N°12 2005

♣♣ REVISTA DE BIOQUÍMICA ONLINE CIENCIA EN CHILE

• NELSON OSSES RIVERA: “En la búsqueda de nuevos mecanismos implicados en la diferenciación osteoblastica inducida por proteínas morfogenéticas (BMPs)”.

CIENCIA AL DIA

• Desarrollo de formulaciones en base a extractos de manzanilla para el control fitosanitario en la industria vitivinícola

• Equipo de investigación encuentra un encendedor dimérico en una zona proteica flexible.

• Los telomeros y la telomerasa modulan el funcionamiento de las células madres

EDICION ESPECIAL

LOS DIEZ HITOS CIENTÍFICOS DEL 2004.

…..de 1900 al 2005, del ábaco al computador y del peor alumno al mejor alumno….

Nuevos aportes a la Industria del Vino. Oncología:

Los Telómeros y la Telomerasa modulan funcionamiento de las células madres.

Genética: Equipo de investigación encuentra un encendedor dimérico en una zona proteica flexible.

Nelson Osses Rivera: Búsqueda de nuevos mecanismos en la diferenciación Osteblástica por BMPs.

Hermann Emil Fischer.

ELISA.

Las Leucemias

Nicolás Pérez: Los arcanos ámbitos infernales.

Rodrigo López “Zombie”: Saludos desde U.S.A

José Miguel Fernández “Profeta”: Sobre las prácticas.

CAA: Los antiguos y nuevos superhéroes

Microbios producen plástico.

CARTA DEL DIRECTOR

CIENCIA EN CHILE

CIENCIA AL DÍA

PIONEROS DE LA BIOQUIMICA

BIOQUIMICA PATOLOGICA

TECNICA DE UN BIOQUIMICO

TRIBUNA DEL ESTUDIANTE

HUMOR GRAFICO

PERSONAJE DEL MES

TRIBUNA DEL PROFESOR

GALERIA FOTOGRAFICA

TRIBUNA DEL TESISTA

BREVES

Células madre. La esperanza en Marte

Matricaria recutita Mecanismos de Diferenciación Osteoblastica por BMPs

Hermann Emil Fischer. Platos para ELISA

Nicolás Pérez. José Miguel Fernández

Personaje del mes. Linfoblastos en la LLA

CARTA DEL DIRECTOR …..de 1900 al 2005,

del ábaco al computador y del peor alumno al mejor alumno….

Algunos esforzados alumnos nacidos por allá en los años 1900 podrán recordar lo difícil que era estudiar tanto por los problemas sociales y por las faltas de tecnologías, sin embargo el mejor alumno destacaba por su capacidad de resolver los problemas (sin una calculadora como diríamos ahora). El mejor alumno generalmente era fácilmente reconocible ya que este destacaba por sus conocimientos y por su gran esfuerzo, era invitado por los profesores a hacer ayudantias y a trabajar de par en par con ellos ya que en esa época las capacidades humanas eran mucho mas valoradas, ya que no existían los computadores, no todo el mundo tenia acceso a vehículos, y terminar un trabajo tardaba alrededor de dos años o mas (Quizás esto es un poco exagerado porque realmente no se si en esa época la mafia era tan poderosa como lo es ahora, conceptualmente hablando). Sin embargo, con el pasar de los años los vehículos se hicieron mas masivos, la calculadora reemplazó al ábaco, se murió Albert Einstein, se descubrió lo molécula de DNA, aparecieron los primeros computadores y de a poco comenzamos a entrar en una década donde los avances tecnológicos comenzaban apoyar bastante a la ciencia. Como todo lo bueno viene acompañado de ciertos problemas esto último no se quedo atrás. Las capacidades humanos de apoco fueron desplazadas, ya que la tecnología se hizo más masiva, y el ser humano poco a poco se fue volviendo más y más flojo, debido a que las máquinas le fueron facilitando sus tareas (bueno, no a todos). Pero, como siempre hubo individuos que se rehusaron a perder sus habilidades y otros que tomaron las máquinas y las hicieron parte de ellos. El problema que este holocausto tecnológico causó en las universidades fue increíble, debido a que este nubló el mundo universitario, debido a que nadie podía decidir quien era el mejor o el peor alumno. Sin embargo, hubieron algunos docentes universitarios que se creyeron capaces de hacerlo con sus evaluaciones olvidando el hecho más importante de todos, que durante esta evolución apareció el gen-dinero, desapareció el gen-ética y de apoco se fue creando un gen bastante “vivaracho” el gen-engaño (no en todos por supuesto, y me excluyo de este último). Y surgió la pregunta ¿el mejor alumno es el de las mejores notas hoy en día, o el que tiene más gen-“vivaracho” y menos gen-ética?. En un acto de desesperación los profesores aún con la suficiente destreza para descubrir esto pusieron las cartas sobre la mesa y dijeron vamos a descubrir quien es el mejor alumno y intentaron hacerlo. El primer paso fue hacerles la prueba Teórica más difícil que tenían guardada entre sus baúles de antaño a sus alumnos, sin considerar que ya la habían hecho antes y que algunos alumnos con el gen-competencia (que por supuesto no se la prestaron a sus compañeros), el gen-flojera (obviamente se consiguieron las soluciones y se aprendieron de memoria todas las pruebas que tenían) y el gen-vivaracho (este profesor siempre hace las mismas pruebas) bastante desarrollado podrían tener la prueba. Llego el día de la prueba y los alumnos se sentaron frente a ella a resolverla, el gen-vivaracho había ganado y el mejor alumno de la clase no lo pudo superar ya que su nota no fue superior y difícilmente al ser la prueba mas difícil de todas alcanzo el 5.0, sin embargo vivaracho había sacado sobre 60 y solo por flojera no llego al 7.0. mmm dijo el profesor creo que tengo al mejor alumno aquí se ha sacado un 6.0. Un segundo profesor le preguntó a este, habías echo esa prueba en algún año anterior, si respondió este, mmm creo que tu método podría haber fallado. Entonces este profesor decidió hacer una segunda prueba esta vez con cálculos matemáticos y respuestas teóricas. Nuevamente los alumnos sentados en la sala se enfrentaron en la prueba, sin embargo vivaracho y flojera se traían algo entre manos y esta vez invitaron al gen-dinero y consiguieron una buena calculadora y colocaron toda la materia y fórmulas en ésta, y nuevamente el resultado fue similar, el alumnos vivaracho alcanzo el 6.0 y el mejor alumno de la clase llego al 55 esta vez ya que la competencia era más pareja. Un tercer profesor dijo: mmmm el factor tecnológico pudo haber ayudado bastante. Necesitamos desarrollar un método en el cual, realmente pudiésemos lograr detectar al mejor alumno….Pasaron los meses y los profesores siguen sin poder idearlo y vivaracho sigue ganando fácilmente. Flojera además, se hizo intimo amigo de los profesores (y estos inocentemente cayeron) y con esto se le facilito bastante la vida, eran vistos como los mejores, los más aptos para todo, gen-competencia estaba feliz; cuantos iban quedando entonces en el camino. Con los años apareció el gen-clasismo (en algunos docentes), y gen-estupidez en otros y cuando estos se combinaban la vida le era más fácil para vivaracho para conseguir las ayudantias, el aprecio de los profesores por sus mejores notas, pero lo que el jamás consiguió fue el gen-ética y el gen-reconocimiento por sus compañeros salvo en su propia mente, donde siempre dijo tenerlo y nadie nunca los vio.

Fin.

Carlos O. Lizama Valenzuela.

DIRECTOR CARLOS LIZAMA

EDITORES KELLY CAUTIVO CARLOS LIZAMA

REDACCION KELLY CAUTIVO CARLOS LIZAMA

REPORTEROS GRACIAS A TODAS LAS PERSONAS QUE COLABORARON Y QUE MANDARON ARTICULOS A TIEMPO PARA ESTE NÚMERO DE LA REVISTA. DISEÑO GRAFICO KELLY CAUTIVO CARLOS LIZAMA NUESTRA PORTADA

DESARROLLO DE FORMULACIONES EN BASE A EXTRACTOS DE MANZANILLA PARA EL CONTROL FITOSANITARIO EN LA INDUSTRIA VITIVINICOLA

Nuevo aporte a la industria del vino Con el objetivo de desarrollar biopesticidas en base a extractos de manzanilla, la Asociación de Empresarios Vitivinícolas de Casablanca, la empresa Anasac, la Pontificia Universidad Católica de Valparaíso y el INIA La Cruz, dieron inicio a un nuevo proyecto Fondef. La industria del vino es uno de los sectores productivos estrella de nuestro país y constituye el producto de exportación nacional con mayor expansión en los últimos años. Con tasas de crecimiento que alcanzan el 43%, concentra actualmente el 3,5% de las exportaciones nacionales y genera retornos por más de $US 600 millones. Del total producido anualmente (aprox. 230 millones de litros), más de la mitad está orientada a vinos de exportación. Estas cifras han llevado a que Chile sea actualmente el quinto mayor exportador de vino del mundo, con la segunda mayor tasa de crecimiento mundial en la década después de Australia (Bordeau & Vargas, 2002). La importancia y lo estratégico del sector, hace necesario continuas búsquedas por mejorar la producción y sus productos a fin de poder competir con los altos estándares internacionales, tanto de la competencia, como también de los públicos de destino cada día más exigentes. Parte de este esfuerzo, es el proyecto "Desarrollo de formulaciones en base a extractos de Manzanilla para el control fitosanitario en la industria vitivinícola", iniciativa que busca utilizar extractos de manzanilla en la formulación de biopesticidas que serán probados en los predios vitivinícolas de los miembros de la asociación de Casablanca.

Integrada por la Universidad Católica (Instituto de Química, Instituto de Biología, Facultad de Agronomía), el Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), ANASAC y la Asociación de Agricultores del Valle de Casablanca, esta iniciativa busca revertir los problemas que han comenzado a afectar al sector. Esta realidad ha traído como consecuencia una importante vulnerabilidad de la industria nacional ante los mercados internacionales, cada vez más exigentes en materia medioambiental, lo cual se ha traducido en una paulatina reducción en el precio de los vinos chilenos, con la consiguiente pérdida de retornos para los agentes privados y el país. Actualmente, los países desarrollados exigen que los productos que importan no dejen una carga de contaminación en el ambiente y que no dañen la salud de los trabajadores que los producen. Es así como el consumo de productos agropecuarios libres de

residuos de pesticidas ha aumentado en el mercado mundial a una tasa anual promedio del 10% en los últimos 15 años. El proyecto Considerando estas variables y la necesidad real que presenta este sector en cuanto a la incorporación de nuevas alternativas tecnológicas para

el desarrollo de una producción mas limpia, el proyecto se abocó al desarrollo de un nuevo mecanismo fitosanitario, con carácter natural, para el control de plagas (insectos, ácaros y nemátodos) y enfermedades infecciosas de importancia (hongos) que afectan a las vides de vinificación en Chile. Para ello, la iniciativa considera evaluar la efectividad de los productos desarrollados en base a extractos florales de la especie Matricaria recutita, conocida comúnmente como Manzanilla Alemana.

Los probarán sobre ácaros (falsa arañita de la vid y arañita bimaculada), insectos (Burrito, Conchuela café de la vid, Trips californiano y chanchito blanco), hongos (Botritis, Oidio de la vid y Mildú de la vid) y nemátodos (nemátodo Daga, nemátodo de las lesiones radiculares y nemátodo del nudo de las raíces). De acuerdo a sus gestores, trabajarán en base a la obtención de extractos refinados de Manzanilla, los cuales serán caracterizados química y físicamente. De esta forma, se elaborarán diferentes formulaciones en base a estos extractos, los que se someterán a bioensayos tanto a nivel de laboratorio como de campo, para así determinar sus propiedades insecticidas, acaricidas, fungicidas y nematicidas. Según el equipo de investigación los plaguicidas botánicos son una solución extremadamente acertada para enfrentar los problemas mencionados. Dentro de las principales ventajas de este tipo de plaguicidas es que usualmente son inocuos y menos dañinos que los pesticidas convencionales. Muchas veces resultan efectivos en pequeñas cantidades y frecuentemente se descomponen rápido evitándose así la cuantiosa contaminación causada por los de tipo convencional. Generalmente afectan sólo la plaga objetivo y organismos estrechamente relacionados, en contraste con los plaguicidas convencionales que pueden afectar organismos diferentes como pájaros, insectos, y mamíferos. Cuando se utilizan dentro del Manejo Integrado de Plagas, pueden disminuir el uso de plaguicidas convencionales, y en temporada de cosecha reducir la alta cantidad de residuos. Experiencia científica El equipo a cargo, dirigido por Jorge Escobar, Académico de la PUCV, ha desarrollado diversos estudios para determinar la acción pesticida de diversos extractos florales de especies vegetales aromáticas, identificando que la manzanilla

(Matricaria recutita), también conocida como Camomilla, posee un alto poder de protección, inhibición o repelencia contra ácaros y hongos. A la luz de los exitosos resultados obtenidos y la gran necesidad existente en el mercado agrícola por desarrollar nuevos productos para el control fitosanitarios no tóxicos, se ideó el proyecto para emplear las notables características de la manzanilla y desarrollar distintas formulaciones pesticidas en base a estos extractos florales para ser utilizados en el fitocontrol de diferentes plagas de importancia agrícola. El equipo es optimista a la hora de proyector los posibles resultados del proyecto, ya que no sólo se presenta como una herramienta de control fitosanitario acorde a las altas exigencias de mercado internacional, sino que además representa una oportunidad para fomentar un nuevo rubro dentro de la agricultura. Debido a la existencia en Chile

de terrenos aptos para el cultivo de esta hierba, permitiría incorporar a pequeños y medianos agricultores a la producción de manzanilla, asegurando al mismo tiempo el volumen de materia prima necesario para la formulación industrial del pesticida botánico.

Trips californiano

Botritis

Dr. Jorge Escobar

El Proyecto en si…

ð Nombre: Desarrollo de Formulaciones en Base a Extractos de Manzanilla para el Control Fitosanitario en la Industria Vitivinicola. Nº D03I1135

ð Concurso: 11º Concurso Nacional de Proyectos de I+D.

ð Tipo de Proyecto: Investigación y Desarrollo C&T

ð Área Prioritaria: Agropecuaria

ð Duración: 36 meses.

ð Monto Fondef Asignado: 171 (en millones de pesos del año de adjudicación).

ð Director General: Jorge Aladino Escobar Fica.

ð Institución Principal: PUCV.

ONCOLOGIA

LOS TELOMÉROS Y LA TELOMERASA MODULAN EL FUNCIONAMIENTO DE LAS CÉLULAS MADRE

Cáncer, envejecimiento, células madre, longitud de los telómeros y cantidad de enzima telomerasa. Cinco conceptos que se entrelazan y que en manos del equipo que dirige María Blasco en el Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO) están dando grandes sorpresas.

María Blasco, PhD Programa de Oncología Molecular Grupo de Telómeros y Telomerasas Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO) Melchor Fernández Almagro 3 28029 Madrid, ESPAÑA.

Maria Blasco, persiguiendo la eterna juventud.

Gracias a sus investigaciones, se ha podido comprender por qué envejecemos y, quizá algún día, se podrá detener ese proceso biológico hasta ahora inevitable. María Blasco es una de las mejores conocedoras de la telomerasa, la enzima que guarda el secreto de la eterna juventud.

En 2003 se incorporaron al CNIO de la mano de Mariano Barbacid. María dirige el programa de Oncología Molecular y el Grupo de Telómeros y Telomerasas está obteniendo grandes resultados. Ese mismo año fue galardonada con el premio de la Fundación del Cáncer Josef Steiner por su aportación al esclarecimiento del papel de los telómeros en el desarrollo del cáncer. Es la primera mujer que ha recibido este honor. El año pasado recibió la medalla de oro de la Organización Europea de Biología Molecular (EMBO), esta vez fue el primer investigador español en obtener este reconocimiento. Las revistas de mayor prestigio, como 'Nature Cell Biology', 'Science', 'Cell' o 'The EMBO journal' han publicado algunos de sus casi 70 artículos.

La investigación. Mantener los telómeros en buen estado y los niveles adecuados de telomerasa permite que las células madre funcionen correctamente.

Esta es la conclusión a la que han llegado, ( de izquierda a derecha) María Luisa Cayuela, María Blasco, e Ignacio Flores del Grupo de Telómeros y Telomerasa del CNIO. Los resultados del trabajo se han publicado en la adición del 21 de Julio, 2005 en “sciencexpress”.

Las células madre regeneran los tejidos dañados del organismo. Se encuentran 'dormidas' en sus 'guaridas' hasta que se produce un daño tisular. Entonces, "emigran desde sus nichos hasta el lugar que tienen que reparar", indica María Blasco. El problema se produce cuando "se activan o multiplican en exceso o demasiado poco. Entonces, surge el cáncer o enfermedades relacionadas con el envejecimiento". A medida que envejecemos, los telómeros -unos fragmentos de ADN que se encuentran en los extremos de los cromosomas- se hacen cada vez más cortos de manera natural. Por su parte, la enzima telomerasa se encarga de corregir este proceso de acortamiento de los telómeros, por lo que es esencial en el proceso vital de un individuo sano.

Equipo de Investigación.

Existe una asociación entre las células madre y los procesos de formación de tumores y de envejecimiento. La longitud de los telómeros y la cantidad de telomerasa determinan el comportamiento de las células madre. Pero cuando hay demasiada telomerasa algo malo está ocurriendo. "Más del 90% de los tumores humanos tienen cantidades aberrantemente altas de telomerasa", asegura la doctora Blasco. "Nosotros hemos reproducido esta situación generando ratones que tienen niveles de telomerasa parecidos a los de un tumor". En el estudio se ha visto cómo la telomerasa y la longitud de los telómeros afectan al comportamiento de las células madre. "Estamos haciendo una investigación básica, pero conocer cómo se comportan las células madre puede repercutir en el estudio del envejecimiento y del cáncer".

Las células madre son las que se encargan de regenerar todos los tejidos. Los defectos en el comportamiento de las células madre preceden en el tiempo a la aparición de los primeros síntomas visibles de envejecimiento prematuro o del cáncer, por lo que la medida de la longitud de los telómeros o la actividad de la telomerasa en las células madre podrían considerarse unos buenos parámetros de pronóstico. "Sabemos que antes de que le pase algo al ratón hay algún mecanismo que no funciona bien, y serían las células madre". El trabajo del CNIO se centra en analizar una de las situaciones que hace que las células madre funcionen mal: la alteración de la telomerasa y los telómeros. El Dr. Ignacio Flores, explica los efectos de esa abundancia de telomerasa: "las células madre abandonan sus nichos en exceso y regeneran los tejidos de manera

demasiado eficaz, con lo que la piel y el pelo crecen más de lo normal, y hay una mayor susceptibilidad a formar tumores". Además, en una investigación previa, el equipo descubrió que las células cancerosas "mantienen siempre los telómeros frescos, gracias a que tienen altos niveles de telomerasa, y esto las convierte en inmortales".

Por el contrario, si la cantidad de telomerasa es muy baja, la longitud de los telómeros es muy pequeña y sucede que "las células madre no abandonan sus nichos ni regeneran la piel y el pelo adecuadamente". Este tipo de alteración está relacionada con enfermedades como la disqueratosis congénita -un extraño síndrome que provoca el envejecimiento prematuro por la deficiencia de regeneración celular- o la anemia aplásica -enfermedad causada por la incapacidad de la médula ósea de producir la suficiente cantidad de células de la sangre-.

Estas alteraciones del comportamiento de las células madre -longitud de los telómeros y cantidad de enzima telomerasa- pueden servir como marcadores de diagnóstico precoz, ya que preceden en el tiempo a la aparición de los primeros síntomas visibles de envejecimiento prematuro o cáncer, de acuerdo con los investigadores. Asimismo, conocer los factores que rigen el comportamiento de las células madre es muy importante para "utilizar éstas en terapias celulares sin causar efectos secundarios".

El tratamiento de quemaduras y la calvicie son dos aspectos que también podrían beneficiarse de esta investigación. "De hecho, a los ratones que tienen mas telomerasa en la piel les crece el pelo más que a los ratones normales y cicatrizan heridas más rápido", asegura la doctora Blasco. No obstante, impone cautela: "¡pero ojo! el aumentar la telomerasa en las células madre de la piel habría que hacerlo de una manera controlada ya que podría tener efectos negativos para la salud como son una mayor incidencia de cáncer con el tiempo".

Fig.: Células madre de la piel, visualizadas en color verde tras un marcaje de dos meses de duración (Foto: Cortesía del CNIO)

Ratones modificados El trabajo se ha llevado a cabo en ratones. Unos carecían de telomerasa y otros la sobreproducían. En los primeros se estudiaron los efectos de envejecimiento y en los segundos, el cáncer. Las sigueinetes figuras (A,B y C), corresponden a la disminucion de Telomero y la sobrexpresion de Tert influencian el potencial proliferativo de las stem cells ex vivo.

Fig. A: La cuantificación del tamaño y del número de las colonias macroscópicas obtenidas de queratinocitos aislados del genotipo indicado purificados desde ratones de 2 dias de edad y cultivados durante 1 semana en J2-3t3 mitomycin-C. Las comparaciones de los P values, son P < 0,0001 (extremadamente significativo) en todos los casos, a excepción de WT v/s G1 Terc -/- P = 0,041 (significativo) y para el WS v/s K5-mTert/Terc -/- P = 0,087 (no significativo).

Fig. B: Se observa que una elevada proporcion de las colonias G3 Terc -/- estan constituida por menos de 50 células. Fig C: G3 Terc -/- de los ratones recién nacidos con un tamaño más pequeño presentan una deficiencia exacerbada en la formación de la colonia. Mayor información: Science 2005; DOI: 10.1126/science.1115025.

En este año 2005 la ANEB comunica que el evento cuenta con la asistencia de destacados

científicos, 14 en total, además de la concurrencia de 30 tesistas pertenecientes a las distintas universidades y se espera la

asistencia de aproximadamente a 550 estudiantes de pre-grado a la

ciudad de Santiago en los días 3,4,5 y 6 de Agosto.

www.aneb.cl

GENETICA

EQUIPO DE INVESTIGACIÓN ENCUENTRA UN ENCENDEDOR

DIMÉRICO EN UNA ZONA PROTEICA FLEXIBLE.

Una zona flexible y sin estructura de una proteína, la Ets, se comporta como un encendedor dimérico, que activa el funcionamiento del gen al que codifica de forma gradual. El hallazgo, realizado por un equipo de la Universidad de Utah, fue publicado en la revista Science. Una proteína de la que se pensaba que únicamente activaba y desactivaba genes parece ser en realidad un "encendedor dimérico", es decir, que combina dos moléculas o funciones, según una investigación del Instituto de Cáncer Huntsman, en la Universidad de Utah, que se publica hoy en la revista Science. "En lugar de actuar como un encendedor on-off, se comporta como un encendedor dimérico que regula luz de forma gradual. El equipo de Barbara Graves, directora del Departamento de Oncología, ha demostrado que cuando ciertas partes de la proteína se modifican, concretamente regiones que se creían insustanciales, se convierten en fundamentales para regular la actividad de los genes, pero de una forma que recuerda a un encendedor dimérico más que a un simple encendedor. El estudio se centra en la proteína Ets-1, conocida por ser un factor de transcripción que ayuda a leer la información genética. Este factor actúa como una biblioteca celular

que ayuda a encontrar las instrucciones genéticas adecuadas. "La cantidad de información que proporciona la biblioteca, y cómo de precisa debe ser, está muy controlada, porque sin la información correcta las células se descontrolan y pueden originar un cáncer", Las modificaciones en la proteína que estudió el grupo de Utah fueron fosfatos, que previamente habían demostrado acumularse en proteínas hasta que se alcanzaba un determinado número. "Hemos visto que cada vez que añadíamos un fosfato a una determinada región de la Ets-1 se producía un efecto en la capacidad proteica de adherirse al gen. Concretamente, la unión se debilitaba, pero el empeoramiento era gradual", ha comentado Bárbara Grave. Al estudiar cómo este ajuste tan preciso funcionaba, también descubrieron que, en contra de lo que se pensaba, las regiones sin estructura de la proteína sí tienen funciones importantes. "Los científicos entienden cómo funciona una molécula en parte porque comprendemos su forma, pero nuestros hallazgos van más allá de la estructura. Nuestros datos apuntan a que partes importantes de la proteína no están fijas en el espacio, sino que son flexibles y cambian". Para llegar a sus conclusiones el equipo estadounidense ha empleado resonancia magnética nuclear que les permitió observar cómo los átomos de la molécula Ets se comportaban dentro de un campo magnético.

BARBARA GRAVES.

Como es tradicional, hace más de una década, la prestigiosa revista que edita la Asociación Americana para el Avance de la Ciencia (AAAS), organización que agrupa a unos 140.000 investigadores, selecciona diez hitos científicos cosechados durante los últimos doce meses. Solamente se lleva el lugar de primer lugar el descubrimiento de que en el pasado lejano el planeta Marte tuvo agua liquida. Por lo que los restantes 9 descubrimientos están enumerados al azar y no relevancia.

LOS DIEZ HITOS CIENTIFICOS DEL 2004.

1. Descubrimiento de que el planeta Marte fue húmedo en su pasado remoto.

2. Descubrimiento en la isla indonesia de Flores de restos de un ser humano de un metro de estatura y cerebro pequeño.

3. Clonación terapéutica realizada por científicos surcoreanos con las mismas técnicas

empleadas para lograr el nacimiento de la oveja Dolly, primer mamífero clonado. 4. La descripción de las mínimas partes que integran la materia, resultó ubicada en el cuarto

puesto. Los investigadores, indica la publicación, aprendieron como los mecanismos de condensación alteran el comportamiento de los átomos.

5. La precisión del número de genes humanos, entre 20 mil y 25 mil, y las complejas relaciones que se establecen entre ellos.

6. Identificación por el radiotelescopio Parkes, en Australia, del primer par de pulsar, hallazgo que podría ser utilizado para poner a prueba la teoría de la relatividad de Albert Einstein.

7. Descubrimiento realizado recientemente de que la variedad de animales y plantas se reduce cada vez más.

8. La hipótesis de científicos alemanes de que la estructura química del agua, considerada válida desde hace 100 años, podría estar equivocada

9. Resultados alentadores de una vacuna contra la malaria o paludismo, enfermedad transmitida por la picada de un vector, y que mata a un millón de personas en el mundo cada año.

10. Hallazgo de un nuevo método que permite descubrir formas de vida minúsculas. Un equipo de investigadores analizó agua de distintos medios y profundidades y secuenciaron los genes encontrados.

1. La esperanza de Marte. "Por Marte un día corrió agua líquida". Durante el mes de marzo del 2004, la NASA anunció el hallazgo de rocas en un inmenso cráter del planeta rojo que, según los científicos de la agencia espacial estadounidense, un día fue un enorme lago. "El agua se fue evaporando con el paso del tiempo, pero ha dejado huellas en las rocas muy claras", afirmaron. "Así que Marte era húmedo en sus primeros años, cuando la vida en la tierra estaba en sus inicios", escribio Richard A. Kerr en 'Science', que anuncio nuevos descubrimientos en este campo gracias al desarrollo de robots. Marte, según la publicación científica, esconde grandes noticias Las pruebas de que en Marte existio agua liquida estan en el Meridiani Planitia, lugar en donde amartizo el robot “Opportunity”. Allí, se encontraron algunas rocas que les

permiten aseverar con certeza que, un día, ese cráter estuvo sumergido por agua. Con otro de los instrumentos, el espectrómetro Moessbauer, la NASA ha detectado un mineral derivado del sulfato de hierro conocido como jarosita. Por el conocimiento que los geólogos tienen de las rocas terrestres, estas pruebas han permitido determinar que las piedras analizadas en Marte “han estado expuestas durante mucho tiempo a los efectos del agua”.

2. El hombre más pequeño.

Los investigadores australianos Peter Brown y Mike Morwood, de la Universidad de Nueva Inglaterra en Armidale (Australia), y Bert Roberts, de la Universidad de Wollongong, descubrieron, durante el mes de octubre del presente año, una nueva especie de ser humano, denominada 'Homo floresiensis', que vivió en la isla indonesia de Flores hace tan sólo 18.000 años. La mayor sorpresa del esqueleto parcial, descubierto en una cueva llamada Liang Bua, es que perteneció a una persona que, en una edad plenamente adulta, era de apenas un metro de alto y tenía el cráneo del tamaño de un pomelo. Según los investigadores, la nueva especie desciende del arcaico 'Homo erectus', de la que se cree que también ha evolucionado el 'Homo sapiens'. La expansión del 'Homo erectus' de África a Asia se produjo hace quizás dos millones de años y los restos de Liang Bua

podrían representar a los descendientes de una población de 'Homo erectus' que se aisló en Flores durante algún tiempo en los últimos cientos de miles de años, evolucionando en una forma enana diferenciada. Con forma de humano enano, la nueva especie encaja justo con la extraña fauna extinta de Flores, que fue el hogar de un amplio rango de arcaicas criaturas, extintas en otros lugares, a menudo metamorfoseadas en formas enanas o gigantes: entre ellos se incluye una forma enana del primitivo elefante Stegodon, además de dragones Komodo y aún especies más grandes del lagarto gigante. La nueva especie de ser humano que ahora se ha encontrado vivió en un tiempo en el que poblaciones residuales de 'Homo erectus' pudieron haber vivido aún en las cercanías de Java, y en la que la región entera fue colonizada por el 'Homo sapiens'. El hallazgo fue calificado como el mayor registrado en los últimos 50 años en el campo de la antropología. "A veces los grandes descubrimientos vienen en pequeños envases", dice 'Science'.

3. Clonación humana.

La misma técnica que permitió la clonación de la oveja Dolly sirve para obtener embriones humanos. Así confirmado en febrero del 2004 por un grupo de investigadores surcoreanos que publicó la primera prueba documentada sobre clonación de embriones humanos con fines terapéuticos con el objetivo de acelerar el desarrollo de nuevas terapias a través de trasplantes

de células madre procedentes de estos embriones. La investigación utilizó la misma técnica que la empleada para clonar a la oveja Dolly, empleó óvulos donados por 16 mujeres para que se replicasen sin necesidad de la contribución del esperma humano. Los investigadores han insistido en que sus fines son terapéuticos y que no desean clonar bebés. Es ahora la primera vez que se publica detalladamente cómo se ha conseguido extraer células madre de embriones humanos clonados. La clonación de embriones se dio a conocer en la

prensa estadounidense pocas horas antes de la publicación en la revista 'Science' del estudio de estos investigadores y sobre la posibilidad de crear nuevos tratamientos contra enfermedades a través del trasplante de células madre El resultado de estos experimentos fue la obtención de 30 embriones humanos clonados, a partir de 176 óvulos, y la extracción de 20 masas de células madre. El siguiente paso, según los autores, es mejorar la tasa de éxito para obtener líneas celulares de blastocitos.

4. Condensación.

La compleja descripción de las mínimas partes que conforman la materia obtuvo, a juicio de 'Science', grandes avances en 2004. Los científicos aprendieron cómo los mecanismos de condensación modifican el comportamiento de los átomos. El hallazgo permitirá profundizar en algunos de los principales enigmas que esconde la materia. Durante los últimos doce meses, varios equipos de físicos lograron inducir extraños estados de la materia al enfriar gases hasta temperaturas ultrabajas. Científicos austríacos y estadounidenses consiguieron que un conjunto de partículas denominadas fermiones adoptaran un estado cuántico único, actuando como una especie de superátomo. Según precisan los editores de «Science», ese trabajo ayudará a entender cómo se comportan los electrones en los materiales complejos, un paso necesario para poder explotar fenómenos relevantes, como la superconductividad. Este mismo año, también a muy bajas temperaturas, otro equipo de investigadores creó el primer condensado trabajando con materiales sólidos. * En la fotografía adjunta se muestra el simulado de un condensado fermionico en crecimiento.

5. Los secretos del ADN. El consorcio público involucrado en la secuenciación del genoma humano determinó con mayor precisión el número de genes humanos: entre 20.000 y 25000. Pero lo importante no es el número, sino las complejas relaciones que se establecen entre ellos. Al contrario de lo que se pensaba, el llamado "ADN basura" ejerce una función esencial. Su estudio abre un nuevo capítulo en el estudio del genoma. Desde febrero de 2001, cuando se publicó el primer gran borrador del genoma humano, los 20 centros de seis países que conforman el consorcio público responsable de la

investigación han ido afinando el trabajo y concretando el número de genes humanos entre los 20.000 y 25.000. Hasta la fecha han sido necesarios 300 millones de dólares, una cantidad inferior a la que se precisa para determinar el número de genes: 320 millones. Después de realizar el último cómputo, mucho más preciso que el que se había hecho anteriormente, el número de genes humanos es inferior al que se estimó en 2001. Sin embargo, los científicos insisten en que lo importante no es el número.

A pesar de la reducción que nos iguala con un gusano, el 'Caenorhabditis elegans', con una planta, la 'Arabidopsis', y con un pez, 'Tetraodon nigroviridis' o pez globo punteado (todos ellos cuentan con unos 20.000 genes), los científicos insisten en que no es la cantidad sino el mecanismo y el tipo de genes lo que importa. En el mismo número de la revista 'Nature', investigadores franceses informaron de que un tipo de pez, denominado erizo verde, tiene también entre 20.000 y 25.000 genes. Estos científicos piensan que los peces duplicaron su genoma hace unos 450 millones de años algo que, según creen, les confirió una especial ventaja evolutiva. El genoma del ser humano tiene muchas más duplicaciones que el resto de mamíferos. Este mecanismo permite ir adquiriendo nuevos cambios en el ADN sin perder en ese proceso la información importante. Las copias en el genoma humano empezaron a producirse mucho después que en el pez erizo verde y que en otros mamíferos, hace tan sólo unos 40 millones de años. En muchos genes la duplicación ocurrió en una época más reciente, hace unos seis millones de años. Ese retraso nos sirvió para adquirir un gran número de diferencias que el resto de los animales y evolucionar más. En las células humanas se producen otros mecanismos distintos a los que se originan en otros animales como los gusanos o las moscas. Esos procesos son los responsables de cómo un gen construye una proteína a través de cortes y empalmes de las bases (unidades del ADN). Por otro lado, el ser humano cuenta con una serie de genes denominados reguladores que cuentan con un control más sofisticado. En un principio, los científicos pensaron que éstos eran trozos de ADN 'basura' hasta que después de estudiarlos ampliamente y han visto que son precisamente ellos los que nos confieren mayores diferencias con el resto de mamíferos. Estos genes construyen estructuras mucho más complejas como las que se dan en el cerebro humano. A través de ellos y de los mecanismos de corte y pegado, unos miles de genes pueden llevar a cabo trillones de combinaciones de proteínas que son esenciales para la vida. Los borradores que se han ido publicando hasta el momento tenían lagunas en varios tramos de ADN resistentes al método habitual de análisis. Así, de 147.821 huecos en el penúltimo borrador, se ha pasado ahora a otro con tan sólo 341 vacíos que son los responsables de que la cifra exacta de genes todavía no se conozca y oscile entre 20.000 y 25.000.

6. Los "pulsar”.

Los 64 metros del radiotelescopio Parkes, en Australia, detectaron este año el primer par de "pulsar" identificados por los científicos, un hito que los astrofísicos esperan utilizar para someter a evaluación la teoría de la relatividad de Einstein. La diversidad de objetos estelares en el océano cósmico se amplió en 2004 con el descubrimiento del primer sistema binario formado por dos pulsar, estrellas de neutrones que giran como faros a una velocidad vertiginosa, lanzando chorros de radiación en lugar de haces de luz. Ese hallazgo se produjo con un radioteles-copio australiano mientras se escrutaba un pulsar que rota 44 veces por segundo, alrededor de un objeto de identidad enigmática. Ese último giraba más despacio sobre su eje: «sólo» una vez cada 2,8 segundos. Lo más curioso es que orbitaba alrededor del primero, produciendo minieclipses de 30 segundos en cada órbita. Los investigadores creen que el movimiento de ambas estrellas acabará desencadenando una fatal colisión dentro de 85 millones de años.

7. Menos biodiversidad.

La variedad de especies de plantas y animales decae. Varios trabajos realizados con anfibios, mariposas, plantas y pájaros lo demuestran. Al mismo tiempo, en 2004 se obtuvo evidencia de que el cambio climático está alterando la historia natural de distintas áreas del planeta.

8. Más agua.

El modelo de la estructura del agua tenido por bueno desde hace un siglo podría ser incorrecto. Un grupo de investigadores de EEUU, Alemania, Suecia y Holanda plantearon esta hipótesis en uno de los estudios destacados por 'Science' entre las principales noticias científicas de 2004. No fue el único trabajo destacado en este campo, donde se debaten asuntos que pueden reformular la química y las ciencias atomosféricas.

Desde hace un siglo se pensaba que sutiles diferencias de carga eléctrica entre los átomos de oxígeno e hidrógeno hacen que cada molécula de agua esté ligada a otras cuatro. Sin embargo, este patrón estructural fue puesto en duda por investigadores de Alemania, Suecia, Estados Unidos y Holanda, mediante análisis con rayos X. Los resultados indican que cada molécula de agua se asocia sólo a las dos más próximas. La controversia creció al aparecer un segundo estudio con rayos X que apoya el modelo original. Otras investigaciones desvelaron también cómo los electrones y protones se disuelven en el

agua y cómo ésta se adhiere a las superficies sólidas.

9. Fármacos para los pobres.

Los esperanzadores resultados obtenidos con la vacuna contra la malaria fueron posibles gracias al establecimiento de acuerdos entre los sectores público y privado, una alianza necesaria para luchar contra las grandes epidemias y enfermedades que asolan el mundo pobre, incluido el sida. Un estudio internacional impulsado por un consorcio público-privado y dirigido por el investigador español Pedro Alonso, del Hospital Clínic de Barcelona, ha obtenido resultados esperanzadores con la inmunización contra el paludismo cuyo desarrollo se encuentra más avanzado. Es el primero de una nueva generación de fármacos en investigación que intenta desarmar una compleja enfermedad que frena el crecimiento del continente negro. La inmunización, fabricada por GlaxoSmithkline (GSK), se evaluó durante seis meses en niños entre uno y cuatro años, el grupo más sensible a la enfermedad. Administrado en tres dosis, el medicamento mostró una eficacia de un 30% en la prevención de casos clínicos de malaria, un 45% de protección contra la infección primaria por el parásito que causa la mayoría de los casos de paludismo en África -'Plasmodium falciparum'- y casi un 58% contra los episodios graves de la enfermedad. En niños menores de dos años, el mayor grupo de riesgo y donde se registra la mayoría de fallecimientos por paludismo, la tasa de éxito fue del 77%.

La vacuna de GSK intenta bloquear la acción del parásito sobre las células del hígado (primera reproducción) o estimular la respuesta del sistema inmune a este ataque para, en última instancia, impedir la formación de merozoitos (segunda reproducción) y la entrada de 'P. falciparum' en la sangre. El mecanismo se evaluó entre abril de 2003 y mayo de 2004 en Mozambique a partir de la estructura sanitaria que el Hospital Clínic creó de forma permanente al norte de Maputo en 1997, el Centro de Investigación y Salud de Manhiça (CISM).

10. Y más genes.

Agua y agua, genes y genes. El último acontecimiento del año según 'Science' une dos campos omnipresentes este año. Los investigadores descubrieron en 2004 un nuevo sistema que permite descubrir formas de vida inapreciables: analizaron agua de distintos medios y profundidades y secuenciaron los genes que encontraron. Una nueva fuente de genomas La investigación de la biodiversidad comenzó a explotar las modernas técnicas de las investigación genómica. En lugar de analizar genomas de organismos individuales, varios grupos optaron por tomar muestras de agua y analizar los genes presentes. Un grupo lo hizo con 1.500 litros de agua del mar de los Sargazo. Así descubrió un millón de genes. Otro equipo utilizó agua extraída a un kilómetro de profundidad en una mina abandonada. Esta investigación reveló la presencia de organismos que se alimentan de compuestos de hierro.

_______________________________________________________

Microbios producen plástico. “Del mismo modo que nosotros transformamos en grasa el carbono absorbido en exceso, esos microorganismos lo convierten en PHA”. Helene Felber.

Un equipo de científicos del Instituto Federal de Investigación de Materiales de Sankt Gallen trabajan en el cultivo de determinadas cepas de microbios que podrían revolucionar tanto la medicina como la industria del plástico. Cerca de un centenar de bacterias, entre ellas la conocida con el nombre científico de pseudomonas putida, devoran con predilección toda una serie de productos tóxicos para el hombre como el fenol, el toluol y otras composiciones de hidrocarburos.

Durante el proceso de digestión, esas bacterias producen una substancia que para los científicos tienen más valor que el petróleo: se trata del biopolímero PHA, cuyos terrenos de aplicación son enormes.

Los científicos suizos han logrado conseguir gracias a esas bacterias tres tipos de biopolímeros PHA, materia prima a partir de la cual podría fabricarse desde material para empaquetado o colas para pegar hasta sucedáneos de epidermis, válvulas cardíacas y hasta arterias. Para mayor información: http://www.bioplanet.net/magazine/bio_julago_2004/bio_2004_julago_breves.htm

EN LA BÚSQUEDA DE NUEVOS MECANISMOS IMPLICADOS EN LA DIFERENCIACIÓN OSTEOBLÁSTICA INDUCIDA POR PROTEÍNAS MORFOGENÉTICAS ÓSEAS (BMPs). Nelson Osses Rivera, es actualmente Investigador Postdoctoral en el Laboratorio del Dr. Francesc Ventura de la Universidad de Barcelona, y su trabajo ha sido financiado por la Fundación Carolina (Ministerio de Asuntos Exteriores de España) y el Ministerio de Educación y Ciencias de España. Fono: 34 93 403 5822 Fax: 34 93 402 4268 nosses@ub.edu Las proteínas morfogenéticas óseas (BMPs) fueron identificadas hace ya 40 años, cuando matriz desmineralizada de hueso implantada ectópicamente era capaz de inducir formación de hueso. A partir de ahí, existe numerosa evidencia del rol que poseen estas proteínas como reguladores de la inducción de hueso, así como de su mantención y reparación. Sin embargo, la función de las BMPs es más extensa que la relacionada solamente con el desarrollo del sistema esquelético. La naturaleza multifuncional de las BMPs se pone de manifiesto al comprobar su función como morfógeno durante los primeros estadios del desarrollo embrionario tanto en el modelo de Drosophila como en el de Xenopus. Resultados en estos modelos y en ratones modificados genéticamente implican a las BMPs en el establecimiento del patrón dorso-ventral, antero-posterior y derecha-izquierda, en la formación y diferenciación del sistema nervioso y las somitas, y en la morfogénesis del riñón, corazón, intestino y pulmones. Las BMPs, además, han demostrado in vitro poseer importantes efectos en diferenciación, proliferación y apoptosis de una amplia variedad de tipos celulares. Esta sola enumeración de efectos de las BMPs, ya los convierte en moléculas interesantes de estudiar. En el presente artículo, se describe brevemente el mecanismo de acción más conocida de las BMPs, y el porqué y cómo estamos involucrados en la búsqueda de nuevos mecanismos de acción. INTERACCIÓN BMPs-RECEPTOR Y SEÑALIZACIÓN INTRACELULAR Las BMPs forman una familia que pertenecen a la superfamilia del factor de crecimiento transformante-β (TGF-β). En humanos, esta familia supera las 30 isoformas. En los últimos años, se han conseguido importantes avances en el esclarecimiento de los mecanismos de transducción de la señal para esta amplia familia de factores (ver Figura 1). La cascada de señalización se inicia con la unión de los ligandos a un receptor heteromérico compuesto por dos receptores con actividad serina/treonina quinasa, denominados tipo I y tipo II. La formación del complejo heteromérico entre los receptores y el ligando permite al receptor tipo I propagar la señal una vez que ha sido fosforilado por el receptor tipo II. La búsqueda de substratos intracelulares para estos receptores condujo a la identificación de la familia de los Smads como transductores de la señal iniciada por BMPs en la membrana plasmática hasta sus efectos transcripcionales específicos. En la actualidad el modelo de activación que se postula implica a los receptores activados que fosforilan a los Smads en una región situada en su extremo carboxilo. Este evento permite la heterodimerización de los Smads fosforilados por receptor con Smad4 y la translocación de este heterodímero al núcleo donde se unen a regiones específicas en los promotores blancos en combinación con otros factores de transcripción. Aunque la vía de los Smads es la más importante como mecanismo de señalización inducidos por BMPs, existen crecientes evidencias que los receptores de BMP activan otras vías de transducción, además de la activación de Smads. Se ha descrito que las BMPs activan a cascadas de MAP quinasas como TAK-1, JNK y p38. Sin embargo, esta activación no parece ser mediada directamente por los receptores, lo que sugiere que existen moléculas intermediarias entre los receptores y la activación de MAP quinasas. De manera muy resumida, lo anterior es lo que se sabe hoy en día acerca de la señalización intracelular inducida por BMPs en distintos tipos celulares y existe consenso en que la acción combinatoria entre Smads y otros factores de transcripción permite que la señal pueda ser específica del tipo celular, así como ser integrada con otras cascadas de transducción de señales inducidas por el factor. Esto significa que la vía de los Smads es la respuesta basal inducida por las BMPs, y que el comportamiento final de la célula dependerá de los factores de transcripción activados y otras probables vías de señalización accionadas.

De los distintos modelos de acción de BMPs, uno los más utilizados es la inducción de osteogenésis por BMP-2 en células de origen mesenquimal. Este modelo, además de tener la ventaja de que muchos de los marcadores de células osteoblásticas son conocidos, tiene importantes implicancias relacionadas con los campos de la regeneración ósea e ingeniería tisular ósea. Aunque se ha avanzado bastante en conocer las respuestas celulares y tisulares a BMPs, quedan múltiples cuestiones que responder acerca de su acción, como por ejemplo; a) Cuáles son los blancos transcripcionales activados por BMPs? b) Existen nuevos factores de transcripción inducidos por BMPs, que dirigen la expresión de genes específicos de osteoblastos? c) Cómo ocurren los mecanismos moleculares utilizados por estas citoquinas para promover la diferenciación osteoblástica, tanto dependientes de la acción de Smads como independientes de Smads?. Estas son algunas de las preguntas que intentamos abordar actualmente en el Laboratorio, las

cuales son de especial interés dentro del campo de señalización inducidas por BMPs durante la osteogénesis.

ALGUNOS EJEMPLOS ESPECÍFICOS EN LA BÚSQUEDA DE NUEVOS MECANISMOS IMPLICADOS EN LA DIFERENCIACIÓN OSTEOBLÁSTICA INDUCIDA POR BMPs. Diferentes evidencias sugieren un papel central de distintos factores de transcripción en el control de la diferenciación osteoblástica. Entre ellos, uno recientemente descrito corresponde a Osterix. BMP-2 es capaz de inducir la expresión de Osterix, sin embargo, la sobreexpresión artificial de este factor no es capaz de inducir todos los eventos transcripcionales osteoblásticos, lo que sugiere que BMP-2 es capaz de inducir factores adicionales. Mediante proteómica buscamos la identificación de proteínas que presentan modificaciones en sus niveles de expresión a nivel nuclear en respuesta a BMP-2. Este tipo de aproximaciones nos permitirían encontrar factores nucleares adicionales a los ya conocidos, que participen como reguladores de la osteogénesis inducida por BMP-2 y evaluar su relevancia funcional. En la misma dirección, estamos interesados en conocer los genes regulados por Osterix, ya que si bien se conoce su importancia en la diferenciación osteoblástica, no se conoce nada acerca de qué genes regula transcripcionalmente. Para ello, estamos generando células con expresión regulada de Osterix de tal manera de analizar mediante ensayos de microarrays de cDNA qué genes son inducidos por el factor. Además, nos encontramos analizando los elementos de respuesta inducidos por BMP-2 en el promotor de Osterix, de tal manera de caracterizar el mecanismo molecular de regulación transcripcional de este gen. En consecuencia, la identificación y caracterización de los reguladores, tanto "upstream" como "downstream" de Osterix, nos ayudará a entender mejor algunos de los mecanismos génicos involucrados en la osteogénesis inducida por BMP-2. Además de estudiar mecanismos inducidos por BMPs a nivel nuclear, estamos interesados en mecanismos citoplasmáticos distintos a la fosforilación de Smads. Gran parte de nuestro trabajo en esta área se debe a las características del receptor de tipo II para BMPs. La única función conocida hasta ahora de los receptores de tipo II (BMPR-II), es la activación de los receptores de tipo I, sin embargo, a diferencia de otros receptores de la súper-familia TGF-β, BMPR-II posee un largo tallo citoplasmático de aproximadamente 500 aminoácidos, por debajo del dominio quinasa (ver Figura 1). Hasta la fecha, no se le ha asignado un rol específico al tallo citoplasmático de BMPR-II , y este, no se requiere para la señalización a través de Smads inducida por BMPs. Mutaciones dentro del BMPR-II están implicadas en la enfermedad autosomal dominante hipertensión pulmonar primaria (PPH), la cual se caracteriza por la proliferación de células endoteliales y de músculo liso de arterias pulmonares, lo que da como resultado una oclusión de los vasos pulmonares y un aumento de la presión sanguínea seguido de falla al corazón. De forma interesante, muchas de las mutaciones identificadas ocurren por debajo del dominio quinasa de BMPR-II y son mutaciones de corrimiento en el marco de lectura o sin-sentido que predicen la formación de BMPR-II con un tallo citoplasmático truncado. Esta observación sugiere que el tallo citoplasmático de BMPR-II puede jugar un rol en actividades aún desconocidas del receptor. Para estudiar el posible rol de este tallo citoplasmático, hemos generado células que expresan de manera regulada BMPR-II en su forma completa o un BMPR-II que posee una de las mutaciones que se presenta en PPH. Induciendo la expresión de estas proteínas evaluaremos mediante proteómica, si existen proteínas que interactúen específicamente con esta zona del receptor. Recientemente, se ha descrito la interacción funcional entre el tallo citoplasmático de BMPR-II y LIM quinasa 1 (LIMK1), un regulador clave de la dinámica del citoesqueleto de actina. Teniendo en cuenta este hallazgo, estamos estudiando los efectos de BMP sobre la dinámica del citoesqueleto de actina y cuáles son los probables mecanismos involucrados en este proceso, ya que si bien, está descrita la interacción de BMPR-II y LIMK1 el mecanismo de activación de esta quinasa, por los receptores de BMPs, es desconocido. Un área de la cual no se tiene ningún tipo de antecedentes, es cómo es regulada la actividad de los receptores de BMPs. En este contexto, el tallo citoplasmático de BMPR-II podría participar en la llegada del receptor a la membrana, en su internalización o en su reciclaje, procesos que en definitiva incidirían en la actividad de BMPs. Utilizando el mismo diseño experimental de células que expresan de manera regulada BMPR-II, hemos comenzado a estudiar estos procesos.

PERSPECTIVAS Y RELEVANCIA DE LOS NUEVOS MECANISMOS El hueso es uno de los pocos tejidos que se encuentran en un proceso constante de remodelación y que posee capacidad de regeneración. Esta regeneración ósea y dentinal es inducida y acelerada por adición de BMPs. Por ello existe un amplio interés de la industria biotecnológica y farmacológica por la capacidad de las BMPs de acelerar la reparación de fracturas óseas severas y la regeneración de estructuras dentales. En la actualidad, Stryker Biotech ha obtenido la aprobación de la FDA para la utilización de BMP-7 (OP-1) en fusiones vertebrales, así como alternativa a los autotransplantes en fracturas severas de huesos largos. Igualmente, Wyeth Biotech también ha recibido la aprobación de la FDA para la utilización de BMP-2 en fusiones vertebrales y fracturas abiertas de tibia. Estas compañías dedican una gran parte de su esfuerzo en investigación básica y clínica al estudio de la biología de las BMPs. En algunos casos se ha observado que este tipo de terapias de adición directa del factor, en el caso de fracturas severas, presentan la limitación en el número de células madre mesenquimales activables presentes en la médula ósea de los pacientes (su número disminuye en un factor de 200 desde el nacimiento hasta la edad adulta). Por ello, en la mayoría de los casos serían aconsejables terapias combinadas de implantación de células mesenquimales activadas con BMP y/o modificadas genéticamente. De este modo, el conocimiento de los factores y mecanismos celulares específicos que producen la osteogénesis y regeneración ósea y dental es de interés, no sólo desde el punto de vista e la investigación básica, sino también en el desarrollo de terapias en traumatología y odontología. Los resultados de estos estudios, contribuirán a identificar nuevas moléculas que participen en diferentes etapas de la osteogénesis y que pueden ser utilizadas como nuevos blancos terapéuticos. Además, dichos estudios pueden llevarnos a obtener información sobre nuevas metodologías para la diferenciación osteoblástica en células madre mesenquimales derivadas de médula ósea para su posible utilización para implantes con fines terapéuticos en patologías del sistema esquelético, como fracturas severas, osteoporosis o enfermedad periodontal. BIBLIOGRAFÍA Y SITIOS WEBS RECOMENDADOS: • Massagué, J. How cells read TGF-β signals. Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 1:169-178, 2000. • Nohe, A., Keating, E., Knaus, P., Petersen, N.O. Signal transduction of bone morphogenetic protein

receptors. Cell. Sign., 16:291-299, 2004. • Shi, Y. and Massagué, J. Mechanisms of TGF-β signaling from cell membrane to the nucleus. Cell,

113:685-700, 2003. • Sykaras, N. and Opperman, L.A. Bone morphogenetic proteins (BMPs): how do they function and

what can they offer the clinician?. J. Oral Sci., 45:57-73, 2003. • http://au.expasy.org/cgi-bin/niceprot.pl?P12643 Información de BMP-2 en Swiss-Prot.

• http://au.expasy.org/cgi-bin/niceprot.pl?Q13873 Información de BMPR-II en Swiss-Prot.

Para contactar: Unidad de Bioquímica Departamento de Ciencias Fisiológicas II Universidad de Barcelona Campus Bellvitge-c/Feixa Llarga s/n 08907 Hospitalet de Llobregat Barcelona-España

HERMANN EMIL FISCHER.

Hermann Emil Fischer nació el 9 de Octubre de 1852 en Euskirchen. Su padre fue un afortunado hombre de negocios. Después de tres años de ser educado con un tutor privado, Emil fue durante dos años a la escuela local en Wetzlar y después dos años más

en Bonn, donde pasó su examen final en 1869 con distinción. Su padre deseaba que su hijo entrara al mundo de los negocios pero Emil quería estudiar Ciencias Naturales, especialmente física. Por lo que después de un fallido intento por lograr que se convirtiera a los negocios, su padre lo envió en 1871 a la Universidad de Bonn a estudiar Química. Allá, Emil asistió a las clases de Kekulé, Engelbach y Zincke y también de Augusto Kundt en fisica, y de Paul Groth en mineralogía. En 1872, sin embargo, Emil, quien aún deseaba estudiar física, fue persuadido por su primo Otto Fischer para ir con el a la Universidad de Strabourg, donde el profesor Rose estaba trabajando un tema sobre el análisis del método de Bunsen. Aquí Fischer se reunió con Adolf von Baeyer, e influenciado por él decidió finalmente dedicar su vida a la química. Estudiando bajo la tutoría de von Baeyer, Fischer se dedicó a estudiar las sondas de ftaleina, la cual había sido descubierta por Rose. Así en 1874, Emil realizó su Ph.D. en Strasbourg con una tesis sobre fluoresceína y orceina-ftaleina. El mismo año ocupó el cargo de Instructor asistente en la Universidad de Strasbourg y fue entonces aquí donde descubrió la primera base de hidracina, fenilhidrazina. En 1875 von Baeyer tomó el puesto de Liebig en la Universidad de Munich y Fischer fue con él como asistente en química orgánica. En 1878 Fischer fue nombrado Profesor Asociado de Química Analítica en

1879 en Munich. Este mismo año se le ofreció la “Chair of Chemistry” en Aix-la-Chapelle, pero lo rechazó. En 1881 fue Profesor de Química en la Universidad de Erlangen y en 1883 Badische Anilin- und Soda-Fabrik le ofreció el cargo de director de este laboratorio pero Fischer, sin embargo, prefirió el cargo académico. En 1888 fue nombrado Profesor de Química en la Universidad de Wurzburg puesto que ocupó hasta 1892 cuando tomó el puesto “Chair of Chemistry” de A. W. Hofmann en la en la Universidad de Berlín. Aquí permaneció hasta su muerte en 1919. Durante su estadía en Munich, Fischer continuó su trabajo con hidracinas y junto con su primo Otto trabajaron una nueva teoría sobre la constitución de las sondas derivadas de trifenilmetano, demostrando éstas con trabajos experimentales perfectamente correctos. En Erlangen Fischer estudiaba los principios activos del té, del café y de la cocoa, y estableció la constitución de una serie de compuestos en este campo, eventualmente sintetizándolos. Emil Fischer y Carl Harries crearon un procedimiento de destilación a vacío, fundamental en la purificación de compuestos orgánicos. El trabajo, sin embargo, sobre el cual se reclina principalmente su fama, fue sus estudios sobre las purinas y los azúcares. Este trabajo, llevado a cabo entre 1882 y 1906 mostró que varias sustancias, muy poco conocidas hasta ese momento, tal como adenina, xantina y sustancias excretadas por los animales como ácido úrico y guanina. Todas estas pertenecían a una familia homogénea y podrían estar derivadas una de otras y que estas correspondían a diferentes derivados hidroxilados y derivados amino del mismo sistema fundamental formado por una estructura nitrogenada biciclica en la cual el grupo característico era la urea. A esta sustancia “patrón”, llamó purina en 1884, y la sintetizó en 1898. Numerosos derivados

artificiales, más o menos análogos a las sustancias naturales, llegaron a su laboratorio entre 1882 y 1896. En 1884 Fischer comenzó su gran trabajo sobre los azúcares, el cual trasformó el conocimiento de estos compuestos y soldó uno nuevo completamente coherente. Hasta antes de 1880 la formula de la glucosa había sido indicada, pero Fischer estableció esta formula por una serie de transformaciones tales como la oxidación en ácido adónico y la acción de fenilhidrazina que el había descubierto y que hizo posible la formación de las fenilhidrazonas y de las osazonas. Fischer estableció la relación entre glucosa, fructosa y manosa descubierta en 1888.

En 1890, mediante epimerización entre ácido glucónico y acido manónico estableció la estereoquímica natural y la isomería de los azúcares, y entre 1891 y 1894 estableció la configuración estereoquímica de todos los azúcares conocidos. Predijo exactamente los posibles isómeros por una ingeniosa aplicación de la teoría de el carbono asimétrico de Van’t Hoff y Le Bel, publicado en 1874. En Septiembre de 1890, Fischer y su ayudante Rudolf Stahel aislaron de la madera de haya un compuesto nuevo al que llamaron Xylit (Xylitol en alemán), más tarde, en 1902 el Dr. Fischer fue premiado con el Premio Nobel en Química por su aportación a la química. Su más grandioso suceso fue la síntesis de glucosa, fructosa y manosa en 1890, empezando desde glicerol. Este monumental trabajo sobre los azúcares llevado a cabo entre 1884 y 1894, fue extendido por otro trabajo, siendo el más importante sus estudios de los glucósidos.

Entre 1899 y 1908, Fischer hizo su gran contribución al conocimiento de las proteínas. El buscó mediante efectivos análisis, métodos de separación y de identificación aminoácidos individuales, descubriendo un nuevo tipo de estos, los aminoácidos cíclicos: prolina y oxiprolina. También estudió la síntesis de proteínas obteniendo la forma óptimamente activa de varios aminoácidos. Fue capaz de establecer un tipo de enlace que podría conectar estos aminoácidos siempre en cadenas, llamándolo enlace peptídico. Obtuvo dipéptidos, tripéptidos y más tarde polipéptidos. En 1901 junto a Fourneau, descubrieron la síntesis del dipetido glicil-glicina y además en este año publicó su trabajo sobre la hidrólisis de caseína. Sus síntesis de oligopéptidos terminaron en un octodecapeptido, el cual presentaba muchas características de las proteínas naturales. En adición a su grandioso desempeño en los campos antes mencionados, Fischer también estudió enzimas y sustancias químicas presentes en liquenes que encontró durante sus frecuentes vacaciones en el Black Forest, y durante sus últimos años de vida, estudió además sustancias usadas en cultivos, las grasas. Fischer fue nombrado Prussian Geheimrat (Excellenz), y nombrado Doctor honorario de las Universidades de Christiania, Cambridge (England), Manchester y Bruselas. También se le honró con la “Orden Prusiana del Mérito y la Orden de Maximiliano para las Artes y las Ciencias. En 1902 se le otorgó el Premio Nobel en Química por sus trabajos sobre los azucares y síntesis de Purina.

Durante toda su vida fue bien conocido por su excelente memoria permitiéndole, aunque no fue naturalmente muy elocuente,

memorizar completamente manuscritos de lecturas que el mismo había escrito. Su entusiasta entendimiento de problemas científicos, su intuición, su sincero amor y su insistencia sobre lo hipotético y lo experimental lo calificaron como uno de los verdaderamente grandes científicos de todos los tiempos. En 1888 Fischer se casó con Agnes Gerlach, hija de J. von Gerlach, Profesor de Anatomia en Erlangen. Infelizmente su esposa murió siete años después de su matrimonio. Ellos tuvieron tres hijos, uno de ellos fue asesinado durante al Primera Guerra Mundial, el segundo hijo se enroló en el ejército a los 25 años falleciendo igualmente. El tercer hijo Hermann Otto Laurenz Fischer murió en 1960 y fue Profesor de Bioquímica e la Universidad de California en Berkeley. A los 18 años de edad, antes de ingresar a la Universidad de Boston, Fischer sufría de gastritis. Posiblemente esta aflicción fue el precursor del cáncer por el cual murió. Cuando Fischer murió en 1919, la medalla en Memoria de Emil Fischer fue instruida por la Sociedad de Química Alemana.

El modelo llave-cerradura supone que la estructura del sustrato y la del centro activo son complementarias, de la misma forma que una llave encaja en una cerradura. Este modelo es válido en muchos casos, pero no es siempre correcto.

Recuerden que cualquier

persona puede participar en cada sección de la revista.

Pueden mandar un escrito con su personaje de mes o alguna

noticia, aviso, etc.

revbioqucv@hotmail.com www.bioquimica.pucv.cl

LAS LEUCEMIAS

Las leucemias son un grupo heterogéneo de tumores malignos del sistema hematopoyético. Se caracteriza por la proliferación de clonos celulares atípicos que tienen una semejanza lejana con las células hematopoyéticas normales. Estos clonos celulares proliferan en la medula ósea e impiden el desarrollo de los elementos hematopoyéticos normales, carecen de los atributos funcionales de las células a quienes desplazan, salen a la sangre y si no se frena su multiplicación con alguno de los tratamientos actualmente en uso conducen casi invariablemente a la muerte del individuo. Según las características del clono celular comprometido las leucemias pueden ser agudas o crónicas y ambas pueden reconocer un origen linfoide o mieloide e incluso en algunos casos representan una fase de la evolución de un linfoma maligno. En las leucemias agudas las células leucémicas son muy inmaduras. Cuando su fenotipo y sus propiedades tintoriales, citoquímicas, inmunológicas y enzimáticas las asemejan a los linfoblastos reciben el nombre de leucemias linfáticas agudas (LLA); ahora si estos rasgos mencionados las asemejan a los elementos celulares de la medula ósea (mieloblastos, promielocitos, eritoblastos, megacariocitos) se las denomina leucemias agudas no linfáticas (LANL) o también leucemias mieloides agudas (LMA). También hay ciertos autores que reconocen un tercer tipo de leucemia si es que las características que se presentan no se engloban en la clasificación antes mencionada y la denominan leucemia aguda indiferenciada (LIA). En las leucemia crónicas los elementos leucocitarios mas representativos son bien diferenciados, distinguiéndose la leucemia mieloide crónica (LMC) que se caracteriza por el gran aumento de los granulocitos neutrófilos maduros (segmentados, baciliformes) y de maduración intermedia (metamielocitos y miecitos) la leucemia linfática crónica en la que predominan los linfocitos maduros con sus distintas variedades como la leucemia linfomatosa (LLL), la leucemia de células velludas,

leucemia prolinfocitica, linfática crónica de células T, etc. Leucemias agudas. Son más frecuentes que las leucemia crónicas y son la consecuencia de la transformación maligna de una célula hematopoyética primitiva (LANL) o el clono celular se origina en una célula primitiva linfopoyética (LLA). La multiplicación del clono celular alterado en la medula ósea desplaza a los clonos celulares hematopoyéticos normales con lo que cuando el clono celular maligno alcanza un volumen suficiente se produce anemia, granulocitopenia y trombocitopenia que se traducen clínicamente por palidez, infección grave y por una púrpura hemorragia. No hay explicaron de cómo se origina este clono atípico y maligno, pero si hay evidencia respecto de una modificación del ADN celular, hay una alteración citogénica demostrable por las anomalías cromosómicas: la translocación (15;17) y la inversión 16 que estas personas presentan, con reordenamiento cromosómico que determina anormalidades de los oncogenes, lo que remata en la producción de una estirpe celular que no madura más allá del mieloblasto, del promielocito, del normoblasto o del megacarioblasto en la LANL y del linfoblasto en la LAL. No se sabe porque esta línea celular maligna predomina sobre las células normales de la medula ósea dado que su reproducción es más lenta que

Fig. 1: Células mieloides en LMC con diferentes grados de madurez

estas últimas, tal vez influyan alteraciones del microambiente medular debido a la presencia de factores hormonales que favorecen su permanencia. El estudio de la morfología celular empleando la técnica pan óptica es muy útil, pero en algunos casos expone a error salvo que el blasto leucémico presente los llamados bastones de Auer (cilindros de color rojo oscuro ubicados en el citoplasma) que siempre y sin excepción indican un origen no linfático.

De ahí que sea necesario recurrir a las tinciones citoquímicas, que facilitan esta distinción. La tinción con PAS (ácido peryódico Schiff) es positiva en la mayoría de las LLA aunque suele ser también positiva en la variedad monocítica de la LANL. En cambio la tinción con sudán negro o con peroxidasas muestran en forma inequívoca que el blasto es de origen mieloide cuando resultan positivas, que es lo que ocurre con alta frecuencia en la LANL; una interpretación similar debe darse a la tinción con cloro acetato esterasa.

Se debe recurrir también a la inmunología pues los blastos presentes presentan antígenos en su superficie, así por ejemplo los marcadores de superficie CD13 y CD33 denotan una estirpe mieloide y la presencia de marcadores tales como CD2, CD10 (CALLA), CD19 indican que es de origen linfoide.

Leucemia aguda no linfocítica. Esta es una condición patológica muy heterogénea que resulta de la multiplicación de un clono celular atípico de alguna de las líneas celulares que tiene su asiento en la medula ósea. Dicho clono esta compuesto por células muy inmaduras que proliferan pero no maduran, desplazan a las células hematopoyéticas normales con la consecuente anemia, neutropenia y trompocitopenia. Según el criterio morfológico, el mieloblasto es una célula redonda de un diámetro que varía entre 15 y 20 µ con muy escaso citoplasma en el que se observan algunos gránulos, el núcleo es también redondo con la cromatina dispuesta en una red y en su interior presenta con frecuencia uno o mas nucleolos, pero este criterio morfológico puede ser engañoso y conducir a error por lo que es necesario recurrir a técnicas citoquímicas. Las más usadas son el sudán negro y las peroxidasas que a menudo se presentan positivas en los blastos leucémicos en esta afección. Los criterios inmunológicos identifican los antígenos de los blastos, tales como el antígeno CD33 que es propio de la leucemia aguda no linfocítica y no de los linfoblastos, el CD11b, el CD14 y el CD36 presentes en las variedades monocíticas. Además esta el análisis de las alteraciones cromosómicas, tal como la translocación (15;17) propia de la leucemia promielocitica aguda y la inversión del cromosoma 16 representativo de la leucemia mielo-monocitica con diferenciación eosinófila, la translocación propia del cromosoma Ph 1 (cromosoma Filadelfia) o t(9;22) (q34.1;q11.21) se demuestra en el 2% de los casos. Leucemia linfática aguda (LLA). En la gran mayoría de los casos no es posible demostrar un agente causal, habiéndose emitido como hipótesis el que mutaciones espontáneas sucesivas ocurrirían en los genes que regulan la proliferación del tejido linfático provocando el desarrollo de la leucemia. La LLA es un trastorno heterogéneo que se expresa con morfología variada y por rasgos inmunológicos también diversos en los blastos leucémicos que caracterizan la afección.

Fig. 2: Los bastones de Auer están presentes solo en LAM.

Fig. 3: Linfoblastos teñidos oscuro en la LLA.

Se distinguen 3 imágenes morfológicas según la clasificación de la FAB. En el grupo L1, los blastos son de pequeño tamaño, su núcleo es de contorno regular con un nucleolo poco aparente; su citoplasma es escaso y puede contener vacuolas. En el grupo L2 los blastos tiene aspecto heterogéneo y son más grandes porque tienen mayor cantidad de citoplasma, el núcleo es de contorno irregular y puede presentar un nucleolo. El grupo L3 es poco frecuente, los blastos tienen gran tamaño, su citoplasma es vacuolado, abundante y basófilo, el nucleolo aparece muy destacado, el aspecto celular es muy similar al que se

observa en el linfoma de Burkitt(61). En las tinciones citoquímicas, el empleo de acido peryódico Schiff (PAS) tiñe el citoplasma de los linfoblastos con una coloración rosada que se dispone en grumos; no se tiñe en cambio con el sudán negro ni con la tinción para peroxidasas. Para formular diferencias entre L1 y L2 es indispensable el estudio inmunológico, de ahí que se insista en definir el inmunofenotipo de los linfoblastos en estos individuos recurriendo al auxilio de los anticuerpos monoclonales. De este punto de vista se distinguen diferentes subgrupos según el grado de maduración, así como según el origen T o B de los linfoblastos. Aproximadamente el 75% de los linfoblastos no expresa con facilidad marcadores que indiquen su origen T o B y por ello ha recibido el nombre de células “nulas” o no T no B. con el progreso inmunológico, se ha comprobado que los linfoblastos “nulos” tiene en su casi totalidad antígenos que son característicos de las etapas inmaduras de la estirpe de los linfocitos B (linfocitos pre B y

pre B tempranos o precoces) aunque no reproducen fielmente las características antigénicas de sus homólogos del individuo normal. Se distinguen de esta manera 3 variedades de LLA de estirpe B: la LLA con linfocitos pre B tempranos compuesta por precursores B muy inmaduros que poseen los antígenos CD10,CD19,CD24 y CD34 y que presentan un reacondicionamiento del gen de la cadena pesada de la inmunoglobulina. El antigeno CD10 (CALLA) esta presente en el 90% de estas células las que además poseen deoxidinucleotidil transferasa terminal (TdT) en su citoplama. En la LLA del tipo pre B los linfoblastos presentan el antígeno CD10, en el 90% son TdT positivos, expresan también CD19, CD20 y CD24 y poseen en su citoplasma la cadena pesada cµ. En la LLA de linaje T los linfoblastos obstentan grados de maduración diferente, desde protimocitos a timocitos, atravesando por elementos de maduración intermedia. En la LLA también existe anemia, la que es prácticamente constante y crónica. La anemia es normocitica y se debe al reemplazo del tejido hematopoyético por la proliferación leucémica. Cuando la interpretación de los linfoblastos resulta difícil, el análisis citológico de la medula ósea permite encontrar una elevada proporción de ellos, por encima de 50%, de dichas células en el recuento diferencial de células nucleadas medulares. El hallazgo citogenético más frecuente e importante es la translocación t(9;22) (q32;q11) que se presenta en un 20% en los adultos y en un 5% en niños. Se asocian en el adulto otras translocaciones: la t(4;11) y la t(8;14) que son de mal pronóstico. Un factor muy importante en esta enfermedad es el número de leucocitos circulantes pues el pronóstico es peor si hay mas de 15-30x109/L y es muy malo con cifras de 100x109/L.

ENZYME LINKED INMUNOABSORVENT ASSAY

Introducción

La técnica ELISA (Enzyme Linked Inmunoabsorvent Assay) se basa en la detección de un antígeno inmovilizado sobre una fase sólida mediante anticuerpos que directa o indirectamente producen una reacción cuyo producto, por ejemplo un colorante, puede

ser medido espectofotométricamente. Este principio tiene muchas de las propiedades de un inmunoensayo ideal: es versátil, robusto, simple en su realización, emplea reactivos económicos y consigue, mediante el uso de la fase sólida, de una separación fácil entre la

fracción retenida y la fracción libre.

Además se han propuesto y desarrollado diferentes métodos de amplificación de la señal (luminiscentes, cascadas enzimáticas,...) que han permitido elevar la sensibilidad de algunos ELISA a la obtenida en el RIA (radioinmunoensayo) hormonal.

Este método ha tenido una enorme aplicación en todos aquellos campos en los que se precisaba la cuantificación de productos mediante anticuerpos : diagnóstico clínico, detección viral, clasificación de anticuerpos en isotipos, búsqueda de anticuerpos monoclonales, etc..

Dispositivos empleados en ELISA

Se han ensayado numerosas fases sólidas, desde los tubos de cristal de los orígenes a las actuales microplacas de 96 pocillos de plástico tratado para aumentar su capacidad de absorción de moléculas y con fondos de pocillo ópticamente claros para poder realizar las medidas de densidad óptica en instrumentos específicos, espectrofotómetros de lectura de placas que han recibido el nombre de lectores ELISA. Actualmente se están desarrollando dispositivos de mayor capacidad, por ejemplo con 384 y 1536 pocillos, adecuados para los sistemas de 'screening' masivo de los sistemas robotizados (HTS, 'High troughput system').

Los lectores ELISA son espectrofotómetros capaces de realizar lecturas seriadas de cada uno de los pocillos de la placa ELISA. A diferencia de un espectrofotómetro convencional, con capacidad de leer todas las longitudes de onda del ultravioleta y el visible de manera continua, los lectores de ELISA disponen de sistemas de filtros que sólo permiten la lectura de una o pocas longitudes de onda. Son la que se corresponden con las necesarias para determinar la densidad óptica de los cromógenos más comúnmente utilizados.

Fases de un ensayo ELISA

Las 4 fases de un ensayo ELISA son las siguientes:

A) Conjugación del anticuerpo o del antígeno con un enzima (peroxidasa, fosfatasa alcalina,...). El anticuerpo conjugado al enzima se emplea en los ensayos directos e indirectos, sandwich, etc... El antígeno marcado se emplea en ensayos de competición de antígeno.

B) Unión del antígeno (o del anticuerpo) a los pocillos. La unión de anticuerpos o antígenos se realiza con facilidad a la superficie de plásticos tratados que tienen gran afinidad por proteínas.

C) Formación de una o más capas de inmunocomplejos. En el caso del antígeno unido a la placa se puede detectar mediante un anticuerpo anti-antígeno marcado (ELISA directo) o empleando un anticuerpo primario anti-antígeno y un secundario anti primario marcado (ELISA indirecto). Este segundo método permite la amplificación de la señal al poderse unir uno o más anticuerpos secundarios a cada anticuerpo primario. En el caso del anticuerpo unido a la placa se incuba con una mezcla de antígeno y antígeno marcado. Se ensayan diferentes relaciones de antígeno frio frente a una cantidad fija de antígeno marcado. Es el ensayo de competición del antígeno. D) Revelado de la reacción enzimática. Después de un lavado para eliminar todos las moléculas marcadas no fijadas en forma de inmunocomplejos se añade el sustrato enzimático en solución. Se deja reaccionar y se lee la densidad óptica (D.O.) mediante espectrofotometría. En el esquema se muestra la reacción asociada a un ELISA directo.

Tipos de ensayos ELISA

Se han desarrollado múltiples variantes de ensayos ELISA que permiten desde la cuantificación de un antígeno en solución, la detección de un anticuerpo en una solución (por ej. en el clonaje de anticuerpos monoclonales), o la determinación de la subclase (idiotipo) de un anticuerpo. A continuación se describen los más comunes.

ELISA directo (ensayo ELISA simple de dos capas). Las placas ELISA se preparan recubriendo los pocillos con las soluciones en las que se sospecha se encuentra el antígeno. Se incuban con anticuerpos marcados. Indican la presencia de antígeno en la solución analizada. Es necesario incluir controles negativos que serán muestras del mismo tipo de las analizadas (sangre, orina, ...) pero en las que se tenga la certeza de la ausencia del antígeno buscado. Asimismo se incluyen controles positivos (soluciones donde se encuentra el antígeno buscado, o bien se le ha añadido).

ELISA indirecto. Las placas ELISA se preparan de una forma idéntica a la anterior. Los controles positivos y negativos son los mismos. El sistema de detección emplea dos anticuerpos : uno primario contra el antígeno, y uno secundario marcado contra el primario. La detección tiene mayor sensibilidad por presentar una amplificación de señál debida a la unión de dos o más anticuerpo secunadarios por cada primario. Es el ensayo más popular, como lo es la inmunofluorescencia indirecta, pues un mismo secundario marcado y un mismo sistema enzimático permite cuantificar una gran cantidad de antígenos.

ELISA 'sandwich'. (ensayo de captura de antígeno y detección mediante inmunocomplejos). Se trata de un ensayo muy empleado en el que se recubre el pocillo con un primer anticuerpo anti-antígeno. Después

de lavar el exceso de anticuerpo se aplica la muestra problema en la que se encuentra el antígeno, que será retenido en el pocillo al ser reconocido por el primer anticuerpo. Después de un segundo lavado que elimina el material no retenido se aplica una solución con un segundo anticuerpo anti-antígeno marcado. Así pues cada molécula de antígeno estará unida a un anticuerpo en la base que lo retiene y un segundo anticuerpo, al menos, que lo marca. Este ensayo tiene una gran especificidad y sensibilidad debido a la amplificación de señal que permite el segundo anticuerpo.

Marcadores enzimáticos más comúnmente utilizados

En la tabla siguiente se recogen los marcadores enzimáticos más comúnmente empleados en ensayos ELISA, los sustratos que se emplean para su revelado y el modo de prepararlos.

Enzima Sustrato Tampón

OPD 10 mg/25 mL de tampón citrato sódico 0.15 M pH 5; añadir microL de 30% peróxido de hidrógeno 30%

TMB 2.5 mg/250 microL de DMSO; hasta 25 ml con tampón citrato sódico 0.1M pH 6; añadir 5 microL de peróxido de hidrógeno 30%

ABTS 60 mg/100 mL de tampón citrato sódico 0.1 M pH 6; añadir 35 microL de peróxido de hidrógeno 30%; parar con fluoruro sódico 1.25%; leer a 405 nm

DAB 10 mg/20 mL de tampón Tris 50 mM pH 7.4; filtrar y añadir 20 microL de peróxido de hidrógeno 1%

CNP 6 mg en 1 mL de metanol; añadir 10 mL de tampón Tris 50 mM pH 7.4; filtrar y añadir 40 microL de peróxido de hidrógeno 30%

AEC 80 mg en 1 mL de N,N'-dimetilformamida + 200 microL de tampón acetato 0.1 M pH 4.5; filtrar y añadir 50 microL de peróxido de hidrógeno 30%

HRP (peroxidasa de rábano)

ASA 80 mg/100 mL de agua destilada caliente; ajustar a pH 6.0 con 1 mM NaOH y añadir 10 % por volumen de 0.05% peróxido de hidrógeno; parar con 25 microL de NaOH 1 M

PNPP 5 mg/5 mL de tampón dietanolamina-HCl 0.1 M pH 9.8 +1 mM cloruro de magnesio

NAPFB (A) 4 mg de fosfato de naftol en 200 microL de dimetilformamida en un tubo de vidrio, (B) 10 mg de sal Fast Blue BB/ 10 ml de tampón Tris 0.05M pH 9.2 - 2 mM cloruro de magnesio. Mezclar A + B y filtrar.

NAPR (A) 4 mg de fosfato de naftol en 200 microL de dimetilformamida en un tubo de vidrio, (B) 10 mg de sal Red BB/ 10 ml de tampón Tris 0.05M pH 9.2 - 2 mM cloruro de magnesio. Mezclar A + B y filtrar.

AP (Fosfatasa alcalina)

BCIP 1 mg/mL en solución AMP (2-amino-2-metil-propanol)

beta-G ONPG 2.5 mg/ml en tampón fosfato sódico 0.1 MpH 7.0 + 1 mM cloruro de magnesio + 0.1 M beta-mercaptoetanol

ureasa BP 8 mg/1.48 ml de 0.01M NaOH; llevarlo a 100 ml con agua desionizada; añadir 100 mg de urea y EDTA a 0.2 mM; ajustar elpH a 4.8 con 1 mM NaOH o HCl; almacenar a 4ºC

PG IS

Añadir a cada placa de ELISA 25 microL de cada uno de los reactivos siguientes en secuencia : (A) 1% (peso/vol) gelatina en 0.1 M tampón fosfayo pH 7.0, (B) 1% (peso/vol) almidón en agua destilada caliente, (C) 3.04 mg/mL de benzil-penicilina en 0.1 M tampón fosfato pH 7.0 (5000 U/mL), (D) 0.01 N ioduro en 0.1 M KI solución stock (en una botella oscura)

Para mayor información se pueden visitar algunos sitios de Internet con información gratuita: http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/E/Elisa.html http://www.uq.edu.au/vdu/ELISA.htm http://www.biology.arizona.edu/immunology/activities/elisa/elisa1.html

Los arcanos ámbitos infernales

Me tomare la libertad de presentarles un artículo que leí en un cómic, pero que me causo impresión el contenido de este por dos razones. La primera es que se pone de manifiesto una critica hacia la ciencia, en la forma

de experimentación que se tiene en muchos casos y la segunda es también una critica, pero hacia los gobiernos y sus fuerzas militares, sobre todo a las de países desarrollados, y su intervención en los descubrimientos y avances tecnológicos que en su mayoría provienen de usos militares y que luego fueron traspasados a uso civil. Sin más introducción quiero mostrarles un extracto de este y cada uno podrá sacar sus propias conclusiones después de leerlo. El razonamiento y la investigación humanos se apoyan totalmente en el método científico, el cual consta de tres fases principales: observación, experimentación y conclusión (claro, hay mas fases, pero las esenciales son las anteriores). En lo que respecta al cuerpo humano, la observación resulta más o menos fácil desde el momento en que todo tiene un cuerpo. Ahora bien, la experimentación ya es otra cosa, pues en ocasiones involucra poner en riesgo la salud y hasta la vida. ¿Entonces existe diferencia entre un investigador y un asesino en serie, cuando ambos cercenan un cuerpo humano para exponer sus vísceras? Técnicamente no, pero claro, muchos argumentaran que es una comparación injusta por tratarse de contextos y situaciones distintas. Sin embargo, pese a todo, el resultado final es el mismo: un cuerpo mutilado. Ahora bien, por supuesto que ante los experimentos mas ... digamos “cuestionables” o “peligrosos”, se recurre a experimentar con animales, desde ratones de laboratorio hasta chimpancés, pasando por perros, gatos, etc. Y claro, cabe señalar que no toda la investigación científica es con fines médicos

exclusivamente; en realidad, industrias como la cosmética, la militar y hasta la creación de drogas “de diseño” experimentan con cosas para verificar su efecto pernicioso potencial a corto o largo plazo. Sin embargo, aquí entra el gran dilema de este tipo de investigaciones: ¿Cómo estar seguro del efecto en humanos, si sólo se ha experimentado con animales? Y al final, en vez de conejillos de Indias, siempre hace falta hacer la prueba final comprobatoria en un humano, por lo menos. En la actualidad, antes de experimentar con humanos, se debe haber llevado, por lo menos, investigaciones con animales. Eso, según los acuerdos internacionales. Pero ya que tales permisos involucran largos tramites, y la negación potencial hacia la autorización final, muchas veces los experimentos con humanos se hacen en secreto, cayendo en la ilegalidad, e incluso existe el caso de científicos que experimentan consigo mismos, como fue el caso, entre muchos otros parecidos, de Albert Hoffman, descubridor del LSD, quien fue el primer humano en probar esta droga en estado puro. Ante los riesgos que implica terminar en la cárcel o muerto, no es secreto que muchos investigadores aceptan apoyo del gobierno de sus países de origen, si facilitan sus descubrimientos a la milicia. Cosas como los teléfonos celulares, máquinas de fax, la Internet, el velcro o el teflón fueron creados y utilizados inicialmente para uso militar, antes de que pasaran a ser de uso común. Por otra parte, resulta irónico, en un sentido macabro, que casi el 90% de los conocimientos médicos del siglo XX proceda de los científicos y médicos nazis que utilizaron judíos para todo tipo de experimentos/torturas en los campos de concentración. El interés de la milicia en la vanguardia de investigación va mas allá de funcionar efectivamente, pues nunca se ha admitido abiertamente, hay pruebas y testimonios de que los ejércitos fomentan los experimentos con seres humanos para probar nuevas armas, o para buscar crear seres humanos mas fuertes y resistentes (¿Qué diría Hitler de esta búsqueda?)

durante los años 60' , con la paranoia de la guerra fría y el temor a las armas nucleares, muchos soldados y algunos civiles, sin saberlo, fueron rociados de radiación atómica en diversos experimentos , para probar los efectos perniciosos de la contaminación nuclear. Hoy por hoy, es un hecho comprobado que la radiactividad provoca cáncer y mutaciones congénitas en la descendencia potencial. Verificada la poca viabilidad de un arma radiactiva, se procedió a investigar por el lado de la microbiología y el concepto de “armas biológicas”. No es secreto que muchos de los cargamentos de vacunas y medicamentos enviados de “buena voluntad” a países tercermundistas, por fuerzas militares, entre medicinas autenticas llevan consigo vacunas experimentales no probadas, e incluso, enfermedades mejoradas en los laboratorios para incrementar su mortandad y selectividad. (Algunas teorías conspiracionistas afirman que el SIDA se origino así, y que por eso, “casualmente”, los primeros brotes se dieron en las naciones mas pobres de África). Ante esto, no falta el paranoide (me incluyo en ese grupo) que cuando ve una epidemia local de gripe especialmente fuerte, pronto cree que se trata de alguna prueba secreta de un arma biológica. Y claro, ni hablar de situaciones como la de alimentos contaminados por químicos o radiaciones (¿Como creen que se descubrió que los alimentos con dosis controladas de radiación, nunca requieren de refrigeración, pero cambian de sabor?), o las teorías de mensajes subliminales y control de masas a través de medios masivos (¿Alguien ha caído en cuenta de como las temporadas deportivas nunca coinciden con otra clase de eventos televisivos?). Tampoco es secreto que en ciertos países, los criminales convictos se les ofrecen conmutar sus penas o, de plano, el perdón total, si aceptan someterse a experimentos con ellos, que van desde la psicología hasta nuevas técnicas de cirugía y medicina. ¿Y todo esto con que fin? Simple: lograr una humanidad “superior”, libre de toda enfermedad (por vacunas, medicamentos o inmunidad desarrollada genéticamente), cada vez mas

fuerte, mas ágil, mas atractiva (esta comprobado que uno de los negocios mas rentables es el de las dietas: todo el mundo desea ser delgado como sea, eso es cierto,

lo vemos en televisión a cada momento). Lo que sea, en tanto

se sea “mejor”. ¿Significa esto, acaso, una “homogeneización” total? Tal vez, pero esto tardara mucho todavía, ya que antes de que surja siquiera la idea de experimentar con humanos, ya esta prohibido hacerlo, aun sin control

internacional estricto en aspectos como la clonación,

(recuerden que muchos países tienen sus propias legislaciones al

respecto) , el diseño de genes y posibles vacunas para el SIDA y le cáncer,

así que por ahora, la raza humana seguirá siendo variada en cuanto a individuos... aunque claro, ¿ que no es una manía de los ejércitos conservar a sus tropas con un solo uniforme común? Hola de nuevo, mucho archivos secretos X dirán ahora ustedes, pero en el mas recóndito de sus pensamientos y dejando de lados los bandos, yo creo que es valido preguntarse este tipo de cosas ,en ocasiones, al menos como personas comunes y corrientes que somos y pensar que todo lo que es muchas veces no es lo que parece, tampoco, es desconfiar de todo o de todos, pero al menos colocar el tapete estos temas es saludable ya que no nos quedaremos con lo que nos dicen solamente o ¿ alguno de ustedes prefiere eso? Nos vemos y cuidado con las gripes.

Nicolás Peréz. Alumno Bioquímica PUCV.

HOLA

Me presento para los

mechones... y para alguno que otro que aun no me ubica, soy Rodrigo López, mas conocido en la U como “Zombie”. Egrese el segundo semestre del año pasado (2004) y actualmente estoy realizando mi proyecto de tesis en el departamento de neurociencia de la escuela de medicina (UPMC) de la Universidad de Pittsburgh, en el laboratorio del Phd. Gonzalo E. Torres… ex alumno de nuestra carrera, en Estados unidos.

Mi trabajo de tesis es determinar y caracterizar interacciones proteína – proteína que se produzcan en el primer loop intracelular del transportador de dopamina DAT, por medio de técnicas proteomicas (GST pull down; electroforesis SDS; electroforesis 2D; espectroscopia de masas MALDI-TOF). Este transportador es una proteína de doce segmentos transmembrana que esta ubicada en la membrana plasmática del las neuronas dopaminergicas pre – sinapticas, en el axon para ser mas precisos, esta proteína es la encargada de la retoma de la dopamina liberada al espacio intersináptico la cual al ser recaptada se almacena en vesículas o bien se puede degradar. Esta proteína pertenece a la familia de los transportadores dependientes de sodio, de hecho, Dat efectúa un cotransporte de sodio, dopamina y cloruro (2 Na+: 1 Cl-; 1 Dopamina). Esta proteína esta implicada en procesos de adicción a drogas como cocaína y anfetamina, también esta implicada en patologías como el mal de Parkinson, esquizofrenia y depresiones. Estudiar el tráfico de DAT desde y hacia la membrana, y caracterizar las proteínas que interaccionan con DAT en dicho tráfico, podría ayudar a encontrar solución a los problemas anteriores.

Llegue a estados unidos junto con Vania Strello, ella esta haciendo su tesis haciendo estudios de interacción proteína-proteína con torsina A, una proteína de lo que se sabe muy poco, pero a diferencia de mi, ella basa sus estudios de interacción en una técnica llamada Y2H (sistemas híbridos de levadura). Sobre nuestra experiencia acá, el cambio fue abrumador…. Nosotros llegamos a USA el 24 de enero de este año en Valparaíso habían temperaturas de 26 grados, en santiago bordeando los 30 y acá fluctuaba entre –15 y –5 grados, enfrentarse al cambio cultural es fuerte también, el idioma… durante el primer mes no

entendía casi nada de lo que decían lo hablantes nativos, de a poco te acostumbras a escuchar palabras en ingles, al comienzo los diálogos suenan como una sola gran palabra, la gente en general es amable, “polite” (algo así como urbanamente educada), una cosa impactante es el acceso a la información y no hablo solo de internet sino de libros… las librerías son gigantes en comparación a las chilenas y puedes ir a leer los libro solamente, además son baratos en comparación con Chile. Sobre la manera de hacer ciencia… es otro mundo, con otros estándares, impuestos por

la cantidad de recursos (monetarios) que tiene este país. Por ejemplo, pipetear con la boca… como siempre lo hemos hecho allá, aquí es considerado trabajar en malas condiciones, así que todos tienen propipetas automáticas, de esas que parecen pistolas) para pipetear… hasta el agua. No quiero describir mucho el lugar para no caer en pedanterías, pero me ha quedado bastante claro el porqué en países como este (USA) la ciencia avanza tan rápido, pues todo el equipamiento y las condiciones que necesitas para llevar a cabo tu investigación (sea cual sea esta) están a la mano, por ejemplo para mis protocolos necesito usar centrifugas a vacío (speed vac) y acá hay tres que son del departamento, y si necesito mandar a secuenciar algún DNA se demoran 2 días en entregarme el resultado.

Otro detalle, es que acá todo es desechable, las pipetas son de plástico, estériles, las usas y las botas.

Pero acá descubrí algo súper importante que quiero compartir con todos ustedes y que va mas allá de los prodigios tecnológicos que aquí poseen. Esto que descubrí es que nuestra formación, la que se nos da en la universidad…. En la PUCV, en Bioquímica es súper buena, va mas allá de nuestras falencias materiales. En base a los cursos experimentales y de investigación como bioquímica experimental 2 y bioquímica clínica en los cuales se deben crear proyectos y planificar trabajos (aunque sea solo en papel como en clínica), además de la planificación de tesis, hemos podido afrontar el desafío de estar en un laboratorio de un país altamente tecnificado y adaptarnos sin ningún problema a técnicas experimentales absolutamente nuevas. Alguien me dijo a finales del año pasado “si eres capaz de hacer un gel

con la Prof. Guillermina eres capaz de hacerlo en cualquier parte” y fíjense que es cierto. Durante todas las asignaturas que se nos imparten, tanto teóricas como experimentales nos forman un criterio, un modo de efectuar trabajos experimentales y de enfrentar situaciones desconocidas con un pensamiento critico que hace posible la solución de problemas de un modo bastante eficiente. Una cosa anexa y casi para la risa… la escasez de recursos durante los laboratorios de docencia nos crea una capacidad de aprovechar recursos inmensa en comparación a la gente que trabaja acá, pues ellos no tienen la necesidad de hacerlo (nunca la han tenido).

Otra cosa que les quería comentar y es a raíz de lo mismo, no tengan miedo en viajar al extranjero, contáctense con investigadores… junten algo de dinero para el pasaje y el primer mes, en lugares como estos el sueldo de tesista alcanza, es como un técnico de rango bajo pero te puedes pagar un departamento, comida y alguna otra cosa. Nosotros estamos bien catalogados para hacer un doctorado acá, pero deben venir a trabajar un año antes por lo menos pues postular a doctorados en USA es mas fácil si se trabaja en USA al menos un año antes de postular, convienen hacer eso ya que las cartas de recomendación que se necesitan son más valoradas si son de científicos que trabajan en USA, además se debe rendir un test llamado GRE (obviamente tener un buen puntaje en el), dar una buena entrevista y tener publicaciones (al menos una), si quedas aceptado tienes automáticamente un sueldo de 18,000 dólares anuales que, aunque suena harto en pesos acá alcanza para vivir pero sin mucho lujo. Espero que todos tengan un muy buen año… y a los mechones… ANIMO la carrera es un poco latera al comienzo pero se pone divertida más adelante, asistan a todos los congresos que puedan pues ayuda bastante para saber si te gusta la carrera, conoces gente y lo pasas súper bien… y pónganle empeño que en Chile las notas de la U si importan para hacer un doctorado.

http://www.pitt.edu

MATRICULAS

El proceso de Matrícula en Línea para el Segundo Semestre 2005, se inició el 25 de julio y finalizará

el 05 de agosto.

* Para obtener tu comprobante de matricula debes ingresar a tu Navegador académico entre las fechas 25 de Agosto hasta el 5 de Agosto e imprimirlo. Hay dos modalidades de pago: - matrícula con pago en línea (mediante tarjeta de crédito y sistema Webpay de Transbank) y - matrícula con pago presencial en cualquier sucursal de Banco BCI. * Las personas que tengan el beneficio del Credito Universitario (cursos superiores) no olviden firmar el Pagaré. Los lugares y fechas son: - Lunes 25 de julio a martes 2 de agosto: Cafetería Casa Central. - Miércoles 3 y Jueves 4: en el Salón de Honor. - Viernes 5 de Agosto: en la Cafeta. (Rezagados) * Quienes que tengan asuntos pendientes con tesorería o alguna duda ingresen a la pagina habilitada por la Universidad www.aranceles.ucv.cl

CLASES

Las clases comienzan normalmente el miércoles 3

de agosto

CICLO DE SEMINARIOS

Este segundo semestre comienza el 3er Ciclo de Seminarios en Biotecnología y Biomedicina que

se realizara los días viernes en la clave 5-6.

Las fechas y los expositores invitados son:

∗ 12 de agosto: Rafael Vicuña ∗ 19 de Agosto: Enrique Jaimovich ∗ 26 de Agosto: Horacio Croxatto ∗ 2 de Septiembre: Juan Carlos Saéz ∗ 9 de Septiembre: Francisco Melo ∗ 23 de Septiembre: Pilar Carvallo ∗ 30 de Septiembre: Eduardo Lissi ∗ 7 de Octubre: Jorge Ferreira ∗ 21 de Octubre: Pedro Labarca ∗ 25 de Noviembre: Leda Guzmán

Sobre las prácticas......

Hola compañeros, quería comentar algo sobre los lugares en los cuales se pueden realizar prácticas profesionales, en función de mi experiencia personal y lo que me he dado cuenta con el tiempo. El análisis y opiniones que se darán a continuación son de mi experiencia en el “Laboratorio de Toxicología Humana y Ambiental” de la Universidad de Playa Ancha, práctica realizada desde el 5 de enero al 11 de febrero del 2004. A continuación daré un listado de cosas buenas y malas sobre realizar una practica profesional en este laboratorio y posteriormente la conclusión de sobre donde buscar práctica y porque. Cosas buenas: 1.- Este laboratorio cuenta con equipos modernos tales como cromatógrafo de gases, HPLC, absorción atómica con horno grafito y atomización con llama y prontamente equipos con detectores de masa en sus áreas de trabajo (determinación de pesticidas, metales pesados y otros compuestos en aguas y muestras biológicas). 2.- El ambiente de trabajo el cual es no es desagradable y compañeros de trabajo en general agradables y la gran cantidad de trabajo con lo cual uno siempre esta ocupado. 3.- La cantidad de cosas que se deben realizar individualmente por ejemplo preparación de soluciones, manipulación de muestras, digestiones lo cual permite un aumento de la destreza en el laboratorio. 4.- La experiencia en esta área puede ser muy importante ya que los conocimientos y práctica en el área instrumental son muy útiles en el área de investigación para un bioquímico. Cosas malas: 1.- El hecho de que a los alumnos en practica se les mire como empleados baratos, ya que se le explica muy superficialmente la teoría de la instrumentación empleada, posteriormente se les asigna tareas especificas en cada sección por el tiempo de practica que este, con lo cual se consigue el nivel máximo de eficiencia en ese trabajo pero un nivel de aprendizaje mínimo para el alumno ya que se queda en una sección y no aprovecha el conocimiento de las otras secciones. Este pudo haber sido mi caso también, pero debido a que solicite transferencia a otra sección para aprender más, no lo fue. 2.- A pesar de que el laboratorio cuenta con equipos modernos estos no son enseñados de una forma apropiada al alumno para su

manipulación por lo cual a uno lo limitan en la gran mayoría de los casos a ser solamente el preparador de las muestras y se pierde la posibilidad de tener la experiencia de manipular los equipos. 3.- Este tipo de laboratorios en sus tratamientos de muestras debe utilizar solventes orgánicos los cuales son tóxicos (hexano, diclorometano por ejemplo) y ácidos frente a lo cual el laboratorio para mi opinión no cuenta con la ventilación adecuada para eliminarlos de el lugar en corto tiempo por lo cual se puede inhalar una cantidad de estos. 4.- A pesar de ser una practica que puede ser bastante completa y puede ser un campo laboral el cual puede ser realizado perfectamente por un bioquímico, los trabajadores de esta área son analistas químicos y laboratoristas químicos (salvo en el área clínica que es muy reducida en la cual hay una tecnóloga medica) a los cuales se les paga un sueldo distinto por este trabajo que el sueldo que habría que pagarle a un bioquímico por lo cual para este trabajo obviamente no se elegirá a un bioquímico para realizarlo por tanto no se justifica realizar prácticas profesionales en áreas donde la posibilidad de contratación es casi nula. 5.- Por ultimo a pesar que no es un defecto de el laboratorio propiamente tal pero lo menciono porque para mi fue lo mas desagradable de todo es la discriminación que se da entre alumnos en practica. Cuando estuve ahí los alumnos en práctica éramos dos estudiantes de bioquímica (uno de la PUCV y el otro de la PUC), una estudiante de analista químico y dos estudiantes de laboratoristas químicos, de todos nosotros solamente se le pago la practica al otro bioquímico, el cual de la PUC. ¿Porqué solamente se le pago a él y a nosotros no?, ¿Porque a mi no me pagaron si yo también soy estudiante de bioquímica y además él y yo teníamos un nivel curricular y académico idénticos? Considero que este tipo de discriminación no puede ser aceptada. Conclusión: A pesar de haber muchas áreas en las cuales se pueden desempeñar los bioquímicos, algunas de estas no son conveniente por un asunto de competencia laboral debido a la remuneración que se debe entregar, por tanto recomiendo que al momento de buscar practica profesional se haga por preferencia en el área clínica donde el bioquímico tiene mayores posibilidades reales de ser contratado.

QUIEN POR QUIEN….LOS ANTIGUOS Y NUEVOS SUPER HEROES INTRACELULARES

CIT

OP

LA

SM

A

CAA 2004-2005 CAA 2005-2006

INTERCAMBIADOR DE PRESIDENTES

INTERCAMBIADOR DE VICEPRESIDENTES

Nombre IUPAC: Felipe Villanelo Isotipos: El maestro Características: Generación 2001, Alumno destacado por su rendimiento. Loc. Subcelular:: En los PC del 3er piso Frase Típica: pero si eso es muy fácil, vengo a solicitar una ayudantia. L.Q.N.S. Vio: Tomando apuntes en clases, siendo irresponsable con sus deberes universitarios, como piojo con lindano en la fiesta del congreso de la ANEB (o se vio). Gordo L.Q.N.S. Supo: la verdadera historia del triangulo amoroso. Regalo Útil: Que lo nombren Secretario de Docencia.

Nombre IUPAC: Pablo Jose Tapia Ossa Isotipos: Brócoli, fungi, pancho puebla, colega, jefe, freddy turbina Características: Generación ’98, Sincero, reclamon, buen amigo, responsable. Loc. Subcelular: Lab.. o microscoipios del Profe Reyes, Frase Típica: yo escribo las cartas, estoy chato de estos #&%#**!!, hola pooo’ L.Q.N.S. Vio: bailando axé con el pelo corto, la “discusión” en Clínica, cuando fue a dejar la carta de reclamo por clínica, L.Q.N.S. Supo: si lo odian el 99,9 % de los profes o el 100%, porque disertó con el aminoácido arsénico, porque dejo de usar el maletín y su antiguo look. Regalo Útil: una podadora....una caja de armonil, la Mariela.

Dentro de poco dará su examen de tesis. Fue uno de los mejores presidentes del CAA q ha tenido la carrera.

Nombre IUPAC: David Báez Isotipos: Juanito, el padre del “yo…” Caracteristicas: Generación 2001, Muy pero muy hablador, siempre dando su opinión. Loc. subcelular: ….nunca en la Universidad. Frase Tipica: “estuve con licencia”, “no tengo na’ de materia”, “que entra en la prueba” L.Q.N.S.Vio: que no diese su opinión “la vez” q iba a clases, que no siga a un profesor días antes de las pruebas. L.Q.N.S.Supo: Que hace para pasar los ramos si nunca va a clases. ¿Quién conquisto a quien? Regalo Útil: Un libro con 1000 Pág. En blanco para que cuente su propio cuento.

Nombre IUPAC: Carolina Antonella Valle Loyola Isotipos: Porotito, carito, chiquitita, chili-huili Características: Generación ’99, Chica, enojona, estudiosa, responsable, buena cocinera,confidencial. Loc. Subcelular: Lab. de la Prof. Curotto, en el HPLC Frase Típica: puchita, hola po colega L.Q.N.vio: q se le acabe la paciencia aunq este a punto de estallar, rendirse porq algo no esta saliendo bien. L.Q.N.S.supo: si le da permiso al “negro” para salir a carretear. Regalo Útil Un perkin elmer nuevo, el José.

Es tesista de la Prof. Curotto. Realmente era la vice-

presidente y tesorera-secretaria del CAA. Su desempeño fue excelente, muy ordenada y responsable.

CIT

OP

LA

SM

A

TRANSPORTE DE TESOREROS

TRANSPORTE DE SECRETARIAS

Nombre IUPAC: Alvaro Gonzalez Vogel (shipirino vogelus) Isotipos : ship, shipon, dewey, moship, mr. magoo, Características: Generación 2002, mirada penetrante, malito pa`l diente, zapatos de guru-guru, buen amigo, canchero, sociable y muy pero muy sexy. Buen Alumno. Delegado de la ANEB. Localización subcelular: La oficina Frase típica: “vamos por unos porotitos” (lentejitas, purecito, pizzita, chaparrita…..), “¿warwaf?”, “perepale dibiribalo los pasones”. L.Q.N.S.Vio: su cara cuando vio su computador que flotaba por que el chancho rebalso la tina. L.Q.N.S.Supo: falto a una prueba por un vil Muss de chocolate, porque se saca los lentes en las fiestas. Regalo Útil: un fondo para hacer lentejas, otro pc para poner más ropa encima., La ultima versión del FLASH.

Nombre IUPAC : Pamela Fernández Caracteristicas: Generación2000

Nombre IUPAC: Daniela Salas Troncoso Isotipos : Chika Características: Generación 2002. Estudiosa, stresada, corre y habla por todos lados, expresiva, social y amigable. Loc. subcelular: Lab. de Espectroscopia, Cafeta, en las mesas del 3er piso, en clases o haciendo ayudantía. Frase típica: Holiii, no he estudiado nada, aa me fue como el hoyo, no! si me lo eché, sin aburrimiento, “mitch”. L.Q.N.S.Vio: cuando dio una vuelta completa a la CC corriendo como manda por pasar Métodos, q repruebe un ramo, retando al Alvaro (o se vio) por irresponsable. L.Q.N.S.Supo: En que terminó su proyecto de CAA de ciencias blablablabla…, Regalo Útil: Unos patines, vales eternos por una Coca-Cola y para ir al Mc Donald, unos billetitos para que no le falte cuando se vaya de intercambio…

Mucha suerte en Canadá….

Nombre IUPAC : Katherine Estay Isotipos : katy Características: Generación 2002 Loc. subcelular: con “juanito”

Nombre IUPAC: Antares Varela Características: Generación 2003

Nombre IUPAC: Patricio Araos Salas Isotipos: Wally, pato, “chip two” Características: Generación 2004, acosador, intelectual, responsable, estudiosos, social y comunicador, le gusta jugar a la pelota. Localización subcelular: En la Biblioteca de la CC y en la cafeta, con sus amigos y compañeros Frase típica: ”puta weon”, “que tal camarada” L.Q.N.S.Vio: dando ideas, ¿Que pasó en la casa de la KIKA?..¿con la KIKA? L.Q.N.S.Supo: ¿que pasó en la fiesta de los mechones?..¿¿¿¿mechona??..¿si o no? Regalo Útil: lentes con mayor aumento, una chaqueta de CUERO original.

Nombre IUPAC : Gonzalo Almarza Isotipos: chalin, lento 2 Características: Generación 2002, Educado, buen alumno, romántico, relajado y paciente. Localización subcelular: en clases, en biología (uyyy) Frase típica: como esta caballero, como esta señorita, hola mi niña. L.Q.N.S.Vio.cuando atino en 1º con una de sus compañeras (o se vio?) L.Q.N.S.Supo: "chalin un ojo abierto otro cerrado…… en la frente" (o se sabe) Regalo Útil:

Nombre IUPAC: Solange Lorena Golusda Castellón. Isotipos : Golu, licenciada, golosa, golum. Características: Generación 1999, gritona, sorda, casi sin olfato, de manos calientes. Alumna destacada por su rendimiento. Loc. subcelular: en Quim. Analítica Ambiental (con la Helen), en el Lab. del Prof. Reyes. Frase típica: mich, L.Q.N.S.Vio: La cara que puso cuando el Prof. Reyes la vio revisando unas “correos”, y la otra cara que puso cuando estaba jugando solitario en el Lab y la volvió a pillar el Prof. Reyes. L.Q.N.S.Supo: Atinando, si estaba entretenida y gososa revisando “esos correos” Regalo Útil: Un espantatia, tíos en realidad.

Actualmente esta terminando su tesis en el LAB. del Prof. Juan Reyes.

CIT

OP

LA

SM

A

Nombre IUPAC: José Antonio Pino Reyes. Isotipos : Negro, Joe, cirilo, pelao, esclavo Características: lentitud, calma, serenidad y paciencia, cuenta chistes fomes, es un trabajólico. Localización subcelular: Lab de la U.V…todo el día Frase típica: mmmm veamos (con la mano en la pera, estilo Bogus), puchita, chiquitita, mmm que interesante L.Q.N.S.Vio: Tirando una talla buena. L.Q.N.S.Supo: Si compraba penca…eso dicen Regalo Util: Un reloj gigante…y con alarma, la carito. Generacion 1999. Ahora está realizando su tesis en la U.

de Valpo.

¿Por qué las mujeres manejan tan mal? Porque el instructor de manejo es un hombre.

¿Por qué los perros aúllan en el desierto? Porque no hay árboles, sólo cactus.

XXII Congreso de estudiantes de Bioquímica. 2005