PREPARO DE AMOSTRAS

Ana Rita de Araujo Nogueira

Grupo de Anlise Instrumental Aplicada - Embrapa Pecuria

Sudeste, So Carlos, SP anarita@cppse.embrapa.br

Resumo

Este texto um resumo do mini-curso apresentado durante o VIII Encontro

sobre Metodologias da Embrapa, organizado pela Embrapa Meio Ambiente.

A apresentao teve como objetivo uma introduo aos principais aspectos

voltados aos cuidados que devem ser tomados para uma boa

representatividade da amostra, envolvendo a coleta, a moagem, o

armazenamento e a amostragem. Tambm foram abordadas a lavagem e a

desmineralizao dos frascos e material que entra em contato com as

amostras e as alternativas existentes para a escolha de reagentes, extraes

e formas de digesto da matria orgnica.

Palavras-chave - preparo de amostras, digesto, decomposio, microondas

Preparo de Amostras

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Introduo

Como na maioria das reas aplicadas, a qumica apresenta-se

fundamental para o fornecimento de informaes para a tomada de decises

na agronomia. com o uso de resultados qumicos que possvel se

conhecer o grau de carncia ou excesso de nutrientes em um solo e a

necessidade de adubao e calagem (para a correo do pH do solo). A

quantidade e o tipo de fertilizante necessrio variam segundo o cultivo, a

poca e a evoluo deste. A escolha, a quantidade e a freqncia de

aplicao do fertilizante dependem principalmente de parmetros

decorrentes da observao direta do cultivo, da anlise do solo e da anlise

foliar. A determinao dos elementos essenciais, do pH e da condutividade,

por exemplo, fornecem informaes sobre as carncias inerentes ao cultivo

e ajudam a decidir, sobretudo, o tipo e a composio dos corretivos a serem

aplicados.

Os dados relacionando os teores de minerais ou dos constituintes

proteicos nas plantas, solos e alimentos so cada vez mais requisitados e um

correto procedimento de coleta e preparo dessas amostras permitem uma

avaliao eficiente, que ir direcionar os recursos financeiros e ambientais

com segurana.

Este curso abordou as etapas de coleta e preparo das amostras, que se

apresentam como as mais demoradas, onde so gastos os maiores recursos

e onde tambm se cometem os maiores erros. Foi preparado com base em

texto publicado pela Embrapa sobre coleta e preparo de amostras, em

material produzido pelos Profs. Francisco Krug, Gunter Knapp e Harold

Barnes para o III Workshop sobre preparo de amostras, realizado em So

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Carlos, SP em 10/2000, em palestras apresentadas pelo Grupo de Anlise

Instrumental Aplicada - GAIA durante Encontro sobre preparo de

amostras, realizado em So Carlos, SP em 04/2003 e em livro publicado

pelos Prof. Kingston & Haswell, de 1997, sobre decomposies assistidas por

microondas, alm da descrio de discusses surgidas nas reunies de

grupo (GAIA- http://www.dq.ufscar.br/Labs/gaia) e em algumas experincias

pessoais e resultados recentes da literatura.

Aproveito para agradecer aos organizadores do VIII Encontro Sobre

Mtodos de Anlise da Embrapa pelo convite, parabenizando-os pela

organizao e empenho e desejando que todos tenham tido uma semana

bastante produtiva, com o aumento dos horizontes profissionais e pessoais.

Coleta de amostras de solo, gua e tecidos vegetais

Alm da escolha conveniente do mtodo analtico e estudo dos

possveis interferentes, torna-se essencial boa amostragem, preparao e

solubilizao da amostra para anlise. Qualquer que seja o tipo de amostra,

erros significativos podero ser introduzidos se a etapa de preparao no

for satisfatoriamente conduzida.

A amostragem a primeira fase da anlise. preciso haver integrao

entre os responsveis pela coleta e o laboratrio, buscando-se sincronismo

entre a remessa de amostras e a capacidade do laboratrio em executar as

determinaes.

Em alguns casos necessrio reduzir consideravelmente a dimenso

da amostra antes que ela seja introduzida no sistema analtico e possa ser

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tratada convenientemente. O mtodo de preparao utilizado depender do

tipo de amostra. O material coletado deve ser preparado em local apropriado

e equipado para esta finalidade. Normalmente a atividade de preparao

inclui o recebimento, o registro, o pr-acondicionamento, a secagem, a

moagem, o acondicionamento e a rotulagem das amostras.

Aspectos importantes relacionados coleta de amostras

Alguns cuidados devem ser observados, para garantir a integridade

fsica e qumica do material coletado (NOGUEIRA et al., 1996):

evitar coletar amostras sujas de terra ou com excesso de gua;

identificar devidamente, com letras legveis, o recipiente (saco de papel ou

de plstico, potes plsticos, frascos, etc.) que receber a amostra. Cuidado

especial deve ser tomado com as amostras que sero armazenadas a

baixa temperatura. Em muitos casos, a identificao feita inicialmente

torna-se ilegvel durante o processo de descongelamento;

garantir que os utenslios, embalagens e ferramentas empregados na

coleta e no transporte no contaminem a amostra, principalmente em

funo das determinaes que sero realizadas. Como exemplo, se de

uma planta pretende-se determinar o teor de ferro, um faco utilizado para

retirar a amostra no pode ter sido confeccionado com esse elemento. Em

amostras provenientes de experimentos conduzidos em casa de

vegetao esse tipo de cuidado deve ser redobrado;

documentar cada etapa da coleta, incluindo eventos no esperados (p.ex.,

chuvas). Especificar todas as caractersticas relevantes da rea, condies

climticas e populao amostrada, condies de transporte e secagem;

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a amostra deve ser encaminhada o mais rapidamente possvel ao

laboratrio, para que possa ser devidamente processada e armazenada;

a amostra que chegar ao laboratrio sem as informaes necessrias ao

processamento e anlise deve ser recusada. necessrio conhecer o tipo

da amostra, o que deve ser determinado e quem o seu responsvel.

Cuidados que devem ser tomados para evitar contaminaes

O maior problema no preparo de uma amostra para anlises na faixa de

g L-1 o risco de contaminao, devido a diferentes causas, como o grau do

reagente empregado, os frascos empregados para estocagem, digesto ou

diluio das amostras ou aos erros relacionados coleta e manipulao da

amostra. Uma adequada tcnica de decomposio dever, de uma maneira

geral, ser eficiente, evitando erros sistemticos provenientes de

contaminao, sendo importante o uso de reagentes de alta pureza

(incluindo a gua utilizada nas diluies), perdas por volatilizao ou

digesto incompleta; ser reproduzvel, apresentar baixos limites de deteco

(baixos valores do branco), ser seguro (quanto aos reagentes usados,

manuseio, equipamento) e, sempre que possvel, ser simples e rpido, com

mnima manipulao. O uso de uma amostra como branco que sofra todos

os tratamentos dados a amostra essencial em todos os procedimentos para

identificar qualquer problema com o analito. A natureza dos frascos

empregados durante as anlises e para estocagem das solues tambm

deve ser observada. Recomenda-se que toda vidraria seja previamente

deixada em banho cido (10% HNO3) por no mnimo 24 horas antes de ser

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utilizada.

Os mtodos de decomposio para anlises de elementos na faixa de

g L-1 requerem o uso de cidos com valores de branco negligenciveis. Com

o objetivo de se evitar contaminao dos cidos devido longa estocagem,

recomenda-se o preparo de quantidades de cido livre de interferentes

imediatamente antes do uso. Isso possvel com o emprego de frascos de

subdestilao, construdos em quartzo ou PTFE. Os cidos so destilados a

temperaturas abaixo do ponto de ebulio, o que evita o arraste das

substncias interferentes. Esse procedimento bastante indicado, pois

resulta em solues com pureza superior aos cidos ultra-puros, alm de

permitir o emprego de cidos comerciais, diminuindo os custos da anlise

(KRUG et al., 2000).

Mtodos de preparo de amostras

Amostras agronmicas normalmente apresentam-se na forma lquida ou

slida. A maneira mais fcil de se manusear a amostra quando esta se

encontra na forma lquida, quando muitas vezes uma simples filtrao

suficiente. No entanto, mesmo nesses casos, a necessidade de serem

determinados teores cada vez menores, em funo de proteo ambiental,

impurezas dos compostos, dentre outros, e aos problemas de sensibilidade

das tcnicas espectroscpicas, para uma determinao adequada

invariavelmente necessrio o emprego de tcnicas de pr-concentrao.

Quando a amostra se encontra na forma aquosa, a maneira mais simples de

se obter essa pr-concentrao a evaporao da gua por aquecimento.

Nesse caso, devem ser tomados cuidados quanto a volatilidade dos

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compostos a serem determinados. Outras alternativas para a pr-

concentrao dos elementos so a troca inica e a extrao por solventes.

Se, por outro lado, a amostra se encontra na forma slida, existem

alguns procedimentos e equipamentos que permitem a anlise direta de

slidos e suspenses. No entanto, o requerimento normal a converso do