Métodos Imunológicos Métodos Imunológicos que utilizam reagentes que utilizam reagentes

não marcadosnão marcados

Rudolf KrausRudolf Kraus1868-19321868-1932

18971897PrecipitaçãoPrecipitação

Michael Heidelberger1888-1991

19351935Precipitação QuantitativaPrecipitação Quantitativa

Zona de excesso Ac

Zona de equivalência

Zona de excesso Ag

++ -- --++-- --

Anticorpo livreAntígeno livre

Pr

ecip

itado

For

mad

o

Quantidade de antígeno adicionado

Curva de HeidelbergerCurva de Heidelberger

Imunodifusão

Pode ser utilizada para a detecção e quantificação de antígenos ou anticorpos.

É baseada na difusão de uma molécula de Ac ou Ag em uma base de ágar, com formação de um precipitado.

Imunodifusão dupla

Resposta: amostra contém anti-1

amostraamostra

Ag 1 + Ag 3Ag 1 + Ag 3Ag 1Ag 1

Resposta: Anticorpos anti-1, anti-2 e anti-4

Ag 1Ag 1Ag 2 + Ag Ag 2 + Ag

44

amostraamostra

Imunodifusão radial

Imunodifusão radialO tamanho do halo formado é diretamente proporcional à quantidade de Ag ou Ac na amostra.

Georges Fernand Isidore WidalGeorges Fernand Isidore Widal1862-19291862-1929

Max Von GruberMax Von Gruber1853-19271853-1927

18971897

Aglutinação Aglutinação

Agrupamento de partículasAgrupamento de partículas

Aglutinação – classificação• Aglutinação Direta

Observa-se a aglutinação das hemáciasExemplo: tipagem sanguínea ABO e Rh

• Aglutinação Indireta Observa-se a aglutinação de partículas tratadas com

antígenos ou anticorposExemplo: partículas de látex revestidas de anticorpos anti-rotavírus

negativo positivonegativo positivo

Teste para sífilis - RPR

positivopositivo

positivopositivo

negativonegativo

Rapid Test Reagin - RPR

HemaglutinaçãoHemaglutinaçãoPERFIL DE SEDIMENTAÇÃO

Aglut.+

Aglut.-

Aglut.+

Aglut.-

Como Ocorre?Como Ocorre?

Hemaglutinação DiretaHemaglutinação DiretaNegativoNegativo PositivoPositivo

Teste de inibição da Teste de inibição da Hemaglutinação DiretaHemaglutinação Direta

NegativoNegativo PositivoPositivo

Teste de inibição da Teste de inibição da Hemaglutinação DiretaHemaglutinação Direta

Hemaglutinação IndiretaHemaglutinação IndiretaNegativoNegativo PositivoPositivo

Teste de Hemaglutinação Teste de Hemaglutinação Indireta Indireta

• Trypanosoma cruziTrypanosoma cruzi

• Treponema pallidumTreponema pallidum

• Toxoplasma gondiiToxoplasma gondii

QualitativoQualitativo

Título = 32UI/mL Título = 32UI/mL 1:81:8

1:21:2 1:21:21:21:21:21:21:21:2

88 1616 3232 6464 128128 256256

VírusVírus

Diluição SeriadaDiluição Seriada

Mistura Mistura com com

hemácias hemácias Visão Visão

LateralLateral

Visão de Visão de cimacima

QuantitativoQuantitativo

1/2

1/2

1/4

1/4

1/8

1/8

1/16

1/16

1/32

1/32

1/64

1/64

1/12

81/

128

1/25

61/

256

1/51

21/

512

1/10

241/

1024

Pos.

Pos.

Neg

.N

eg.

PacientePaciente

1122334455667788

Hemaglutinação Passiva ou indiretaHemaglutinação Passiva ou indireta“Quantitativo”“Quantitativo”

6464

Título UI/mLTítulo UI/mL

88512512<02<023232

> 1024> 102432320404

Hemaglutinação Passiva ou IndiretaHemaglutinação Passiva ou Indireta