)

Mancini et al, Blood 2005

Page 24: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Translocação Gene de Fusão Morfologia R esposta ao ATR A

t(15;17)(q22;q12) PML-R AR C lássica ou m icrogranular

Sensível

t(11;17)(q23;q21) PLZF-R AR Assoc. m icrogranular

R esistente

t(11;17)(q13;q21) NuMA-R AR C lássica Sensível

t(5;17)(q23;q12) NPM-R AR C lássica ou m icrogranular

Sensível

t(17;17) STAT5b- R AR R esistente

Translocações Cromossômicas Envolvendo o Gene RARα

Genes X

Genes X-RARDr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 25: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

MÉTODOS DIAGNÓSTICOS

Artefatos, não define alvo para MRD

Rápido, barato

1 diaImunofluores.

Proteína PML

Núcleo

Qualidade do RNA, falsos positivos

Rápido, sensível, define alvo p/ MRD

1 diaRT-PCRfusão PML/RARa

RNA

Laborioso, uso de radioativos, não define alvo para MRD

Específico7 dias

Southerngenes PML e RARα

DNA

Custo, não define alvo para MRD

Céls. intérfase

2-3 dias

FISH

Crescimento em cultura; fusões crípticas não são detectadas, não define alvo para MRD

Específico13-14

dias

Cariótipot(15;17)Cromossomos

DesvantagemVantagemTMétodoAlvoEstrut.

Dr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 26: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Imunofluorescência anti-PML

5’ 3’5’ 3’DR5 DR5

RXRRXR RARRAR

RARRARPMLPML

RARA

PMLPML

LMA – não LPMaDr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 27: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Acute Myeloid Leukemia

Tyrosine Kinase Receptor Mutations

Gene Mutation Frequency

FLT-3 Duplication 15-30%Point Mutation 5-10%

FMS Point Mutation 10-20%

c-KIT Various <10%

Gene Mutation Frequency

FLT-3 Duplication 15-30%Point Mutation 5-10%

FMS Point Mutation 10-20%

c-KIT Various <10%

Page 28: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Vanderson Rocha – Board Review-MDAnderson/HIAE/ Junho 2007

Page 29: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

E F

S (

%)

1 2 3 4 5 6years

FLT3 wildtype

Core Binding Factor AMLPrognostic impact of TK receptor mutations

FLT3 mutationp<0.001p<0.001

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 30: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

E F

S (

%)

1 2 3 4 5 6years

1 2 3 4 5 6years

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

O S

(%

)

FLT3 wildtype

p=0.03p=0.03

p<0.001p<0.001 FLT3 mutation

c-KIT wildtype

c-KIT mutationc-KIT mutation

Core Binding Factor AMLPrognostic impact of TK receptor mutations

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 31: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

LMA. Carcaterísticas clínicas de acordo com o status FLT3

FLT3 pos FLT3 neg

Pts 150 (20%) 582

Idade(mediana) 15-60 (48.5) 16-60 (40.5)

Sexo F/M 86/64 290/292

G.B.(mediana) 10.1-410 (126.0) 1.0-170 (28.2)

Blastos (%) 50-100 (85) 12-98 (46)

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 32: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 33: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal
Page 34: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1110 12

Oligomerization HeterodimerizationAc AcNLS NLSMB

Falini et al., NEJM 352: 254-266, 2005

NPM1 Kb

MutationsNone (wild type) GATCTCTG....GCAGT....GGAGGAAGTCTCTTTAAGAAAATAG Mutation A (77%) GATCTCTGTCTGGCAGT....GGAGGAAGTCTCTTTAAGAAAATAGMutation B (13%) GATCTCTGCATGGCAGT....GGAGGAAGTCTCTTTAAGAAAATAG Mutation C (2%) GATCTCTGCGTGGCAGT....GGAGGAAGTCTCTTTAAGAAAATAGMutation D (2%) GATCTCTGCCTGGCAGT....GGAGGAAGTCTCTTTAAGAAAATAGMutation E (2%) GATCTCTG....GCAGTCTCTTGCCCAAGTCTCTTTAAGAAAATAGMutation F (2%) GATCTCTG....GCAGTCCCTGGAGAAAGTCTCTTTAAGAAAATAG

Pelo menos 40 variantes da mutação NPM já foram identificadas

Exon 12

Page 35: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

WB: anti-NPM (376)

86

47

NIH 3T3

NPM wild-type NPM-mutated

NPM MUTANTS LOCALIZE ABERRANTLY IN THE CYTOPLASM

GFPNPMm

GFPNPMwt

C

WT Mutated

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 36: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Tratamento: Fatores Prognósticos• Pacientes idosos (>60 anos ? ; >80 anos)• Sanz et al (PETHEMA+GIMEMA)

– Baixo risco: GB<10.000/μl e Plt>40.000/ μl– Alto risco: GB≥10.000/ μ l– Risco intermediário:GB<10.000/ μl e Plt<40.000/ μl

• Persistência do PML/RARα pós-consolidação• Mau prognóstico mas não modificam o tratamento:

CD56+, isoforma S do PML/RARα e mutações do FLT3

• Não são fatores de mau prognóstico: anormalidades citogenéticas adicionais (30%)

Dr. Eduardo Rego – Atibaia 03/2007

Page 37: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

GIMEMA-AIEOP “AIDA” Trial GIMEMA-AIEOP “AIDA” Trial Risco de recaída de acordo com Risco de recaída de acordo com

monitoramento precoce de RT-PCR após monitoramento precoce de RT-PCR após consolidaçãoconsolidação

11

00 1212 2424 3636 4848MonthsMonths

RT-PCR negativeRT-PCR negative

RT-PCR positiveRT-PCR positive

00

0.20.2

0.40.4

0.60.6

0.80.8

Pro

bab

ility

Pro

bab

ility

p=0.0001p=0.0001

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 38: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Sobrevida da LPA em pacientes Sobrevida da LPA em pacientes tratados por recaída hematológica vs tratados por recaída hematológica vs

molecular molecular

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0

Molecular

Hematologico

32 20 7 2

94 47 26 14

P = 0.01

Robin Foá – Atibaia 03/2007

Page 39: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Expressões gênicas em LMA: grupos moleculares e resultados

Clear correlation between cytogentic groups and gene expression (Kohlmann, 2003, Genes,Chrom Cancer)

Identification of a HOX signature in sampleswith normal cytogenetics (Debernardi, 2003, Genes, Chrom Cancer)

54 AML pediatric samples with a different signaturethat is associated with outcome (Yagi, 2003, Blood)

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 40: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Vanderson Rocha – Board Review-MDAnderson/HIAE/ Junho 2007

Page 41: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Objective 1:

Clinical accuracy of the microarray test as compared to

standard leukemia laboratory methods (“gold standard”)

Gold standard Diagnostic

Information

Morphology Cytogenetics Immunophenotyping

FISHCytochemistry PCR

Microarray-based gene expression profile

n = 4000 patients

AmpliChip LeukemiaMILE: Clinical Objectives

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 42: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Microarray Innovations in LEukemia

A retrospective and prospective study to compare laboratory standard leukemia tests with a new microarray-based gene expression test

AmpliChip LeukemiaThe “MILE” multi-center pre-

marketing study

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 43: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

The MILE study will be conducted in collaboration with the European Leukemia Network plus US participants

European Leukemia Network (WP13)

• Site 1 Montpellier / France• Site 2 Munich / Germany• Site 3 Berlin / Germany• Site 4 Rome / Italy• Site 5 Padua / Italy• Site 6 Salamanca / Spain• Site 7 Cardiff / UK

Principal Investigator: T. Haferlach

US Sites – Memphis, La Jolla

AmpliChip LeukemiaKey hematological centers participating in Phase-I

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 44: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Accuracy by cross-validation:

95.65%

- based on 30fold CV- HG-U133 Plus 2.0- 2,647 samples for training

Classification performance of 17 - class algorithm: MDS not included in data set

Class Name N Sensitivity SpecificityC1 mature B-ALL with t(8;14) 18 0.833 1.000C2 Pro-B-ALL with t(11q23)/MLL 101 1.000 0.999C3 c-ALL/Pre-B-ALL with t(9;22) 127 0.934 0.999C4 T-ALL 152 0.974 0.998C5 ALL with t(12;21) 61 0.934 0.997C6 ALL with t(1;19) 44 1.000 1.000

C7 ALL with hyperdiploid karyotype 50 0.853 0.997C8 c-ALL/Pre-B-ALL without t(9;22) 188 0.871 0.991C9 AML with t(8;21) 72 1.000 1.000C10 AML with t(15;17) 72 0.986 0.999C11 AML with inv(16)/t(16;16) 73 1.000 1.000C12 AML with t(11q23)/MLL 82 0.855 0.997

C13AML with normal karyotype + other abnormalities 685 0.962 0.984

C14 AML complex aberrant karyotype 144 0.887 0.997C15 CLL 455 0.996 0.999C16 CML 151 0.984 1.000C18 None of the above 172 0.972 0.994

2647

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 45: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

AmpliChip Leukemia TestMILES Stage I data presented at ASH conference 2006

[852] An International Multi-Center Microarray Study for the Molecular Classification of Leukemia Identifies Novel Sub-Groupings in MDS Overlapping with AML.

Session Type: Oral SessionAuthors: Ken I. Mills, Torsten Haferlach, Jesus M. Hernandez, Wolf-Karsten Hofmann, Alexander Kohlmann, Mickey Williams, Lothar Wieczorek

Date/Time: Tuesday, December 12, 2006 - 8:45 AM

Session Info: Simultaneous Session: Myelodysplastic Syndromes: Molecular Biology (8:00 AM-10:00 AM)

Robin Foá – Atibaia – 03/2007

Page 46: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Illumina

Page 47: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Genes

CBFCBF

Subunity(promotes interaction with DNA)

Subunity(direct contact with DNA)

Proteins

CBFCBFAML-1(21q22)

Core Binding Factor

Page 48: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

Genes

CBFCBF

Subunity(promotes interaction with DNA)

Core Binding Factor

Subunity(direct contact with DNA)

Proteins

rhd

Runt homology domain (RUNX1)

CBF(16p13)

AML-1(21q22)

Page 49: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

CBF-MHY11inv (16)

rhd

CBFCBF

MYH11MYH11

rhd

CBFCBF

rhd ETO

CBFCBF

AML1-ETOt(8;21)

Wild type

Core Binding Factor Translocationsin AML

Page 50: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

5-12% AML8 t(8;21) 21

Page 51: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

LEUCEMIAS MIELÓIDES AGUDAS – 912 casos analisados LEUCEMIAS MIELÓIDES AGUDAS – 912 casos analisados MDS – 59 casos / BIFENOTÍPICAS – 10 casos no HIAEMDS – 59 casos / BIFENOTÍPICAS – 10 casos no HIAE

5.139 CASOS DE DOENÇAS ONCOHEMATOLÓGICAS (Novembro 1991 a Julho 2006)(Novembro 1991 a Julho 2006)

LMA M0 65LMA M1 154LMA M2 135LMA M3 120LMA M4 149LMA M5 61LMA M6 17LMA M7 16LMA (com expressão aberrrante) 47LMA Indiferenciada 4LMA 144TOTAL (17,7%) 912LEUCEMIA (Bifenotípica) (0,19%) 10MIELODISPLASIA (1,15%) 59

Page 52: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

OBRIGADA PELA ATENÇÃO !

Nydia

[email protected]

Grupo de Citometria de Fluxo do Laboratório Clínico HIAE - 2007

Ana Claudia Miranda BritoAlexandra CavalcanteSonia Tsukasa NozawaRuth Hissae Kanayama

Page 53: LMA – Diagnóstico laboratorial Nydia S. Bacal

I II III IV

Monoblasto Promonócito Monócito Macrófago

CD34CD34CD117CD117HLA-DRHLA-DR

CD117CD117HLA-DRHLA-DR

CD11b CD11b CD15+fracoCD15+fracoCD14 CD14

CD11bCD11b

CD14CD14

CD34/CD117/CD45/CD13.33

CD14/CD33/CD45/CD34

Diferenciação Monocítica – MO normal

Painéis de anticorpos monoclonais

CD13+forteCD13+forteCD33+forteCD33+forte

CD13+forteCD13+forteCD33+forteCD33+forte

CD13+CD13+CD33+CD33+

CD11bCD11bCD15CD15CD14CD14

CD13+forteCD13+forteCD33+forteCD33+forte

HLA-DRHLA-DR HLA-DRHLA-DR

Dra. Silvia – Florianópolis Santa Catarina