Tema 25. Conjugación pilus pelo F o pelo sexual proceso unidireccional (Hayes, 1953) donadora o...
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Tema 25. Conjugación
piluspelo Fo pelo sexual
proceso unidireccional (Hayes, 1953)
donadorao macho
receptorao hembra
pelos o fimbrias
25. Conjugación• Conjugación: descubrimiento y el proceso
• Factor F o factor de fertilidad: tipos sexuales
• Tipos de conjugación:
F+ X F-, Hfr X F-, F’ X F-
• Mapa genético por conjugación interrumpida- mapa circular - distintas estirpes Hfr
• Mapa de ligamiento
conjugación
Lederberg y Tatum, 1946 (P. Nobel 1958)
108 células
pasa el mediopasan moléculasno pasan células
tubo en U
no nutrición cruzadano transformación (1944)
pareja específica pareja efectiva
Factor F (Hayes): - independiente de marcadores cromosómicos (se pierde y se transfiere en mayor proporción)- no un gen con dos alelos (aumentan F+ en función del tiempo)- F es un plásmido: círculo de DNA de doble cadena con replicación independiente del cromosoma
factor F o factor de fertilidadinserción
en el cromosoma
replicación
transferencia
sfa parte de F en cromosoma(afines al factor sexual)
5’
donadora receptora
F+ X F-
puente deconjugación
F+ pasa a Hfr
1/1000 células F+ pasan a ser Hfr
Hfr: alta frecuencia de recombinación (Cavalli-Sforza, 1950)
inserción de F: F+ pasa a Hfr
¡un únicosobrecruzamiento!
Hfr X F-
dossobrecruzamientos
recombinación homólogano recíproca
frecuencia de transferencia de material genético en conjugación
F+ X F+ o F+ X Hfr: no hay contacto
F+ X F- => genera un F+ (1/5) y baja recombinación (1/107)
Hfr (1/103) X F- => receptora F- y alta tasa de recombinación (1/104)
Hfr genera un F’
excisión: Hfr genera un F’
puede generarse también una estirpe sfa
F’ X F-
merodiploide o merocigoto o diploide parcial
Proceso: sexducción o F-ducción
Regulación génica: dominancia/recesividad en células n, cis/trans Cartografiado: dos genes en un F’, es porque están juntos en cromosoma
Mapa genéticopor gradiente de transferencia(conjugacióno apareamiento interrumpido,Jacob y Wollman1955)
a mayor tiempoentran marcadores(genes) nuevos
transferenciasecuencialy linealde genes de Hfr a F-
La conjugación es un proceso de transferencia de material genéticounidireccional y orientada
gradiente de transferencia
porcentajemáximo
mapa circular (Jacob y Wollman, 1957)
orden relativo de genes siempre igual
distintas estirpes Hfr
difieren en el lugar y orientación de la inserción de F(distinto origen y dirección de transferencia)
mapa genéticode E. coli
por conjugación interrumpida,
1963
hoy 100 min
Mapa de ligamiento: análisis de la frecuencia de recombinación
selección de Leu+ (marcador tardío) y entre estos determinar los diferentes tipos de recombinantes
ejemplo: problema 8.9
5% -> 5 um leu-arg
5% -> 5 um arg-met
≈90%
≈0,25%
a----------------b-c ó a ----------------c-b ???
orden de los genes
determinación del orden de genes cercanos:a partir de frecuencias relativas de recombinantes
en cruzamientos recíprocos
1. Partimos de dos estirpes: a+b+c- y a-b-c+2. Cruzamientos recíprocos, con ambas opciones (a-bc y a-cb)3. Determinar recombinantes a+b+c+4. Orden en función del número de recombinantes obtenidos
en los dos cruzamientos recíprocos
ejemplo: problema 8.7
aprox. 1h de clase
problemas
capítulo 8
problemas: 7-13