Relatório de Estágio Do Mestrado de Anãlises Clínicas.

8/10/2019 Relatrio de Estgio Do Mestrado de Anlises Clnicas.

1/82

ndice

Margarida Souto Pinto Proena Lucas i

NDICE

ABREVIATURAS ......................................................................................................... v

RESUMO.................................................................................................................... ix

ABSTRACT ................................................................................................................ ix

INTRODUO ............................................................................................................ 1

CARATERIZAO DO LABORATRIO DE ESTGIO .............................................. 2

ATIVIDADES DESENVOLVIDAS ................................................................................ 4

I. HEMATOLOGIA ....................................................................................................... 5

1.1 Equipamentos e Metodologias Utilizadas .......................................................... 5

1.2 Hemograma ....................................................................................................... 6

1.2.1 Anemia ...................................................................................................... 10

1.2.2 Execuo e Observao do Esfregao Sanguneo de Sangue Perifrico. 11

1.2.3 Contagem de Reticulcitos ....................................................................... 13

1.2.4 Velocidade de Sedimentao (VS)............................................................ 13

1.3 Hemostase e Provas de Coagulao .............................................................. 14

1.4 Grupos Sanguneos ......................................................................................... 17

1.4.1 Sistema AB0 ............................................................................................. 17

1.4.2 Sistema Rh ................................................................................................ 18

1.5 Ferritina ............................................................................................................ 19

1.6 Controlo de Qualidade ..................................................................................... 19

2. BIOQUMICA ......................................................................................................... 21

2.1 Hidratos de Carbono ........................................................................................ 22

2.1.1 Glicose ...................................................................................................... 22

2.1.2 HbA1c (Hemoglobina Glicosilada)............................................................. 23

2.2 Lpidos ............................................................................................................. 24

2.2.1 Colesterol Total ......................................................................................... 24

2.2.2 Colesterol-HDL .......................................................................................... 25


2/82

ndice

Margarida Souto Pinto Proena Lucasii

2.2.3 Colesterol-LDL .......................................................................................... 26

2.2.4 Triglicridos .............................................................................................. 26

2.3 Compostos Nitrogenados Proteicos ................................................................ 27

2.3.1 Protenas Totais ........................................................................................ 27

2.3.2 Protena C Reativa (PCR) ........................................................................ 28

2.3.3 Albumina Srica ........................................................................................ 29

2.3.4 Microalbuminria ...................................................................................... 29

2.4 Compostos Nitrogenados No Proteicos ........................................................ 30

2.4.1 cido rico ................................................................................................ 30

2.4.2 Ureia ......................................................................................................... 312.4.3 Creatinina e Clearance da Creatinina ....................................................... 32

2.5 Enzimas .......................................................................................................... 33

2.5.1 AST /GOT ................................................................................................. 33

2.5.2 ALT /GPT .................................................................................................. 34

2.5.3 Fosfatase Alcalina (ALP) .......................................................................... 35

2.5.4 Gama-glutamil transferase (-GT) .............................................................. 36

2.5.5 Creatina Cinase (CK) ................................................................................ 37

2.5.6 LDH (Lactato Desidrogenase) .................................................................. 38

2.5.7 Amilase ..................................................................................................... 39

2.6 Bilirrubinas ...................................................................................................... 40

2.6.1 Bilirrubina Total ......................................................................................... 40

2.6.2 Bilirrubina Direta ....................................................................................... 41

2.6.3 Bilirrubina Indireta ..................................................................................... 42

2.7 Ies ................................................................................................................. 42

2.7.1 Sdio ........................................................................................................ 44

2.7.2 Potssio .................................................................................................... 45

2.7.3 Cloretos .................................................................................................... 46

2.7.4 Magnsio .................................................................................................. 46


3/82

ndice

Margarida Souto Pinto Proena Lucas iii

2.7.5 Clcio ........................................................................................................ 47

2.7.6 Fsforo ...................................................................................................... 49

2.7.7 Ferro Srico .............................................................................................. 50

2.8 Controlo de Qualidade no Laboratrio de Bioqumica ..................................... 50

2.8.1 Calibrao ................................................................................................. 50

2.8.2 Controlo de Qualidade Interno .................................................................. 51

2.8.3 Controlo de Qualidade Externo ................................................................. 51

CONCLUSES ......................................................................................................... 53

BIBLIOGRAFIA ......................................................................................................... 55

ANEXOS ................................................................................................................... 57


4/82


5/82

Abreviaturas

Margarida Souto Pinto Proena Lucas v

ABREVIATURAS

Ac

ADE(RDW)

AEQ

ALP

ALT

AMP

AR

AST

4-AAP

Ca 2+CHGM

CK

Cl-

CE

CNPG3

CO

CPNPCQI

CTFF

DHBS

DCHBS

EDTA

ELFA

ELISAFA

Fl

FR

FFUC

FvW

GI

GK

GLDH

Anticorpo

Amplitude da Distribuio Eritrocitria

Avaliao Externa da Qualidade

Fosfatase Alcalina

Alanina Aminotransferase Srica

2-amino-2-metil-1-propanol

Artrite Reumatide

Aspartato Aminotransferase srica

4-Aminoantipirina

ClcioConcentrao da Hemoglobina Globular Mdia

Creatina Cinase

Cloro

Colesterol Esterase

2-cloro-4-nitrofenil-alfa-D-maltrotriosido

Colesterol Oxidase

2-cloro-4-nitrofenolControlo de Qualidade Interna

Capacidade de Fixao da Transferrina

3,5-dicloro-2-hidroxibenzenossulfnico

3,5-dicloro-2-hidroxibenzenossulfonato

cido Etilenodiaminotetracetico

Enzyme Linked Fluorescent Assay

Enzyme Linked Immunosorbent AssayFosfatase Alcalina

Fentolitros

Fator Reumatide

Faculdade Farmcia da Universidade de Coimbra

Fator de von Wilebrand

Gastrointestinal

Glicerol Cinase

Glutamato Desidrogenase


6/82

Abreviaturas

Margarida Souto Pinto Proena Lucasvi

GPO

G6PDH

HBA

Hb

HbA1cHDL

Hgb

HGM

HK

HPO

Ht

IDLINR

INSA

ISI

K+

LAC

LCR

LDL

LDH

MDH

Mg2+

MPV

4-MUP

NAC

NAD

NADH

Na+

Nm

PCR

pg

PTGO

PTH

RNARF

Glicerolfosfato Oxidase

Glicose-6-fosfato Desidrogenase

cido Hidroxibenzico

Concentrao da Hemoglobina

Hemoglobina GlicosiladaLipoprotenas de Alta Densidade

Hemoglobina

Hemoglobina Globular Mdia

Hexocinase

Peroxidase de Rbano

Hematcrito

Lipoprotenas de Densidade IntermdiaInternational Normalized Ratio

Instituto Nacional de Sade Dr. Ricardo Jorge

ndice de Sensibilidade Internacional (Tromboplastina)

Potssio

Laboratrio de Anlises Clnicas

Liquido Cefalorraquideo

Lipoprotenas de Baixa Densidade

Lactato Desidrogenase

Malato Desidrogenase

Magnsio

Volume Mdio das Plaquetas

4-metil umbeliferil fosfato

N-Acetil-L-Cistena

Beta nicotinamida Adenina

Beta -Nicotinamida Adenina Dinucletido

Sdio

Nanmetros

Protena-C-Reativa

Picogramas

Prova Oral de Tolerncia Glicose

Hormona Paratiride

cido RibonucleicoFator Reumatide


7/82

Abreviaturas

Margarida Souto Pinto Proena Lucas vii

Rpm

SASUC

SD

SGQSIADH

ST

TFG

TP

TTP

UKNEQAS

VGMVIDAS

VLDL

VS

Rotaes por minuto

Servios de Ao Social da Universidade de Coimbra

Desvio Padro

Sistema de Gesto de QualidadeSndrome de Secreo Inapropriada de Hormona Antidiurtica

Saturao da Transferrina

Taxa de Filtrao Glomerular

Tempo de Protrombina

Tempo Parcial de Tromboplastina

United Kingdom National External Quality Assessment Service

Volume Globular MdioVitek Immuno Diagnostic Assay System

Very Low Density Lipoproteins (Lipoprotenas de densidade muito

baixa)

Velocidade de Sedimentao


8/82


9/82

Resumo

Margarida Souto Pinto Proena Lucas ix

RESUMO

Este relatrio de estgio do Mestrado de Anlises Clnicas pretende descrever todas

as atividades nas quais estive envolvida durante o perodo de estgio no Laboratrio

de Anlises Clnicas da Faculdade de Farmcia da Universidade de Coimbra.

Desta forma, vo ser descritos os mtodos usados na execuo de anlises nas

reas do laboratrio em que mais trabalhei hematologia e bioqumica e a respetiva

interpretao de resultados.

ABSTRACT

This report for the Clinical Biology Master pretends to describe all the activities on

which I was involved during my practice in the Clinical Analyses Laboratory of FFUC.

In this way, there will be described all the methods used in the lab tests on the

laboratory areas I worked the most like Hematology and Biochemistry and the results

evaluation involved in this testing.


10/82


11/82

Introduo

Margarida Souto Pinto Proena Lucas 1

INTRODUO

Este relatrio visa descrever todas as atividades laboratoriais que desempenhei

como estagiria do Mestrado de Anlises Clnicas, durante o perodo de 27 de

Setembro de 2010 a 15 de Julho de 2011, sob a orientao da Dra. Maria Luclia

Silveira e da Dra. Ana Donato, no Laboratrio de Anlises Clnicas da Faculdade de

Farmcia da Universidade de Coimbra. O estgio decorreu todos os dias da

semana, de acordo com o horrio do laboratrio e dependendo do nmero de

amostras dirias. Este estgio de carter profissional contemplou de forma geral as

valncias: Hematologia, Bioqumica, Imunologia e Microbiologia.

As reas selecionadas para complementar os meus conhecimentos a nvel clnicoforam a Hematologia e a Bioqumica.

Primeiramente, fui integrada na parte organizacional do laboratrio, de seguida pela

fase de colheitas de amostras e posteriormente no trabalho laboratorial em contato

com as amostras do cliente/utente, as tcnicas para cada tipo de anlise e aparelhos

correspondentes. Na primeira fase laboratorial acima referida, a pr-analtica,

muito importante que o cliente/utente, a amostra e a solicitao de exames estejamdevidamente identificados. Tem que se ter em conta a correta preparao do doente

antes da colheita da amostra em causa, como o fato de estar em jejum, o estado

nutricional do utente/cliente, interferncia dos medicamentos, exerccio fsico. J na

fase de colheita da amostra biolgica essencial ter conhecimento dos erros e

variaes que podem ocorrer antes, durante e aps a obteno da mesma (

identificao incorreta da amostra, troca de material, contaminao da amostra, erro

por hemlise, homogeneizao).

As diversas variveis analticas devem ser muito bem controladas na realizao de

um exame laboratorial para assegurar que os resultados sejam precisos e exatos.


12/82

Introduo

Margarida Souto Pinto Proena Lucas2

CARATERIZAO DO LABORATRIO DE ESTGIO

O laboratrio onde estagiei est incorporado na Faculdade de Farmcia da

Universidade de Coimbra. Este Laboratrio de Anlises Clnicas tem como Diretora

Tcnica a Dra. Maria Luclia Silveira Farmacutica Especialista em Anlises Clnicas

e como Diretora Tcnica Adjunta a Dra. Ana Donato Farmacutica Especialista em

Anlises Clnicas. No LAC tambm trabalham uma tcnica de diagnstico e

teraputica, duas enfermeiras e duas funcionrias administrativas.

O laboratrio est dividido em vrias reas: administrativa, colheitas e laboratrio.

Tambm tem um armazm e casas de banho.

As valncias disponveis so: Hematologia, Bioqumica, Endocrinologia, Imunologia

e Microbiologia.

O LAC envia amostras especficas dos clientes/utentes para o Laboratrio D. Diniz e

tem um setor de colheitas no SASUC.

O nmero mdio de amostras dirias do LAC cerca de 15.

O servio participa no Programa de Avaliao Externa da Qualidade do INSA, que

abrange as reas de Hematologia, Bioqumica, Imunologia, Endocrinologia e

Microbiologia.

O LAC tem vrios equipamentos automticos para processar as diversas anlises:

1) Analisador Coulter MaxM para a realizao de anlises hematolgicas;utilizando o princpio Coulter e Tecnologia VCS;

2) Syncron CX4: autoanalisador, totalmente automatizado e controlado por

computador para a determinao quantitativa de numerosos componentes dos

fluidos biolgicos, nomeadamente do soro, plasma e urina, usado na Bioqumica;

3) VIDAS: analisador da Biomrieux, equipamento automatizado para anlises

imunolgicas utilizando a tecnologia ELFA que combina o mtodo ELISA com

uma leitura final em fluorescncia;

4) Analisador de VS: autoanalisador para ESR com deteo por fotodiodo e

apresentao de resultados em mm Westergreen;


13/82

Introduo


5) Option Plus4: coagulmetro automtico; funcionamento por deteo tica do

cogulo com agitao magntica constante do meio reacional;

6) Spotlyte Na+/K+/Cl-: analisador automtico baseado em eltrodos seletivos de

ies.

7) Sistema Helenapara eletroforese;8) Combi Scan 100 (analisador de tiras de urina) para determinar parmetros

bioqumicos na urina.

Dispe ainda de uma centrfuga e microscpio tico.


14/82

Atividades Desenvolvidas


ATIVIDADES DESENVOLVIDAS

Como j foi referido, estagiei e desenvolvi atividades nos diversos setores:

1) Imunologia: pesquisa do ttulo de anti-estreptolisina O, ac. anti-citomegalovrus

IgG/IgM, ac. anti-HVA, ac. anti-HBc, ac. anti-HBc IgM, ac. anti-HBe, ac. anti-HBs,

ac. anti-hepatite C, ac. anti-HIV, ac. anti-HVA IgM, ac. anti-tirideus, ac. anti-

toxoplasma IgG/IgM, ac. anti-vrus da rubeola IgG/IgM, ag. HBe, ag. HBs, fator

reumatoide/RA teste, reao de Widal, reao de Waller Rose, reao de VDRL.

2) Microbiologia: na urina - exame citobacteriolgico (direto e cultural com

identificao e eventual contagem de colnias e antibiograma).

3) Endocrinologia: doseamento do estradiol, hormona folculo-estimulante,

hormona lteo-estimulante, hormona tireo-estimulante, tiroxina total ou livre,

triiodotironina total e frao livre, prolactina, testosterona e progesterona,

marcadores tumorais: Ca 19-9, Ca 125, Ca 15-3, alfa-fetoprotena, ag. carcino-

embrionrio, ag. especfico da prstata- total e frao livre.

4) Hematologia e Bioqumica: as duas vertentes que mais estudei e que vou focarmais frente, detalhadamente.


15/82

Hematologia


I. HEMATOLOGIA

1.1 Equipamentos e Metodologias Utilizadas

a) Analisador Coulter MaxMpara a realizao dos hemogramas:

Fig. 1- Analisador Coulter MaxM

Funcionamento base do Coulter MaxM:

A tecnologia VCS o mecanismo pelo qual os analisadores de hematologia Coulter

fazem a diferenciao dos leuccitos em cinco tipos: Neutrfilos, Linfcitos,

Moncitos, Eosinfilos e Basfilos.

Fig. 2 Esquema de funcionamento do Coulter


16/82

Hematologia


Para a contagem de partculas:

1) o nmero de impulsos eltricos correspondente ao nmero de partculas que

passam na abertura, amplitude dos impulsos proporcional ao volume das

partculas;

2) abertura na cmara de contagem de eritrcitos e plaquetas de 50m, na cmarade contagem de leuccitos 10 m;

3) contagem em triplicado para cada tipo de partculas: eritrcitos, plaquetas e

leuccitos;

4) na cmara de contagem de eritrcitos: eritrcitos-partculas com volume superior

ou igual a 36 fl; plaquetas- partculas entre 2 e 20 fl;

5) na cmara de leuccitos- partculas com volume superior ou igual a 36 fl.

b)Aparelho automtico de VSpara medir a Velocidade de Sedimentao.

c)Option Plus4para realizar os Testes de Coagulao Sangunea: funcionamento

por deteo tica do cogulo com agitao magntica constante do meio reacional.

1.2 Hemograma

Este exame fornece-nos um conjunto de informaes hematolgicas quer

quantitativas quer qualitativas. um dos exames laboratoriais mais requisitado pelos

clnicos para screening e diagnstico de diversas patologias. No Laboratrio de

Anlises Clnicas da Faculdade de Farmcia da Universidade de Coimbra utiliza-se

o Coulter MaxM para a contagem celular. No Coulter MaxM feito o controlo de

qualidade interno antes do processamento das amostras dos utentes, com trs

nveis de controlo: alto, mdio e baixo. Quando aparecem valores muito desfasados

no autoanalisador, comparamos esses mesmos valores com o histrico de anlises

do cliente/utente para termos a certeza se se trata de uma patologia.

Feita a anlise dos resultados emitidos pelo Coulter, se nos depararmos com uma

alterao significativa dos valores podemos suspeitar de uma patologia,

nomeadamente de uma anemia. Aps o hemograma faz-se um esfregao sanguneo

de sangue perifrico e por fim a contagem de reticulcitos.


17/82

Hematologia


O sangue colhido por puno venosa para tubos que contm EDTA na proporo

de 1:9 com o sangue.

O EDTA um anticoagulante capaz de remover o clcio necessrio coagulao e

o mais indicado uma vez que no altera a morfologia celular.

a) Contagem de eritrcitos: o nmero total de eritrcitos por unidade de volume

de sangue total, expressa em 1012/L.

b) Concentrao da Hemoglobina (Hb): medida de quantidade de hemoglobina por

unidade de volume de sangue, expressa em g/dl.

c) Hematcrito (Ht): determina o volume sanguneo ocupado pela massa doseritrcitos, em percentagem ou L/L. A partir dos valores do hematcrito, da

contagem de eritrcitos e da concentrao de hemoglobina podemos calcular as

constantes eritrocitrias: VGM, HCM, CHCM e o RDW.

d) Volume globular mdio (VGM)que o volume mdio dos eritrcitos expresso

em fentolitros (fl): VGM = /^/

. Os valores normais so de 8010 fl, os

valores acima de 96 indicam macrocitosee os valores inferiores a 80 fl indicammicrocitose. um parmetro muito til na classificao de anemias. Quando

estamos perante determinadas doenas em que se denota uma variao do

tamanho eritrocitrio, embora o tamanho mdio esteja inalterado, o VGM pode no

apresentar alteraes e observamos no esfregao sanguneo uma anisocitose, que

so glbulos vermelhos de vrios tamanhos e, por vezes, tambm com diferentes

formas chamado de poiquilocitose.

e) Hemoglobina corpuscular mdia (HCM)representa o contedo hemoglobnico

de um eritrcito expresso em picogramas (pg): HCM= //

, os valores

normais variam entre 276 picogramas, os valores acima de 33 pg indicam

hipercromiae abaixo de 27 hipocromia(Princpios de Hematologia Clnica, 2007).

f) Concentrao de Hemoglobina Corpuscular Mdia (CHCM) a razo entre a

quantidade de hemoglobina e o volume total de eritrcitos. Assim, CHCM=/

/.


18/82

Hematologia


g) Amplitude da Distribuio Eritrocitria (RDW): o coeficiente da variao da

distribuio dos volumes eritrocitrios individuais, expresso em percentagem.

Quanto maior a percentagem de RDW maior a anisocitose.

(a) (b)

(c) (d)

(e)

Fig. 3- Diferentes formas de apresentao das clulas sanguneas vermelhas, desde a forma normala) at ao estado hipocrmico.: (a) Erotcitos normais; (b) Micrcitos; (c) Anisocitose; (d)

Poiquilocitose; (e) Hipocromia


19/82

Hematologia


Hemograma Valores de refernciaEritrcitos 4,52 5,9 x 1012/L

4,1 5,1 x 1012/LHemoglobina 14,0 17,5 mg/dL

12,0 15,0 mg/dLHematcrito 0,42 0,5 L/L

0,36 0,45 L/LVGM Adultos 80 96 flHCM Adultos 27 33 pgCHCM Adultos 30 35 mg/dLLeuccitos Adultos 4,4 11,3 x 10 /LNeutrfilos Adultos 40 75 % (2,0 7,0 x 109/L)Linfcitos Adultos 20 45 % (1,0 3,0 x 109/L)Moncitos Adultos 2 10 % (0,2 1,0 x 109/L)Eosinfilos Adultos 1 6 % (0,02 0,5 x 109/L)Basfilos Adultos < 1% (0,02 0,1 x 10 /L)

Tabela I Valores de referncia relativos ao hemograma.

h) Contagem de Leuccitos:esta contagem representa o nmero de leuccitos por

unidade de volume de sangue em 109/L. A frmula leucocitria que completa o

hemograma pode ser estabelecida quer pelo contador automtico quer pela

observao ao microscpio de um esfregao sanguneo. A partir daqui faz-se a

interpretao analtica atravs dos nmeros absolutos.

(a) (b) (c)

(d) (e)

Fig. 4- Morfologia dos diferentes tipos de leuccitos: (a) Linfcito; (b)Moncitos; (c)Basfilos;

Neutrfilos; (e) Eosinfilos


20/82


21/82

Hematologia


1.2.2 Execuo e Observao do Esfregao Sanguneo de Sangue

Perifrico

Depois da interpretao dos resultados fornecidos pelo hemograma se suspeitarmos

que estamos na presena de alguma patologia executamos um esfregao sanguneo

de sangue perifrico. O esfregao feito fazendo deslizar uma gotcula de sangue

entre a lmina e a lamela. Posteriormente para se observarem muito bem os

elementos figurados do sangue e alteraes morfolgicas que possam aparecer

realizamos uma colorao de Maygrnwald-Giemsa.

Fig. 5- Execuo de um esfregao sanguneo de sangue perifrico


22/82

Hematologia


(a) (b)

(c)

Fig. 6- Observao microscpica de um esfregao sanguneo de sangue perifrico: (a) Zona

espessa de um esfregao, (b) Zona correta para observao, (c) Zona terminal de um esfregao.


23/82

Hematologia


1.2.3 Contagem de Reticulcitos

Os reticulcitos so eritrcitos jovens que possuem RNA no seu citoplasma. So

clulas vermelhas mais jovens e percursoras das hemcias normais, cuja

percentagem, corrigida pelo hematcrito do paciente, nos d uma ideia da taxa deproduo medular dos eritrcitos (Princpios de Hematologia Clnica, 2007).

Esta contagem feita para avaliar a capacidade de produo de hemcias da

medula ssea e distinguir anemias relacionadas com perda sangunea ou destruio

excessiva de hemcias e anemias por diminuio da produo de hemcias. Para

monitorizar a resposta da medula ssea e a reposio da sua funo normal aps

quimioterapia, transplante de medula ssea ou tratamento de anemias.

Procedemos a este tipo de contagem celular quando o paciente apresenta uma

diminuio ou um aumento da contagem de hemcias, da hemoglobina, do

hematcrito, e tambm quando o mdico quer avaliar a funo da medula ssea.

Fig. 7- Reticulcitos

1.2.4 Velocidade de Sedimentao (VS)

Amostra:plasma citratado em tubo especfico.

A velocidade de sedimentao determinada ao encher um tubo calibrado de

dimetro padro com sangue total anticoagulado e ao determinar a velocidade de

sedimentao dos eritrcitos durante um perodo de tempo especfico, geralmente1h. Quando os eritrcitos se depositam no fundo do tubo, surge uma zona bastante


24/82

Hematologia


grande de plasma transparente, que a rea medida. A maioria das alteraes na

VS causada por alteraes das protenas plasmticas, principalmente fibrinognio,

com menor contribuio das alfa-2-globulinas. A VS est quase sempre aumentada

em utentes com insuficincia renal crnica submetidos ou no a dilise. A VS possui

trs aplicaes principais para ajudar a detetar e estabelecer o diagnstico dedistrbios inflamatrios ou para excluir a possibilidade dessa patologias; como meio

de acompanhar a evoluo clnica ou no tratamento de doenas com componente

inflamatrio, como artrite reumatide ou glomerulonefrite aguda; para confirmar a

presena ou ausncia de doena oculta, por exemplo quando o doente est

totalmente assintomtico. Os tubos devem estar numa posio absolutamente

vertical; mesmo graus minmos de inclinao possuem grande efeito sobre a

velocidade de sedimentao.

O mtodo de Westergren, no qual se baseia o Option Plus 4, tem a reputao de ser

imune aos efeitos da anemia, todavia existem estudos que contrariam esta hiptese.

Alm da anemia e das alteraes observadas no fibrinognio e nas alfa-2-globulinas,

outros fatores tambm afetam a VS. As alteraes nas protenas sricas que

modificam a viscosidade do plasma influenciam a sedimentao dos eritrcitos.

Certas doenas como, como a anemia falciforme e a policitemia, diminuem

falsamente a VS. Os valores normais esto relacionados com a idade.

1.3 Hemostase e Provas de Coagulao

A hemostase o conjunto de processos que permitem manter o sangue no estado

fluido, resultante da interao entre os fatores de coagulao, plaquetas sangunease a capacidade de contrao ou distenso dos vasos sanguneos em equilbrio com

o sistema fibrinoltico. Para o controlo da hemorragia, quando h rompimento de um

pequeno vaso sanguneo, temos a Hemostase Primria (vasoconstrio e formao

de um agregado de plaquetas); de seguida, temos a Coagulao Sangunea onde

h formao de uma rede de fibrina, por ativao da cacata de coagulao. Por

ltimo, a Fibrinlise, onde ocorre a dissoluo do cogulo e um restabelecimento do

fluxo sanguneo. Mas quando se trata de leses maiores, o sistema hemosttico no

suficiente para solucionar a hemorragia.


25/82

Hematologia


Classicamente, a cascata de coagulao divide-se em trs vias: a intrnseca,

extrnseca e a via comum. Na primeira, os elementos necessrios encontram se no

sangue e o processo inicia se quando h leso endotelial e consequente exposio

do colagnio. A via extrnseca ou via do fator VII considerada a principal via de

iniciao do processo de coagulao que a coagulao parte de uma leso tecidularcom libertao do fator III ou tromboplastina. As duas vias convergem a nvel do

fator X (via comum), com posterior ativao do fibrinognio em fibrina. Apesar de ter

trs vias que a caraterizam, a coagulao um processo dinmico, no devendo

ser, por isso, compartimentado (Correia- Pinto et al., 1996).

No que diz respeito s Provas de coagulao:

a) Tempo de Protrombina (TP)

O TP e utilizado em trs situaes: para monitorizar a terapia anticoagulante; como

parte de uma triagem geral para distrbios da cascata de coagulao e como prova

de funo heptica. O TP indica principalmente a existncia de defeitos no sistema

extrnseco da coagulao (protrombina e factores V, VII e X). Se o defeito no

fibrinognio for grave ele tambm ir produzir resultados anormais do TP, uma vez

que o teste depende de um mecanismo intato da fibrina para produzir o cogulo.

timo no controlo da teraputica com anticoagulantes orais (cumarnicos,

antagonistas da vitamina K). As clulas hepticas produzem certos fatores de

coagulao que necessitam da presena da vitamina K para a sua sntese numa

forma passvel de ser ativada. Os anticoagulantes cumarnicos inibem a utilizao de

vitamina K pelas clulas hepticas. Os fatores vitamina K-dependentes, situados por

ordem decrescente de sensibilidade cumarina, so: fator VII, fator IX, fator X e

protrombina. A anticoagulao obtida por estes anticoagulante e mais bem

monitorizada pelo TP, embora esta prova no seja afetada pelo fator IX (Ravel,

1995).

Para determinar o TP, no sentido de reduzir as diferenas entre os vrios tipos de

testes utilizados, procedeu-se padronizao das tromboplastinas, atribuindo-se a

cada uma o seu ISI. Assim, os utentes/clientes devem monitorizar a dose diria de

anticoagulante atravs do INR dado pela frmula: =, geralmente

um INR de 2,5 (Princpios de Hematologia Clnica, 2007).


26/82

Hematologia


Mtodo:

O tempo consumido, em segundos, at coagulao do plasma o Tempo de

Protrombina.

1 Aplicar esferas na cpula da amostra em duplicado.

2 Colocar 100 l de plasma em duplicado + 200 l de reagente (tromboplastinaclcica).

3 Ler INR.

Valores de referncia:0,9-1,1.

Interpretao:O reagente tromboplstico tissular utilizado no teste no contm os

fatores V, VII e X, que devem ser fornecidos pelo plasma do paciente, juntamentecom a protrombina e o fibrinognio. Assim, a deficincia ou ausncia de qualquer um

desses fatores, resulta num prolongamento do Tempo de Protrombina. Admitindo-

se que o fibrinognio esteja em concentrao normal, o prolongamento do Tempo de

Protrombina deve-se deficincia de alguns dos fatores do complexo da

Protrombina.O Tempo de Protrombina pode encontrar-se alongado nos seguintes

casos: presena de anticoagulantes circulantes, na deficincia de vitamina K e nas

hepatopatias de um modo geral.

b) Tempo Parcial de Tromboplastina (TTP)

Este o mtodo mais apropriado para investigar coagulopatias por deficincia de

um ou mais fatores de coagulao como a hemofilia, para controlar doentes

heparinizados, uma vez que tem a capacidade de avaliar as vias intrnseca e final

comum da cascata de coagulao. Avalia todos os fatores de coagulao exceto o

VII e o III, com sensibilidade mxima para os fatores VIII e IX.

Mtodo:

1 Aplicar esferas na cpula reagente/amostra em duplicado

2 Colocar 100 L de reagente (Triniclot TTP) com as particulas de slica que

formam a superfcie de contato + fosfolpidos (libertados na hemostase) e 100 l da

amostra

3 Incubar em 3 min.4 Aplicar 100 l de cloreto de clcio


27/82

Hematologia


Notas: aplicado o reagente + amostra para desencadear a cascata de coagulao.

R=

, (R=0,8 a 1,2).

Valores de referncia:25-35 segundos

Interpretao:O TTPA uma prova sensvel para avaliar alteraes no processo

da coagulao.O alongamento do TTPA, indicativo de alterao dos fatores V, VII,

IX, X, II e I, ou ainda, de quando existirem anticoagulantes circulantes.

1.4 Grupos Sanguneos

O sangue de cada indivduo classificado em grupos de acordo com a presena de

antignios especficos nos eritrcitos. O conhecimento do grupo sanguneo de um

doente e de uma determinada unidade de sangue essencial para a realizao de

transfuses sanguneas com um maior grau de segurana. No trabalho laboratorial

de rotina fiz as determinaes dos grupos AB0 e Rh.

1.4.1 Sistema AB0

O sistema de grupo sanguneo AB0 um exemplo clssico de aglutinognios e seus

isoanticorpos correspondentes. Existem trs desses antignios: A, B e 0, cujos

genes se localizam num locus em cada cromossoma de um par homlogo. Os

antignio A e B so antignios relativamente fortes e, do ponto de vista sorolgico

comportam-se como genes dominantes, enquanto o antignio 0 no detetado por

soros de tipagem comercial e, portanto, comporta-se sorologicamente como um

gene recessivo. O grupo sanguneo 0 diagnosticado pela ausncia de reao para

os antignio A ou B, de modo que o grupo sanguneo 0implica a presena de

antignio 0em ambos os cromossomas, em vez de apenas um. Esta situao resulta

na possibilidade de quatro fentipos principais A, B, AB e 0, visto que A e B so

dominantes em relao a 0. Alm disso quando os eritrcitos do indivduo possuem

antignio A ou B, os isoanticorpos correspondentes anti-A ou Aanti-B esto ausentes

no soro. Por outro lado, se o indivduo carece de de antignios A ou B, o soro

contm o isoanticorpo contra o isoantignio ausente. O antignio 0 to fraco, que


28/82

Hematologia


para finalidades prticas ele considerado no antignio. Por conseguinte o

indivduo AA ou A0 ter isoanticorpos anti-B no soro; o indivduo 00 ter

isoanticorpos anti-A e anti-B, e assim por diante.(Ravel,1995)

Amostra:sangue total (EDTA K3)

Mtodo em lmina:Pesquisa dos antignios nos eritrcitos do utente/paciente

Para a tipificao AB0 usam-se soros comercializados que contm anticorpos

conhecidos dirigidos contra os respetivos antignios, que existem superfcie dos

eritrcitos: soro anti-A, soro anti-B e anti-AB. A leitura final feita pela tcnica de

aglutinao.

1.4.2 Sistema Rh

De acordo com Wiener, o grupo Rh determinado por genes isolados, contendo

cada cromossoma um par desses genes. Na maioria das situaes, cada gene deve

determinar supostamente um antignio contra o qual pode ser produzido umanticorpo especfico. Na teoria do sistema Rh de Wiener, cada gene controla na

verdade um antignio. Todavia cada um desses antignios d origem a vrios

fatores sanguneos diferentes, sendo os anticorpos dirigidos contra esses fatores,

que so os componentes sorolgicos do sistema Rh (Ravel, 1995).

Amostra:sangue total (EDTA K3)

Mtodo: A tcnica usada igual ao Sistema AB0, ou seja, a aglutinao. O

procedimento o mesmo e realizado ao mesmo tempo do AB0, sendo que a

aglutinao corresponde a Rh positivo e a sua ausncia Rh negativo.


29/82

Hematologia


1.5 Ferritina

A ferritina uma protena de elevado peso molecular que contm ferro e que

funciona como uma reserva de ferro no nosso organismo. encontrada

fundamentalmente nas clulas da medula ssea, bao e fgado, onde armazena oferro em excesso. A ferritina constitui uma medida mais sensvel, especfica e fivel

para a determinao precoce do estado de depleo de ferro.

Amostra:soro

Mtodo:Imunoensaio no VIDAS 30. Para detetar os anticorpos, fixa-se o antignio

nas paredes do cone. Se a amostra tiver o anticorpo pesquisado,4-metil umbeliferilfosfato hidrolisado em Umbeliferona (ELISA indireta). Para detetar as

imunoglobulinas M, a IgM pesquisada capturada pelos anti-IgM fixados nas

paredes do cone. A presena de IgM revelada pelo Ag estabilizado meio lquido. A

deteo de antignios (baterianos, virais, proteicos) o anticorpo fixado nas paredes

do cone. Para estes trs princpios, a fluorescncia medida diretamente

proporcional quantidade de anticorpos ou de antignios presentes na amostra.

Para calibrar este aparelho automatizado temos que introduzir um carto com toda ainformao necessria para reconhecer o kit, recalibrar de 14 em 14 dias.

Valores de referncia:

Homens: 21,8 a 274 ng/ml

Mulheres: 4,6 a 204 ng/ml

1.6 Controlo de Qualidade

O sistema de controlo de qualidade minimiza os erros analticos no laboratrio, com

a finalidade de obter resultados fiveis e seguros. Temos assim um sistema de

controlo de qualidade interno e externo O controlo interno uma anlise diria de

amostras baseada nos valores dos analitos conhecidos para avaliar a preciso dos

ensaios. Assim, podemos avaliar o funcionamento eficiente das tcnicaslaboratoriais fornecendo resultados vlidos que posteriormente contribuiro para um


30/82

Hematologia


bom diagnstico clnico. Este parmetro tem como objetivos garantir a

reprodutibilidade (preciso),verificar a calibrao dos analitos e indicar o momento

certo para promover aes corretivas quando surgir uma no conformidade. Todos

os documentos referentes ao controlo da qualidade devem ser arquivados para

estarem sempre disponveis a todos os elementos integrantes do LAC, de acordocom as premissas das Boas Prticas de Laboratrio

Clnico.

Temos tambm o controlo de qualidade efetuados pelo Programa Nacional de

Avaliao Externa da Qualidade em Hematologia do Instituto Nacional de Sade Dr.

Ricardo Jorge. Este tipo de controlo interlaboratorial visa comparar a exatido dos

exames do laboratrio com a de outros participantes, tendo em conta anlises de

alquotas do mesmo material, a partir de concentraes desconhecidas fornecidaspelo controlo de qualidade externo. Com a participao do INSA no controlo externo

torna-se possvel assegurar resultados finais muito prximos do valor real (exatido)

dentro de uma variabilidade analtica permitida. No podemos descurar a

importncia do material de controlo, homogneo e estvel e os analitos presentes

devem ser estveis durante o prazo de validade tanto na forma liofilizada quanto

aps dissoluo.


31/82

Bioqumica


2. BIOQUMICA

No setor de Bioqumica do LAC, os principais equipamentos automatizados no

sentido de assegurar um resultado vlido so:

a) O autoanalisador Syncron CX4

b) O Spotlyte Na +/K+/Cl-

c) Combi Scan 100 (Analisador de tiras da urina)

d) Aparelho para eletroforese da Helena Biosciences

FIg. 8 Autonalisador Syncron CX4

O autoanalisador Syncron CX4 executa todos os passos que eram usados

manualmente nos tempos mais remotos.

Primeiramente, procede-se calibrao, depois feito o controlo e por ltimo

coloca-se a amostra a correr no carrossel, fazendo uso de cdigos de barra para

facilitar todo o processo. Para a leitura final so usados fotmetros com quatro filtros

de comprimentos de onda. Este um autoanalisador que funciona pela tcnica de

quimioluminescncia nas amostras de soro; urina (urina 24h), sangue total (HbA1c).

No Syncron CX4 existem vrios tipos de tcnicas consoante os requisitos dos

parmetros a analisar. Tcnicas estas como a colorimtrica direta para as protenas

totais, clcio, ferro, entre outros; mtodos enzimticos colorimtricos em que aintensidade de cor proporcional s enzimas mas no direta porque h uma


32/82

Bioqumica


interferncia de enzimas (ex.: na glicose, a glicose oxidase); cinticas de ordem

zero para todos os enzimas e o princpio de turbidimetria que doseia a PCR, o Fator

Reumatoide, a Microalbuminria e a HbA1c, exibem uma maior sensibilidade para

traar as curvas de calibrao.

2.1 Hidratos de Carbono

2.1.1 Glicose

Resumo do teste: a determinao deste monossacardeo no sangue o diagnstico

mais frequentemente utilizado para auxiliar no diagnstico da diabetes. Odoseamento de glucose feito num conjunto especfico de provas em jejum; em

jejum e ps-prandial; Prova de Tolerncia oral glucose e curva de glicmia.

As alteraes no metabolismo da glucose correspondem, na maioria das vezes, a

uma hiperglicemia (> 106 mg/dL) e com menor frequncia, a hipoglicmia (


33/82

Bioqumica


2.1.2 HbA1c (Hemoglobina Glicosilada)

A determinao da Hemoglobina aceite como um mtodo de controlo da glicose a

longo prazo em doentes com diabetes mellitus, pois fornece informao importante

para a monitorizao teraputica durante o tratamento desta patologia. O tratamentoda doena a longo prazo mostra a importncia do controlo dos nveis sanguneos de

glicose na preveno das complicaes agudas da cetose e da hiperglicmia. A

hemoglobina ao ser analisada cromatograficamente mostra ser fracionada em

HbA1a, HbA1b e HbA1c, sendo esta ltima a mais abundante. O processo de

converso de hemoglobina A em hemoglobina A1c depende da concentrao

sangunea da glicose. Dado que o tempo de vida mdia de um eritrcito de 120

dias, a determinao da hemoglobina A1c pode refletir a concentrao sanguneamdia diria de glicose ao longo dos dois meses e fornece indicao muito mais

fivel do controlo da glicmia que as determinaes de glicose no sangue ou na

urina. Nveis elevados de HbA1c indicam a necessidade de um tratamento mais

agressivo da glicmia (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- ficha de

informao qumica, 2010).

Amostra:Sangue total (colhida em tubos com EDTA)

Metodologia:1ml de reagente hemolisante adicionado a 25 ul de sangue total. De

seguida, calcula-se a % de HbA1c no Syncron CX4. O reagente de HbA1c

utilizado para determinar a concentrao total de hemoglobina por colorimetria. O

sistema SYNCRON CX distribui automaticamente a amostra e os volumes de

reagente apropriados na cuvete. monitorizada a variao da absorvncia a 410

nanmetros. A variao de absorvncia diretamente proporcional concentrao

total de hemoglobina na amostra e utilizada pelo Sistema para calcular e exprimir a

concentrao de hemoglobina total.

O reagente A1c utilizado para medir a concentrao de HbA1c atravs de um

mtodo de imunoinibio turbidimtrica. Durante a reao os anticorpos da

hemoglobina A1c combinam-se com a hemoglobina A1c da amostra para formarem

complexos antignio-anticorpo solveis.

Valores de referncia:4,6%- 6,2%


34/82

Bioqumica


2.2 Lpidos

2.2.1 Colesterol Total

O colesterol sintetizado de modo permanente em todo o organismo e um

componente essencial das membranas celulares e lipoprotenas. Endogenamente

sintetizado pelo fgado e outros tecidos, sendo uma pequena parte derivado da

dieta. igualmente, um percursor da sntese de hormonas esterides, dos cidos

biliares e da vitamina D.

Clinicamente: As determinaes de colesterol so utilizadas no diagnstico e

tratamento de doenas aterosclerticas das artrias coronrias. As determinaesde colesterol so tambm utilizadas no diagnstico de doenas metablicas que

envolvem lpidos e lipoprotenas. As concentraes totais de colesterol srico

dependem de muitos fatores como a idade, sexo, dieta, atividade fsica, doenas

hepticas e outras doenas metablicas (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON

CX- ficha de informao qumica, 2010).

Amostra:Soro humano, em jejum.

Metodologia:O reagente CHOL usado para medir a concentrao de colesterol

atravs de um mtodo de ponto final de tempo fixo. Na reao, a colesterol esterase

(CE) hidrolisa steres de colesterol a colesterol livre e cidos gordos. O colesterol

livre oxidado a colestenona-3 e perxido de hidrognio pela colesterol oxidase

(CO). A peroxidase catalisa a reao do perxido de hidrognio com a 4-

aminoantipirina (4-AAP) e fenol, para produzir um produto corado de quinona-imina.

Ter em ateno as interferncias tais como:A hemlise e a hiperbilirrubinmia.

Valores de referncia: (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- ficha de

informao qumica, 2010).

a) Baixo risco: 240 mg/dL


35/82

Bioqumica


2.2.2 Colesterol-HDL

O HDL o responsvel pelo transporte do colesterol dos tecidos perifricos para o

fgado, considerado um protetor cardiovascular. Assim, dentro do intervalo de

referncia, os valores elevados so considerados benficos para o organismo.

A determinao dos nveis sricos de colesterol HDL constitui um valioso parmetro

para a identificao de doentes de alto risco de doena cardaca coronria. Tudo isto

dependente das diversas classes destas lipoprotenas: quilomicrons, VLDL, LDL e

HDL.

Clinicamente: O colesterol HDL est inversamente relacionado com o risco deaparecimento de doenas das artrias coronrias. Uma baixa relao colesterol

HDL/LDL est diretamente relacionada com o risco de aparecimento de doenas das

artrias coronrias. Um nvel elevado de colesterol HDL est associado ao sndrome

da longevidade (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- ficha de informao

qumica, 2010).

Metodologia: um ensaio homogneo que no requer quaisquer passos off-line depr-tratamento ou centrifugao. O mtodo depende de um nico detergente que

solubiliza apenas as partculas de lipoprotenas-HDL e liberta colesterol-HDL, o qual

reage com a colesterol esterase e a colesterol oxidase na presena de substncias

cromognicas, produzindo um produto corado. O mesmo detergente inibe tambm a

reao das enzimas de colesterol com as lipoprotenas- LDL, VLDL e quilomicrons.

Um polianio contido no reagente aumenta a seletividade para o ensaio de

colesterol-HDL complexando as lipoprotenas-LDL, VLDL e quilomicrons.

Amostra e valores de referncia:Soro/plasma

Baixo risco cardiovascular > ou igual a 60 mg/dl

Elevado risco cardiovascular < 40 mg/dl


36/82

Bioqumica


2.2.3 Colesterol-LDL

As lipoprotenas de baixa densidade so os principais transportadores de steres de

colesterol do fgado aos tecidos perifricos. As LDL so conhecidas como o mau

colesterol, pois esto implicadas na formao das placas de aterosclerose econsequente doena cardiovascular. Esta determinao feita atravs da frmula

de Friedwald: = (

+ ),

utilizada sempre que o valor de triglicridos no ultrapassar os 400 mg/dl, para se

obter um resultado vlido. O colesterol VLDL corresponde a um quinto da

concentrao de triglicridos (Tietz, 2009).

2.2.4 Triglicridos

Na alimentao humana, os triglicridos so os steres de glicerol com uma maior

prevalncia, constituindo 95% de reservas tecidulares lipdicas. Aps a absoro no

intestino, os triglicridos so ressintetizados nas clulas epiteliais intestinais e

combinados com colesterol e apolipoproteina B formam quilomicrons.

O ensaio de cor enzimtico para a determinao quantitativa de triglicridos feito

no soro e plasma humanos.

Clinicamente: A avaliao dos triglicerdeos deve ser feita em conjunto com o

colesterol e as outras lipoprotenas, pois a integrao de todos estes parmetros

que se torna importante no diagnstico, tratamento e preveno de doenas

cardiovasculares.

Existem ainda doenas genticas, como a hipertrigliceridmia familiar, em que os

triglicerdeos chegam a atingir 10x o seu valor normal, e que, por isso, devem ser

monitorizados frequentemente.

A determinao de triglicridos so utilizadas no diagnstico e tratamento de

doentes com diabetes mellitus, nefrose, obstruo heptica e de outras doenas


37/82

Bioqumica


relacionadas com o metabolismo dos lpidos, bem como de diversas patologias

endcrinas.

Metodologia: O reagente para triglicridos GPO utilizado para determinar a

concentrao de triglicridos atravs de um mtodo de ponto final de tempo fixo. Ostriglicridos presentes na amostra so hidrolisados a glicerol e cidos gordos livres

por ao da lipase. Uma sequncia de trs passos enzimticos acoplados que

utilizam glicerol cinase (GK), glicerolfosfato oxidase (GPO) e peroxidase de rbano

(HPO) causa o acoplamento oxidativo do cido 3,5-dicloro-2-

hidroxibenzenossulfnico (DHBS) com a 4-aminoantipirina para formar um produto

corado de quinonaimina.

Valores de referncia (Risco cardiovascular):

a) Normal 500 mg/dl

2.3 Compostos Nitrogenados Proteicos

2.3.1 Protenas Totais

Clinicamente: O doseamento das protenas totais utilizado no diagnstico e no

tratamento de diversas doenas que envolvem o fgado, os rins ou a medula ssea,

bem como perturbaes sseas e nutricionais.

As protenas totais so tambm doseadas e aparecem aumentadas, diminudas ou

normais consoante a patologia em causa. Podemos ter sndromas nefrticos,

infees agudas, cirroses hepticas, gamopatias, anemia por deficincia de ferro,

entre outras. As protenas totais no soro aparecem diminudas em relao urina

onde surgem sempre mais aumentadas.

Amostra:Soro


38/82

Bioqumica


Metodologia: Qumico baseado na reao do biureto. O reagente TP utilizado

para medir a concentrao de protena total atravs de um mtodo de biureto de

ponto final temporizado. Durante a reao, as ligaes peptdicas na amostra de

protena ligam-se aos ies cpricos num meio alcalino para formar complexos de

pptidos/cobre coloridos.


Adultos: 6,4 a 8,3 g/dL

2.3.2 Protena C Reativa (PCR)

A PCR uma glicoprotena produzida durante a inflamao aguda ou a destruio

dos tecidos. uma das protenas de fase aguda, produzida pelo fgado, que

aumenta significativamente em resposta a estmulos inflamatrios. utilizada como

auxiliar de diagnstico, controlo teraputico e acompanhamento de diversas

patologias, uma vez que dos mais sensveis e precoces indicadores de processos

inflamatrios resultantes de infees, carcinomas e necrose de tecidos.

A deteo de nveis de PCR muito mais baixos pode indicar um risco acrescido de

doena coronria em doentes assintomticos.

Clinicamente: As determinaes da protena-C-reativa tm utilidade na avaliao

clnica dos estados de stress, traumatismo, infees, inflamaes e intervenes

cirrgicas.

Amostra:Soro

Metodologia: S reagente de CRP utilizado para determinar a concentrao de

protena-c-reativa por turbidimetria. Durante a reao a protena-c-reativa combina-

se com um anticorpo especfico para formar complexos insolveis de antignio-

anticorpo.

Valores de referncia: < 1,0 mg/dL


39/82

Bioqumica


2.3.3 Albumina Srica

Esta a protena principal do soro em pessoas normais. Nveis muito elevados da

albumina resultam da desidratao, enquanto que nveis mais baixos desta protena

ocorrem em diversas patologias como doena renal, heptica, m absoro,desnutrio, queimaduras graves, infees e cancro.

Clinicamente: As determinaes de albumina so utilizadas no tratamento de

muitas doenas que afetam sobretudo os rins e/ou o fgado.

Metodologia:O reagente ALB utilizado para medir a concentrao de albumina

atravs de um mtodo de ponto final temporizado. Durante a reao, a albuminacombina-se com o bromocresol prpura (BCP) para formar o produto final.

Amostra: Soro

Intervalos de referncia:3,5- 5,0 g/dL

2.3.4 Microalbuminria

O rim o primeiro rgo em falncia, ento esta prova de grande importncia visto

que vai dosear pequenas quantidades de albumina no rim, que passa a mais do que

devia. uma anlise feita na urina, extremamente sensvel, dando por isso um bom

diagnstico. A microalbuminria, assim, definida como um aumento da excreo

urinria de albumina acima do valor de referncia para indivduos no diabticos,mas no detetvel noutros testes para a determinao de protena urinria. A

microalbuminria agora considerada um importante fator indicador do declnio da

funo renal em utentes/clientes diabticos. Ento, clinicamente um excelente

auxiliar no diagnstico de disfunes renais.

Amostra: Colheita de urina das 24h

Metodologia: O reagente de MA utilizado para determinar a concentrao de

albumina por turbidimetria. Durante a reao a albumina combina-se com um


40/82

Bioqumica


anticorpo especfico para formar complexos insolveis de antignio-anticorpo.

(Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- ficha de informao qumica, 2010).

Valores de referncia: Os nveis normais de albumina, microalbuminria e

macroalbuminria so, respetivamente de: 300mg/24h.

2.4 Compostos Nitrogenados No Proteicos

2.4.1 cido rico

O cido rico o produto principal do catabolismo de purinas no ser humano, e

formado a partir da xantina sob a ao da xantina-oxidase. A maior parte da

formao do cido rico ocorre no fgado e eliminado atravs dos rins. A reserva

de cido rico no organismo determinada pela diferena entre a sntese e a

eliminao.

A Gota uma patologia com origem na hiperuricemia, podendo esta ltima estarrelacionada para alm da gota com casos de leucemia, disfuno renal, diabetes,

hipotiroidismo e algumas doenas genticas. Nveis baixos de cido rico so

observados na Doena de Wilson.

Amostras:Soro e urina; na urina usar a urina de 24h.

Metodologia:O reagente de URIC utilizado para determinar a concentrao decido rico atravs de um mtodo de ponto final de tempo fixo. O cido rico

oxidado pela uricase, produzindo a alantona e perxido de hidrognio. O perxido

de hidrognio reage com a 4-aminoantipirina (4-AAP) e o 3,5-dicloro-2-

hidroxibenzenossulfonato (DCHBS), numa reao catalisada pela peroxidase,

produzindo um produto corado. (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- ficha

de informao qumica, 2010).


Soro/ Plasma- 2,6 a 7,2 mg/dL


41/82

Bioqumica


Urina- 250-750 mg/24h

2.4.2 Ureia

A ureia o produto metablico nitrogenado existente em maior quantidade no

organismo, proveniente do catabolismo proteico. A biossntese da ureia a partir da

amnia derivada de aminocidos feita exclusivamente a nvel heptico no ciclo da

ureia. A ureia quando apresenta pequenos aumentos no tem grande significado a

nvel renal, mas se se apresentar valores aumentados pode tratar-se de trs tipos de

causa: pr renais, renais e ps renais. Quanto s primeiras, relacionadas com uma

deficincia na perfuso renal, uma vez que ocorre a diminuio do fluxo de urinacom um aumento da reabsoro tubular. Tambm se observa um aumento dos

nveis plasmticos de ureia quando h ingesto de dietas ricas em protenas ou,

como resultado do aumento do catabolismo proteico devido, por exemplo, a

traumatismos. As causas renais onde h insuficincia renal aguda ou crnica com

diminuio da filtrao glomerular. H um aumento dos nveis plasmticos de ureia

at estes igualarem a quantidade excretada na urina, ou continuam a aumentar

quando h uma insuficincia renal completa. Referindo-me agora s causas psrenais ocorrem quando h uma obstruo do fluxo de urina que pode acontecer a

diferentes nveis (urter, bexiga ou uretra) e devido a vrias causas (ex.: pedras no

rim, prostatites, cancro geniturinrio). Contrariamente, os nveis de ureia podem

estar diminudos na hepatopatia grave e, por vezes, no final da gravidez.

Clinicamente: As determinaes de azoto ureico/cido rico so utilizadas no

diagnstico e tratamento de certas doenas renais e metablicas.

Amostra:Soro ou urina; urina preferencialmente das 24h (Tietz NW, 1995)

Metodologia:O reagente de UREA utilizado para medir a concentrao de azoto

ureico atravs de um mtodo de cintica enzimtica. Durante a reao, a ureia

hidrolisada pela urease a amonaco e dixido de carbono. A glutamato

desidrogenase (GLDH) catalisa a condensao de amonaco e de alfa-cetoglutarato

a glutamato, com a concominante oxidao da forma reduzida do dinucletido de

beta-nicotinamida adenina (NADP) a dinucletido de beta- nicotinamida adenina


42/82

Bioqumica


(NAD). (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- ficha de informao qumica,

2010).


Soro: 15-38 mg/dLUrina: 26-43 g/24h

2.4.3 Creatinina e Clearance da Creatinina

A creatinina est presente em quase todos os fluidos corporais e filtrada livremente

pelo glomrulo. Posteriormente, no sofre reabsoro pelos tbulos renais e sofreuma pequena, mas significativa, secreo tubular. Este fato faz com que a creatinina

seja um analito de eleio para a avaliao da taxa de filtrao glomerular (TFG) e

da funo renal.

Amostras:Soro e urina

Metodologia: Cintico colorimtrico- Jaffe modificado. Num pH alcalino, a creatininareage com o picrato e forma o complexo creatinina-picrato. A taxa de aumento da

absorvncia a 500 nanmetros em consequncia da formao deste complexo

corado. diretamente proporcional concentrao de creatinina presente na

amostra.


Soro: Homens: 0,7 - 1,3 mg/dL

Mulheres: 0,5 1,0 mg/dL

Urina: Homens: 21 26 mg/Kg peso/24h

Mulheres: 16 22mg/Kg peso/24h

A creatinina no soro varia em funo da idade, peso corporal e sexo do individuo.

Por vezes baixa em indivduos com massa muscular relativamente reduzida,

doentes caquticos, amputados e em pessoas de idade avanada. Um nvel de

creatinina no soro que seria considerado normal no exclui a presena de um

quadro de insuficincia renal.


43/82

Bioqumica


A Clearance da Creatinina o marcador mais preciso da TFG e o mtodo mais

sensvel para a deteo de disfuno renal do que o doseamento da creatinina

plasmtica. Esta prova, tem os mesmos interferentes do doseamento plasmtico,

mas so mais reduzidos ou anulados, uma vez que a recolha da urina feita em 24

horas. A depurao ou clearance da creatinina tem sido considerada uma dasprovas mais sensveis disponveis para indicar a presena de insuficincia renal,

devido rpida queda dos seus valores. Uma diminuio do seu valor abaixo dos

valores de referncia ser indicativo de uma diminuio da TFG e consequentes

leses renais.

Valores abaixo de 10 ml/min indicam a necessidade de dilise.

Clearance da creatinina=(/)/

(/)x Volume urina de 24h (ml)/1440

(min)


Homens: 97 137 mL/minuto/1,73m2

Mulheres: 88 128 mL/minuto/1,73m2

2.5 Enzimas

2.5.1 AST /GOT

A Aspartato Aminotransferase srica uma enzima encontrada em vrios rgos etecidos, incluindo o fgado, o corao, o msculo-esqueltico e os eritrcitos.

Clinicamente:No diagnstico e tratamento de certos tipos de doenas hepticas e

cardacos.

Amostra:Soro

Metodologia: O reagente AST utilizado para medir a atividade do aspartato

aminotransferase atravs de um mtodo de classificao enzimtico. Durante a


44/82

Bioqumica


reao, o aspartato aminotransferase catalisa a transaminao reversvel do L-

aspartato e alfa-cetoglutarato em oxaloacetato e L-glutamato. O oxaloacetato

ento reduzido a malato na presena de malato desidrogenase (MDH) com a

oxidao simultnea de beta-nicotinamida adenina dinucleotdeo (NADH) reduzido

em beta-nicotinamida adenina dinucleotdeo (NAD). (Beckman Coulter, SistemasSYNCRON CX- ficha de informao qumica, 2010).

Valores de referncia:10-42 Ul/L

2.5.2 ALT /GPT

A Alanina Aminotransferase srica uma enzima encontrada predominantemente no

fgado, porm com quantidades moderadas no rim e pequenas quantidades nocorao e no msculo-esqueltico. Em, geral, a maior parte do aumento da ALT

deve-se presena de uma doena heptica, embora a ocorrncia de graus

significativos de leso tecidular nos outros rgos mencionados tambm possa

afetar os nveis sricos. Na maioria das vezes a ALT tem maior atividade que a AST,

mas h excees a referir: como a hepatite alcolica; a cirrose heptica; o cancro

heptico. Nas hepatites virais e outras formas de necrose heptica, os valores

destas enzimas elevam se antes dos sinais clnicos e do aparecimento de sintomas.A atividade das enzimas pode ser bastante elevada, chegando a alcanar valores de

100 vezes maiores ou mais que o referido valor de referncia. Quando a persistncia

da ALT se prolonga por mais de 6 meses aps um episdio de hepatite aguda

usada para diagnosticar uma hepatite crnica. Na colestase extra-heptica, a

concentrao de transaminases elevada, sendo maior do que a obstruo crnica

(Tietz analytes, 2009). Na cirrose, a concentrao varia consoante o estado do

processo e, pode atingir um mximo de 45 vezes o limite mximo de referncia, com

um ratio AST/ALT superior a 1. Este ratio pode refletir o grau de fibrose nestes

pacientes.

No cancro heptico, aumentam as duas enzimas sendo a AST mais elevada do que

a ALT. Podem ser encontradas ligeiras alteraes nos valores das enzimas

concomitantes com a administrao de medicamentos.

A ALT uma enzima mais especfica do fgado, pelo que os seus valores elevados

so geralmente observados em doenas hepticas parenquimatosas. No caso de


45/82

Bioqumica


uma elevao isolada da AST, podemos estar perante um enfarte do miocrdio, pois

esta enzima tem uma concentrao elevada no msculo cardaco. No entanto,

tambm pode aparecer em distrofias musculares e dermatomiosite. Nas patologias

do msculo-esqueltico estriado, a CK tambm est aumentada.

Amostra: Soro (os eritrcitos tm aproximadamente 3 a 5 vezes mais ALT do que o

soro. Portanto a hemlise no soro pode aumentar os resultados do teste).

Metologia: O reagente de ALT utilizado para determinar a atividade do analito

atravs de um mtodo cintico. Durante a reao, a alanina aminotransferase

catalisa a transaminao reversvel da L-alanina e do alfa cetoglutarato a piruvato e

L-glutamato. Em seguida, o piruvato reduzido a latato na presena de laCtatodesidrogenase (LDH), com a correspondente oxidao do dinucletido de beta-

nicotinamida adenina reduzido (NADH) a dinucletido de beta-nicotinamida adenina

(NAD).


2.5.3 Fosfatase Alcalina (ALP)

A fosfatase alcalina constituda por um grupo de enzimas estritamente

relacionadas e com atividade mxima em pH 10. A atividade da ALP est presente

na maioria dos rgos e est associada a membranas e superfcies celulares

localizadas na mucosa do intestino delgado e tbulos contornados proximais do rim,

ossos (osteoblastos), fgado e placenta.

Clinicamente:As determinaes de fosfatase alcalina so utilizadas no diagnstico

e tratamento de doenas hepticas, sseas, da paratiride e intestinais.

O doseamento da ALP tem um interesse particular na investigao de duas

patologias: a doena hepatobiliar e a doena ssea associada a aumento de

atividade de osteoblastos. Quanto doena hepatobiliar, esta enzima mostra-se

especialmente sensvel obstruo do trato biliar, de carter intra- ou extra-

heptica. O seu aumento reflete o grau de obstruo e o nvel de tecido biliar


46/82

Bioqumica


afetado. O aumento do resultado tende a ser maior no caso de obstruo extra-

heptica (pedras na vescula ou cancro da cabea do pncreas) do que na intra-

heptica. Uma elevao de valores semelhante ao anterior pode surgir no cancro

heptico avanado ou em metstases hepticas. Leses parenquimatosas, como na

hepatite infeciosa, refletem apenas um ligeiro aumento de resultados ou, resultadosnormais. No segundo caso, a doena ssea, podemos estar perante um tumor

metastizante com reao osteoblstica ou a Doena de Paget. Esta enzima tambm

apresenta aumentos de atividade nalgumas situaes fisiolgicas como o

crescimento e a gravidez (Tietz, 2009).

Amostra:Soro

Metodologia: O reagente de ALP utilizado para determinar a atividade da

fosfatase alcalina por um mtodo cintico utilizando um tampo de 2-amino-2-metil-

1-propanol (AMP). Durante a reao, a fosfatase alcalina catalisa a hidrlise do

substrato incolor de ster orgnico fosfatado,p-nitrofenilfosfato, para dar o produto

corado amarelo, p-nitrofenol e fosfato. (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX-

ficha de informao qumica, 2010).


2.5.4 Gama-glutamil transferase (-GT)

A Gama GT pertence a um grupo de peptidases que catalisam a transferncia de

aminocidos de um pptido para outro atuando, assim, como transferases de aa. A

GT existe em todas as clulas do organismo, exceto nos msculos. A enzima

existente no soro parece ter essencialmente origem no sistema hepatobiliar. O

aumento da atividade de GGT parece ser um marcador sensvel de doena

hepatobiliar. Tal como a ALP, a GGT apresenta valores bastante elevados quando

est na presena de uma obstruo intra ou ps-heptica. O seu aumento aparece

em doentes com hepatite infeciosa, fgado gordo e com a toma de frmacos

anticonvulsivos. Em doentes com cirrose alcolica e na maioria dos doentes que

consomem grandes quantidades de lcool, a GGT encontra se elevada,

desempenhando um papel importante na deteo do alcoolismo e monitorizao de


47/82

Bioqumica


patologias. Ao contrrio da ALP, a GGT no est aumentada em situaes

patolgicas de carter sseo. No enfarte do miocrdio, esta enzima apresenta-se

normal. No entanto, um aumento pode ocorrer ao fim do 4 dia e implica

normalmente leso heptica secundria (Abbot Diagnostics, 2009).

Clinicamente: As determinaes de y- glutamil transferase so utilizadas no

diagnstico e tratamento de doenas hepticas como a cirrose alcolica e tumores

primrios e secundrios do fgado.

Amostra:Soro.

Metodologia:O reagente de GGT utilizado para determinar a atividade da GGTatravs de um mtodo de cintica enzimtica. Na reao, a y-glutamil transferase

catalisa a transferncia de um grupo gama-glutamilo do substrato incolor, a g-

glutamil-p-nitroanilina, para o aceitador, a glicilglicina, com produo de um produto

corado, a p-nitroanilina.


2.5.5 Creatina Cinase (CK)

A CK um dmero composto por subunidades M-msculo e/ou B-crebro que se

associam para formar as isoenzimas CK-MM, CKMB e CK-BB. Estes catalisam a

fosforilao reversvel da creatina por ATP. A atividade da CK maior no msculo

estriado e no corao, apresentando uma atividade menor nos outros tecidos, comoo crebro, trato GI e bexiga. O valor srico da CK est muito aumentado em todos

os tipos de distrofia muscular (ex.: Poliomiosite). A atividade da CK aumenta aps

danos no miocrdio, com aumento significativo das fraes MM e MB. No

diagnstico de enfarte agudo do miocrdio, faz se a anlise desta enzima com a

Troponina I, Troponina T, CK-MB, GOT,LDH e mioglobina. Na rotina a CK muito

pedida, uma vez, que os doentes diabticos tomam muita civastatina que altera o

msculo. A CK juntamente com as transaminases determina a toma deste

medicamento.


48/82

Bioqumica


Clinicamente:As determinaes de CK e das respetivas isoenzimas so utilizadas

no diagnstico e tratamento do enfarte do miocrdio e de doenas musculares como

a distrofia muscular progressiva do tipo de distrofia de Duchenne.

Amostra: Soro; as amostras que apresentam um nvel moderado a elevado dehemlise podem afetar o ensaio da CK.

Metodologia: O reagente de CK utilizado para determinar a atividade de CK

atravs deum mtodo de cintica enzimtica. Na reao, a creatina cinase catalisa a

transferncia de um grupo fosfato do substrato creatina fosfato para o difosfato de

adenosina (ADP). A formao subsequente de trifosfato de adenosina (ATP)

medida atravs da utilizao de duas reaes acopladas, catalisadas porhexocinase (HK) e pela glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), com a

consequente produo de dinucletido de beta- nicotinamida adenina reduzido

(NADH) a partir de dinucletido de beta- nicotinamida adenina (NAD). O ensaio de

CK contm o ativador monotioglicerol. (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX-



a) Indivduo do sexo masculino 38-174 Ul/L

b) Indivduo do sexo feminino 26-140 Ul/L

2.5.6 LDH (Lactato Desidrogenase)

A LDH do soro consiste na atividade de 5 isoenzimas, LDH-1 a LDH-5, e encontra sedistribuda por todo o corpo da ser relevante no diagnstico do enfarte do miocrdio,

da anemia hemoltica, etc. O papel principal do LDH total consiste na deteo de

leses reduzidas no tecido. A LDH aparece elevada em hepatites, nefrites

glomerulares, embolismo pulmonar, doenas musculares e em muitas leucemias e

linfomas.

Como a LDH um marcador no especfico usado em combinao com outros

marcadores em diagnsticos e na gesto dos doentes.


49/82

Bioqumica


Clinicamente: As determinaes de lactato desidrogenase so utilizadas no

diagnstico e tratamento de doenas hepticas, tais como a hepatite viral aguda, a

cirrose e o carcinoma heptico metastizado, de doenas cardacas como o enfarte

do miocrdio e de tumores dos pulmes ou dos rins.

Amostra:Soro

Metodologia:O reagente de LDH utilizado para determinar a atividade dalactato

desidrogenase atravs de um mtodo enzimtico cintico. Durante a reao o LDH

catalisa a reduo reversvel de piruvato a L-lactato, com a correspondente oxidao

do dinucletido de beta- nicotinamida adenina reduzido (NADH) a dinucletido de

beta-nicotinamida adenina (NAD). (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX- fichade informao qumica, 2010).

Intervalo de referncia:266-500 Ul/L

2.5.7 Amilase

A amilase uma enzima da classe das hidrolases que catalisa a hidrlise de ligao

1,4-glucosdicas em polissacridos. Esta enzima encontra-se num grande nmero

de tecidos e rgos. A maior concentrao nas glndulas salivares (tipo-S), e no

pncreas (tipo-P) produzida pelas clulas acinares. (Tietz, 2009)

A amilase srica normalmente baixa, aumentando drasticamente: na pancreatite

aguda primria ou pancreatite crnica recidivantes, colecistite, litase, tumor, lcera

gastroduodenal, peritonite, entre outros.

A amilase urinria pode ser til na confirmao de valores sricos, ou quando os

valores esto normais. Em geral, a amilasria aumenta 24 horas aps a amilase

srica e, permanece alterada durante 7- 10 dias, aps a normalizao dos valores

sricos. A amilase srica rapidamente eliminada pelos rins, pelo que as doenas

que afetam o pncreas fazem aumentar os nveis urinrios da enzima. A amilasria

sensvel para a doena heptica, mas no especfica. Para maior informao


50/82

Bioqumica


deve-se comparar a razo amilasria/clearance da creatinina. Uma razo superior a

5% indica uma pancreatite e uma inferior aponta para outras causas.(Tietz, 2009).

Amostras: Soro e urina; na urina conservar amostras aleatrias ou de 24h sem

adio de conservantes.

Metodologia: Substrato de CNPG3.

A alfa-amilase hidrolisa o 2-cloro-4-nitrofenil-alfa-D-maltotriosido (CNPG3) para

libertar o 2-cloro-4-nitrofenol (CPNP) e formar 2-cloro-4-nitrofenil-alfa-D-maltosido

(CNPG2), maltotriose e glicose. A taxa de formao de 2-cloro-4-nitrofenol pode ser

detetada por espectrofotometria a 404 nm para fornecer uma quantificao direta daatividade da alfa-amilase na amostra. (Beckman Coulter, Sistemas SYNCRON CX-



Soro/Plasma: 28 100 U/L

Urina Amostras de 24h: 1 a 17 U/hora

Nota: cada laboratrio deve estabelecer o seu prprio intervalo de referncia com

base nas caractersticas locais e populacionais.

2.6 Bilirrubinas

2.6.1 Bilirrubina Total

A bilirrubina um pigmento amarelo-alaranjado derivado da destruio eritrocitria,

conjugado no fgado e excretado na blis e na urina. Esta molcula provm da

degradao do heme, da mioglobina e de citocromos. Esta protena insolvel no

plasma transportada ligada albumina at aos hepatcitos. A conjugada com o

cido glucornico tornando-a hidrossolvel. A sua libertao posterior no intestino

serve para saponificar as gorduras. A bilirrubina total a soma das fraces

conjugadas e no conjugadas.


51/82

Bioqumica


Clinicamente: As determinaes de bilirrubina so utilizadas no diagnstico e

tratamento de doenas hepticas hemolticas, hematolgicas e metablicas,

incluindo hepatite e bloqueio da vescula biliar.

O seu doseamento tem interesse no estudo de doentes ictricos em que estassociada uma hiperbilirrubinmia. Este aumento de bilirrubina pode ocorrer por

causas pr-hepticas que existem quando h uma produo exagerada de

bilirrubina que se traduz por um aumento da sua forma no conjugada. uma

alterao que est presente em todas as formas de anemias hemolticas. A

Hiperbilirrubinmia hepatocelular surge em vrias situaes, nomeadamente, com

um uptake heptico anormal de bilirrubina (ex.: Sndroma de Gilbert, hepatite ou

cirrose), com uma conjugao de bilirrubina ineficiente (ex.: Recm-nascidosprematuros, Sndroma de Gilbert e de Crigler-Najjar), uma secreo anormal de

bilirrubina na blis (ex.: Sndromas de Rotor e Dubin-Johnson, leso hepatocelular

generalizada). Todas estas situaes traduzem um aumento das duas formas

(conjugada e no conjugada) de bilirrubina. Quanto Hiperbilirrubinmia colesttica:

a obstruo do fluxo da blis tanto pode ser intra como extra-heptica e, ambas,

traduzem-se num aumento da forma conjugada de bilirrubina.

Amostra: Soro; amostras protegidas da luz uma vez que a bilirrubina fotolbil

Metodologia: O reagente de TBIL utilizado para determinar a concentrao de

bilirrubina total atravs de um mtodo de diazo de ponto final de tempo fixo. Na

reao, a bilirrubina reage com o reagente diazo na presena de cafena, benzoato e

acetato como aceleradores para formar azobilirrubina. (Beckman Coulter, Sistemas

SYNCRON CX- ficha de informao qumica, 2010).

Valores de referncia:0,2 a 1,0 mg/dL

2.6.2 Bilirrubina Direta

Clinicamente: As determinaes de bilirrubina direta so utilizadas no diagnstico e

tratamento de doenas hepticas, hemolticas, hematolgicas e metablicas,

incluindo hepatite e bloqueio da vescula biliar.


52/82

Bioqumica


Amostra: Soro sem hemlise ou lipmia visveis, as amostras sempre protegidas

Metodologia: O reagente de DBIL utilizado para determinar a concentrao de

bilirrubina direta atravs de um mtodo diazo de ponto final de tempo fixo. Na reao

a DBIL combina-se com a espcie diazo para formar azobilirrubina.

Valores de referncia: 0,0 a 0,2 mg/dL

2.6.3 Bilirrubina Indireta

Esta frao de bilirrubina denominada de bilirrubina indireta ou no conjugada. Nofgado conjuga-se com o cido glucurnico para formar a bilirrubina conjugada. Esta

excretada do sistema biliar para o intestino, onde metabolizada pelas batrias a

um grupo de produtos conhecidos que so os pigmentos. Uma parte reabsorvida

pela circulao enteroheptica, entra na circulao sangunea e eliminada na urina

sob a forma de urobilinognio, que d a cor caraterstica da urina.

Esta aumenta quando estamos perante situaes de hemorragia graves, na doenade Gilbert ou em hemlise acentuada.

Amostra:Soro

Metodologia:Diferena entre a bilirrubina total e a bilirrubina direta

2.7 Ies

O Spotlyte Na +/K+/Cl-faz o doseamento do sdio, do potssio e dos cloretos.


53/82

Bioqumica


FIg. 9 Spotlyte Na +/K+/Cl-

Amostra:soro e a urina. No soro, no ensaio de potssio no podem ser utilizadas

amostras hemolisadas. Na urina das 24h ou a primeira da manh, colher amostras

de 24h sem adicionar conservantes. (Burtis CA, 1999)

Muitos medicamentos e estados patolgicos causam desequilbrios eletrolticos

temporrios no organismo, uma vez que, no h quase processos metablicos queno dependam ou no sejam afetados por eletrlitos. Torna-se, portanto, necessrio

integrar na teraputica do doente um controlo frequente desses eletrlitos.

Metodologia:O aparelho tem trs eltrodos com afinidade para os referidos ies. O

potencial de cada eltrodo medido em relao a uma voltagem fixa de um eltrodo

de referncia (eltrodo de prata). Cada eltrodo desenvolve uma voltagem que varia

com a concentrao do io correspondente. A relao entre as voltagensdesenvolvidas e as concentraes dos ies determinada por uma frmula j

existente em memria, no aparelho. desenvolvido um potencial eltrico de acordo

com a Equao de Nernst para um io especfico. Quando comparado com uma

referncia interna, este potencial eltrico convertido em voltagem e seguidamente

na concentrao de ies da amostra. Em alternativa a este mtodo temos a

Fotometria de Chama.


54/82

Bioqumica


2.7.1 Sdio

a) Sdio Srico

o principal catio extracelular, pois dele depende o fluido extracelular. Adiminuio de sdio pode ser devida utilizao de diurticos, mas est

frequentemente associado a situaes de desidratao extrema. Fora dos valores

normais podemos ter uma hiponatrmia ou hipernatrmia. Na hiponatrmia pode

haver uma depleo de sdio e gua, por dfice, uma perda metablica. Temos

tambm o caso da hiponatrmia dilucional em que ocorre um excesso de gua, uma

hipoalbuminmia, cirrose, sndrome nefrtico, insuficincia renal aguda com oligria.

Existe tambm a possibilidade de ocorrncia de SIADH Sndrome de secreo

inapropriada de hormona antidiurtica; perda Intracelular, uma falsa hiponatrmia,

triglicridos altos, proteinmia alta e uma glicmia alta grave tambm so

hipteses.

No que concerne hipernatrmia, a principal causa a a desidratao, que pode ter

como causa: a ingesto insuficiente de gua, um dbito renal excessivo de gua(ex.: Diabetes Inspida), um dbito excessivo de gua pela pele, um dbito excessivo

do trato GI, uma sobredosagem de sdio ou uma alimentao com alto teor de

sdio.

b) Sdio Urinrio

A sua determinao na urina feita para explorar as causas de hiponatrmia.

Normalmente o rim tenta conservar o sdio, de modo que a sua excreo baixa

(


55/82

Bioqumica


2.7.2 Potssio

a) Potssio srico

Este o catio mais abundante logo a seguir ao sdio e o mais importanteintracelularmente na regulao da excitabilidade neuromuscular, contrao cardaca,

no volume de fluido intracelular e na concentrao de H+. A sua determinao

muito importante nalguns tipos de patolologias. A alterao da homeostase do

potssio trs srias consequncias a vrios nveis: cardaco e cerebral. Os

medicamentos diurticos (hipotensores) diminuem os nveis de potssio e o potssio

no convm estar abaixo de 3mEq (hipocalimia), porque provoca problemas a nvel

cerebral. Por outro lado, nvel acima de 6mEq (hipercalimia) faz com que umapessoa entre em falncia cardaca podendo inclusivamente levar morte. Os

grandes edemas aumentam o potssio no plasma eliminando, consequentemente, o

lquido presente nos edemas. (Tietz, 2009).

b) Potssio urinrio

Se o K

+

urinrio for menor que 25 mmol/dia estamos perante uma perda extra-renalcomo: diarreia, fstula, sudorese excessiva, aporte insuficiente de potssio na dieta.

Se o K+urinrio exceder os 25 mmol/dia h uma acidose metablica (acidose tubular

tipo I e II), uma necrose tubular aguda, uma toxicidade medicamentosa por

Anfotericina B, entre outros.

Com o aumento da concentrao de potssio tais como suplementos de K+,

transfuso sangunea, hemlise, necrose tecidular e doses elevadas de penicilina

surge a oligria.

Um fator a ter em conta que o doseamento de potssio que as amostras

levemente hemolisadas conduzem geralmente a grandes alteraes nos valores

sricos de potssio, j que este altamente afetado pela hemlise.


56/82

Bioqumica


2.7.3 Cloretos

O cloro o principal anio extracelular e intervm, entre outras funes na

manuteno da presso osmtica. Geralmente, os valores do cloro acompanham os

do io sdio. A determinao do cloro importante como diagnstico diferencial dedesequilbrios eletrolticos. Quanto maiores as concentraes de Na+e Cl-no soro

maior a influncia na tenso arterial. Quando estamos perante uma hipoclormia

quando temos uma acidose metablica (falha renal e cetoacidose diabtica), vmitos

e secreo gstrica persistente (alcalose metablica), diurticos e SIADH. O cloro

aparece diminudo no soro em vrias doenas renais, como por exemplo nas nefrites

e pielonefrites crnicas, em que h perda de sais.

Em situaes de hiperclormia temos um quadro de desidratao, acidose tubular

renal, insuficincia renal aguda, acidose metablica (diarreia prolongada e perda de

bicarbonato), hiperfuno adrenocortical, hipomagnesmia, alcalose metablica.


Soro: a) Sdio 136-145 mmol/l

b) Potssio 3.5-5.1 mmol/lc) Cloretos 98-107 mmol/l

Urina: a) Sdio 40-220 mmol/dia

b) Potssio 25-125 mmol/dia

c) Cloretos 110-250 mmol/dia

No Syncron Cx4medem-se os restantes ies:

2.7.4 Magnsio

O magnsio, catio intracelular, tem um papel extremamente importante no

metabolismo celular, participando ativamente em mecanismos como a fosforilao

Relatório de Estágio Do Mestrado de Anãlises Clínicas.

Documents

Transcript of Relatório de Estágio Do Mestrado de Anãlises Clínicas.