Roteiro DNA
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5/16/2018 Roteiro DNA - slidepdf.com
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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA – MACROEXTRAÇÃO DE DNA VEGETAL -
KIWI E BANANA.
Materiais:
- 01 saco plástico tipo “zip loc”;
- 01 rodela da fruta utilizada sem casca (kiwi, mamão
ou morango);
- 10 mL de solução de extração de DNA;
- Aparato filtrante: 1 funil com gaze;
- Álcool etílico (mínimo 70%) gelado;
- 01 tubo de ensaio ou recipiente estreito limpo;
- 01 palito de dentes ou de churrasco.
Solução de Extração de DNA:
- 50 mL de detergente comum (sem corante);
- 15g (2 colheres de chá) de sal de cozinha (NaCl);- 950 mL de água mineral.
Procedimento:
1. Coloque a fruta no saco “zip loc”;
2. Esmague com o punho por, no mínimo, 2
minutos;
3. Adicione10 mL de solução de extração de DNA;4. Misture tudo apertando com as mãos por 1
minuto;
5. Derrame o extrato no aparato filtrante e colete
uma quantidade equivalente a “2 dedos” no tubo de ensaio;
6. Derrame, devagar, o álcool gelado no tubo, até
que esteja cheio pela metade – mantenha o tubo ao nível dos olhos;
7. Mergulhe o palito de dentes dentro do tubo, nolocal entre a camada de álcool e o extrato, retirando o DNA.
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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA – EXTRAÇÃO DE DNA DE CÉLULAS
EPITELIAIS BUCAIS.
Materiais:
- 03 colheres de chá de sal de cozinha (NaCl);
- ½ xícara de água;
- 01 copo limpo;
- Detergente comum (sem corante);
- 01 colher limpa;
- Aparato filtrante: 1 funil com gaze;
- 01 tubo de ensaio ou recipiente estreito limpo;
- Álcool isopropílico.
Procedimento:
1. Dissolver 3 colheres de chá de sal em ½ xícara de água;
2. Colocar uma porção dessa solução na boca e bochechar vigorosamente
por 2 minutos;
3. Despejar essa solução em um copo limpo;
4. Adicionar cerca de ¼ de detergente e misturar;
5. Filtrar essa solução, recolhendo o filtrado no tubo de ensaio (até a
metade);
6. Adicionar, lentamente, o álcool isopropílico ao tubo de ensaio, até
aumentar o nível em 2 a 3 cm;
7. Depois de adicionar o álcool, a camada de DNA sobe para a fase
superior, separando-se da camada inferior.
Obs.: É possível retirar o DNA enrolando-o cuidadosamente em um palito de dentes.
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“À PROCURA DO DNA NA COZINHA”
Toda a informação necessária para criar um organismo encontra-se no DNA.
Esta molécula é usada durante o período de vida de um organismo para fornecer
instruções para milhões de processos celulares que ocorrem constantemente.
Para estudar o modo como essas informações são comunicadas às células, os
cientistas isolaram o DNA e estudaram o modo de interação do DNA com as
proteínas e RNAs.
Este trabalho laboratorial usa um processo semelhante ao utilizado pelos
cientistas quando começaram as primeiras investigações sobre DNA.
Para isolar o DNA, os cientistas separaram-no dos outros componentes
celulares. As células foram fragmentadas e o DNA separado do conteúdo lipídico
das membranas da célula e dos organitos. Em seguida o DNA foi separado das
proteínas.
Questões para Discussão
1. Onde se encontra o DNA na célula?
2. Qual a função dos reagentes usados na extração (sal, detergente e álcool)?
3. Como é que se pode extrair DNA de qualquer coisa morta?
4. Por que motivo não se pode ver a dupla hélice que constitui a molécula de
DNA?
Sites recomendados para busca de informações:
1. http://www.dbio.uevora.pt/LBM/Foco/Extraccao/Extraccao_DNA.html#_Toc48
5235129
2. http://www.odnavaiaescola.com
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