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PapelCentraldoGeneRedePPARynacoordenaodeBovinosdeCorteintramuscularadipogenesisemrespostaaidadededesmameeNutrioSoniaJ.Moisa, DanielW.Shike, DanB.Faulkner, WilliamT.Meteer, DuaneKeisler, eJuanJ.Loor

InformaodoautornotasArtigocopyrightedelicenciamentoinformaes

EsteartigofoicitadoporoutrosartigosemPMC.

Fundo

Processosbiolgicoscomplexos,comoadipogneseelipognesesoregidasporumvastonmerodeenzimasqueatuamemconjunto,juntamentecomhormniosemetablitoschavepararegularometabolismodasclulasdegordura.Adiferenciaodeprecursoresdeadipcitosconduzidoporumacascatadeeventoscontroladosporreguladoresdetranscrio,coactivadores,eoscontrolosdociclocelular.Todoesteprocessomuitobemreguladaaonveldatranscrio.Pradipcitospodemserinduzidasparasediferenciareminvitropormeiodeumasinalizaoexterna,talcomoainsulina,osglicocorticidese/oumolculasquepodemaumentaroAMPcintracelular. Estaspistasdesencadearocomeodeumacascatadetranscriocompostoporumarededeprotenasquemedeiamasfunesdeadipcitos.

Oreguladormestredadiferenciaodosadipcitosemmonogstricosperoxissomaproliferadordoreceptorgamaactivado(PPARG),ummembrodasuperfamliadereceptornuclearqueaomesmotemponecessrioesuficienteparaadipogenesis. VriasprotenasCCAAT/potenciadordeligao(CEBP)soimportantesadipognicaelipogenicreguladoresdetranscrio.Elesfuncionamcomopartedeumacascatadeeventos,cominduoprecocedaCEBPBeCEBPDlevandoinduodeCEBPA.CEBPAumtransactivadordePPARG,eambososreguladoresdetranscrioagememconjuntoparapromoveraadipognese. OresultadogeralinvitroPPARGativaonotecidoadiposobovinaupregulatealvosgenesquepermitemadiferenciaodospradipcitosemadipcitosmaduros,ouseja,clulasquepodearmazenartriacilglicerol(TAG).

Aocontrriodoqueasvastasdadosemmonogstricos,poucosesabesobreosfatoresambientais(incluindoanutrio)queregulamadipogenesisnocrescimentoruminantesquesocriadosparaproduodecarne.Trabalhosanterioresindicaramque,durantea"fasedecrescimento"emgadodecorte(isto,antesdodesmameem~205diasdeidade),osnutrientessodivididasemfavordocrescimentodoesqueletoedomsculo,enquantoataxadedeposiodegordurarelativamentebaixo.Emcontraste,durantea"fasedeterminao",adeposiodegorduratemamaiorrespostaprincipalmentedevidoaoelevadocontedodehidratosdecarbononoestruturais(amido)dadieta.

Crescimentocorporaleadeposiodegorduraembovinostambmsoinfluenciadospelaidadeemqueosanimaissodesmamados.Sistemas(OE)"desmameprecoce"incentivarosfilhosacomerumadietaricaemcarboidratosnoestruturaisfoilevantadaahiptesedequeestalhespermitiriaalcanarseupotencialgenticoparaagregargorduraintramuscular("mrmore"), e,assim,alcanarummaiorgraudequalidadedacarnenoabate. Claramente,oconhecimentosobreosprocessosfundamentaisquecontrolamadipogenesisnacarnedebovinogadotemimportantesimplicaesbiolgicasedeconsumo.

Ahipteseparaesteestudofoiadequeodesmameemumaidadeprecoceemcomparaocomo

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"desmamenormal"(NW),emcombinaocomumadietaricaemamido,provocariaregulaopositivadoPPARGrededesinalizaoecausaraativaodelongoprazodaadipognese,queseriareflectesenoteordegorduraintramusculardoanimalduranteocrescimentoetambmnomomentodoabate.OobjetivoespecficofoiavaliarosperfisdeexpressotemporaldePPARGgenesalvo,bemcomooutroscomponentesimportantesdoprogramaadipognica/lipogenic(Fig.1)nolongussimomuscular(LM)deduasraasdebovinosdecorte.ComposiocorporaledadosdebiomarcadoressanguneosselecionadosforamutilizadasparadeterminaroefeitofenotpiconadeposiodegorduraintramusculardoalteradosPPARGexpressoredegenedevidoaoEW.

Figura1RelaesentregenesanalisadoscombaseemexamemanualmentecuradoriadaliteraturapublicadadentrodoIngenuityPathwayAnalysis(atualmenteconhecidawww.ingenuity.com)basedeconhecimento.

Mtodos

Manejoanimal

UmsubconjuntodequatorzepurosangueAngus(A)eAngusSimmental(SA)orientapelaUniversidadedeIllinoisrebanhobovinoforamselecionadosdeumgrupomaiordeanimaisutilizadosemumestudocomocompanheiro. Osnovilhosforamdivididosaleatoriamenteemdoisgrupos(EWSeCFS).Seteanimaisforamdesmamadosprecocementeemumaidadede14131diasealojadosemedifciosnoBeefLaboratriodePesquisaCampodaUniversidadedeIllinois.Osedifciosestoabertosparaosulcomtelasdeaveseatemperaturanointeriorflutuacomatemperaturaexterior.Essepontomarcouoinciodopresenteestudo(dia=0).Osanimaistiveramumperododeadaptaodietadenovoduassemanas.

Novilhosprecocesdesmamadosforamalojadosemedifciosempavimentosdegrelhaembeto(cobertocomborracha)ealimentadoapartirdalinhadecercabelichesdeconcreto.Outrosseteanimaiscontinuaramcuidandodesuasmes,enquantoelesestavamnopasto(festucagrama,pomargrama,bluegrass,trevobranco,trevovermelho,ealfafa)erecebeuumaltoamido"suplementofluncia",atqueforamdesmamadosaoscercade222diasdeidade.Comeandoem222diasdeidade,ambososgrupossejuntouaoconfinamentoereceberamumafasedeacabamentodietaricaemamidoatoabate.OsdadosdeconsumodealimentaoindividuaisforamrecolhidosduranteestafaseusandoaGrowSafe sistema(GrowSafeSystemsLtd,Alberta,Canad).Oganhomdiodirio(GMD)foicalculadousandoopesocorporaldecadaanimal,oqualfoiregistradopertodahoradebipsia.Individualconsumodematriasecapordia(DMI)eGMDforamutilizadosparaestimaraeficinciadeconversoalimentar(ganho/alimentaokg/kgTabelaadicionais1)duranteafasedeacabamento.

Mediesultrasnicasdeespessuradetoucinho,profundidadedemsculoegorduraintramuscular,usandoumultrasomAloka500Vcomtransdutorde3,5MHz(HitachiAloka),foramobtidasnoinciodafasedeacabamentoeemintervalosde44diasparadeterminaropontofinaldoperododeengorda(colheitaalvoespessuradetoucinhode1,2cm).No~140diasdeidadetodososnovilhosreceberam

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umadosede4pastilhascontendo100mgdeprogesteronae10benzoatodeestradiolmg(SynovexC,PfizerAnimalHealth).Nafasedeterminao(dia97apsodesmameprecoce),novilhosforamimplantadoscomumimplantedeborrachadesiliconecontendoumtotalde25,7mgdeestradiol+0,5mgdeoxitetraciclina(Compudose200,Elanco).

Procedimentodebipsiaecoletadesangue

OprocedimentodebipsiafoipreviamenteaprovadopelaUniversidadedeIllinoisAnimalCareInstitucionaleComitdeUsosoboprotocolon05.095efoidescritoemdetalheanteriormente. Resumidamente,asbipsiasforamcolhidassobanestesialocalnomomentodoEW(0dias),entocom25anos,50e96dias(tempoNW)dafasedecrescimentoenomeiodocaminhoatravsdafasedeterminao(167diasapsaEW)eumasemanaantesdoabate(222diasapsaEW).importantemencionarquenovilhosNWnecessriosmais20diasparaatingiraespessuradetoucinhode1,2cm.Identificaodosanimaisfoiobservadodemodoqueosmesmosanimaisforambiopsiadosacadapontodetempoparapermitirarecolhadeamostrasmedidasrepetidas.

UmtotaldecatorzenovilhosAeSAdentrodoEW(n=4A,3SA)eNW(n=3A,a4gruposSA)foramseleccionadosparabipsia.Aprimeirabipsiafoirecolhidoapartirdeumpontoentreanervura12e13noladodireitodoanimal.Bipsiassubseqentesforamcoletadascercade5cmdoqueaanteriorsemovendoemdireocabea.Maisde0,5gdetecidofoiobtidaapartirdecadabovinoemcadapontodetempoefoiarmazenadanolquidoN ataextracodeARN.

Osanguefoirecolhidoapartirdaveiajugularantesdabipsia(cercade0900h)paraisolarosorodeinsulina(kitdeELISAdeinsulinadebovino,CatNo.10120101,MercodiaAB,Uppsala,Sucia),deglucoseecidosgordosnoesterificadoscidos(NEFA)(DiagnsticosdeLaboratrio,EscoladeMedicinaVeterinriadaUniversidadedeIllinois),ehormniodocrescimento(GH),aleptina(LEP),einsulinlikegrowthfactor1(IGF1),atravsderadioimunoensaio. Animalstiveramlivreacessoparaalimentareconsumidosca.6refeiespordia,minimizandoassimopotencialparaefeitospsprandiaisemconcentraesdemetabolitosnosangue.

ExtracodeARNeanlisedeqPCR

Estesprocedimentosforamexactamentecomodescritoanteriormente. Resumidamente,amostradetecidomuscularfoipesado(~0,30,5g)eimediatamentehomogeneizadoscomoreagentedeTrizol(InvitrogenCorp.)eacrilamidalinear(Ambion Cat.No.9520)comocoprecipitanteparaprocedercomextraodeRNA.OADNgenmicofoiremovidodoARNcomDNaseusandocolunasRNeasyMiniKit(Qiagen,Alemanha).AconcentraodeARNfoimedidausandoumespectrofotmetroNanoDropND1000(NanoDropTechnologies).ApurezadoRNA(A260/A280)paratodasasamostrasfoide1,81acima.Almdisso,onmerodeintegridadedoRNA(NIR)foimedidausandoaplataformaBioanalyzer(AgilentTechnologies,Inc.,SantaClara,CA,EUA).OsdadosfinaisforamnormalizadosutilizandoamdiageomtricadeUXT,MTG1eRPS15A,queforamvalidadascomogenesdecontrolointernoadequadosemLMbovina.DuranteaanlisedosresultadosqPCR,determinousequeWnt10beMLXIPLtinhaumnvelmuitobaixodeexpressoAssim,concentrouseoADNc(diluio1:3)enovamenteanalisadasessesgenes,juntamentecomoscontrolosinternos.

Anliseestatstica

PCRquantitativodadosforamanalisadosusandooprocedimentoMIXEDdoSAS(SAS9.1Institute,Cary,NC,EUA).Antesdaanliseestatstica,osdadosnormalizadosqPCR(usandoamdia

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geomtricadeUXT,MTG1eRPS15A)foramtransformadasparadobrarmudanaemrelaoaodia0(isto,diadoEW).Paraestimaroserrospadronodia0eevitardesviosnaanliseestatstica,osdadosqPCRnormalizadosforamtransformadosparaseobterumsignificativoperfeitode1,0nodia0,deixandoadiferenaproporcionalentrearplicabiolgica.Amesmavariaoproporcionalfoicalculadaemtodososoutrospontosdetempoparaobterumadobramudanarelativamenteaodia0.Osefeitosfixosnomodeloestatsticoparacadavarivelanalisados(isto,genes,produo,carcaaedometabolitonosangue)incluiutratamento,raa,temponoexperimento,otratamentoraa,tratamentotemponoexperimentoeraatratamentotempoeminteraesexperinciaquandoforocaso(porexemplo,aexpressodomRNAaolongodotempo).Dadosdeexpressognicaanliseincluaumadeclaraodemedidasrepetidascomumaestruturadecovarivelautoregressivo.Desempenhoanimal,parmetrosdequalidadedecarcaa,metabolitosdesangueeultrasomdadostambmforamanalisadosusandooprocedimentoMIXEDdoSAS,eotratamentofoioefeitofixonomodeloestatstico.Oefeitoaleatrioemtodososmodelosfoiorientardentrodetratamento.

Omodeloestatsticoutilizadofoi:Y =+C +T +B +S +(CT) +(TB) +(CB) +(TCB) + onde,Y amudanavezesoudadossanguevalornormalizadoajustadoaofundoamdiageralC oefeitofixodetempo(6nveis)T oefeitofixodetratamento(2nveis)B oefeitofixoderaa(2nveis)S oefeitoaleatriodetouroaninhadodentrodetratamentoCT,TB,CBsoasinteraesdetempodetratamento,otratamentoporraaetempo,raa,respectivamenteTCBainteraoouterceiraordemparaosprincipaisefeitose oerroaleatrio(0, )associadoaY .Umtestedetaxadeprobabilidadefoiutilizadoparaexaminarseosefeitosprincipaisforamnosignificativa,esepudessemterumimpactosobreologaritmodeconvergnciadomodelooriginal.Raaefeitonoteveimpactosignificativosobreologaritmodeconvergnciadomodelo,assim,raapermaneceunomodelo.Almdisso,carcaadadoscategricos(YGeQG)foramanalisadosusandooprocedimentoGENMODdoSAS.AsdiferenasestatsticasparadesempenhoedecarcaadedadosdeanimaisforamdeclaradosnaP0,10,devidoaosescassosgrausdeliberdadequesaramdosubconjuntodenovilhosdaqualmsculoesquelticofoiutilizadoparaanlisedaexpressognica. Paraaexpressodogene,osdadosdeultrasomemetablitossanguneosanlise,diferenasestatisticamentesignificativasforamdeclaradosemP0,05.Porfim,aanlisedecorrelaodePearsonparcialentregeneseentreosgeneseosdadosdeultrasom,ajustadopelosefeitosfixos,foirealizadautilizandooprocedimentoPROCCORRdoSAS(Tabelasadicionais6,7e8).

Resultadosediscusso

Odesempenhoanimal

PorquenoeravivelparamedirDMIdeanimaisnopasto,osdadosparatodososgrupossestodisponveisapartirde96diasapsodesmameprecoceatoabate.NohouvetratamentosignificativointeracoraaparaDMIemqualquerumdostratamentos(Tabela1adicional).Noentanto,emcomparaocomnovilhosCFS,osnovilhosEWSconsumidomaisalimentosnasduasprimeirassemanasapsodesmamenormal(Fig.1adicional).Aeficinciaalimentar(FE)nafasedeterminaonofoiafetadapelaalimentaoconcentradadealtaenergiaprdesmameduranteoperododeamamentao,quesemelhanteaosresultadosdeumestudoanterior. Almdisso,houvediferenassignificativasnaADGemrespostaaostratamentosentrenascimentoediaEW(Tabelaadicionais1).

MenossignificaquadradosparaosdadosdeultrasomsorelatadosnaFigura2.pontuaoUltrasound

ijklm i j k l ij jk

ik ijk ijklm ijklm

i j

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ijklm e2

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marmoreio(Fig.2)emarmoreiocarcaa(Tabela1)sorepresentadosutilizandoaescalaUSDAquepassaportraos(200299),ligeiro(300399),pequeno(400499),modesto(500599),moderada(600699),umpoucoabundante(700799)amoderadamenteabundante(800899).Oultrasommarmoreio(umamedidadadeposiodegorduraintramuscular)tinhaumaraasignificativainteracotratamentoxtempo(P=0,01)eumefeitodetempo(P

oplanodenutrioefeitoclaramentesublinhadapelofactodequeosnovilhosDPtiverammaiorestaxasdeingestoduranteasprimeirascincosemanasdefasedeterminao(Figadicionais.1),oquesecorrelacionoucomumamaiorregulaopositivadoprogramaatravsadipogica167dias.Duranteomesmoperododetempo,maioringestodenutrientesemnovilhosCFSfoiincapazdecompensarestafaltaemumaidadeadiantada,assim,apenasalgunsdosgenesadipogicasrespondeu,apesardeestesanimaisquecomemnamesmataxacomonovilhosEWS.Paraapoiarestasassociaes,importanteressaltarqueotempomdionecessrioparacolherosnovilhosfoibastantesemelhanteentreostratamentos,ouseja,3718e3638diasparaEWeNWdirige.

Concentraobiomarcadorsangue

Ahormonadocrescimento(GH)efactordecrescimentosemelhanteinsulina1(IGF1)tinhaumaraasignificativainteracotratamentoxtempo.ConcentraodeGHduranteafasedeterminaofoimaiorparaEWScomparaocomnovilhosCFS.Emcontraste,aconcentraodeIGF1foimaiorparaosboisCFScomparaocomnovilhosEWS.IGF1aconcentraodesoroindicativodoestadonutricionalemetablicoe,consequentemente,aumentaemrespostaaumincrementonaingestodenutrientes. Almdisso,embovinosdeumaconcentraoelevadadeIGF1nodesmametemsidoassociadacomtaxasdecrescimentoaumentadas,aovivodefinitivapeso,eganhoparaalimentarproporo.

OsnovilhosCFSpareciaterumavantagememtermosdetaxadecrescimento,provavelmentedevidomaiorconcentraodeIGF1.Emcontraste,aolongodoestudonovilhosEWSAtinhammaioresconcentraesdeGH,masaconcentraoestveldeIGF1.AconcentraodeGHdiminuimedidaqueosanimaismaduros,reduzindo,assim,osestmulosparaaproduodeIGF1duranteesteltimoperododetemponoconfinamento. bemsabidoquearespostadeIGF1deGHdiminuiquandoosnveisdeinsulinaoudeestadosonutrientesbaixo, masosresultadosdesteestudonoconcordocomessasconcluses.Concentraosricadeleptinatinhamumaumentoperceptvelduranteocrescimentoeafasedeacabamento,massemraasignificativainteracotratamentoxtempo(Fig.3).Essarespostaconcordacomoaumentogradualdadeposiodegorduracomoasidadesdosanimais,ouseja,maisadipcitoscapazesdeproduziresecretaraleptinaouadipcitosquecrescememtamanho.

Figura3Concentraonosorosanguneodeinsulina,ainsulinalikegrowthfactor1(IGF1)ehormonadecrescimento(GH),oscidosgordosnoesterificados(NEFA),glucoseeleptinanodesmameprecoce(EWS)enormaldesmamados(CFS)Angus(EWSA,SFCA)eAngusSimental...

Expressodeactivadoresadipogicas

DetalhesdedesempenhoqPCRparatodososalvos,sequnciasdeprimermedidos,eosresultadosiniciadordesequenciaopodeserencontradaemoutrastabelas25.ResultadosdeactivadoresadipogicasindicouqueZFP423eraonicogenequenotemumaraasignificativainteracotratamentoxtempo(Fig.4).Dentrodestegrupo,PPARG,CEBPA,BMP2,eHEY1teveomaisalto

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nvelderegulaopositivacomumaumentoacentuadode0at167diasapsaEW.Almdisso,arespostafoimaiorparaosnovilhosEWScomparaocomnovilhosCFS.CEBPBeCEBPDexpressotinhaumpadrooposto,sendomaioremnovilhosCFS.Almdisso,houvecorrelaesmaissignificativasem167dparanovilhosCFSentreprofundidademusculareativadoresadipogicas(PPARG,CEBPA,CEBPDeBMP2).Almdisso,houvecorrelaesmaissignificativasem167dparaEWSnovilhosentreespessuradetoucinhoeativadoresadipogicas(ZFP423,BMP2eSmad1).AcorrelaoentremarmoreioeSmad1em222dfoipositivoparaosboisEWSeentremarmoreioeBMP2em167dfoitambmpositivoparaosboisCFS.

Figura4OspadresdeexpressodemRNA(foldchange)deativadoresadipogicasemLongissimustecidodedesmameprecoce(EWS)enormaldesmamados(CFS)Angus(EWSA,CFSA)eAngusSimmental(EWSSA,CFSSA)novilhos.Todososanimaisforamalimentadoscomumadietacomumde...

Aalimentaoprecocedeamidonadieta,juntamentecomodesmameprecoceinduzidaumaclaramudanaentreEWSenovilhosCFSnaexpressodemRNAdeativadoresadipogicas.UmgrandenmerodeestudosemmonogstricosdemonstraramquePPARG eCEBPA soosprincipaisindutoresdoprocessodediferenciaodeadipocitosempradipcitos.Estesdoisgenes,emconjuntocomaprotenamorfogenticassea2(BMP2),teveamaiordiferenanaexpressoentreEWSAeEWSSAnovilhosnoinciodafasedecrescimentoenofinaldafasedeacabamento.BMP2regulaopositivafoimaiselevadaemEWScomparaocomnovilhosCFS,comumnotvelaumentoduranteafasedeacabamento,oquesugerequeestaprotenanoparticipanaprogramaoantecipadadeadipogenesisenoessencialparasustentaresseprocessoduranteafasedeacabamento.AdiminuiodaBMP2expressopertodeabateeraesperadodevidoaofatodequeabaixaBMP2expressopromoveadipogenesis,enquantoaaltaBMP2expressopromoveaosteognese. Emcontraste,estaprotenapodeservirpararenovaresteprocessoemnovilhosCFSduranteafasedeacabamento,oquerepresentaumespciedemecanismocompensatrioemrespostaaoconsumodeenergiasuperioraalimentaoantesdoabate.

EstudosiniciaissugeriramqueBMP2induzidadiferenciaodosadipcitosdeformaindependenteSmad1atravsdainduodePPARG. Noentanto,agoraclaroqueBMPsativarPPARGduranteadipogenesisatravsdainteraodeZFP423eSmad1. SMADmembrodafamlia1(Smad1)umtransdutordesinalquereforaaassociaoentreoreguladordetranscriocomoADN,fornecendocapacidadedeactivaodatranscrio. protenadededodezinco423(ZFP423)aprotenadeligaodeADNqueseassociacomSmad1. EstaprotenaumalvoajusantedesinalizaodeBMPeumzincodedoreguladordetranscrio,actualmentereconhecidocomoumdeterminanteessencialfuncionaldecompromissodepradipcitos. OdomniodeligaodeSMADZFP423absolutamentenecessrioparaZFP423paraprovocarumpapelduranteafasedediferenciaodeadipocitoscomprometidainduzidaporBMPs. OsnossosdadosparaZFP423feznoatingiusignificnciaestatstica,masimportantenotarqueestefactordetranscrioseguiuomesmopadrode

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expressodePPARgeCEBPA.Almdisso,entretodosostratamentos,asalteraesnaSmad1expressoforamestatisticamentesignificativas,masrelativamentepequena,oquesugerequepodetersidohumedecidoporumcorepressor(porexemplo,SMAD6), ,portanto,diminuindooefeitodeSmad1comoumsinaladipognica.

DuranteadiferenciaodosadipcitosainduoprecocedeCEBPBeCEBPDlevaaumaregulaopositivadeCEBPA. ArespostanutrioeidadededesmameparaCEBPBeCEBPDeraexatamenteoopostodeoutrosactivadoresdetranscrioadipogicas.NofoimarcadaregulaopositivatemporalemnovilhosCFScomparaocomEWS.Emvirtudededependerdeforragemcomofontealimentar,osanimaistinhamumaprobabilidademaiorproporodeetilodisponvelnosanguecomoumafontedenutrientes,oquesugerequeCEBPBeCEBPDemruminantesemcrescimentopodemseractivadospormeiodeacetilao.Trabalhosanterioresfornecidaalgumaevidnciadequeaacetilaopodecontribuirparaaadipognese. Apartirdestesresultados,verificasequeotipoequantidadedenutrientesfornecidosnavidapsnatalprecoce,juntamentecomoperfilhormonaldireita,sonecessriasparaneutralizaroefeitonegativopermanentementedeCEBPB,CEBPD,eBMP2.Estesresultadoscombinadosnoslevamaproporque1)podehaverumtipoespecficodefentipopradipitoformadoemrespostaexposioprecoceaumadietaricaemamido2)podehaverumfentipodosadipcitosmenossensvelaumadietaricaemamidoduranteafasedeterminaoou3)nopoderiahaverumefeitoepigentico(porexemplo,metilao,acetilao)influenciarosresultados.

AexpressodeHEY1seguiuumpadrosemelhanteemtodosostratamentoscomumpiconaexpresso(~1,5vezes)ameiodafasedeacabamento.Cabeludo/intensificadordedivididarelacionadacomYRPWummotivo(HEY1)umaprotenadehlicelaohlicedebaseeummembrodafamliadeprotenasrelacionadascomorepressordeHESquepertenceviadesinalizaoNotch.Emorganismosmodelo,HEY1temumpapelproadipogicaatravsdainibiodaFOXC2quenoaindabemcompreendido. AvariaomodestanaexpressoemHEY1emrelaoaoutrosreguladoresdetranscrioparecesugerirqueestaprotenapodeterumpapelsecundrio,sehouver,naadipognese.

AdinmicadoPPARGeCEBPAresposta,juntamentecomosdeSREBF1easenzimaslipognicasestudado,fornecemevidnciasdeumarespostapradipognicacoordenadaemanimaisEWS,provavelmentecomoresultadodoreforodofornecimentodenutrientesdoelevadoteordeamidodiettico.Emoutraspalavras,novilhosCFStinhaumatrasonacapacidadedasclulasadiposasaganharofentipoadipognica.

Tomadosemconjunto,estasrespostassublinhamclaramentequeoefeitoambientaldanutriosobreadeposiodemarmoreio,querdevidoingestodemaisoumaisdaingestodeumnutrienteespecfico,substituiacapacidadegenticadoanimalaacumulargorduraintramuscular.IstoapoiadopelofactodequeogadoAngussoconhecidosparadepositarmaisgorduraintramusculardeAngusnovilhosSimentalnomesmoplanodenutrio.

Expressoderepressoresadipogicas

Nocasodosrepressoresadipogicas(Fig.5),houveumasignificativaraainteracotratamentoxtempoparaNCOR1,NCOR2,Wnt10b,FOXC2,eNR2F2.ExpressodeNCOR1nosealterouduranteafasedecrescimento,masaumentouacentuadamenteentre96e222dias,oqueconstituiuarespostamaisrobustaentretodososrepressoresadipogicasestudados.EstefoiespecialmenteocasonoEWSSAnovilhos.

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Figura5OspadresdeexpressodemRNA(foldchange)derepressoresadipogicasemLongissimustecidodedesmameprecoce(EWS)enormaldesmamados(CFS)Angus(EWSA,CFSA)eAngusSimmental(EWSSA,CFSSA)novilhos.Todososanimaisforamalimentadoscomumadietacomumde...

OscorepressoresdoreceptornuclearNCOR1eNCOR2codificamprotenasquemedeiamindependentedoligandorepressodatranscriodehormonatiroideiaereceptoresdecidoretinicoporhistonadesacetilaoqueconduzacondensaodacromatina. Naausnciadeligaodoligando,PPARGformaumcomplexodeprotenacomosseuscorepressoresqueconduzaumareduodaactivaodatranscriodegenesalvo. OaumentomarcadodaNCOR1expressoduranteafasedeacabamentopodeexplicar,emparte,odecrscimonaexpressodetodososactivadorestranscricionaispradipogicasentre167e222dias,quefoimaisevidenteemEWSnovilhosalimentadosdealtaamido.EmboraopapelNCOR2emfunodosadipcitosclaro,umestudorecentesugeriuquepodediminuirasensibilidadeinsulinaemadipcitosetambmdiminuirLEPexpresso,emqueomodolimitandoacapacidadedemassagordaparaexpandircomoaumentodaingestocalrica.

AligaoentreNCOR2eLEPemnossoestudoclaro,excetoparaosboisEWSA,quetinhaumaexpressorelativamenteconstantedeNCOR2masclaramentetiveramumadiminuionaLEPexpressopor222dias.Esteresultadopoderiasignificarqueoprogramapradipognicabastantesensvelduranteestaidadeprecoce,masaltamentedependentedeumnutrienteadequadoeambientehormonal.Portanto,arespostadiferenteingestodealimentosentreostratamentosduranteasduasprimeirassemanasdafasedecrescimentotambmnotvelemtermosdecorepressores,porqueasuaexpressodemRNAnoparecemsersensveisaoplanodenutrio.OpadrosemelhantedeexpressodeNCOR1eNCOR2pareceargumentarcontraaexistnciadediferentesfentiposdeadipcitos.

Estescorepressorespoderiasersensoresindependentesemnutrientessemelhantesqueestoprogramadosgeneticamenteparacontrolare/ouencerraradipogenesis.Naverdade,afigurasebaseadoemCEBPBeCEBPDexpressoqueafaltadenutrientes(ouseja,carboidratosnoestruturais)emumaidadeprecocepoderia"desregulamentar"oprocessoecausarumasobreregulaorobustaperceptvelapartirde96diasat167diasapsaEWemApesardenovilhosCFSalcanarumamaiorDMIduranteaprimeirametadedafasedeterminao. Consequentemente,arespostaadipognicanessesnovilhosinduzidasduranteafasedecrescimentoparecetersidoumedecidoemumaformadiscretaapsNW,primeiroatravsderegulaopositivadeNCOR2duranteoparteinicialdafasedeacabamentoe,emseguida,atravsderegulaopositivadeNCOR1duranteasegundametadedafasedeterminao.SeoadipocinasLEPouADIPOQ(Fig.6)contribuiuparaquearespostaumestudomaisaprofundadoclaroemritos.

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Figura6PadresdeexpressodemRNA(mudanafold)deadipocinasemLongissimustecidodedesmameprecoce(EWS)enormaldesmamados(CFS)Angus(EWSA,CFSA)eAngusSimental(EWSSA,CFSSA)novilhos.Todososanimaisforamalimentadoscomumadietacomum96222...

Emorganismosmodelo,fatorovalbuminadegalinhamontantetranscriopromotorII(COUPTFII),tambmchamadodereceptornucleardasubfamlia2,grupoF,membro2(NR2F2),expressanosestgiosiniciaisdedesenvolvimentodosadipcitosbranco. NR2F2regulapositivamenteaadipogenesisumafasedeexpansoinicial,promovendoaformaodepequenosadipcitosConsiderandoque,aexpressopersistentedoNR2F2duranteadiferenciaopodeserinibitriaparaoaumentodamassadotecidoadiposo. Semelhanteaoestudoanterior, arespostatemporaldeexpressodeNR2F2eramodesta.Noentanto,oaumentode1vezdeNR2F2expressoemNWSAnovilhosentre50e96diasapsosnovilhosDPeEWSAem167diasapsEW(Fig.5)poderiaserumsinaldemaioresquantidadespequenasdepradipcitos.

SinalizaoWntatravsdecateninaeTCFmantmpradipcitosemumestgionodiferenciada. sinalizaodeWnt/cateninaativaaexpressodeNR2F2,querecrutaoNCOR2complexocorepressorparaPPARG.AformaodeumNR2F2/NCOR2complexomantmacromatinaemestadohypoacetylated,queinibePPARGexpressoebloqueiaaadipognese. AmaiorexpressodeWNT10BeactivadoresadipognicosemEWSSAnovilhossugeriuqueWnt10bpodenoteracapacidadedehumedecidoadipcitosparadiferenciar.

FactordeTranscrioforkhead2(FOXC2)bloqueiaaadipogneseporaumentarasensibilidadedoadrenrgicocAMPdeprotenaquinaseA(PKA)quesinalizaocaminho eatravsdainibiodacapacidadedePPARgparapromoveraexpressodegenesreconhecidoscomomarcadoresdeadipcitosmaduros(CEBPA,ADIPOQ,eFABP4). Emnossoestudo,FOXC2,comoNCOR2eNR2F2,noexperimentoumudanasmarcantesnaexpresso.Noentanto,noparecetersidopadresinteressantesnarespostadestegene.Porexemplo,houveumaumentogradualnaexpressoat96diasapsEWemtodosostratamentos,seguidoporumadiminuiode222diasapsEWemexpressosemdiferenasentreostratamentos.PodeserpossvelqueonveldeexpressodeFOXC2emCFSSAnovilhosfoisuficienteparagerarumefeitoinibidorsobreosPPARgalvosestudados.

Expressodeadipocitoquinas

Entretodasasadipocinasanalisados(LEP,LEPR,ADIPOQeAdipoR2),LEPReraanicasemumaraatratamentointeraotempo(Fig.6).Destesgenes,arespostaemLEPexpressoemnovilhosDPfoiamaisacentuada.Expressoaumentadaat167diasapsEWseguidoporumadiminuiode222dias.

Aadministraodeumadietaricaemenergiapromoveaangiogneseporqueoaumentodamassadegordurageradoporestetipodedietaconduzaumaumentoemredescapilares. Estasredesde

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abastecimentocapilaresnutrientesparaasclulasdegordura,permitindoqueosadipcitosparasecretaractivamenteadipocitoquinas(porexemplo,leptina)aumataxafortementerelacionadocomaadiposidade. Enquantoadipcitosaumentoemtamanhoemassa,asconcentraesdeleptina(LEP)nosanguetambmaumentam. Almdisso,existeumacorrelaopositivaentreodimetrodosadipcitoseLEPnveisdemRNAemnovilhosmestios.

Umestudoanteriorrelatouumefeitosignificativodaraaelocalizaoanatmicadepsitodegordura, commaiorLEPexpressodemRNAnagorduraintramusculardeAngusemconfinamentodoqueemgordurasubcutnea.OopostofoiobservadoemLimousindirige. Emnossoestudo,onveldeexpressodepicoparaLEPera250vezesemnovilhosEWSAe170vezesnaEWSSAorientaem167diasapsaEW.Subsequentemente,LEPdiminuiudramaticamente.ApesardarespostarobustaobservadaparaLEP,mudanasnaexpressodeLEPRemnovilhosEWSforambastantemodesta,eocorreuprincipalmenteduranteafasedecrescimento.EstefoioopostoemnovilhosCFS,quetiverammaiorexpressoduranteosestgiosiniciaisdafasedecrescimento,comumaregulaopositivamenordeLEP.Podeserpossvelqueessasdiferenasestorelacionadasfuncionalmenteasensibilidadeleptinaemadipcitos.

Aadiponectina(ADIPOQ)umaprotenaantiinflamatriaesensibilizadoresdainsulinasegregadaapartirdetecidoadiposo.ADIPOQpromoveadiferenciaodeadipcitoseaumentaaacumulaodelpidosnosadipcitosmaduros. ApsaacodeADIPOQ,adipogneseacelerada,assegurandoumaexpressoacentuadaeprolongadadoPPARgeCEBPA. Emadipcitostotalmentediferenciadas, estarespostaaumentaataxadeacmulodegotculasdegorduracitoplasmtica,aumentandoaeficinciadesntesedetriglicerdeos,etambmotransportedeglicoseinsulinaresponsiveatravsdeaumentosdetransportador4(glicoseSLC2A4)expresso(verFig.2adicional).

EmcontrastecomaLEP,adipcitosmenoressecretammaisADIPOQ,resultandonumamaiordiferenciaodeadipcitoseacumulaodelpidos. Coincidindocomosresultadosanteriores, EWeelevadoteordeamidodietticoresultounamaiorrespostaemADIPOQexpresso.IstoimportanteporqueADIPOQdeveseractivadoantesdeLEPparainduziroprogramaadipognica. OAdipoR2resposta,noentanto,podetersidoligadocomamarcadaADIPOQexpressoporqueADIPOQsobreexpressoemadipcitosfoirelatadoparadiminuiraacumulaodelpidos.

TodosostratamentosconduziuaumaumentononveldeexpressodeAdipoR2entre96e167diasapsEW.Issofoiseguidoporumaacentuadadiminuionaexpressoduranteasegundametadedafasedeacabamento,especialmenteparaosboisCFSA(Fig.6).OsnovilhosEWSpareceutermelhoradoacapacidadedotecidoadiposopararesponderaosADIPOQparticularmenteduranteaprimeirametadedafasedeacabamentoemqueopiconaexpressodeAdipoR2foiobservada.PodeserpossvelquearespostacombinadadeADIPOQedoseureceptoremanimaisEWSbloqueadospartedoefeitonegativosobreregulaodecorepressor(porexemplo,NCOR2).

Expressodosreguladoreslipognicas

ComaexcepodeSREBF1,todososgenesclassificadoscomoreguladoresdetranscriolipognicas(Fig.7)tinhaumaraatratamentotempodeinteraco.SREBF1foiafectadapelaidadededesmame.EmEWSorientaTHRSPem167dias,MLXIPLem96diaseINSIG1em167diastiveramasmaioresvariaesvezesnaexpressoemrelaoa0dias.FOXO1foionicoreguladorlipogenicquetevemaiorexpressoemnovilhosCFSeem167diasapsaEW.

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Figura7OspadresdeexpressodemRNA(foldchange)dosreguladoreslipognicasemLongissimustecidodedesmameprecoce(EWS)enormaldesmamados(CFS)Angus(EWSA,CFSA)eAngusSimmental(EWSSA,CFSSA)novilhos.Todososanimaisforamalimentadoscomumadietacomumde...

Hormniodatireideresponsivo(THRSP)teveamaiormudananaexpressoemcomparaocomoutrosreguladoreslipognicas.NossosresultadosparaTHRSPsobastantesemelhantesaosobtidosemumestudoanterior. Almdisso,umestudorecenteconfirmouumaassociaodecomposiodecidosgraxosdebovinoscomumpolimorfismodenucleotdeoemTHRSP. THRSPfoialtamentecorrelacionadocomocontedomarmoreioemraasamplamenteconhecidospossuirextremamentealtacapacidadedemarmoreiocomoojaponspretoouWagyu. TodasestasrespostasapoiaraexistnciadeumimportantepapeldeTHRSPemtermosderegulaolipogenicbovina.

EmroedoreshevidnciasbemestabelecidoqueSREBF1fundamentalparaocontroledalipogneseheptica. protenaCarboidratoselementoderespostadeligao(ChREBP)ouMaxXcomointeragindoprotenalike(MLXIPL),umfatordetranscrioglucoseresponsivoqueafectadaporacetilao(isto,seaglicoseestpresente,nohnenhumaacetilaodashistonas).Aacetilaodehistonaslevaadescondensaodacromatinalocaleexpressodogene.MLXIPLdesempenhaumpapelcrticonalipognesehepticaemrespostadietaricaemhidratosdecarbono,aconversodeglicoseemexcessoparalpidodearmazenamentodemediaraactivaodevriasenzimasreguladorasdeglicliseelipogneseincluindopiruvatoquinase,acetiloCOAcarboxylase,ecidograxosintase. Nossosresultadosconcordamcomumestudoanterior, ,ondeMLXIPLexpressofoimaiornoEWSAngusnovilhosconsumindoumadietaricaemamido.Almdisso,emnossoestudo,em96diasMLXIPLtinhamumnvel100vezesmaiordeexpressonoEWSSAnovilhos,emcomparaocomnovilhosEWSA.IstopodeserumadasrazespelaqualamaioriadosgenesanalisadosnesteestudoforamactivadasanteriormenteemEWSSAnovilhos,emcomparaocomnovilhosEWSA.

UmestudorecenteforneceuprovasdequeINSIG1podebloquearaactivaoproteolticadeSREBPs,reduzindo,portanto,aactivaodeumagrandevariedadedegeneselevandosntesedecidoseformaodetriacilglicerol.palmticoeoleico Onossoestudo,noentanto,apoiaosresultadosanterioresdemonstramque,emnovilhosEWSAcomaltamarmoreiopontuaoINSIG1expressofoimaioremcomparaocomnovilhosmestios.

ProtenacaixaForkheadO1(FOXO1)podetertantoumpositivoeumefeitonegativosobreaadipognese.FosforilaoinduzidaporinsulinainactivaFOXO1eprendelonocitoplasma, impedindo,assim,aligaoaDNAereduzindoosFOXO1PPARginteraces. Durantearesistnciainsulina,noreduzidafosforilaoeaumentodaacumulaonucleardeFOXO1,queacopladoamenorexpressodePPARGgenesalvo.Emclulasprogenitorasdeadipcitos,asupressodeFOXO1actividadepelainsulinaimpedeaactivaoatocrescimentodiminuiudociclocelularassociadadetenofactordep21. Nestafasedaadipognese,FOXO1activadoporumderivadodeglicoseligadaemONacetilglicosamina(O

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Absorodesubstrato

GlcNAc), ecooperacomPPARGparadesencadearumaparagemdocrescimentopsmittico,quenecessrioparaadiferenciaoterminal.NossosresultadosmostraramumaativaosignificativadeFOXO1emnovilhosCFSAem167diasapsaEW.EstesresultadospoderiamsertomadacomoevidnciadeumefeitodeglucosesobreFOXO1emnovilhosCFSA,ouaumafaltadeinsulinaconduzaumainibiodeFOXO1aexpressodogene.Aanlisedecorrelaoa222diasapsaEWrevelouumafortecorrelaonegativaentreFOXO1eprofundidadedomsculoparanovilhosEWS.

AinteracoprotenaMiD11(MID1IP1)ligaseeformaumheterodmerocomTHRSP. NaausnciadeTHRSP,MID1IP1formaumhomodmero,umprocessorequeridoparaocidogordoeeficientedebiossntesedelpidos, incluindotriacilglicerol,diacilglicerolefosfolpido. Estegenetinhaonvelmaisbaixodeexpresso,masumpadrosemelhanteemcomparaocomoutrosreguladoreslipognicasanalisadasnesteestudo.Aanliserevelouumacorrelaopositivaem167diasapsEWentreMIDumIP1eespessuradetoucinhoparanovilhosEWS,umacorrelaonegativaem222diasapsEWcommarmoreioparaEWSbois,eumacorrelaopositivaem167diasapsEWcomprofundidadedemsculoparanovilhosdoCFS.

Aexpressodeenzimaslipognicas

OtransportadorsensvelinsulinaSLC2A4eraonicogeneentreosrelacionadoscomalipliseelipognesequenotemumaraainteracotratamentoxtempo(Figura2adicionais).Almdisso,todosestesgenestinhaumpadrosemelhantederegulaopositiva(sempremaiorparaosboisEWScomparaocomnovilhosSFC)entre0e167diasapsEWseguidoporumadiminuiode222dias.Entretodososgeneslipognicas,SCDeFASNteveamaiormudanavezes,por167dias.LPLeCD36tinhaomenorgraudealteraonaexpressodentrodestegrupodegenes(Fig.8),massempremaiornosorientaEWS.

Figura8OspadresdeexpressodemRNA(foldchange)deenzimaslipognicasemLongissimustecidodedesmameprecoce(EWS)enormaldesmamados(CFS)Angus(EWSA,CFSA)eAngusSimmental(EWSSA,CFSSA)novilhos.Todososanimaisforamalimentadoscomumadietacomumde96...

Emgadodecortedegorduraintramuscular,lactatoosubstratopreferidoparaasntesedeglicerol,glucoseeparaasntesedecidosgordos. Paraotecidoadipososubcutneo,etiloaprincipalfontedesntesedecidosgordos. LactatorequerasenzimasdeliasedeATPcitrato(ACLY)eNADPmalatodesidrogenase,afimdeserconvertidoemcidosgordos. AactividadedeACLYnotecidoadiposodebovino,emboramenordoqueemtecidosderato,aindasuficienteparapermitiraconversodelactatodecidosgordos.OsnossosresultadosmostraramqueACLYtinhamaiorregulaopositivaemEWSSAnovilhos,mastambmumamaiorquedanonveldeexpressode167222diasapsEW.Emcontraste,aanlisedecorrelaoem167diasapsEWrevelouumacorrelaopositivaparaACLYcommarmoreioeprofundidademuscularemnovilhosCFS.

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Asntesedenovo

cidograxosintase(FASN)catalisaasntesedepalmitatodeacetilCoAemalonilCoA. Emnossoestudo,FASNteveumaclaradiferenadeexpressoentreCFSeEWSnovilhos,commaioresnveisdeexpressoemEWSnovilhos(Fig.7).Protenadeligaodecidogordo4(FABP4)proporcionacidosgordosdecadeialonga(AGCL)ecidoretinicoparaosseusreceptorescognatosnoncleodeadipcitos. FABP4seguiramumpadrosimilardeexpressocomoFASN,comumarespostamaiscedoemaisforteemEWSSAemcomparaocomEWSA(Fig.8).Assim,oFABP4resposta,especialmenteparaEWSSAorientaentre50e96diasapsaEW,ressaltouaimportnciadeAGCL,eicosanidesecaptaodecidoretinico(oureciclagemAGCLdurantealiplisebasal)parasustentarumprocessolipogenicrobusto. Almdisso,oaumentodaFABP4expressoestassociadaaoaumentomarmoreioembovinoseaumentodocontedodeTAG.

Dessaturao

EstearoilCoAdessaturase(SCDou9dessaturase)converteumaporodecidoesterico(18:0)emcidooleico.(18:1) VriosestudostmindicadoqueemvezdeumadietadeacabamentocornbasedaumentaomsculoetecidoadiposoSCDexpressodogene. Issoserefletiutambmemnossoestudo,comdiferenasimpressionantesemSCDexpressoemEWS,emcomparaocomnovilhosCFS.Almdisso,emumestudoanterior,ondeSCDexpressofoimedidaemAnguseWagyubois,novilhosAngusmilhofedtevemaiorSCDexpressoemcomparaocomnovilhosWagyu. NossosresultadossosemelhantesemquehouveummenorgraudemudananaSCDexpressoemSAnovilhos,queumaraacomumatendnciaatermarmoreadoinferior,emcomparaocomumaraacomoAngus.

Alongamento

Noretculoendoplasmticodoadipcito,elongasedecadeialongadecidosgordosdafamlia6(ELOVL6)catalisaoalongamentodecidosgordossaturadosemonoinsaturadocom12,14e16carbonos.ELOVL6expressoemtecidoslipognicas,eemmonogstricosreguladoporesteriselementoreguladordeligaodofactor1(SREBF1). Emtodasascomparaesdetempoemnossoestudo,ELOVL6teveumamaiorregulaopositivaemEWSnovilhos,masem96diasapsaEWaexpressoemEWSSAnovilhosfoi20vezesmaioremcomparaonovilhoscomEWSA.Esteresultadosemelhanteaumestudoonderaasdeporcomagraedegorduraforamcomparados. Osresultadossublinhamopapeldestaenzimanoalongamentode16:0susceptveisdefornecer18:0paraareacodeSCDqueprecedeasltimasfasesdasntesedeTAG.

Glyceroneogenesis

Fosfoenolpiruvatocarboxicinase(PCK1)umaenzimacitoslicaque,juntamentecomGTP,catalisaaformaodefosfoenolpiruvatoapartirdeoxaloacetato. Emmonogstricos,pCK1expressoreguladapelainsulina,glucagonedieta,eresponsvelpelasntesedegliceroldecido3fosfatoereesterificaodecidosgraxoslivres(FFA)paragerarTAG. Curiosamente,nossosresultadosrevelaramumaexpressosingularparaEWSdirige.EmnovilhosEWSA,pCK1foireguladaparaumtempomaislongodoqueEWSSAnovilhos,queteveumpicodeexpressos96diasapsEW,seguidoporumadiminuioacentuadaataofinaldoestudo.EstesresultadossugeremqueemnovilhosEWSAcomparaocomEWSSA,ofluxodeglicoseatravsglyceroneogenesispoderiatersidomaior.Almdisso,pCK1noparecemresponderaEWataltimaporodafasedecrescimentoisto

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Vpara:

sugerequeoprogramadepradipogicacomeamaiscedoeoprogramadematuraodepois,quandoexisteumanecessidadedegerarmuitodeglicerol3fosfatoparaaestrilicao(ereesterificao)deAGCLesubsequenteformaodegotculasdegordura.

Esterificao

Aexpressodalipoprotenalipase(LPL),quecodificaumaenzimasolvelemguaquehidrolisatriglicridosemdoiscidosgordoslivreseumamolculamonoacilglicerol,atingiuopicodeexpressoemEWSSAorientaa96diase167diasemnovilhosEWSA(Fig.8).Comopradipcitoscomeardiferenciaremadipcitosmaduros,LPLumdosprimeirosgenesexpressosdevidoaoseupapelnofornecimentoAGCLparaaesterificaointracelular. dietasdealtahidratosdecarbonoaumentaaLPLexpressoemambosostecidosadipososenomsculoesqueltico. ComoaumentodaLPLgenetranscrio, ainsulinatemumefeitoimportantesobreLPLatividadeduranteadiferenciaodosadipcitos.

Umaoutraenzimaqueessencialparaaformaodegotculasdegorduradiacilglicerolaciltransferase2(DGAT2),quecatalisaopassofinaldasntesedetriacilglicerol. EmumestudoanteriorutilizandoHerefordAngusconfinados,DGAT2actividadefoisuperiornotecidoadipososubcutneoemcomparaocomFMIoumusculartecido. AdiferenadeDGAT2expressoentreostratamentospodemserassociadoscomasdiferenasnadistribuioposicionaidoscidosgordosnamolculadetriacilglicerol.

MesmoquensnomediracomposiodecidosgraxosetamanhodosadipcitosnoLM,osresultadoscombinadosparaasenzimaslipognicasnoslevamaconcluirqueacomposiodegorduraintramuscularpodevariardentroderaas,tratamentoseidade,deacordocomestudosanteriores. Nesteestudo,houveumtempojanelaentre50e96diasapsaEW,ondeaexpressodogenedadosrevelammaiorcaptaodefontesdelipognicasparapromoveradeposiodegorduraintramuscular,especialmenteparaEWSSAnovilhos.

Concluses

AnlisederedetranscriodeLMduranteEWeNWrevelouqueaativaoprecoceesustentadadaPPARGeseusgenesalvoumfatorqueconduzaumamaiordeposiodegorduraintramusculare,consequentemente,maiscarcaasdeclassificaosuperiorouiguala"HighChoice".AcombinaodeamidodietticoEWealtalevaaumefeitofortedeprogramaonotecidodomsculoesqueltico,comambosPPARGeCEBPAcomooscoordenadorescentraisdaresposta.Dopontodevistaprtico,osresultadosfornecemevidnciasadicionaisdequeEWumaestratgiadegestovaliosoparaoprodutordegadodecorte.Almdisso,arespostaobservadaemAngusnovilhosSimentalressaltaopotencialdefinetuningadipogenesisnestaraadeanimais.AngusSimmentalcomparaocomnovilhosAngusEWtinhaumnveldeexpressoprecoceemaiordamaioriadosgenesanalisados,oqueeracontrriosnossasexpectativasporqueosanimaisAngusnormalmentetmmaiorcapacidadedemrmore.Apesardisso,aaplicaodaabordagemdecriaoEWmesmoembezerrosAngusapareceuparainduziradiferenciaoprecocepradipcitoselipdicodeenchimentoatravsdaPPARGeCEBPArede.

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Figura9Putativomodelodeadaptaesdetranscrioduranteafasedecrescimentoeterminaoemrespostaaoplanodenutrio.