Download - Avaliação genética do homem infértil

Transcript
Page 1: Avaliação genética do homem infértil

Esteves, 1

Sandro Esteves

Diretor, ANDROFERT

Campinas, SP

Congresso Brasileiro de Urologia – Florianópolis – 2011

Curso de Pós-graduação – Avaliação em Infertilidade Masculina

Page 2: Avaliação genética do homem infértil

Conteúdo da Aula

Base Genética Fertilidade Masculina

Infertilidade de Causa Genética

Avaliação Genética do Homem Infértil:

Para quem e como?

Esteves, 2

Page 3: Avaliação genética do homem infértil

Base Genética Fertilidade Masculina

Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:

Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

Page 4: Avaliação genética do homem infértil

Base Genética Fertilidade Masculina

Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:

Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

Page 5: Avaliação genética do homem infértil

Base Genética

Fertilidade

Masculina

Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:

Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

Page 6: Avaliação genética do homem infértil

Base Genética Fertilidade Masculina

Adaptado de: Esteves & Agarwal. Novel concepts in male infertility. Int Braz J Urol 2011;37:5-15.

Page 7: Avaliação genética do homem infértil

Genótipo Céls. Somáticas Anormal

• Hipogonadismo Hipogonadotrófico: ex.: S. Kallman

• Aberração Cromossômica (aneuploidias/translocações): ex. S. Klinefelter

• Mutações Gênicas: ex. gene CFTR (CBAVD)

• Deleção Cromossômica Parcial: ex. Microdeleção Y

• Alts. Gênicas c/Repercussão Funcional: ex. S. Kartagener

Genótipo Céls. Somáticas Normal

• Anormalidades cromossômicas nos espermatozóides

• Alteração integridade DNA espermático

• Defeitos mitocondriais

• Alterações epigenéticas (ex. S. Angelman, Beckwith-Wiedemann)

Infertilidade Causa

Genética

Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A [ed]. Infertility:

Management and Treatment, Jaypee Med. Pub., In press

Page 8: Avaliação genética do homem infértil

Infertilidade Causa Genética

Aberrações Cromossômicas & Concentração

Espermática

10,4%

4,6%

1,0%

0

2

4

6

8

10

12

0 >0-19 >19

Frequência de alterações cromossômicas

Chandley et al. , 1972; De Kretser et al, 1972; Matsuda et al, 1992

Esteves, 8

Page 9: Avaliação genética do homem infértil

1. Aberrações Cromossômicas

Síndrome Klinefelter

Prevalência:

1:600-1.000 nascidos sexo masculino

~5% casos oligozoospermia grave

~11% casos azoospermia não-obstrutiva

Cariótipo (Aneuploidia):

Clássico: 47,XXY; Mosaico: 47,XXY/46,XY

Clínica:

Testículos hipotróficos

FSH elevado, hipogonadismo, ginecomastia (1/3 casos)

Azoospermia (92% casos)

Oligozoospermia grave (~0.1 milhão/mL)

Esteves, 9

Page 10: Avaliação genética do homem infértil

1. Aberrações Cromossômicas

Síndrome Klinefelter

Azoospermia:

Focos células germinativas: 40-50% casos

Histologia: SCO (espermatogênese focal 8-24% túbulos)

Importância: captação Sptz para ICSI

Espermatogônia 47,XXY:

Gametas aneuplóides e haplóides

Impacto:

Chance paternidade biológica via ICSI

Risco Genético:

- Abortamento

- Saúde prole (Klinefelter, Turner)

- Diagnóstico genético pré-implantacional (PGD)Esteves, 10

Sciurano et al., Hum

Reprod. 2009

Page 11: Avaliação genética do homem infértil

2. Mutações Gênicas

Agenesia Congênita Canais Deferentes

Prevalência:

Homens inférteis: 1,3%; Azoospermia Obstrutiva: 6%

Característica:

Mutação gene fibrose cística (7q:190kb e 27 exons)

CFTR: cystic fibrosis transmembrane conductance regulator

Clínica:Azoospermia + Hipospermia (pH ácido)

FSH normal

Epidídimos engurgitados (ausência parcial)

Deferentes ausentes

Vesículas seminais hipoplásicas ou ausentes

Esteves, 11

Page 12: Avaliação genética do homem infértil

2. Mutações Gênicas

Agenesia Congênita Canais Deferentes

Mutação gene CFTR detectada 80% CBAVD

∆F508, polimorfismos 5T/7T, R117H (+1,500 mutações)

Agenesia unilateral canal deferente

pode estar associada à mutação CFTR;

agenesia renal ipsilateral pode coexistir

Obstrução idiopática e S. Young (sinusite

crônica, bronquiectasia e azoospermia obstrutiva)

pode estar associada à mutação CFTR

Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the

infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10. Esteves, 12

Page 13: Avaliação genética do homem infértil

100%95.3%

100%

CBAVD (N=30) Vasectomia (N=64) Pós-infecção (N=48)

SUCESSO CAPTAÇÃO ESPERMATOZÓIDES NA AZOOSPERMIA OBSTRUTIVA

Esteves SC et al. Success of percutaneous sperm retrieval and

intracytoplasmic sperm injection (ICSI) in obstructive azoospermic (OA) men

according to the cause of obstruction. Fertil Steril. 2010;94 (Suppl):S233.Esteves, 13

2. Mutações Gênicas

Agenesia Congênita Canais Deferentes

Page 14: Avaliação genética do homem infértil

2. Mutações Gênicas

Agenesia Congênita Canais Deferentes

CBAVD:

- Espermatogênese preservada

- Aspiração espermatozóides & ICSI

Risco Genético :

Mulheres caucasianas tem 4% chance de serem

portadoras mutações gene CFTR

- Risco fibrose cística prole:

25% chance

FC: doença autossômica recessiva letal

Diagnóstico genético pré-implantacional (PGD)

Esteves, 14

Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the

infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.

Page 15: Avaliação genética do homem infértil

Yp: região SRY associada ao desenvolvimento testicular

Yq: AZF associada à espermatogênese

3. Deleção Gênica

Microdeleções Cromossomo Y

Hamada, Esteves, Agarwal: Genetics and Male Infertility. In: Dubey A. In press

Page 16: Avaliação genética do homem infértil

3. Deleção Gênica

Microdeleções Cromossomo Y

Prevalência:1:2.000-3.000 meninos nascidos

Homens inférteis: 5-12%

Característica:Deleções do tipo de novo

Clínica:Testículos normais ou hipotróficos

FSH normal ou elevado

Azoospermia ou Oligozoospermia grave

Pode coexistir com varicocele e/ou criptorquidia

Esteves, 16Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the

infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.

Page 17: Avaliação genética do homem infértil

Microdeleções Cromossomo Y e

Concentração Espermática

10,4%

4,6%

1,0%

00

1

2

3

4

5

6

7

8

9

0 0-1 1-5 >5

Frequência de microdeleções Yq

Girardi et al, Hum Reprod 1997

Page 18: Avaliação genética do homem infértil

Transmissão microdeleções AZFc para a prole via

concepção natural ou assistida (ICSI)

Vogt, 1996; Pryor, 1997; Chang, 1999; Saut, 2000

Portadores microdeleções Y são inférteis e pode

ocorrer diminuição concentração espermática com o

tempo

Chang, 1999; Girardi, 1997; Simoni, 1997; Saut, 2000

Microdeleções Cromossomo Y e

Riscos Genéticos

Page 19: Avaliação genética do homem infértil

Esteves, 19

Avaliação Genética do Homem Infértil

Importância

1) Determinação causa genética infertilidade

2) Prognóstico:

chance captação Sptz (azoospermia)

impacto nas chances de gravidez

3) Aconselhamento genético:

transmissão infertilidade

risco malformações, retardo mental, etc.

risco abortamento

Esteves, Miyaoka & Agarwal. An update on the initial assessment of the

infertile male. CLINICS 2011; 66:1-10.

Page 20: Avaliação genética do homem infértil

Avaliação Genética do Homem Infértil

Para quem e como?

Dada, Esteves, Agarwal. Genetic testing in male infertility. Open Reprod Sci J 2011;3:42-53.

Ind

ica

çõ

es Oligozoospermia

grave (≤5 milhões/mL)

Azoospermia Não-obstrutiva

Te

ste

s Cariótipo Bandas G

PesquisaMicrodeleçõesCromossomo Y

tod

o Cariótipo: cultura linfócitossangueperiférico, extraçãocromossomos e coloraçãoGiemsa

MDCY: PCR linfócitossangue periférico(amplificação sítio AZF do Yq e identificação genes marcadores)

Azoospermia Obstrutiva (agenesiacanais deferentes)

Azoospermia obstrutiva idiopática

Candidatos às TRA

Pesquisa mutaçõesgene CFTR

Casal (mínimoesposa)

PCR linfócitossangue periférico(amplificação gene CFTR 3q e pesquisamutações)

Page 21: Avaliação genética do homem infértil
Page 22: Avaliação genética do homem infértil
Page 23: Avaliação genética do homem infértil

Avaliação Genética do Homem Infértil

Impacto

68%11%

15%

6%

Azoospermia

Page 24: Avaliação genética do homem infértil

Avaliação Genética do Homem Infértil

Como interpretar resultados anormais?

Klin

efe

lter Cariótipo:

47,XXY

47,XXY/46,XY

Espermograma:

Azoospermia

Oligozoospermia

Op

çõ

es Oligozoospermia:

Concepção natural??

TRA: ICSI

Azoospermia:

TESE ou micro-TESE

Man

ejo Aconselhamento

genético

Discutir PGD (ICSI)

Tratamentomedicamentoso

Esteves, Miyaoka & Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of

ICSI – new insights. CLINICS 2011; 66:1463-77.

Page 25: Avaliação genética do homem infértil

Síndrome Klinefelter

inibidores aromatase & chance sucesso

captação espermatozóides micro-TESE

0

50

100

150

200

250

300

350

Testosterona Basal T pós-IA

Resposta pos

Resposta neg

Ramasamy et al., J Urol 2009

72%

55%

Page 26: Avaliação genética do homem infértil

Avaliação Genética do Homem Infértil

Como interpretar resultados anormais?

CB

AV

D PCR gene CFTR esposa:

Mutação presente(Mt+)

Mutação ausente(Mt-) não excluirisco (máx. 95% gene mapeado)

Espermograma:

Azoospermia

Opçõe

s TRA:

PESA/TESA/MESA & ICSI

Ma

ne

jo Aconselhamentogenético:

Mt+: Risco FC (ICSI c/PGD)

Mt-: RiscoCBAVD menino

(ICSI c/PGD & sexagem

embrionária)

Esteves, Miyaoka & Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of

ICSI – new insights. CLINICS 2011; 66:1463-77.

Page 27: Avaliação genética do homem infértil

Avaliação Genética do Homem Infértil

Como interpretar resultados anormais?

MD

CY PCR AZF:

Deleção isoladaregião AZFa

(5%), AZFb (16%) ou AZFc (60%)

Deleçõescombinadas (14%)

Espermograma:

Oligozoospermiagrave

Azoospermia

Op

çõe

s TRA:

Oligozoospermia:

ICSI

Azoospermia Não-obstrutiva:

TESE/micro-TESE & ICSI

Manejo

Indicação ExtraçãoEspermatozóides

depende regiãoAZF acometida

Aconselhamentogenético:

Transmissãoinfertilidade prolemasculina (ICSI

c/PGD & sexagemembrionária)

Esteves, Miyaoka & Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of

ICSI – new insights. CLINICS 2011; 66:1463-77.

Page 28: Avaliação genética do homem infértil

Sucesso Extração

Espermatozóides de acordo com a

região AZF deletada

DeleçãoAZFb

Não há chance de extrair Sptz testiculares

Esteves SC & Agarwal A: Novel concepts in male infertility. Int Braz J Urol 2011; 37:5-15;

Foresta C, Moro E, Ferlin A: Y chromosome microdeletions and alterations of spermatogenesis. Endocr

Rev. 2001; 22: 226-39

.

Page 29: Avaliação genética do homem infértil

Avaliação Genética do Homem Infértil

Potencial Reprodutivo ICSI homens azoospérmicos

Sucesso Captação Espermatozóides Taxa Nascidos Vivos

97.9%

38.2%55.2%

25.0%

Obstrutiva (N=142) Não-obstrutiva (N=172)

Odds-ratio 43.0 1.86

IC 95% 10.3 – 179.5 1.03 – 2.89

p <0.01 0.03

Prudencio C, Seoul B, Esteves SC. Reproductive potential of azoospermic men

undergoing intracytoplasmic sperm injection is dependent on the type of azoospermia.

Fertil Steril 2010; 94(4):S232-3; Frontiers in Bioscience, in press.

Page 30: Avaliação genética do homem infértil

Mensagens Finais

Base Genética Fertilidade Masculina

~2.000 genes implicados

Infertilidade de Causa Genética

15% homens inférteis; 30% azoospérmicos

Klinefelter, MDCY e CBAVD mais comuns

Avaliação Genética do Homem Infértil

Cariótipo, pesquisa MDCY, mutação gene CFTR

Indentifica causa infertilidade

Prognóstico chances paternidade e sucesso extração Sptz

Aconselhamento genéticoEsteves, 30

Page 31: Avaliação genética do homem infértil

Leitura Complementar

1) Esteves SC, Miyaoka R & Agarwal A. An update on the

initial assessment of the infertile male. CLINICS 2011;

66:1-10.

2) Dada R, Esteves SC, Agarwal A. Genetic testing in male

infertility. Open Reprod Sci J 2011; 3:42-53.

3) Esteves SC, Miyaoka R & Agarwal A. Surgical treatment

of male infertility in the era of ICSI – new insights.

CLINICS 2011; 66:1463-77.

4) Esteves SC & Agarwal A. Novel concepts in male

infertility. Int Braz J Urol 2011; 37: 5-15.