Venenos de Anfíbios como Novos Protótipos Farmacêuticos para Leishmaniose e Doença de Chagas...

Venenos de Anfíbios como Novos Protótipos Farmacêuticos para

Leishmaniose e Doença de Chagas

André Gustavo TemponeInstituto Adolfo Lutz

LEISHMANIOSE

André G. Tempone- Inst. Adolfo Lutz

Doença negligenciada• Endêmica em 88 países.• 12 milhões de infectados (WHO, 2004)

WHO/TDR

Leishmaniose Tegumentar



WHO/TDR


HIV and Leishmaniasis. WHO/TDR


WHO/TDR

Leishmaniose Visceral

• Forma fatal.• Hepatoesplenomegalia.



WHO/TDRWHO/TDR

Terapia


Glucantime

• Elevada toxicidade;• Cardiotóxica, nefrotóxica


Tripanossomíase Americana


Doença de Chagas

• 16-18 milhões de infectados.• Benznidazol (apenas fase aguda)• Nenhum fármaco efetivo.


Cardiomegalia, megacólon


Necessidade urgente da pesquisa de novos fármacos


Inovação- Área Farmacêutica

39%

61%

100% OrigemSintética

Origem deProdutosNaturais

Total de Protótipos Naturais em Novos Medicamentos 1981-2002

Newman, J.D., et al., 2003 J. Nat. Prod.

captopril- CAPOTEN®- Antihipertensivo

Bothrops jararaca

AZT (Donia & Hamann, 2003) - AIDS

Tethya sp.

Cytosar-U (Upjohn)- leucemia aguda não-linfocítica, leucemia

crônica mielocítica (Ireland et al., 1993; McConnel et al., 1994).

Vira-A (Parke-Davis)- Herpes simplex e Herpes zoster (Oliveira

& Freitas, 2001).

Acyclovir (GSK)

PRIALT

• Ziconotide- peptídeo –dores crônicas (oncológicas) não tratadas com morfina.

• Mais de 40 compostos marinhosem estudo clínico.

Como chegar ao medicamento?

ONH

HN

NH

OHHNO

NH

BrBr

NH

O NH

Br

Br

OH

HNNHHN

2

Dendrobates auratus

Brasil- Biodiversidade

Dendrobates tinctorius

Dendrobates amazonarum

Dendrobates sp.

Dendrobates azureus

Phyllomedusa

Anfíbios X Drug Discovery

Veneno- secreção cutânea de anfíbios

• Rica fonte de moléculas bioativas como proteínas, peptídeos e moléculas pequenas como os metabólitos secundários (alcalóides, esteróides…).

• defesa contra predadores e microorganismos.


Rhinella jimi

Bioma Caatinga (Nordeste)


0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 min

0

250

500

750

1000

1250

1500

1750

2000

2250

2500

2750mAU214nm,4nm (1.00)

4.55

65.

198

8.51

6

11.7

2312

.373

12.4

98

16.6

68

18.0

7718

.443

18.8

27 19.4

11

20.9

49

22.0

9222

.638

23.9

21

25.0

06

HPLC - ACE C18 (4.6 x 250 mm 5µm)

Fracionamento biomonitorado

HPLC – C18 (PDA detection)

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 min

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2750mAU

214nm,4nm (1.00)

4.55

65.

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8.51

6

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2312

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16.6

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27 19.4

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9222

.638

23.9

21

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1

2

13C e 1H NMR + espectrometria de massa

O

O

OH

HOOH

1

2

34

5

67

8910

11

12

13

14

15

1617

18

19

20

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22

23

O

O

CHO

OH

HOOH

1

2

34

5

67

8910

11

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1617

18

19

20

21

22

23

1 2

Bufadienolídeos- Telocinobufagina MW 403.51 (1) e hellebrigenina MW 417.39 (2)

Steroids IC50 (µg/mL)L. chagasi

Promastigote

% Treatment Leishmania-

Infected Macrophages at

150 µg/mL

IC50 (µg/mL)T. cruzi

Macrophage Toxicity

IC50 (µg/mL)

Hemolytic Activity (µg/mL)

telocinobufagin 61.2 37.0 >200 >200 >200

hellebrigenin 126.2 21.5 91.75 >200 >200

Estudos ultraestruturaistelocinobufagina x Leishmania

1h 1h

3h

5h

Conclusões

• Telocinobufagina e hellebrigenina são os esteróides ativos do veneno de R. jimi contra Leishmania e T. cruzi.

• Síntese química deve ser avaliada para realização de ensaios in vivo.

• Ambos esteróides podem servir como protótipos no desenho de novos fármacos.


Carlos Jared Daniel C. Pimenta

IALMatilia VicenteJulianaDanielaDenise

http://www.fapesp.br/index.php

André [email protected]

Inst. Adolfo Lutz

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