Teste de Coombs
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Teste de Coombs
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O teste de Coombs (nome dado em homenagem a um dos investigadores que desenvolveram o teste para uso laboratorial, Coombs, 1945), embora o princípio tenha sido descrito muito antes, em 1908, por Moreschi. Se baseia no princípio de que anticorpos específicos antiglobulina humana atuam como uma ponte que induz a aglutinação de eritrócitos revestidos com imunoglobina humana ou complemento.
Introdução
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Robin Coombs graduou-se emmedicina veterinária na universidade De Edimburgo.Em 1947 obteve O doutorado no King’s College,em Cambridge.Foi durante o doutorado que desenvolveu e publicou o método de detecção de anticorpos.A Reação de Coombs (ou Teste da Antiglobulina) foi introduzida por meio de umestudo sobre anemias hemolíticas em 1945, com a finalidade de detectar tanto autoanticorpos quanto aloanticorpos antieritrocitários
Robert Coombs
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O soro antiglobulina humana pode ser produzido através de hiperimunização animal, usualmente coelhos, com imunoglobina purificada ou complemento para produzir títulos elevados de anticorpos IgG com avidez alta.
SORO ANTIGLOBILINA
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Atualmente, os reagentes poliespecíficos usualmente são uma mistura de anticorpos IgG policlonais contra o espectro de subclasses de IgG humana e anticorpos moniclonais contra os componentes do complemento C3b e C3d
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Estima-se que 100 a 500 IgG ou moléculas de C3 ligadas por eritrócitos são necessárias para a detecção de anticorpos antiglobulina (Harmening, 1994); um número menor de moléculas ligadas pro eritrócitos dão uma reação negativa.
SENSIBILIDADE DO TESTE DE COOMBS
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Dois tipos de células para o controle de qualidade são normalmente utilizados: as revestidas com IgG e as revestidas com C3b iu C3d.
As células para o controle de qualidade do teste de Coombs frequentemente são denominadas células de checagem, células controle de Coombs ou células sensibilizadas.
CONTROLE DE QUALIDADE DO TESTE DO COOMBS
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Teste de Coombs direto: amostras de sangue devem ser coletadas em EDTA para prevenir a sensibilização de células com complemento in vitro. Uma suspensão salina a 3% até 5% de eritrócitos do paciente é preparada para a testagem. Uma gota dessa suspensão celular é posteriormente lavada pelo menos quatro vezes com solução salina, e em seguida, deve ser adicionada AHG poliespecífica contendo anti-IgG e anti-C3d de modo que a sensibilização in vitro, seja para a IgG ou para o complemento, possa ser detectada.
MÉTODOS
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Teste de Coombs direto: Eritrócitos do paciente, do doador e reagente incuba-se com o soro apropriado ou anti-soros preparados comercialmente, usualmente a 37°C, durante o período de tempo indicado no procedimento de operação padrão para o ensaio participar que estiver sendo realizado. Dependendo do método, os tubos podem ser centrifugados e então examinados em busca de hemólise ou de aglutinação, o passo seguinte deve ser lavar os eritrócitos pelo menos quatro vezes para remover todas as globulinas séricas livres ou proteínas estranhas.
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Ajuntamento de antígenos particulados tais como bactérias ou eritrócitos pela ação de anticorpos que pode resultar num precipitado visível a olho nu,sendo uma reação altamente específica em que cada antígeno reage com seu anticorpo.
O que é aglutinação
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Investigação de reações homolíticas transfusionais Doenças hemolíticas do recém-nato
Investigação de auto-anticorpos Anticorpos induzidos por medicamentos
APLICAÇÕES DO TESTE DE COOMBS DIRETO
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Detecção e identificação de anticorpos eritrocitários no soro Tipagem de antígenos eritrocitários
Prova cruzada
APLICAÇÕES DO TESTE DO COOMBS INDIRETO
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http://www.uftm.edu.br/patolo/cpgp/imagem/Tese_VitorMAlvesME.pdf
Referencias