NewsLab - edição 65 - 2004132

Estudo de Ovos de Meloidogyne sppem Fezes Humanas

Geny Aparecida Cantos1, Rosilene Linhares Dutra2, Nádia Salete Benedet3

1- Prof(a) Dr(a) do Departamento de Análises Clínicas (ACL), Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC), Florianópolis, SC, Brasil2 - Mestre e doutoranda, UFSC

3- Aluna da disciplina Estágio Supervisionado – ACL - UFSC

Artigo

Meloidogyne spp is a nematode of agriculturalimportance, mostly found in roots, such as: potato,manioc, beat, radish, turnip or sweet potato. It isharmless to human beings. By ingesting such foodpeople may present eggs of this nematode in theirfeces. Yet, these may be mistaken for hookworms andTrichostrongylus spp eggs, worms which parasitemen. All three of the parasites have similar egg mor-phology. In order to differentiate the nematode eggsin human feces the size, the shape and presence ofinternal structures must be taken into account eggsof Meloidogyne spp present the lack of a clear spa-ce between the morula and the membrane as a dis-tinctive feature. Thus this paper’s main objective wasto consider distinct features of the nematoda Meloi-dogyne spp and the main differences in the eggs ofthe three parasites.

Keywords: Meloidogyne spp, Trichostrongylusspp and Hookworms

Meloidogyne spp é um nematelminto de interesse agrí-cola, encontrado principalmente em nódulos radiculares,como batatinha, mandioca, beterraba, rabanete, nabo,batata-doce, sendo inofensivo para o ser humano. Pelaingestão de tais alimentos o homem pode apresentar emsuas fezes ovos deste helminto, os quais podem ser confun-didos com ovos de Ancilostomideos e Trichostrongylus spp,os quais são parasitas do homem. Esses três parasitas têma morfologia do ovo semelhante entre si. Para diferenciaros ovos destes helmintos nas fezes humanas, deve-se levarem conta o tamanho, a forma e a presença ou não deestruturas internas, sendo que os ovos de Meloidogyne sppapresentam entre outras características, como diferencia-ção marcante, a ausência de um espaço claro entre amórula e a membrana. Assim, este trabalho teve comoobjetivo considerar as principais características do nema-toda Meloidogyne spp e também apresentar as principaisdiferenças dos ovos desses três parasitas.

Palavras-chaves: Meloidogyne spp, Trichostron-gylus spp e Ancilostomídeos

Resumo Summary

IntroduçãoIntrodução

M eloidogyne spp é um nema-

telminto pertencente à clas-

se Nematoda e como tal é vermi-

forme (nema=fio; eidos= forma),

apresentando aparelho digestivo

completo e ausência de epitélio no

pseudoceloma (cavidade do corpo).

Está inserido na subclasse Secer-

nentea (com presença de flasmí-

deos, que são depressões sensori-

ais localizadas na porção posterior

do helminto), na ordem Tylenchida

(de interesse agrícola), na super-

família Tylenchoidea; na família He-

teroderidae e no gênero Meloido-

gyne (Fraga, 1984). As espécies

desse gênero são as causadoras de

uma afecção conhecida como “an-

guilolose da raiz” ou “nematodos de

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nódulos radiculares”, sendo encon-

trados em mais de 1000 varieda-

des de plantas, e mais comumente

nas agalhas de raízes como toma-

te, pimentão, beringela, tabaco,

soja, erva-mate, olivas e algodão,

tornando limitante a cultura dessas

plantas (Barnes & Olive, 1995).

Muitas são as espécies do gê-

nero Meloidogyne descritas, sen-

do que as mais importantes são:

Meloidogyne arenaria, Meloido-

gyne javanica, Meloidogyne in-

cognita e Meloidogyne artiellas.

Embora essas espécies diferem

em suas relações com os hóspe-

des, morfologicamente as dife-

renças observadas entre as mes-

mas são vagas. Para a identifi-

cação dessas espécies muitas

técnicas têm sido utilizadas, des-

tacando-se as análises de pro-

teínas codificadas de estruturas

cuticulares de tais nematodos

(De Giorgi et.al.,1996; Jaubert

et.al., 2002); os anticorpos mo-

noclonais específicos contra an-

tígenos de glândulas de fêmeas

adultas de Meloidogyne e tam-

bém contra proteínas essenciais

envolvidas na patogênese deste

nematodo (Rosso et.al., 1996);

os marcadores genéticos, cujas

seqüências de DNA são amplifi-

cadas pela reação em cadeia de

polimerase (Castagnone et.al.,

1994; Chacon et.al., 1994) e a

diversidade da estrutura mito-

condrial do parasito, utilizando

técnicas eletroforéticas de alta

resolução (Huggal et.al.,1994).

Morfologia e Ciclo Biológico

Tanto o macho como a fêmea

apresentam cor branca leitosa e

têm aspecto vermiforme. Os ma-

chos possuem a forma típica de fio

e podem medir 1,5 mm de compri-

mento com um ou dois testículos,

com seus correspondentes espícu-

los ou pênis, praticamente termi-

nais em sua típica cauda arredon-

dada que carecem totalmente de

bursas. Quando adultos, vão à bus-

ca das fêmeas ou muitas vezes se

dirigem diretamente ao solo. Assim,

é comum encontrar os machos de

Meloidogyne spp livres no solo ou

mesmo encrustrados nas massas

de ovos. Logo após a fecundação,

o macho morre, sendo um parasito

sedentário unicamente durante seu

desenvolvimento larvar.

As fêmeas têm mais aspecto glo-

boso, piriforme, medindo aproxima-

damente 0,8 mm de comprimento,

contendo dois ovários e uma vulva

subterminal. Vivem normalmente

dentro das raízes de tubérculos su-

culentos, sendo que após a fecun-

dação (para alguns autores a re-

produção pode ser do tipo pater-

nogenética), ela secreta, através de

sua vulva, uma substância gelati-

nosa e, em seguida, deposita seus

ovos (200 a 500 e até mais de

1000), que se mantêm unidos, pro-

tegidos por uma capa protetora.

Após a eclosão dos ovos as larvas

vão rapidamente em busca de uma

raiz, pois caso contrário, morrerão

em poucas horas. Nessas raízes elas

começam a alimentar-se imediata-

mente no primeiro ponto no qual

entram em contacto, para recupe-

rar-se do esforço realizado. Logo,

com o seu estilete (estrutura oca,

usada para penetrar nas raízes e

alimentar-se das células das plan-

tas), vão realizando um orifício com

o qual conseguem finalmente intro-

duzir-se. Após as larvas penetra-

rem em seu sítio definitivo, elas

continuam alimentando-se voraz-

mente dos sucos vegetais e pas-

sam logo por dois estádios, nos

quais a alimentação passa a cum-

prir um papel secundário. Em seu

segundo estádio larvar, elas medem

de 0.4 a 0.5 mm de comprimento.

No fim do terceiro e no início do

quarto estádio larvar, as fêmeas co-

meçam a tomar sua forma de limão

(Fraga, 1986). As fêmeas, alcançan-

do seu estado adulto, logo após a

fecundação, fazem a ovoposição.

Normalmente permanecem no mes-

mo sítio em que se desenvolveram.

A fêmea é um parasito sedentário

em todo seu desenvolvimento lar-

vário e durante toda sua vida adul-

ta. Em algumas ocasiões, tem-se

encontrado os machos da mesma

forma que as fêmeas, porém duran-

te um período mais curto (Barnes &

Olive, 1995).

O período de incubação, desde a

penetração da larva à deposição dos

ovos pela fêmea, é de aproximada-

mente 20 a 30 dias (Fraga, 1984).

Os climas quentes e os solos leve-

mente úmidos favorecem o desen-

volvimento e a fusão destas espéci-

es, porém o excesso de umidade as

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prejudicam. O ciclo completo se

cumpre em aproximadamente 30 a

45 dias. Em nosso meio, e em con-

dições normais, pode-se calcular de

3 a 5 ciclos por ano (Fraga, 1986).

Patologia

O parasita é inofensivo para o

ser humano, porém causa danos

para a planta que estiver parasi-

tando. O mecanismo de destruição

do vegetal parasitado ocorre da

seguinte maneira: inicia-se na par-

te superior da planta com mudan-

ça de coloração, amarelamento e

ressecamento, começando pelos

bordos, ocasionando lentidão no

crescimento e decaimento geral da

planta. Em alguns casos a planta

morre, porém mesmo que isso não

aconteça, sua produção é pratica-

mente nula. Na raiz aparecem aga-

lhas provocadas pelos nematóides

que vivem em seu interior e debili-

tam a planta, dificultando a circu-

lação da seiva na mesma.

A planta gasta energia em su-

plantar as raízes atacadas e o de-

bilitamento geral se acentua. As

necroses, produzidas nos locais

onde houve penetração dos nema-

tóides, constituem um fator impor-

tante no decaimento dos vegetais

atacados (Fraga, 1986).

Diagnóstico diferencial de al-

guns nematóides parasitas do

homem e sua comparação com

Meloidogyne spp

Os ovos de Meloidogyne spp

podem ser encontrados nos vege-

tais parasitados e encontram-se

pouco unidos ou formando massas

compactas, como se fossem ver-

dadeiros sacos, em forma de pêra

e, algumas vezes, em forma de

esfera. Podem aparecer em fezes

humanas pela ingestão de plantas

como batatinha, mandioca, beter-

raba, rabanete, nabo, batata-doce,

podendo ser confundidos com os

ovos de Trichostrongylus spp e An-

cilostomídeos. Esses três parasitas

têm a morfologia do ovo semelhan-

te entre si. Para diferenciar os ovos

destes helmintos nas fezes huma-

nas, deve-se levar em conta o ta-

manho, a forma e a presença ou

Figura 1. Ovos de Meloidogyne spp, mostrando formas ovóides, casca fina, hialina,corpúsculos refringentes de forma oval e arredondados, localizados entre a casca e amórula, se assemelham a gotas de gordura (400x).

Figura 3. Ovos Trichostrongylus spp em fezes recentemente emitidas (400x).

Figura 2. Ovos de Ancilostomídeos em fezes recentemente emitidas, podendo ser encontradosovos com quatro, oito, ou mais blastômeros e depois uma massa germinativa (400x).

não de estruturas internas.

Os ovos de Meloidogyne spp são

brancos, têm o formato ovóide ou

elipsóide medindo de 82 a 120 µm

de comprimento por 24 a 43 µm de

largura. Possuem casca fina hialina,

com extremidades arredondadas,

podendo apresentar um dos lados

ligeiramente achatados ou cônca-

vos (Pessoa & Martins, 1988). Po-

dem apresentar corpúsculos refrin-

gentes em seu interior, localizados

entre a casca e a mórula (Pardini

et al., 1999-2000) (Figura 1), es-

trutura que quando presente é im-

portante na diferenciação dos ovos

de Trichostrongylus sp e dos anci-

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Conclusão

lostomídeos. Muito característico,

embora não seja encontrando em

todos os ovos, é a presença em um

dos pólos, de corpúsculos (arredon-

dados ou ovalados ou irregulares e

refringentes), que se assemelham

a gotas de gorduras situados entre

a mórula e a casca (Pardine et al.,

1999-2000) (Figura 1).

O ovo de Trichostrongylus sp é

semelhante ao de Ancilostomídeo,

diferenciando-se deste pelo seu

maior tamanho, extremidade me-

nos romba e aspecto mais alonga-

do (Pardini et al.,1999-2000) (Fi-

gura 3). Os ovos de ancilostomí-

deo têm uma característica mar-

cante: entre a casca e a célula-ovo

há sempre um espaço claro, que

diminui à medida que avança a seg-

mentação (Figura 2).

Em relação ao verme adulto, a

maior diferença entre os parasitas

Trichostrongylus spp e Ancilosto-

mídeos (tanto macho quanto fê-

mea) está na cápsula bucal, que é

rudimentar para este parasita e

bem desenvolvida nos ancilostomí-

deos e Meloidogyne spp. Esta di-

ferença faz com que os Trichos-

trongylus spp fiquem parcialmen-

te enterrados na mucosa do duo-

deno e jejuno (metade ou um ter-

ço do helminto) e os ancilostomí-

deos fiquem firmemente aderidos

à mucosa intestinal através da cáp-

sula bucal bem desenvolvida (for-

madas de lâminas ou dentes cor-

tantes) (Cantos & Lima, 1997).

Por outro lado, o verme adulto

de Meloidogyne spp é bem diferente

dos outros dois já citados acima,

principalmente a fêmea que mede

0,8mm de comprimento e tem for-

mato de limão ou pêra. O macho

tem forma de fio, com 1,5mm de

comprimento, com cauda arredon-

dada, porém a larva tem cauda

pontiaguda.

Conclusão

Embora a presença de ovos de

Meloidogyne spp em fezes huma-

na seja rara, a diferenciação de

diferentes nematóides que para-

sitam o homem em estudo é de

suma importância porque impede

que os pacientes sejam submeti-

dos a tratamentos inadequados,

pois Meloidogyne spp não causa

danos ao homem.

Referências BibliográficasReferências Bibliográficas

1. Barnes RSK & Olive PJW. Os Invertebrados: uma nova síntese. Ed. Atheneu, São Paulo, 1995.2. Cantos GA & Lima LM. Estudo Comparativo entre Trichostrongylus spp e Ancilostomídeos. NewsLab 24: 130-136, 1997.3. Castagnone Sereno P et al. Genetic polynorphusm between and within Meloidogyne species detected with RAPDmarkers. Genome 6(37): 904-909, 1994.4. Chacon MR et al. The differentiation of parasitic nematodes using tandom amplifica DNA. J. Helmintol 2(68): 109-113, 1994.5. De-Giorgi C, Luca F, Lamberti F. A silent transplicing signal in the cuticlin-encinding gene of the plant parasiticnematode Meloidogyne artiellia.Gene 2 (170): 261-65, 1996.6. Fraga CP. Introduccion A La Nematologia Agricola. 2ed.Hemisferio Sul S.A.43 48, 1984.7. Hugal A, Moritz C, Stanton J et al. Low, but strongly structured mitochondrial DNA diversity in root knot nematodes(Meloidogyne). Genetics 3(136) 903-912, 1994.8. Pardini VC, Ferreira CJ, Mourão DM, Mendonça AR et al. Ocorrência de Ovos de Trichostrongylus spp. e Meloidogynespp. em exames coproparasitológicos de rotina. Revista Laes & Haes 122: 86 – 90, 1999 – 2000.9. Pessoa SB & Martins AV. Parasitologia Médica. 11ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 1988.10. Rey L. Parasitologia, 2ed.São Paulo: Guanabara Koogan, 1991.11. Rosso MN, Schiuten A, Roosien J et al. Expression and functional characterization of a single chain Fv antibody directedagainst secretions involved in plant nematode infection process. Biochem Biophys Res Commun 2 (220) 255-263, 1996.

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