MicroRNAs no contexto de cancro oral
Da biologia básica à utilidade clínica
Universidade de Lisboa - Faculdade de Medicina Dentária
Mestrado Integrado em Medicina Dentária – 2.º Ano/2.º Semestre
Ano Letivo 2014/2015
Unidade Curricular de Biologia Oral II
29 de maio de 2015
Cristina Sterbet, Daniela Lourenço, Luís Nepomuceno, Sara NevesRegente: Prof. Doutor António Mata
Índice Geral
01. Introdução;
02. Biogénese e função dos miRNAs;
03. Métodos de deteção de miRNAs;
04. Comportamento dos miRNAs no cancro;
05. Mecanismos de desregulação dos miRNAs no cancro;
06. miRNAs no cancro oral;
07. Utilidade clínica dos miRNAs associados a OSCC;
08. miRNAs e tratamento.
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01. Introdução
MicroRNA
Nucleótidos não
codificantes
RNA cadeia
simples
Reguladores pós-
transcricionais
Proliferação CelularDiferenciação
Apoptose
[1, 2, 4]
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Transcrição pela RNA polimerase II
pri-miRNA
Stem(38 bp)
Terminal loop
Flankingsingle-strandedsegments
02. Biogénese e função dos miRNAs
Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral
Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res
91(5):440-446
[1, 2]
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Processamento/conversão
pré-miRNA
Microprocessorcomplex
02. Biogénese e função dos miRNAs
Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral
Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res
91(5):440-446
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Exportação para o citoplasma
RAN-GTP-dependent
02. Biogénese e função dos miRNAs
Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral
Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res
91(5):440-446
Exportin-5
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Ação da enzima Dicer RNase II
miRNA/miRNA duplex
Loqacious(Loqs)
02. Biogénese e função dos miRNAs
Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral
Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res
91(5):440-446
[1, 2]
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Cadeia simples de miRNA maduro
RISC
Funcional
02. Biogénese e função dos miRNAs
Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral
Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res
91(5):440-446
[1, 2]
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Ligação do miRNA a zonas 3’ não transcritas – UTR – do mRNA alvo
Degradação do mRNA
02. Biogénese e função dos miRNAs
Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral
Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res
91(5):440-446
Repressão translacional
AGO2 + GW182
Down-regulation
[1, 2]
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•Confiável e altamente sensível para a deteção de miRNA.PCR
•Globalmente estabelecida como a tecnologia padrão paraestudos sobre a expressão dos miRNA;
•Sondas e condições de hibridização.Tecnologia dos microarrays
Northern Blot, hibridização in situ e a análise em série da
expressão de gene
•Deteção de novos smallRNAs, incluindo miRNA.Sequenciação de smallRNA
•Identificação de novos biomarcadores de miRNA.Programas como o microRNA.org ou TargetScan. sequenciação
profunda
Outras técnicas como NGS (next-generation sequencing)
03. Métodos de deteção de miRNAs
[3, 5, 8]
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Oncogenes
Genes supressores de tumores
miRNA-21 quando presente diminui a
apoptose e aumenta o crescimento das células
Let 7 alvo RAS
Let 7 Ras
Perda de função de alguns miRNA promove carcinogénese
04. Comportamento dos miRNAs no cancro
[1]
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Causas
Consequências
05. Mecanismos de desregulação dos miRNAs no cancro
Figura 02. Mecanismos de desregulação dos miRNAs no cancro.
Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral Cancer Context
– from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res 91(5):440-446
[1]
miRNAs Agentes que afetam a proliferação celular, apoptose e até a resposta a quimioterapia
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↑miR-21 e miR-221 e ↓ da
família let-7 miR-184
↑miR-21 ↔↓TPM1 e PTEN
↓ família let-7 ↔↑proteína
Dicer
miR-222/ miR-138
↓miR-1 e miR-133a
06. miRNAs no cancro oral
[1, 5]
miRNAs
• Apresentam um diferente perfil em células normais e cancerígenas
Biomarcadoresnão-invasivos
• Deteção de estados precoces de diagnóstico de cancro oral
Desenvolvimento de terapias e
tratamentos com base em miRNAs
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07. Utilidade clínica dos miRNAs associados aos OSCC
[1, 5]
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Silenciados com inibidores de miRNA
(miRNA-21)
Administração terapêutica em células
tumorais (miR-26a)
Oncogenes
Supressores tumorais
Vetores Administração
direta nos tecidos
08. miRNAs e tratamento
[1]
Bibliografia_Webgrafia[01] Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res 91(5):440-446;
[02] Pérez-Sayáns M, Pilar G-D, Barros-Angueira F, Suárez-Peñaranda JM, Fernández AC, Gándara-Rey JM, García-García A (2011). Current trends in
miRNAs and their relationship with oral squamous cell carninoma. JOral Pathol Med (2012) 41: 433-443;
[03] Ma et al (2012). Circulating microRNAs in cancer: origin, function and application. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 2012 31:38;
[04] Lu Y, Cheng A. Profiling of microRNA in oral cancer cells identifying miR-10b functions in oncogenesis and up-regulates in plasma of oral cancer
patients. Graduate Institute of Biomedical Science;
[05] Yoshizawa J, Wong D. Salivary MicroRNAs and Oral Cancer Detection. Methods Mol Biol. 2013;
[06] Kolokythas A, Miloro M, Zhou X. Review of MicroRNA Proposed Target Genes in Oral Cancer. Part II. J Oral Maxillofac Res 2011 (Apr-Jun);2(2):e2;
[07] Shiiba M, Uzawa K, Tanzawa H. MicroRNAs in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma (HNSCC) and Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC).
Department of Clinical Molecular Biology, Graduate School of Medicine, Chiba University. 2010;
[08] Koturbasha I, J. Zempa F, Pogribnyb I, Kovalchuka O. Small molecules with big effects: The role of the microRNAome in cancer and carcinogenesis.
Mutation Research 722 (2011) 94–105.
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