Outros Sistemas de Importância Clínica

Sistemas Kell, Duffy, Kidd, MNSSistemas Kell, Duffy, Kidd, MNS

Simpósio Hemopasso Passo Fundo, 24 a 26/03/2008

Lilian Castilho, PhD

Sistema Kell

Grande importância na medicina transfusional, depois Grande importância na medicina transfusional, depois

dos sistemas ABO e Rh, pois os antígenos são dos sistemas ABO e Rh, pois os antígenos são

potentes imunógenospotentes imunógenos

Anticorpos do sistema KellAnticorpos do sistema Kell

– Reação transfusional hemolítica Reação transfusional hemolítica

– Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN)

Sistema Kell

1946: Coombs et al ISBT: 006 Altamente polimórfico 31 antígenos Principais antígenos: K, k, Kpa, Kpb, Jsa, Jsb

(antitéticos) Fenótipo null: K0

Expressos somente nos eritrócitos

Sistema Kell

Localização cromossômica: 7q33 Gene:KEL Produto gênico:glicoproteína (732 aa) Proteína Kell interage na membrana da

hemácia com a proteína Kx e tem função enzimática

Polimorfismo associado com mutações de ponto (SNPs)

Sistema Kell

Localização dos resíduos Localização dos resíduos de aa responsáveis pelo de aa responsáveis pelo polimorfismo Kellpolimorfismo Kell

Sistemas Kell e Kx

Forte associação entre as glicoproteínas Kell e Kx na membrana da hemácia

Ausência ou redução da glicoproteína Kell resulta na elevação de Kx

Fenótipo McLeod: perda de Kx enfraquecimento da expressão dos antígenos Kell

Antígenos Kell

Expressão alterada dos antígenos

Fenótipo McLeod :Kx Kell Fenótipo Kmod: Kell Kx Fenótipo Kp(a+b-)

Fenótipo Knull ou K0

Gene Ko Gene Ko alelo silencioso no locus Kell alelo silencioso no locus Kell

Fenótipo Kell Fenótipo Kell null null K Koo K Koo Kx em abundância Kx em abundância

Hemácias KHemácias Koo tem sobrevida normal tem sobrevida normal

Indivíduos KIndivíduos Koo alomunizados alomunizados anti-Ku : RTH e anti-Ku : RTH e

DHRN DHRN

Fenótipo raro: porém com maior frequência Fenótipo raro: porém com maior frequência

Finlândia e Japão Finlândia e Japão

Sistema Kell

Antígenos Kell são resistentes ao tratamento pelas enzimas mas são sensíveis ao tratamento com DTT

Sistema Kell

Alo-anticorpos– anti-K– IgG, raramente IgM– reativos a 37oC e AGH– clinicamente significantes Auto-anticorpos– anti-Ku

Sistema Kell

DHPN: anti-K– título de anti-K e níveis de bilirrubina no

líquido amniótico não se correlacionam com a severidade da doença

– genotipagem do feto tem um valor clínico importante

Sistema Kell Fenotipagem Genotipagem

Sistema Duffy

1950: Cutbush et al ISBT: 008 6 antígenos: Fya, Fyb, Fy3, Fy4, Fy5, Fy6

Fenótipo null: Fy(a-b-) em Caucasianos Expressão alterada no fenótipo Fyx

Expressos nas hemácias e vários tecidos

Sistema Duffy

Localização cromossômica: 1q22-q23 Gene: FY Produto gênico: glicoproteína (336/338

aa) Proteína Duffy: receptor P. vivax e P.

knowlesi e quimioquinas (IL-8, MGSA, RANTES, MCP-1)

Sistema Duffy

Definido por três alelos comuns:

– FY*A e FY*B codificam 2 antígenos antitéticos, Fya e Fyb

– FY*O é o principal alelo em Africanos e ocorre raramente em outras populações

Estes alelos dão origem a 4 fenótipos: Fy(a+b–), Fy(a–b+), Fy(a+b+) and Fy(a–b–)

Fenotipagem Duffy

Fy(a+b–), Fy(a–b+), Fy(a+b+) and Fy(a–b–)

Fenótipo Fy(a-b-)

Predominante em AfricanosOcorre devido a uma mutação de ponto

no gen promotor GATA-1Resistentes a invasão pelos parasitas

da maláriaNão se ligam a quimiocinasGenotipados como FY*B/FY*B

Fenótipo Fy(a-b-) em Africanos

intron Exon 2Exon 2

Exon 2Exon 25’

Ex1Ex1

Ex1Ex1Ex1Ex1

3’

3’

NH2COOH

1572 (nt)

AAAn

3361

1

mRNA

Gp-FY

125 A

GATA-1 boxGATA-1 box-33

ttattaccctct

* Em descendentes de Africanos Fy(a-b-), o gene FY codifica FY*B

Mutação no sítio de ligação para o fator de transcrição eritróide específico GATA-1 afetando a expressão do antígeno nas hemácias : -33T>C na sequência TTATCT impede a transcrição do gene FY

Fenótipo Fy(a-b-)

Por que os indíviduos Fy(a-b-) desenvolvem anti-Fya e não desenvolvem anti-Fyb ?

– a maioria tem um alelo FY*B com um GATA box não funcional

– Fyb é expresso em outros tecidos

Genotipagem Duffy

Genotipagem dos alelos FY*A e FY*B e do gen promotor GATA-1 funcional e não funcional

– importante para selecionar os pacientes fenotipicamente Fy(b-) que podem ser transfundidos com hemácias Fy(b+)

FYA/FYB-33FYA/FYB-33

Fy(a–b–)Fy(a–b–)

FYB-33/FYB-33FYB-33/FYB-33

PacientesPacientes

Fy(a+b-)Fy(a+b-)

Unidades Fy(b+) transfundidasUnidades Fy(b+) transfundidas

6 a 326 a 32

1 a 571 a 57

6.56.5

Estes pacientes não desenvolveram anti-FyEstes pacientes não desenvolveram anti-Fybb ou anti-Fy ou anti-Fy33

25

3

Pacientes Fy(b-) transfundidos com hemácias Fy(b+)

Fenótipo Fyx

Fyx

Membranaeritrocitária

NH2

COOH

59

336Arg89Cys Ala100Thr

Substituição de aminoacido levando a redução dos níveis da proteína na membrana eritrocitária (10%)

Sistema Duffy

Antígenos

– polimórficos: Fya, Fyb (antitéticos)

– alta prevalência: Fy3, Fy4, Fy5, Fy6

Anticorpos

– anti- Fya, anti- Fyb, anti-Fy3

– IgG/Clinicamente significantes

Sistema Duffy

Antígenos Fya, Fyb e Fy6 são sensíveis ao tratamento pelas enzimas ficina/papaína mas são resistentes ao tratamento por DTT e cloroquina

Sistema Duffy

alo-anticorpos

– anti- Fya

– IgG, raramente IgM

– reativos a 37oC e AGH

– clinicamente significantesauto-anticorpos

– mimetizam alo-anticorpos

Sistema Kidd

1951: Allen et alISBT: 0093 antígenos: Jka, Jkb, Jk3 fenótipo null: Jk(a-b-)expressos nos eritrócitos, neutrófilos e rim

Sistema Kidd

localização cromossômica: 18q12gene: HUT11produto gênico: proteína (391 aa) com

função de transporte de uréia

Camada bilipídica-membrana eritrocitária

Jka/Jkb

Asp/Asn*280

Fenótipo null

Fenótipo Jk(a-b-)Homozigose de um raro gen recessivo

ou presença de um gen dominante inibidor In(Jk)

Ausência dos antígenos KiddResistente a lise pela uréia 2MDesenvolvem anti-Jk3

Antígenos Kidd

antígenos Kidd são resistentes ao tratamento por enzimas, DTT e cloroquina

Fenotipagem Kidd

Fenotipar sempre os antígenos Jka e Jkb utilizando anti-soro comercial (monoclonal) e técnica sensível

Anticorpos Kidd

Alo-anticorpos– anti-Jka e anti- Jkb

– IgG, alguns IgM– reativos a 37oC, AGH, enzimas– clinicamente significantes Auto-anticorpos– podem ocorrer (anti-Jka mais frequente)

associado a AHAI severa

Anticorpos Kidd

Difíceis de detectar:– Anticorpos potentes são exceção; maioria é fracamente

reativo

– Geralmente encontrado no soro com outros aloanticorpos

– Necessário métodos sensíveis(ex., AGH com hemácias tratadas com enzimas, gel teste ou polibreno)

– Podem não reagir com hemácias Jk(a+b+): efeito de dose

– podem “desaparecer” in vivo e in vitro

Impacto clínico dos anticorpos Jk: transfusão

Fixam complemento

Causam reações transfusionais hemolíticas imediatas severas e fatais

Associados com reações transfusionais hemolíticas tardias (RTHT):

– severas: oliguria, falha renal

Anti-Jka mais comum que anti-Jkb

– Causam no mínimo 1/3 das RTHT

Impacto clínico dos anticorpos Jk: DHPN

Antígenos Jka, Jkb e Jk3 são bem desenvolvidos nas hemácias de RNs

Raramente causam DHPN: geralmente só fototerapia

Raros casos de DHPN severa e fatal

– 1 caso fatal case publicado para anti-Jka

– 2 casos fatais publicados para anti-Jkb

Transfusão Incompatível anti-Jka

PAI em 21 de Abril. Nenhum anticorpo detectado (Enz/AGH!)

PAI em 29 de Abril. (Observe plasma, pós RTH devido a anti-Jka

8 dias pós-transfusão

Hemólise devido a anti-Jkb

Todos os pacientes transfundidos deveriam receber sangue Jk fenótipo

compatível?

Genotipagem Kidd

Recomendada em pacientes politransfundidos, portadores de AHAI e na presença de resultados de fenotipagem duvidosos

Sistema MNS

1927: Landsteiner e Levine ISBT: 002 Altamente polimórfico 46 antígenos: Jka, Jkb, Jk3 Fenótipos null:S-s-, En(a-), MkMk Expressos nos eritrócitos, endotélio e epitélio renal

Sistema MNS

Localização cromossômica: 4q28.2-q31.1 Gene:GYPA, GYPB produto gênico:glicoforina A (GPA) e

glicoforina B (GPB) Antígenos são carreados na GPA, GPB e

GPA/GPB híbridas Polimorfismo associado com mutações de

ponto (SNPs) e presença de genes híbridos

Antígenos do Sistema MNS

Incidência n Antígenos

Variavéis4 M N S s

Alta 9 Ena ENKT ENEP ENEH ENAV

U ‘N’

Baixa 33 He Mia Mc Vw Mur Mg Vr Me Mta

Sta Ria Cla Nya Hut Hil Mv Far sD

Mit Dantu Hop Nob Or DANE

TSEN MINY MUT SAT ERIK Osa

HAG MARS

GPA e GPB

camada bilipídica

131

72

1’N’

1 M/N

29 S/s

Variantes MNS

Fenótipos null

S-s-: ausência ou alteração da GPB

En(a-): ausência ou alteração da GPA

MkMk: ausência da GPA e GPB

Fenótipo S-s-

~1% dos afro-americanos

–50% apresentam deleção do GYPB

Fenótipo S-s-U-

–50% apresentam mutações no exon 5 do GYPB

Fenótipo S-s-U+var

–pode desenvolver anti-U (IgG, clinicamente significante, resistente ao tratamento enzimático

Antígenos MNS

antígenos MNS são geralmente sensíveis ao tratamento por ficina/papaína e resistentes ao DTT e cloroquina

Fenotipagem MNS

Fenotipagem dos antígenos antitéticos

Anticorpos MNS

alo-anticorpos anti-M e anti- N– IgM e IgG– Reativos a 40C, TA e raramente a 37oC, AGH– Não reativos por enzimas, efeito de dose Anti-S e anti-s– IgG, raramente IgM– reativos a 37oC, AGH– Reações variáveis com ficina/papaína– clinicamente significantes

Genotipagem MNS

Genotipagem S e s podem ser necessárias em pacientes politransfundidos e portadores de AHAI

Genotipagem na investigação de variantes

Obrigado pela atenção!