Participação do 3--Adiol, um metabólito da DHT, na regulação da Expressão da Aquaporina 9 nos

Dúctulos Eferentes do rato

Aluna: Patrícia de LimaOrientadora: Drª Cleida Aparecida de Oliveira

Universidade Federal de Minas GeraisInstituto de Cîências Biológicas

Departamento de Morfologia

O Sistema Genital Masculino

Hormônios Sexuais

TestosteronaTestosterona

EstrógenoEstrógeno(E2)(E2)

DHTDHTOH

OH

O

OHOOOO

OHOHOHOH

Aromatase 5- redutase

H

ERE gene

ERER

ARE gene

ARAR

Ação de Estrógenos:

Receptores de Estrógenos Fatores de Transcrição

ER ER

Dúctulos Eferentes de rato

-Maior Concentração de Receptores para Estrógeno ER e ER -Reabsorção de Fluido (96%)-Estrutura

HH22OO HH22OO

HH22OO

COCO22++ HH22COCO33 HH++ ++ HCOHCO33--

(AQP-1; AQP-9;(AQP-1; AQP-9;AQP-10)AQP-10)

NaNa++

NaNa++ NaNa++

NaNa++

KK++ 2Cl2Cl--

KK++ ClCl--

CAII

ClCl--

HCOHCO33--KK++

CFTRCFTR

KK++

NHE-3NHE-3

Mecanismo de Reabsorção de Fluidos

Na/K-ATPaseNa/K-ATPase

Similaridades – Reabsorção Renal

DRADRA

Aquaporinas

-Proteínas Integrais de Membrana

- Poro passivo - Passagem água movida pelo gradiente osmotico. -A água é selecionada pelo tamanho e pela carga elétrica -Ions não a atravessam por estarem hidratados

Não Apenas Água

Subtipos de AQPs de mamíferosexpressos em células/tecidos Específicos– 11 AQPs

A Família aquaporinas é dividida em :

*Aquaporinas – Selecionam apenas água*Aquagliceroporinas - Água e Glicerol

AQP 3 transporte de GLICEROL para o eritrócito AQP 7 tecido adiposo transporte de glicerol originado dos TAGAQP 9 captação de glicerol pelo fígado para formação de glicoseAQP 10

AQP 1, 2, 3, 4, 6 , 7 e 8

AQP 4AQP 0, 1, 4, 5

AQP 3

AQP 3, 5

AQP 3, 10

AQP 4

AQP 0, 3,7, 8, 9, 10

AQP 9

Agre et al, 2003

AQP-1, AQP2, AQP-9

EPIDÍDIMO

Brown et al, 1993 (AQP-1); Stevens et al, 2000 (AQP-2)Elkjaer et al, 2000 (AQP-9)

Cel.Leydig: AQP0, AQP9

Espermatócitos: AQP2, AQP8??

Cel.Sertoli: AQP0, AQP8

AQP3 e AQP9

Próstata - AQP1 e AQP9Vesícula seminal - AQP1

AQP1,AQP9 , AQP10

Aquaporinas no Sistema Reprodutor Masculino

Homeostase de fluidos: reabsorção, secreção

AQP1 (MV, basolat, peritubular; endotélio)

AQP9 (MV)

AQP10 (MV, cílios, endotélio)

Dúctulos eferentesC

NC

Regulação das Aquaporinas nos Dúctulos Eferentes do Rato

Regulação diferencial da expressão de AQP-1 e AQP-9 nos dúctulos eferentes

AQP-1: •Não regulada Testosterona, DHT ou estradiol

AQP-9:•DHT•Estrógenos

ED

IS •DHT•Não expressoOliveira et al 2004

Via alternativa para o metabolismo de DHT

Testosterona DHT 5-androstane-3, 17 Diol

AR ER

3HSD5 redutase

(3 HSD) : 3 -hidroxiesteróide desidrogenase

- 3-diol ação estrogênica na próstata/mama -Ligante fisiológico para o ER . -Concentração 3-Adiol > E2 na próstata

O 3- Adiol nos Ductulos Eferentes

A modulação na expressão de AQP 9 via DHT poderia ter sido através do 3 -Adiol?

3 -Adiol ER (abundantes no ED)

DHT Expressão AQP 9 (?)

Castração

DE DE

Grupos:-Castração bilateral; -Castração simulada (sham) (para controle da cirurgia);-Castração bilateral + 3 mg 3- Adiol /dia (6d)-Castração bilateral + óleo de milho

Imunohistoquímica para análise da expressão de AQP 9

Material e Métodos:Animais: •Ratos Wistar -90 dias idade

Testículo

Resultados obtidos – Peso Corporal , EP/ED e Gls. Sexuais Acessórias

Peso Corporal

0

50

100

150

200

250

300

350

400

450

500

sham cast óleo diol

g

Peso das próstatas

0

0,05

0,1

0,15

0,2

0,25

0,3

sham Castrado óleo diol

g/1

00g

de

pe

so c

orp

ora

l

Peso ED/EP

0

0,05

0,1

0,15

0,2

0,25

sham cast óleo diol

g/1

00

g d

e p

es

o c

orp

ora

l

Peso das Vesículas seminais + glândulas de coagulação

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

sham Castrado óleo diol

g/1

00

g d

e p

es

o c

orp

ora

l

* *

* ** *

*

* P 0,05

RESULTADO - Expressão AQP 9

Castração/ reposição com óleo milho : Redução na expressão das AQP9

Reposição hormonal com 3 Adiol: Recuperação na expressão das AQP9

Regulação da Expressão de AQP 9 nos Dúctulos Eferentes

E2 DHT 3 -Adiol

Possível função para receptores ER???

Considerações Finais

Agradecimentos• À todos do Laboratório de Morfologia de

Aves e da Biologia da Reprodução

• À minha especial orientadora Cleida, um modelo a seguir

• Ao Germán pelos conhecimentos adquiridos

• E ao André Gustavo, cuja ajuda foi essencial , obrigada !