REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS

INTRODUÇÃO

Proteínas são macromoléculas naturais com uma ou mais cadeias

polipeptídicas , isto é, são polímeros de aminoácidos; constituem 50% ou mais

da matéria seca celular, sendo fundamentais tanto no aspecto estrutural como

funcional. As proteínas podem ser separadas umas das outras e de outros tipos

de moléculas através de métodos baseados em certas propriedades

características , tais como solubilidade , peso molecular , carga elétrica e

afinidade por determinados compostos. É também possível caracterizar as

proteínas por reações de precipitação e coloração.

OBJETIVOS

Identificação de aminoácidos e ligação peptídica pelos métodos da Ninhidrina e

Biureto.

MATERIAL

Ovoalbumina 1%

Gelatina 1%

Glicina 1%

H2O Destilada

NaOH 6N

Solução de Ninhidrina

Reagente de biureto

Pipetas 5ml e pêra

Banho-maria a 100°

Tubos de ensaio/ estantes para tubos de ensaio

PROCEDIMENTOS

1° ETAPA: Teste de Ninhidrina (Identificar somente aminoácidos livres)

Essa reação é dada pela presença do amino grupo livre e possibilita inclusive a

determinação quantitativa do aminoácido – formação de composto colorido.

1. Numerar os 4 tubos de 1 á 4.

2. Colocar em cada tubo 3ml de solução de ovoalbumina, gelatina, glicina e

água, respectivamente.

3. Adicionar 1 ml de Ninhidrina.

4. Aquecer em banho-maria por 10 minutos e observar.

2°ETAPA: Teste de Biureto

Essa reação é dada por substância que contêm no mínimo duas ligações

peptídicas(tripeptídeo). Sendo assim, essa reação é positiva para todas as

proteínas , graças as suas ligações peptídicas. O íon cobre fornecido por uma

solução diluída e alcalina de CuSO4 se complexa com os grupos aminos as

ligações peptídicas desenvolvendo uma coloração violeta.

1. Numerar tubos 4 tubos de 1 á 4

2. Colocar em cada tubo 3ml de solução de ovoalbumina, gelatina,

glicina e água, respectivamente.

3. Adicionar 0,5 ml de NaOH e agitar com cuidado.

4. Adicionar a cada tubo 3 gotas de reativo de Biureto.

RESULTADOS

ETAPA 1 TUBOS DE ENSAIO EM BANHO MARIA 1ML DE NINHIDRINA +

10 MINUTOS EM BANHO-MARIA

Tubo 1 -> Ovoalbumina = NÃO OCORREU REAÇÃO

Tubo 2 -> Gelatina = NÃO OCORREU REAÇÃO

Tubo 3 -> Glicina = HOUVE REAÇÃO ( VIOLETA ESCURO)

Tubo 4 -> H20 = NÃO HOUVE REAÇÃO PEPTÍDICA

ETAPA 2 TUBOS DE ENSAIO + 0,5ml DE NaOH + 3 GOTAS DE REATIVO DE

BIURETO

Tubo 1 -> Ovoalbumina = REAÇÃO PEPTÍDICA

Tubo 2 -> Gelatina = REAÇÃO PEPTÍDICA

Tubo 3 -> Glicina = NÃO HOUVE REAÇÃO

Tubo 4 -> H20 = NÃO HOUVE REAÇÃO