OBJETIVOS Descrever base estrutural dos anticorpos Demostrar como ocorre sua produção Compreender...
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OBJETIVOS
• Descrever base estrutural dos anticorpos
• Demostrar como ocorre sua produção
• Compreender suas funções
• Aplicação prática
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IMUNIDADE HUMORAL-ANTICORPOS-
CARACTERÍSTICAS:
- Glicoproteínas solúveis produzidas por linfócitos B e células
plasmáticas após a estimulação com uma macromolécula (antígeno).
- Têm a capacidade de se ligar ao antígeno, pertencem a um grupo de
grandes polipeptídeos chamados imunoglobulinas (separação
eletroforética).
- Molécula com uma forma semelhante à letra Y.
- Interação Ag – Ac se dá através de forças não covalentes (ligações de
hidrogênio, atração eletrostática e força de van der Waals).
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Glicoproteinas
Immune serum
Ag adsorbed serum
1 2
+
albumina
globulinas
Mobilidade
Am
oun
t of
pro
tein
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ANTICORPOS - COMPOSIÇÃO
• Ac são compostos de polipeptïdeos com regiões:
• REGIÃO VARIÁVEL ( Fab)
• REGIÃO CONSTANTE ( Fc)
• CADEIAS PESADAS
• CADEIAS LEVES
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- Conteúdo de carboidrato: 2 – 12%
- Ligações dissulfeto
- Domínios (numerados de acordo com a cadeia).
2 leves (L): 23 kDa
2 pesadas (H): 50 – 80 kDa
ESTRUTURA:
- Massa 150 – 200 kDa
- 4 cadeias polipeptídicas
- 2 tipos alternativos de cadeia leve:
- 5 tipos alternativos de cadeia pesada:
- Cada cadeia tem segmentos relativamente estáveis ou constantes (C), que controlam as funções efetoras da molécula.
- Há também uma zona na qual a sequência de aminoácidos varia
enormemente: regiões variáveis (V).
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Tratamentos enzimáticos
podem clivar a molécula de
imunoglobulina:
Papaína: 3 fragmentos (2 Fab,
1Fc).
Pepsina: 2 fragmentos Fab.
ESTRUTURA:
A imunoglobulina pode ainda ser dividida em duas porções:
Fab: onde ocorre a ligação com
o Ag.
Fc: cristalizável.
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VARIABILIDADE E HIPERVARIABILIDADE NOS ANTICORPOS
Algumas áreas da molécula de imunoglobulina possuem as mesmas seqüências de aminoácidos, ou seqüências similares, em outras há um pico
de variação na escolha dos aa.
- As regiões de variabilidade (3 em cada cadeia leve e pesada) são denominadas: regiões hipervariáveis ou determinantes de complementaridade (CDRs).
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SÍTIO LIGAÇÃO Ag
• FORMADO REGIÕES HIPERVARIÁVEIS
• HIPERVARÁVEL - CDR
( regiões determinantes de complementaridade)
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CLASSES IMUNOGLOBULINASIGA- IGG- IGM- IGD- IGE
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SÍTIO LIGAÇÃO Ag
• VARIAM NA FORMA
• VARIAM PROPRIEDADES FÍSICAS• baseados em forças não covalentes• NEM TODOS OS CDR FAZEM CONTATO COM
Ag
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EPÍTOPOS• LINEARES E CONFORMACIONAIS
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EXEMPLO PRÁTICO
• ANTICORPOS MONOCLONAIS
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GERAÇÃO DIVERSIDADE DAS IG NAS CÉLULAS
• COMO É POSSIVEL UM NÚMERO TÃO GRANDE DE ANTICORPOS SEJA CODIFICADO PELOS NOSSOS GENES?
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IGMPropriedades:• primeiro Ac produzido• pentâmero• resposta primária (baixa afinidade)• região constante reage complemento• Sintetizada à partir do 5 meses de vida fetal• Não neutraliza vírus ou toxinas• * Níveis elevados de IgM normalmente indicam uma
infecção recente ou uma exposição recente do Ag
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IGG
Propriedades– Mais abundante (10g/l);
– 3 domínios constantes na cadeia H;
– Monômero: 4 subclasses;
– Principal Ig dos espaços extravasculares
– Transferência placentária –
– Fixa Complemento
– Opsonina
– Neutraliza toxinas
– Neutraliza vírus
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IGA• Propriedades
– 2ª mais abundante no soro (monomerica)– Ocorre como monômero e como dímero (2 mol. unidas por
um peptídeo)– Principal Ig secretada para superfícies externas (mucosas)
• Lágrimas, saliva, suco gástrico e secreções pulmonares– Não fixa Complemento– Neutraliza vírus– Bactericida contra Gram-negativas, na presença de lisozima
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• Propriedades– Monômero longo com 4 domínios CH– Baixa concentração no soro
• Liga via porção Fc em basófilos e mastócitos (Não requer a presença do antígeno para se ligar)
– Indivíduos saudáveis, os níveis de IgE são baixos (mg/l)– Reações alérgicas - Níveis aumentam na resposta a parasitas ou
pacientes com hipersensibilidade do tipo I;– Interação mastócito / IgE / Ag, causa a ativação do mastócito com
efeitos vasculares potentes localizados.– Infecções parasitárias (Helmintos)
• Ligação via Fc aos eosinófilos– Não fixa Complemento
IGE
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• Propriedades:– Concentrações séricas baixas– Vida curta– Menos caracterizada das imunoglobulinas do
ponto de vista funcional– Sensível à proteólise– Está na superfície do LB– Não liga Complemento
IgD
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1. Na defesa do hospedeiro:marcação de organismos infecciosos;
recrutamento, no hospedeiro de mecanismos efetores de destruição;
neutralização de toxinas;
remoção de antígenos estranhos da circulação;
2. Na medicina clínica:
níveis de Ac específicos antipatógeno usados no
diagnóstico/monitoramento de uma doença;
conjunto de Ac administrados passivamente para a
terapia/proteção do hospedeiro;
3. Em laboratórios científicos: diagnóstico e pesquisa.
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Funções Anticorpos
• NEUTRALIZANTE: se liga ao patógeno e impede de interagir com membrana celular
• OPSONIZACÃO: revestimento patógeno por proteínas sistema imune
• ATIVAÇÃO COMPLEMENTO
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NeutralizaçãoNeutralização
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NeutralizaçãoNeutralização
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NeutralizaçãoNeutralização
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OpsonizaçãoOpsonização
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OpsonizaçãoOpsonização
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OpsonizaçãoOpsonização
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Ativação do Sistema Ativação do Sistema ComplementoComplemento
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EXPRESSÃO DAS IMUNOGLOBULINAS;
- Na superfície da célula B;
-Resposta primária e secundária;
-GENES DAS IMUNOGLOBULINAS;
- Genes de cadeias leves;
- Genes das cadeias pesadas;
- Geração da diversidade da imunoglobulina.