A LTA RESOLUO MICROSCOPIA 4 Cristina Mary Orikaza Toqueiro
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Resoluo de Imagens Componentes modernos de lentes Design ptico
auxiliado por computador Difrao das ondas de luz visvel
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
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Resoluo de Imagens Componentes modernos de lentes Design ptico
auxiliado por computador Limite mximo de resoluo ptica Barreira de
Difrao de Abbe Difrao das ondas de luz visvel
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
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Resoluo de Imagens Componentes modernos de lentes Design ptico
auxiliado por computador Limite mximo de resoluo ptica Barreira de
Difrao de Abbe Difrao das ondas de luz visvel Ernst Abbe (1873)
fsico alemo http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm Ponto
focalNA ndice de refrao
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Resoluo de Imagens Componentes modernos de lentes Design ptico
auxiliado por computador Limite mximo de resoluo ptica Barreira de
Difrao de Abbe Difrao das ondas de luz visvel Ernst Abbe (1873)
fsico alemo http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm Ponto
focalNA ndice de refrao o menor nvel de detalhe que pode,
eventualmente, ser trabalhada, e que as estruturas peridicas tm
maior frequncia espacial (comprimentos de onda mais curtos) no sero
transferidos para a imagem. estruturas menores que meio
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Resoluo de Imagens Ernst Abbe (1873) fsico alemo
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html
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Resoluo de Imagens Ernst Abbe (1873) fsico alemo
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html
Alongado no eixo z d min Airy
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Resoluo de Imagens Ernst Abbe (1873) fsico alemo
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html
Alongado no eixo z d min Airy
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Resoluo de Imagens Ernst Abbe (1873) fsico alemo
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html
O ideal: uma frente de onda esfrica cheia, de um ngulo slido de 4
conduziria a um ponto esfrico. Alongado no eixo z d min Airy
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Resoluo de Imagens Ernst Abbe (1873) fsico alemo
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html
O ideal: uma frente de onda esfrica cheia, de um ngulo slido de 4
conduziria a um ponto esfrico. melhoria da resoluo espacial no eixo
axial (z) Alongado no eixo z d min Airy
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Qualidade e Funo dos Laseres Ondas coerentes Interferncia
construtiva
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Qualidade e Funo dos Laseres Ondas coerentes Interferncia
construtiva
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Microscopia 4 Excitao coerente 2 objetivas justapostas
Interferncia construtiva Amplificao do ponto focal Melhor resoluo
axial http://www.ks.uiuc.edu/Research/microscope/
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Microscopia 4 Excitao coerente 2 objetivas justapostas
Interferncia construtiva Amplificao do ponto focal Melhor resoluo
axial http://www.ks.uiuc.edu/Research/microscope/
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Microscopia 4
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Tipo A: excitao coerente Tipo C: excitao coerente multiftons e
deteco coerentes http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/publications/pdf/Handbook_Biol_Conf_Micr_561-570.pdf
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Microscopia 4 Tipo A: excitao coerente Tipo C: excitao coerente
multiftons e deteco coerentes
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/publications/pdf/Handbook_Biol_Conf_Micr_561-570.pdf
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Microscopia 4 Tipo A: excitao coerente Tipo C: excitao coerente
multiftons e deteco coerentes
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm
http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/publications/pdf/Handbook_Biol_Conf_Micr_561-570.pdf
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Microscopia 4 - Aquisio de Imagens Varredura laser Aquisio
baseada em CCD rpido Microscpio multifocal multifton 4
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Microscopia 4 - Aquisio de Imagens Varredura laser Aquisio
baseada em CCD rpido Microscpio multifocal multifton 4 1 seg/fatia
Imerso 1 tcnica: imagens-3D de cl vivas (100nm)
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Microscopia 4 - Aquisio de Imagens Varredura laser Aquisio
baseada em CCD rpido Microscpio multifocal multifton 4 1 seg/fatia
Imerso 1 tcnica: imagens-3D de cl vivas (100nm) Artefatos x
deconvoluo x z http://www3.mpibpc. mpg.de/groups/hell/4 Pi.htm
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Microscopia 4 - Aquisio de Imagens Varredura laser Aquisio
baseada em CCD rpido Microscpio multifocal multifton 4 1 seg/fatia
Imerso 1 tcnica: imagens-3D de cl vivas (100nm)
http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs125
51-010-0037-0/fulltext.html#Fig1 Artefatos x deconvoluo x z
http://www3.mpibpc. mpg.de/groups/hell/4 Pi.htm
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Microscopia 4 - Aquisio de Imagens
http://light.ece.illinois.edu/NBSS09/UIUC_Bewersdorf_forDistribution.pdf
Varredura laser Aquisio baseada em CCD rpido Microscpio multifocal
multifton 4 1 seg/fatia Imerso 1 tcnica: imagens-3D de cl vivas
(100nm) http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs125
51-010-0037-0/fulltext.html#Fig1 Artefatos x deconvoluo x z
http://www3.mpibpc. mpg.de/groups/hell/4 Pi.htm
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Microscopia 4 - Aplicaes Reconstruo 3D da matriz mitocondrial
(GFP) de uma levedura viva (S. cerevisae) com brotamento Hell SW,
Nat Biotech 21, 1347-55 (2003)
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Microscopia 4 - Aplicaes Reconstruo 3D da matriz mitocondrial
(GFP) de uma levedura viva (S. cerevisae) com brotamento Hell SW,
Nat Biotech 21, 1347-55 (2003) Scale bar = 0,5 m Imunofluorescncia
(hibridizao in situ) e reconstruo 3D da protena PML (vermelho) ao
redor do DNA telomrico (verde). Chung I, et al., Nucleus 3, 263-75
(2012)
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Confocal Resoluo lateral: 200-300 nm para luz visivel Confocal
X Microscopia 4
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Confocal Resoluo lateral: 200-300 nm para luz visivel
Microscopia 4pi Duas objetivas justapostas Gera interferncia
construtiva Reduz resoluo axial (z) pra 100 nm Varredura
pixel-a-pixel, como confocal, mas Pode usar fontes multiftons e
cmeras CCD Confocal X Microscopia 4
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Confocal Resoluo lateral: 200-300 nm para luz visivel
Microscopia 4pi Duas objetivas justapostas Gera interferncia
construtiva Reduz resoluo axial (z) pra 100 nm Varredura
pixel-a-pixel, como confocal, mas Pode usar fontes multiftons e
cmeras CCD PSF lateral 1,5x melhor que confocal PSF axial 5-7x
melhor que confocal Confocal X Microscopia 4