UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
PROFª BIANCA MENDES MACIEL
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA PROFª BIANCA MENDES MACIEL
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
EXERCÍCIOS
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA PROFª BIANCA MENDES MACIEL
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
EXERCÍCIOS
TURMA _________________________________ GRUPO:
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA PROFª BIANCA MENDES MACIEL
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
EXERCÍCIOS
(CURSO / ANO)
_________________________________
:
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ – UESCDEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
PROFª BIANCA MENDES MACIEL
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
(CURSO / ANO):
_________________________________
UESC
PRÁTICAS DE BIOFÍSICA:
__________________________________________________________________
Práticas de Biofísica: exercícios
2
SUMÁRIO
Apresentação .......................................................................................... 3
I. BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS ........................................................... 4
II. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA ................................................................................................
10
III. EXERCÍCIOS DE SOLUÇÕES I .................................................................... 13
IV. EXERCÍCIOS DE SOLUÇÕES II (Aplicação clínica) ...................................... 18
V. PREPARO DE SOLUÇÕES .......................................................................... 20
VI. PRESSÃO OSMÓTICA ............................................................................... 22
VII. ESPECTROFOTOMETRIA ......................................................................... 26
VIII. EFEITO DA OSMOLARIDADE DO MEIO SOBRE A INTEGRIDADE DAS HEMÁCIAS ...............................................................................................
33
IX. EQUILÍBRIO DE DONNAN (Prática demonstrativa) .................................. 36
X. CROMATOGRAFIA EM PAPEL .................................................................. 39
Práticas de Biofísica: exercícios
3
APRESENTAÇÃO
Esta apostila é destinada aos estudantes da disciplina de Biofísica da
Universidade Estadual de Santa Cruz, ministrada pela Profª. Bianca Mendes Maciel. Os
roteiros das aulas práticas (com duração de 1 h e 40 min) tiveram como base algumas
referências (conforme citado abaixo) e foram adaptados de acordo com a
disponibilidade da infraestrutura desta Universidade.
Os estudantes realizarão as aulas práticas em grupos de 3 a 5 membros,
previamente estabelecidos. Os exercícios serão respondidos em grupo ao final de cada
aula e apresentados a Professora para vistoria. No final do semestre, este material
deverá ser encadernado e entregue para correção, em data a ser marcada, e fará parte
do crédito prático da disciplina.
REFERÊNCIAS:
Caliri, M. H. L. Medidas e diluições de drogas. Disponível em:
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/49929/mod_resource/content/2/ApostilaDil
uicaoDrogas2007.pdf
Cambraia, J.; Pacheco, S. Práticas de Biofísica. Viçosa: \UFV, 1997.
Degani, A. L. G.; Cass, Q. B.; Vieira, P. C. Cromatografia um breve ensaio. Química Nova
na Escola nº 7, 1999. p. 21-25.
HENEINE, I. F. Biofísica Básica. São Paulo: Atheneu, 2000.
Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de bioquímica e
biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
•••••
CONSIDERAÇÕES:
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
�
1.
2.
3.
4.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
procedimentos
�
menos, suas consequências, minimizadas.
1.
2.
3.
4.
5.
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
• Familiarizar o estudante com • Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;• Saber identificar os pictogramas de perigo químico;• Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;• Apresentar a norma de rotulagem de produtos químicos.
CONSIDERAÇÕES:
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
� IntroduçãoTodo trabalho de laboratório passa por quatro fases:
1. Familiarização do estudante com o ambiente do laboratório.2. Desenvolvimento de habilidades para o uso de aparelhos.3. Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.4. Interpretação dos resultados
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
procedimentos-
� Normas Os acidentes pod
menos, suas consequências, minimizadas.
1. Usar sempre jaleco;2. Usar calça comprida, cabelo preso e cal3. Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
laboratório
4. Não beber, comer ou fumar no 5. Caminhar lentament
sabor, odores devem ser verificados com muito cu
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I.
NOME DOS COMPONENTES:
Familiarizar o estudante com
Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;
Saber identificar os pictogramas de perigo químico;
Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;
Apresentar a norma de rotulagem de produtos químicos.
CONSIDERAÇÕES:
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
Introdução
trabalho de laboratório passa por quatro fases:
Familiarização do estudante com o ambiente do laboratório.
Desenvolvimento de habilidades para o uso de aparelhos.
Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.
Interpretação dos resultados
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
-padrão e os principais materiais e
gerais de segurança no laboratório
Os acidentes podem ser evitados, se devidas pre
menos, suas consequências, minimizadas.
Usar sempre jaleco;
Usar calça comprida, cabelo preso e cal
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
laboratório;
Não beber, comer ou fumar no
Caminhar lentament
sabor, odores devem ser verificados com muito cu
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I. BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS
NOME DOS COMPONENTES:
Familiarizar o estudante com o laboratório;
Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;
Saber identificar os pictogramas de perigo químico;
Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;
Apresentar a norma de rotulagem de produtos químicos.
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
trabalho de laboratório passa por quatro fases:
Familiarização do estudante com o ambiente do laboratório.
Desenvolvimento de habilidades para o uso de aparelhos.
Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.
Interpretação dos resultados obtidos.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
e os principais materiais e
gerais de segurança no laboratório
em ser evitados, se devidas pre
menos, suas consequências, minimizadas.
Usar sempre jaleco;
Usar calça comprida, cabelo preso e cal
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
Não beber, comer ou fumar no
Caminhar lentamente e com atenção Nunca testar am
sabor, odores devem ser verificados com muito cu
4
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BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS
o laboratório;
Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;
Saber identificar os pictogramas de perigo químico;
Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;
Apresentar a norma de rotulagem de produtos químicos.
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
trabalho de laboratório passa por quatro fases:
Familiarização do estudante com o ambiente do laboratório.
Desenvolvimento de habilidades para o uso de aparelhos.
Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.
obtidos.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
e os principais materiais e
gerais de segurança no laboratório
em ser evitados, se devidas pre
menos, suas consequências, minimizadas.
Usar calça comprida, cabelo preso e calçado fechado
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
Não beber, comer ou fumar no laboratório
com atenção Nunca testar am
sabor, odores devem ser verificados com muito cu
Práticas
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BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS
DATA: ____/_____/_____
o laboratório;
Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;
Saber identificar os pictogramas de perigo químico;
Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;
Apresentar a norma de rotulagem de produtos químicos.
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
trabalho de laboratório passa por quatro fases:
Familiarização do estudante com o ambiente do laboratório.
Desenvolvimento de habilidades para o uso de aparelhos.
Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
e os principais materiais e equipamentos que utilizará.
gerais de segurança no laboratório
em ser evitados, se devidas precauções forem tomadas ou, ao
ado fechado
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
laboratório;
com atenção Nunca testar am
sabor, odores devem ser verificados com muito cuidado
Práticas de Biofísica: exercícios
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BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS
DATA: ____/_____/_____
Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;
Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;
Apresentar a norma de rotulagem de produtos químicos.
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
trabalho de laboratório passa por quatro fases:
Familiarização do estudante com o ambiente do laboratório.
Desenvolvimento de habilidades para o uso de aparelhos.
Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de seguran
equipamentos que utilizará.
ções forem tomadas ou, ao
ado fechado;
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
com atenção Nunca testar amostras ou reagentes p
idado;
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
Conscientizar o estudante das regras básicas de segurança laboratorial;
Classificar os resíduos produzidos no laboratório de aula prática;
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
Execução do experimento proposto visando aos resultados finais.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
deve conhecer o espaço físico no qual trabalhará, as normas de segurança, os
equipamentos que utilizará.
ções forem tomadas ou, ao
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
ostras ou reagentes p
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
Adaptado de: Nardy, M. B. C.; Stella, M.B.; Oliveira, C. Práticas de laboratório de
bioquímica e biofísica: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
Para que o aluno se familiarize com o ambiente em que desenvolverá as atividades, ele
ça, os
ções forem tomadas ou, ao
Não usar relógios, pulseiras, anéis ou outros ornamentos durante o trabalho no
ostras ou reagentes pelo
Práticas de Biofísica: exercícios
5
6. Não levar a mão á boca ou olhos quando estiver manuseando produtos químicos;
7. Em casos de acidentes, manter a calma e chamar o professor ou técnico responsável;
8. Guardar em armários, ou outros locais indicados pelo professor, os objetos pessoais, como bolsas, blusas e outros;
9. Brincadeiras são absolutamente proibidas nos laboratórios; 10. Usar a capela sempre que trabalhar com solventes voláteis, tóxicos e reações
perigosas, explosivas ou tóxicas;
11. Manipular as substâncias inflamáveis em locais distantes de fontes de aquecimento;
12. Usar pipetadores sempre que utilizar pipetas; 13. Ao final de cada aula, as vidrarias utilizadas durante o trabalho de laboratório
devem ser esvaziadas e enxaguadas antes de serem enviadas para limpeza;
14. Entregar ao técnico, ou responsável, as vidrarias trincadas, lascadas ou quebradas;
15. Antes de manipular qualquer reagente, deve-se ter conhecimento de suas características com relação á toxicidade, inflamabilidade e explosividade
(ATENÇÃO AOS PICTOGRAMAS DE PERIGO INDICADOS NO RÓTULO!!!);
16. Indicar claramente os reagentes e as soluções, que devem apresentar data de preparo, o nome de quem a preparou;
17. Usar sempre materiais e equipamentos adequados; 18. Orientar-se sempre com o professor quanto ao descarte de reagentes, resíduos
de reações ou outros resíduos dos laboratórios.
Estas são algumas regras gerais que devemos seguir durante o trabalho no
laboratório. Ao longo do curso, em cada experimento, serão relacionadas outras mais
especificas, inclusive sobre os reagentes que serão manipulados.
� Classificação dos resíduos de acordo com a resolução CONAMA nº 358/2005
• GRUPO A: Resíduos com a possível presença de agentes biológicos que, por suas características de maior virulência ou concentração, podem apresentar
risco de infecção.
• GRUPO B: Resíduos contendo substâncias químicas que podem apresentar risco à saúde pública ou ao meio ambiente, dependendo de suas
características de inflamabilidade, corrosividade, reatividade e toxicidade.
• GRUPO C: Quaisquer materiais resultantes de atividades humanas que contenham radionuclídeos em quantidades superiores aos limites de
eliminação especificados nas normas da Comissão Nacional de Energia
Nuclear-CNEN e para os quais a reutilização é imprópria ou não prevista.
Práticas de Biofísica: exercícios
6
• GRUPO D: Resíduos que não apresentem risco biológico, químico ou radiológico à saúde ou ao meio ambiente, podendo ser equiparados aos
resíduos domiciliares.
• GRUPO E: Materiais perfurocortantes ou escarificantes, tais como: lâminas de barbear, agulhas, escalpes, ampolas de vidro, brocas, limas endodônticas,
pontas diamantadas, lâminas de bisturi, lancetas; tubos capilares;
micropipetas; lâminas e lamínulas; espátulas; e todos os utensílios de vidro
quebrados no laboratório (pipetas, tubos de coleta sanguínea e placas de
Petri) e outros similares.
� Norma de rotulagem de produtos químicos de acordo com GHS: critérios mínimos
O GHS (Globally Harmonised System of Classification and Labelling) foi desenvolvido pela ONU com o objetivo de estabelecer um conjunto de critérios globalmente harmonizados para a classificação de riscos físicos, perigos para a saúde, e riscos ambientais especificados nos rótulos dos produtos químicos. Neste sistema, as seguintes informações devem estar contidas no rótulo:
1. Identificação do produto e telefone de emergência do fornecedor 2. Composição química 3. Pictograma de perigo 4. Palavra de advertência 5. Frase de perigo 6. Frases de precaução 7. Outras informações
Observe o exemplo abaixo
Práticas de Biofísica: exercícios
7
EXERCÍCIOS:
1) Agora reflita: o laboratório em que trabalhará produz que tipos de resíduos? Pesquise como deve ser o descarte desses resíduos?
Práticas de Biofísica: exercícios
8
2) O que significa cada pictograma de perigo químico?
SÍMBOLO SIGNIFICADO SÍMBOLO SIGNIFICADO
Práticas de Biofísica: exercícios
9
3) Agora, observe o rótulo de um produto químico e identifique as informações mínimas de acordo com GHS. Existe alguma informação faltando? Qual (quais)?
4) Quais são os perigos deste produto de acordo com os pictogramas indicados no rótulo? Cite os principais cuidados que devem ser tomados ao manusear este
reagente:
II. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
•
••
EXERCÍCIOS:1) Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
(desenhe
. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
• Familiarizar o estudante com práticas de Biofísica
• Aprender a técnica de pipetagem;• Realizar diluições seriadas.
EXERCÍCIOS:
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
(desenhe ou fotografe caso
VIDRARIA
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. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
NOME DOS COMPONENTES:
Familiarizar o estudante com práticas de Biofísica
Aprender a técnica de pipetagem;
Realizar diluições seriadas.
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
ou fotografe caso
VIDRARIA
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. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
NOME DOS COMPONENTES:
Familiarizar o estudante com práticas de Biofísica e suas aplicações;
Aprender a técnica de pipetagem;
Realizar diluições seriadas.
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
ou fotografe caso precis
10
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. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
Familiarizar o estudante com as vidrariase suas aplicações;
Aprender a técnica de pipetagem;
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
precise memorizar):
Práticas
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. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
DATA: ____/_____/_____
as vidrarias de uso mais frequente nas aulas
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
memorizar):
UTILIZAÇÃO
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. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
DATA: ____/_____/_____
de uso mais frequente nas aulas
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
UTILIZAÇÃO
de Biofísica: exercícios
. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
DATA: ____/_____/_____
de uso mais frequente nas aulas
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
de Biofísica: exercícios
. INSTRUMENTAÇÃO PARA USO DO LABORATÓRIO EM ATIVIDADE DE BIOFÍSICA
DATA: ____/_____/_____
de uso mais frequente nas aulas
Identifique as vidrarias apresentadas durante a aula e descreva a sua utilização
Práticas de Biofísica: exercícios
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Práticas de Biofísica: exercícios
12
2) Qual é a principal diferença na função de uma vidraria graduada e uma vidraria volumétrica?
3) Como se realiza as diluições seriadas 10X e 2X em um volume final de 10 mL? Esquematize com desenhos, identificando o fator de diluição.
4) Dilua o corante realizando uma diluição seriada 10X (10-1 ; 10-2 ; 10-3) em um volume final de 5 mL. Observe a coloração das diluições. Visualmente, as
diluições parecem estar corretas?
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
••
••
CONSIDERAÇÕES:
Massa molecular (MM): soma das massas atômicas (em Massa molarmolecularmuito pequenas e não existe balança que permita pesáunidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x 1023 podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u e um mol de moléculas de KCl (ou seja 6,02 x 10seja, a massa molar é igual a 74,5 g/mol.
Concentração:as concentrações das soluções
•
•
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
• Aprender a converter • Apresentar, discutir e
concentrações
• Calcular soluções diluídas a partir de soluções concentradas• Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membran
CONSIDERAÇÕES:
Massa molecular (MM): soma das massas atômicas (em
Massa molar (M)molecular (em umuito pequenas e não existe balança que permita pesáunidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
(nº de Avogadro), assim como podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u e um mol de moléculas de KCl (ou seja 6,02 x 10seja, a massa molar é igual a 74,5 g/mol.
Concentração: relação as concentrações das soluções
• Percentual (%)
• Molaridade
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NOME DOS COMPONENTES:
Aprender a converter
Apresentar, discutir e concentrações;
alcular soluções diluídas a partir de soluções concentradas
Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membran
CONSIDERAÇÕES:
Massa molecular (MM): A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a soma das massas atômicas (em
(M): A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa u) e relaciona
muito pequenas e não existe balança que permita pesáunidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
(nº de Avogadro), assim como podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u e um mol de moléculas de KCl (ou seja 6,02 x 10seja, a massa molar é igual a 74,5 g/mol.
relação quantidade de soluto / quantidade de soluçãoas concentrações das soluções
Percentual (%) =
Molaridade (M): O resultado é expresso em
m= massa em gramas; MM = massa molecular; V = volume (L)
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III. EXERCÍCIOS DE SOLUÇÕES I
NOME DOS COMPONENTES:
Aprender a converter as escalas de volume, massa e concentração;
Apresentar, discutir e calcular
alcular soluções diluídas a partir de soluções concentradas
Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membran
Relembrando...
A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a soma das massas atômicas (em u) dos átomos da molécula.
A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa e relaciona-se com o número de moles
muito pequenas e não existe balança que permita pesáunidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
(nº de Avogadro), assim como podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u e um mol de moléculas de KCl (ou seja 6,02 x 10seja, a massa molar é igual a 74,5 g/mol.
quantidade de soluto / quantidade de solução
as concentrações das soluções em:
gramas de soluto / 100 mL de soluçãomL de soluto /
O resultado é expresso em
m= massa em gramas; MM = massa molecular; V = volume (L)
13
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EXERCÍCIOS DE SOLUÇÕES I
as escalas de volume, massa e concentração;
calcular diferentes modos de expressão de
alcular soluções diluídas a partir de soluções concentradas
Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membran
Relembrando...
A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a ) dos átomos da molécula.
A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa se com o número de moles
muito pequenas e não existe balança que permita pesáunidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
(nº de Avogadro), assim como ovos são contados por dúzias! podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u e um mol de moléculas de KCl (ou seja 6,02 x 10seja, a massa molar é igual a 74,5 g/mol.
quantidade de soluto / quantidade de solução
gramas de soluto / 100 mL de soluçãomL de soluto / 100 mL de solução
O resultado é expresso em
m= massa em gramas; MM = massa molecular; V = volume (L)
Práticas
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EXERCÍCIOS DE SOLUÇÕES I
DATA: ____/_____/_____
as escalas de volume, massa e concentração;
diferentes modos de expressão de
alcular soluções diluídas a partir de soluções concentradas
Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membran
Relembrando...
A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a ) dos átomos da molécula.
A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa se com o número de moles. Os átomos possuem massas
muito pequenas e não existe balança que permita pesáunidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
ovos são contados por dúzias! podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u e um mol de moléculas de KCl (ou seja 6,02 x 1023 moléculas) pesa 74,5 g. Ou
quantidade de soluto / quantidade de solução
gramas de soluto / 100 mL de solução100 mL de solução
O resultado é expresso em mol.L-1 (mol por litro)
m= massa em gramas; MM = massa molecular; V = volume (L)
Práticas de Biofísica: exercícios
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EXERCÍCIOS DE SOLUÇÕES I
DATA: ____/_____/_____
as escalas de volume, massa e concentração;
diferentes modos de expressão de
alcular soluções diluídas a partir de soluções concentradas;
Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membran
A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a ) dos átomos da molécula.
A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa Os átomos possuem massas
muito pequenas e não existe balança que permita pesá-los diretamente em unidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
ovos são contados por dúzias! podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u
moléculas) pesa 74,5 g. Ou
quantidade de soluto / quantidade de solução
gramas de soluto / 100 mL de solução (m100 mL de solução (v/v)
(mol por litro)
m= massa em gramas; MM = massa molecular; V = volume (L)
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
as escalas de volume, massa e concentração;
diferentes modos de expressão de
Discutir o transporte de substâncias em sistemas separados por membranas.
A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a
A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa Os átomos possuem massas
los diretamente em unidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
ovos são contados por dúzias! Por exemplopodemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u
moléculas) pesa 74,5 g. Ou
quantidade de soluto / quantidade de solução. Expressaremos
m/v)
(mol por litro)
m= massa em gramas; MM = massa molecular; V = volume (L)
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
diferentes modos de expressão de
as.
A massa molecular (às vezes chamada de peso molecular) é a
A massa molar (em gramas) é numericamente igual à massa Os átomos possuem massas
los diretamente em unidades de massa atômica. Por isso, contamos os átomos em “pacotes” de 6,02 x
Por exemplo, podemos dizer que uma única molécula de KCl tem massa molecular igual a 74,5 u
moléculas) pesa 74,5 g. Ou
Expressaremos
Práticas de Biofísica: exercícios
14
• Osmolaridade (Osm): O resultado é expresso em osmol.L-1 (osmol por litro)
M = Molaridade; n = nº de partículas dissociadas.
Diluição: Preparar soluções diluídas a partir de soluções mais concentradas (“soluções estoque”).
Equivalente-grama de uma substância: é a massa dessa substância capaz de reagir com 1g de hidrogênio.
E = massa molar/ k O valor de k é interpretado de acordo com o comportamento químico da substância.
• Ácido: k é igual ao número de hidrogênios ionizáveis (H+). Eácido = massa molar/nº de H
+
• Base: k é igual ao número de hidroxilas (OH-). Ebase = massa molar/nº de OH
-
• Sal: k é igual à valência total do cátion ou do ânion considerado. Esal = massa molar/ valência total
OBS: A valência é medida pelo número de elétrons que um átomo pode dar, receber, ou compartilhar de forma a constituir uma ligação química. Isto está relacionado com o número de espaços omissos nas camadas eletrônicas do átomo.
Observe as escalas de volume, concentração e massa:
VOLUME L mL µL nL pL
MASSA g mg µg ng pg
CONCENTRAÇÃO
mol.L-1 (mol por litro) = M (Molar)
mol.L-1
(M)
mmol.L-1
(mM)
µmol.L-1
(µM)
nmol.L-1
(nM)
pmol.L-1
(pM)
Exemplos: 1 103 106 109 1012
10-3 1 103 106 109
10-6 10-3 1 103 106
10-9 10-6 10-3 1 103
10-12 10-9 10-6 10-3 1
Osm = M x n
Ci . Vi = Cf . Vf
Práticas de Biofísica: exercícios
15
EXERCÍCIOS
1) Converta as unidades abaixo (use notação de base 10, quando necessário):
a) 28 µL = _________________mL
g) 3,56 mL = _______________µL
b) 0,9 mL = ________________µL
h) 0,8 µL = ________________mL
c) 57,4 µL = _______________mL
i) 0,5 mol.L-1 = _____________ mmol.L-1
d) 25 µM = ________________mM
j) 1,5 mmol.L-1 = ___________ nM
e) 3 M = __________________µM
k) 200 nmol.L-1 = ___________ mmol.L-1
f) 350 nmol.L-1 = ___________M l) 45µmol.L-1 = _____________ nmol.L-1
2) Como preparar as seguintes soluções?
a. 200 mL de solução salina (NaCl 0,9%).
b. A partir de uma solução de glicose 20%, preparar 12 mL de uma solução
glicose a 3%.
c. A partir de uma solução de ureia 2M, preparar 30 mL de uma solução a 2,5%.
Práticas de Biofísica: exercícios
16
d. A partir de uma solução de glicose 5M, preparar 15 mL de uma solução a 3%.
e. A partir de uma solução de NaCl 5M, preparar 500 mL de uma solução a 0,9%.
3) Qual é a osmolaridade das soluções abaixo?
a) NaCl 0,9% = ___________ mOsm.L-1
c) NaCl 3% = ___________ mOsm.L-1
b) Glicose 5% = ___________ mOsm.L-1 d) Glicose 10% = _________ mOsm.L-1
4) Quantos mEq de potássio tem em 1mL de uma solução de cloreto de potássio a 10%?
5) Como preparar uma solução aquosa de potássio a 20 mEq/500 mL a partir de uma solução de KCl a 20%?
OBS: NaCl: MM = 58,5 u; Glicose: MM = 180 u; Uréia = 60 u
KCl: Massa molar = 74,5 g/mol; Valência K = 1.
Práticas de Biofísica: exercícios
17
6. Considere os sistemas abaixo separados por uma membrana permeável e complete as lacunas:
a. A velocidade de migração dos solutos, em ordem decrescente será?
_____>_____>_____.
b. O equilíbrio será atingido: 1º _____; 2º _____; 3º _____.
c. Antes do equilíbrio, o desnível será maior em: 1º _____; 2º _____; 3º _____.
d. No equilíbrio, as concentrações nos compartimentos serão:
( ) iguais ( ) diferentes
e. No equilíbrio, as pressões nos compartimentos serão:
f. ( ) iguais ( ) diferentes
g. Em todos os casos, a elevação do nível será:
( ) transitória ( ) permanente
7. Complete as lacunas, no caso dos mesmos sistemas serem separados por uma
membrana semipermeável:
a. A velocidade de migração do solvente, em ordem decrescente será?
_____>_____>_____.
b. O equilíbrio será atingido: 1º _____; 2º _____; 3º _____.
c. Antes do equilíbrio, o desnível será maior em: 1º _____; 2º _____; 3º _____.
d. No equilíbrio, as concentrações nos compartimentos serão:
( ) iguais ( ) diferentes
e. No equilíbrio, as pressões nos compartimentos serão:
( ) iguais ( ) diferentes
f. Em todos os casos, a elevação do nível será:
( ) transitória ( ) permanente
solução de
URÉIA
MM = 60
solução de
GLICOSE
MM = 180
solução de
SACAROSE
MM = 342
0,2M 0,1M 0,2M 0,1M 0,2M 0,1M
A B C
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO:
•
EXERCÍCIOS:
1)
2)
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO:
• Aplicar o cálculo de soluções em situações clínicas.
EXERCÍCIOS:
1) Um paciente endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
preparar a solução desejada?
2) Se a solução invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
OBS: Osmolaridade do plasma é de aproximadamente 300 m
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NOME DOS COMPONENTES:
Aplicar o cálculo de soluções em situações clínicas.
Um paciente necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
preparar a solução desejada?
Se a solução acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
OBS: Osmolaridade do plasma é de aproximadamente 300 m
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA PROFª BIANCA MENDES MACIEL
IV. EXERCÍCIO DE SOLUÇÕES II (Aplicação clínica)
NOME DOS COMPONENTES:
Aplicar o cálculo de soluções em situações clínicas.
necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
preparar a solução desejada?
acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
OBS: Osmolaridade do plasma é de aproximadamente 300 m
18
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA PROFª BIANCA MENDES MACIEL
EXERCÍCIO DE SOLUÇÕES IIplicação clínica)
Aplicar o cálculo de soluções em situações clínicas.
necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
OBS: Osmolaridade do plasma é de aproximadamente 300 m
Práticas
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA PROFª BIANCA MENDES MACIEL
EXERCÍCIO DE SOLUÇÕES II plicação clínica)
DATA: ____/_____/_____
Aplicar o cálculo de soluções em situações clínicas.
necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
OBS: Osmolaridade do plasma é de aproximadamente 300 m
Práticas de Biofísica: exercícios
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ – UESC DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DATA: ____/_____/_____
necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
OBS: Osmolaridade do plasma é de aproximadamente 300 mOsm/L.
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
seria isotônica, hipotônica ou hipertônica em relação ao plasma?
Osm/L.
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
necessita de 1000 mL de soro glicosado a 5% para administração
endovenosa. Na farmácia hospitalar tem disponível glicose a 50% (ampolas
de 20 mL) e água bidestilada (frascos de 500 mL). Como proceder para
acima fosse preparada em solução fisiológica (NaCl 0,9%) ao
invés de água bidestilada, qual seria a osmolaridade da solução final? Esta
Práticas de Biofísica: exercícios
19
3) O paciente necessita de 500 mL de solução glicofisiológica (solução glicosada 5% + solução fisiológica 0,9%). Na farmácia hospitalar tem disponível solução
glicosada a 5% (frascos de 500 mL) e solução de NaCl a 10% (ampolas de 10
mL). Como proceder para preparar a solução desejada?
4) Foi diagnosticado hipocalemia (baixo nível sérico de potássio) em um canino de 27 kg. Para o tratamento, foi recomendado a suplementação diária com
cloreto de potássio a 0,5 mEq/Kg por via oral (1 x dia), durante 10 dias. O
medicamento é apresentado na forma de drágeas de KCl 500 mg (caixa com
50 drágeas). Quantos comprimidos ao dia e quantas caixas serão utilizadas
durante a terapia? OBS: Massa molar KCl = 74,5 g/mol; Valência K = 1.
5) O paciente necessita de 500 mL de solução salina hipertônica (NaCl 3%). Na farmácia hospitalar tem disponível solução fisiológica (NaCl 0,9%) em frascos
de 500 mL e ampolas de 20 mL de NaCl 20%. Como proceder para preparar a
solução desejada?
NaCl: MM = 58,5 u; Glicose: MM = 180 u
KCl: Massa molar = 74,5 g/mol; Valência K = 1.
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO
•
•
MATERIAL:I. Equipamentos:
••
II. Vidrarias e utensílios:
•••••••••••••
III. Reagentes:
•••••••
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
• Preparar soluções de diferentes concentraçõespráticas da disciplina;
• Determinar a osmolaridade
MATERIAL: I. Equipamentos:
• Balança digital• Agitador magnético com as “bailarinas”
Vidrarias e utensílios:
• Balão volumétrico de 100 mL• Béquer de 250 mL• Erlenmeyer de 250 mL• Proveta de 100 mL• Vidro de relógio• Bastão de Vidro• Espátulas• Rolo de barbante• Rolo de gaze• Rolo de papel alumínio• Algodão hidrofóbico• Caneta para marcação em vidro• Tesoura
III. Reagentes:
• NaCl • KCl • CaCl2 • Sacarose• Glucose • Manitol • Água destiladada
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª
NOME DOS COMPONENTES:
Preparar soluções de diferentes concentraçõespráticas da disciplina;
Determinar a osmolaridade
I. Equipamentos:
Balança digital
Agitador magnético com as “bailarinas”Vidrarias e utensílios:
Balão volumétrico de 100 mL
Béquer de 250 mL
Erlenmeyer de 250 mL
Proveta de 100 mL
Vidro de relógio
Bastão de Vidro
Espátulas para pesagem
Rolo de barbante
Rolo de gaze
Rolo de papel alumínio
Algodão hidrofóbico
para marcação em vidro
Sacarose
Manitol
Água destiladada
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª
V. PREPARO DE SOLUÇÕES
NOME DOS COMPONENTES:
Preparar soluções de diferentes concentraçõespráticas da disciplina;
Determinar a osmolaridade das soluções
Agitador magnético com as “bailarinas”
Balão volumétrico de 100 mL
Erlenmeyer de 250 mL
para pesagem
Rolo de papel alumínio
Algodão hidrofóbico
para marcação em vidro
20
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
PREPARO DE SOLUÇÕES
Preparar soluções de diferentes concentrações
das soluções.
Agitador magnético com as “bailarinas”
para marcação em vidro
Práticas
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BIANCA MENDES MACIEL
PREPARO DE SOLUÇÕES
DATA: ____/_____/_____
Preparar soluções de diferentes concentrações, que serão utilizadas nas aulas
Práticas de Biofísica: exercícios
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BIANCA MENDES MACIEL
PREPARO DE SOLUÇÕES
DATA: ____/_____/_____
, que serão utilizadas nas aulas
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
, que serão utilizadas nas aulas
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
, que serão utilizadas nas aulas
Práticas de Biofísica: exercícios
21
PROCEDIMENTO:
1) Preparar 100 mL das seguintes soluções abaixo e calcular as respectivas
concentrações osmolares:
SOLUÇÕES* CONCENTRAÇÃO
(Osm.L-1)
SOLUÇÕES** CONCENTRAÇÃO
(Osm.L-1)
NaCl (0,5 M) NaCl (0,2 M)
NaCl (1,0 M) KCl (0,2 M)
NaCl (2,0 M) CaCl2 (0,15 M)
Sacarose (0,5 M) Sacarose (0,4 M)
Sacarose (1,0 M) Manitol (0,4 M)
Sacarose (2,0 M) Glicose (0,4 M)
* serão utilizadas na aula VI ** serão utilizadas na aula VIII
Demonstre seus cálculos:
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO:
•
CONSIDERAÇÕES:
Onde:
π = Pressão osmóticaM = concentração molarR = constante universal dos gases (T – temperatura em Kelvin (= T °C + 273)i = fator de correção de Van’t Hoffdissociadas) MATERIAL:I. Vidrarias e utensílios
II. Reagentes
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO:
• Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da solução.
CONSIDERAÇÕES:� Pressão osmótica
concentrada para impedir a passagem de moléculas de solvente� A sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
Hoff:
Onde:
= Pressão osmótica
M = concentração molarR = constante universal dos gases (
temperatura em Kelvin (= T °C + 273)= fator de correção de Van’t Hoff
dissociadas)
MATERIAL: I. Vidrarias e utensílios
• Becker • Pipeta • Proveta 50 ou 100 mL• Termômetro• Barbante• Tesoura• Caneta para marcação em vidro• Luvas • Saco de diálise
II. Reagentes
• Soluções preparadas na aula V (NaCl 0,5 MM e 2,0 M)
• AgNO3
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NOME DOS COMPONENTES:
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da solução.
CONSIDERAÇÕES: Pressão osmóticaconcentrada para impedir a passagem de moléculas de solventeA sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
= Pressão osmótica
M = concentração molar R = constante universal dos gases (
temperatura em Kelvin (= T °C + 273)= fator de correção de Van’t Hoff
I. Vidrarias e utensílios
Becker 500 mL
de vidro de
Proveta 50 ou 100 mL
Termômetro
Barbante
Tesoura
Caneta para marcação em vidro
Saco de diálise
Soluções preparadas na aula V (NaCl 0,5 MM e 2,0 M)
1%
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VI.
NOME DOS COMPONENTES:
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da
Pressão osmótica: é a pressão que deve ser aplicada à solução mais concentrada para impedir a passagem de moléculas de solventeA sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
R = constante universal dos gases (= 0,082 atm ou 62,3 mmHg)temperatura em Kelvin (= T °C + 273)
= fator de correção de Van’t Hoff
de vidro de 1 mL
Proveta 50 ou 100 mL
Caneta para marcação em vidro
Soluções preparadas na aula V (NaCl 0,5 M
π
22
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. PRESSÃO OSMÓTICA
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da
: é a pressão que deve ser aplicada à solução mais concentrada para impedir a passagem de moléculas de solventeA sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
= 0,082 atm ou 62,3 mmHg)temperatura em Kelvin (= T °C + 273)
= fator de correção de Van’t Hoff (está relacionado a quantidade de partículas
Caneta para marcação em vidro
Soluções preparadas na aula V (NaCl 0,5 M
π = M.R.T
Práticas
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PRESSÃO OSMÓTICA
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da
: é a pressão que deve ser aplicada à solução mais concentrada para impedir a passagem de moléculas de solventeA sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
= 0,082 atm ou 62,3 mmHg)
(está relacionado a quantidade de partículas
Soluções preparadas na aula V (NaCl 0,5 M, 1,0 M
= M.R.T.i
Práticas de Biofísica: exercícios
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PRESSÃO OSMÓTICA
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da
: é a pressão que deve ser aplicada à solução mais concentrada para impedir a passagem de moléculas de solventeA sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
= 0,082 atm ou 62,3 mmHg)
(está relacionado a quantidade de partículas
e 2 M; sacarose
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da
: é a pressão que deve ser aplicada à solução mais concentrada para impedir a passagem de moléculas de solvente. A sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
(está relacionado a quantidade de partículas
; sacarose 0,5 M, 1,0
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar a relação entre a concentração de soluto e a pressão osmótica da
: é a pressão que deve ser aplicada à solução mais
A sua relação com a concentração da solução é dada pela equação de Van’t
(está relacionado a quantidade de partículas
0,5 M, 1,0
Práticas de Biofísica: exercícios
23
PROCEDIMENTO: 1. Umedeça o tubo de diálise em água destilada; 2. Amarre com um barbante uma das extremidades do tubo de diálise; 3. Adicione 25 mL da solução preparada pelo seu grupo no interior do tubo de
diálise; 4. Introduza a ponta da pipeta de 1mL, aproximadamente 2 cm, para dentro da
solução contida no tubo de diálise e amarre firmemente com cuidado para que não fiquem bolhas de ar no sistema;
5. Introduza o conjunto pipeta-tubo de diálise num becker contendo, aproximadamente, 400 mL de água destilada;
6. Fixar o conjunto no suporte de ferro; 7. Marcar a altura do líquido na pipeta de vidro (este deve estar acima do cordão
para conseguir visualizar). Esta pipeta funciona como um osmômetro capilar; 8. Anote imediatamente o tempo do início do experimento e a altura no nível do
líquido; 9. A cada 5 min, anote a altura do líquido na pipeta de vidro até completar 20 min
de experimento. Anote também o resultado dos outros grupos; 10. Nos grupos que utilizaram soluções de NaCl: retirar 1 mL da solução externa
(em cada tempo do experimento), colocar em um tubo de ensaio e adicionar 200 µL de AgNO3 (use luvas!). OBS1: O nitrato de prata revela a presença de cloretos formando um precipitado branco (cloreto de prata):
NaCl + AgNO = AgCl + NaNO3 OBS2: Utilizar controle positivo (sol. NaCl) e controle negativo (água) para visualizar as reações
ANOTAÇÃO DOS RESULTADOS:
SOLUÇÃO
ALTURA DA COLUNA (cm)
5 min 10 min 15 min 20 min
NaCl 0,5 M NaCl 1,0 M Sacarose 0,5 M Sacarose 1,0 M EXERCÍCIOS: 1) Formule sua hipótese para este experimento:
Práticas de Biofísica: exercícios
24
2) Calcule a porcentagem (m/v), a osmolaridade e a pressão osmótica (em mmHg) de cada solução
SOLUÇÃO
% (m/v)
Osmolaridade (osm.L-1)
π (atm)
NaCl 0,5 M NaCl 1,0 M Sacarose 0,5 M Sacarose 1,0 M
3) Trace um gráfico com os dados obtidos de cada solução, colocando-se na ordenada as variações dos volumes (mL) e na abscissa as variações do tempo
(min):
Práticas de Biofísica: exercícios
25
4) Interprete os resultados relacionando a concentração das soluções, osmolaridade, pressão osmótica, altura da coluna de liquido no osmômetro
capilar e permeabilidade da membrana.
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO
•
••
CONSIDERAÇÕES:
�
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
• Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas aplicações;
• Determinar o espectro de absorção de uma substância;• Produzir um gráfico de curva padrão para
amostra desconhecida.
CONSIDERAÇÕES:
� COLORIMETRIA• Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da
quantidade de luz absorvida por uma solução.
• Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua complementar.transmitida.
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
NOME DOS COMPONENTES:
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas aplicações;
Determinar o espectro de absorção de uma substância;
Produzir um gráfico de curva padrão para amostra desconhecida.
CONSIDERAÇÕES:
COLORIMETRIA
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da quantidade de luz absorvida por uma solução.
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua complementar.transmitida.
AZUL
VIOLETA
� Vértices = cores primárias (vermelho, azul e amarelo);� Laterais � Medianas
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VII. ESPECTROFOTOMETRIA
NOME DOS COMPONENTES:
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas
Determinar o espectro de absorção de uma substância;
Produzir um gráfico de curva padrão para amostra desconhecida.
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da quantidade de luz absorvida por uma solução.
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua complementar. Assim, a cor da solução é determinada pela cor da luz
- TRIÂNGULO DE CORES
AZUL
VIOLETA
értices = cores primárias (vermelho, azul e amarelo);
aterais = cores secundárias (verde, violeta e laranja);
edianas = cores complementares
26
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
ESPECTROFOTOMETRIA
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas
Determinar o espectro de absorção de uma substância;
Produzir um gráfico de curva padrão para
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da quantidade de luz absorvida por uma solução.
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua Assim, a cor da solução é determinada pela cor da luz
TRIÂNGULO DE CORES
VERMELHO
VERDE
értices = cores primárias (vermelho, azul e amarelo);
= cores secundárias (verde, violeta e laranja);
cores complementares
Práticas
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DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
ESPECTROFOTOMETRIA
DATA: ____/_____/_____
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas
Determinar o espectro de absorção de uma substância;
Produzir um gráfico de curva padrão para determinar a concentração de uma
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da quantidade de luz absorvida por uma solução.
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua Assim, a cor da solução é determinada pela cor da luz
TRIÂNGULO DE CORES -
VERMELHO
VERDE
LARANJA
értices = cores primárias (vermelho, azul e amarelo);
= cores secundárias (verde, violeta e laranja);
cores complementares
Práticas de Biofísica: exercícios
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ESPECTROFOTOMETRIA
DATA: ____/_____/_____
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas
Determinar o espectro de absorção de uma substância;
determinar a concentração de uma
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua Assim, a cor da solução é determinada pela cor da luz
AMARE
LARANJA
értices = cores primárias (vermelho, azul e amarelo);
= cores secundárias (verde, violeta e laranja);
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas
determinar a concentração de uma
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua Assim, a cor da solução é determinada pela cor da luz
AMARELO
értices = cores primárias (vermelho, azul e amarelo);
= cores secundárias (verde, violeta e laranja);
de Biofísica: exercícios
DATA: ____/_____/_____
Familiarizar o estudante com a técnica analítica de espectrofotometria e suas
determinar a concentração de uma
Compreende os métodos analíticos que se baseiam na medição da
Uma solução colorida apresenta máxima absorção de luz para a sua cor Assim, a cor da solução é determinada pela cor da luz
RELAÇÃO ENTRE RELAÇÃO ENTRE
Vermelha
Luz incidente
RELAÇÃO ENTRE O COMPRIMENTO DE ONDA
Vermelha
Amarela
Azul
Luz incidente
(branca)
O COMPRIMENTO DE ONDA
FONTE:
Luz absorvida pela
solução colorida
27
O COMPRIMENTO DE ONDA, A COR
FONTE: http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/naturezadacor.html
Luz absorvida pela
solução colorida
(vermelha
Práticas
A COR ABSORVIDA E A COR COMPLEMENTAR
http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/naturezadacor.html
Luz absorvida pela
solução colorida
vermelha)
Práticas de Biofísica: exercícios
ABSORVIDA E A COR COMPLEMENTAR
http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/naturezadacor.html
Amarela
Azul
Luz transmitida e
da solução (
de Biofísica: exercícios
FONTE: ENEM 2011
ABSORVIDA E A COR COMPLEMENTAR
http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/naturezadacor.html
Amarela
Verde
Luz transmitida e cor
da solução (verde)
de Biofísica: exercícios
FONTE: ENEM 2011
ABSORVIDA E A COR COMPLEMENTAR
http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/naturezadacor.html
Verde
cor
�
T – projetado);
It - intensidade de luz transmitida;
A – Absorbância
linearidaproporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.quando a soluçãpara determinação de sua absorbância.
I
• À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção.intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das moléculas absorventes de luz.
� LEI DE LAMBERTsolução vmeio atravessado”.
T (Tra
Transmitânciaprojetado);
intensidade de luz transmitida;
Absorbância
Desvios da lei de Lambertlinearidade (limite de concentração para a qual a lei de Lambertproporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.quando a soluçãpara determinação de sua absorbância.
Io
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção.intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das moléculas absorventes de luz.
LEI DE LAMBERT-BEERsolução varia exponencialmente com a concentração e com a espessura do meio atravessado”.
T (Transmitância) =
mitância (mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
intensidade de luz transmitida;
Absorbância (mede a quantidade de luz absorvida, é o inverso da tra
T[1] > T[2]
Desvios da lei de Lambertlimite de concentração para a qual a lei de Lambert
proporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.quando a solução é muito concentrada, necessitandpara determinação de sua absorbância.
It
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção.intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das moléculas absorventes de luz.
BEER: “A intensidade da energia radiante absorvida por uma aria exponencialmente com a concentração e com a espessura do
meio atravessado”.
mitância) = It / I
(mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
intensidade de luz transmitida; I0 - intensidade de luz incidente
(mede a quantidade de luz absorvida, é o inverso da tra
T[2] > T [3]
Desvios da lei de Lambert-Beer: limite de concentração para a qual a lei de Lambert
proporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.é muito concentrada, necessitand
para determinação de sua absorbância.
Io
28
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção.intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das moléculas absorventes de luz.
: “A intensidade da energia radiante absorvida por uma aria exponencialmente com a concentração e com a espessura do
I0
(mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
intensidade de luz incidente
(mede a quantidade de luz absorvida, é o inverso da tra
T [3] A
Beer: Para concentrações superiores ao limite de limite de concentração para a qual a lei de Lambert
proporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.é muito concentrada, necessitand
para determinação de sua absorbância.
FONTE: Compri
limite de linearidade
Práticas
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção.intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das
: “A intensidade da energia radiante absorvida por uma aria exponencialmente com a concentração e com a espessura do
A (Absorbância) =
(mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
intensidade de luz incidente
(mede a quantidade de luz absorvida, é o inverso da tra
A[1] < A[2]
Para concentrações superiores ao limite de limite de concentração para a qual a lei de Lambert
proporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.é muito concentrada, necessitando, portanto,a diluição da amostra
FONTE: Compri
It
limite de linearidade
Práticas de Biofísica: exercícios
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção.intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das
: “A intensidade da energia radiante absorvida por uma aria exponencialmente com a concentração e com a espessura do
A (Absorbância) = -logT
(mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
intensidade de luz incidente
(mede a quantidade de luz absorvida, é o inverso da tra
[2] < A [3]
Para concentrações superiores ao limite de limite de concentração para a qual a lei de Lambert-Beer é válida)
proporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir.o, portanto,a diluição da amostra
FONTE: Compri-Nardi et al., 2013
Io
limite de linearidade
de Biofísica: exercícios
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de que atravessa a solução diminui, indicando maior absorção. Ou seja, a intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das
: “A intensidade da energia radiante absorvida por uma aria exponencialmente com a concentração e com a espessura do
logT
(mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
(mede a quantidade de luz absorvida, é o inverso da transmitância)
Para concentrações superiores ao limite de Beer é válida)
proporcionalidade linear entre concentração e absorbância deixa de existir. Ocorre o, portanto,a diluição da amostra
Nardi et al., 2013
I
de Biofísica: exercícios
À medida que a concentração de um corante aumenta, a quantidade de luz Ou seja, a
intensidade da cor de uma solução é proporcional à concentração das
: “A intensidade da energia radiante absorvida por uma aria exponencialmente com a concentração e com a espessura do
(mede a intensidade de luz transmitida em relação ao que foi
mitância)
Para concentrações superiores ao limite de Beer é válida), a
Ocorre o, portanto,a diluição da amostra
It
�
� ESPECTROFOTÔMETRO
• Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz transmitida) e absorbância (
comprimento de onda.
• A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de onda
espectro de absorção.
• A curva de espectro de absorção determina de onda para
onde há maior absorbân
• Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecerinicialmente,
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e
das concentrações conhecidas de uma determinada solução.
• Curva padrãomenos
um gráfico da concentração (eixo x)
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
gráfico
ESPECTROFOTÔMETRO
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
transmitida) e absorbância (
comprimento de onda.
FUNCIONAMENTO
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
onda eletromagnética para leitura
espectro de absorção.
A curva de espectro de absorção determina
de onda para a leitura espectrofotométrica de
onde há maior absorbân
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer
inicialmente, uma
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e
concentrações conhecidas de uma determinada solução.
Curva padrão: realizada a partir da determinação das absorbância
menos, cinco diluições de uma solução conhecida
um gráfico da concentração (eixo x)
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
gráfico e através de uma equação de regr
ESPECTROFOTÔMETRO
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
transmitida) e absorbância (
comprimento de onda.
FUNCIONAMENTODE UM ESPECTROFOTÔMETRO
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
eletromagnética para leitura
espectro de absorção.
A curva de espectro de absorção determina
a leitura espectrofotométrica de
onde há maior absorbância e menor transmitância.
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer
uma “curva
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e
concentrações conhecidas de uma determinada solução.
: realizada a partir da determinação das absorbância
cinco diluições de uma solução conhecida
um gráfico da concentração (eixo x)
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
e através de uma equação de regr
29
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
transmitida) e absorbância (luz absorvida) de uma solução em um ou mais
DE UM ESPECTROFOTÔMETRO
FONTE:
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
eletromagnética para leitura, que deve ser determinado pela curva de
A curva de espectro de absorção determina
a leitura espectrofotométrica de
cia e menor transmitância.
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer
curva padrão” (ou “curva de calibração”), que
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e
concentrações conhecidas de uma determinada solução.
: realizada a partir da determinação das absorbância
cinco diluições de uma solução conhecida
um gráfico da concentração (eixo x)
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
e através de uma equação de regr
Práticas
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
uz absorvida) de uma solução em um ou mais
DE UM ESPECTROFOTÔMETRO
FONTE: http://quimicanastaipas.wordpress.com
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
, que deve ser determinado pela curva de
A curva de espectro de absorção determina a faixa de
a leitura espectrofotométrica de uma determinada solução,
cia e menor transmitância.
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer
” (ou “curva de calibração”), que
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e
concentrações conhecidas de uma determinada solução.
: realizada a partir da determinação das absorbância
cinco diluições de uma solução conhecida
um gráfico da concentração (eixo x) versus
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
e através de uma equação de regressão.
Práticas de Biofísica: exercícios
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
uz absorvida) de uma solução em um ou mais
DE UM ESPECTROFOTÔMETRO
http://quimicanastaipas.wordpress.com
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
, que deve ser determinado pela curva de
a faixa de melhor comprimento
uma determinada solução,
cia e menor transmitância.
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer
” (ou “curva de calibração”), que
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e
concentrações conhecidas de uma determinada solução.
: realizada a partir da determinação das absorbância
cinco diluições de uma solução conhecida (5 padrões)
absorbância
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
de Biofísica: exercícios
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
uz absorvida) de uma solução em um ou mais
http://quimicanastaipas.wordpress.com
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
, que deve ser determinado pela curva de
melhor comprimento
uma determinada solução,
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer
” (ou “curva de calibração”), que
corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e os valores
concentrações conhecidas de uma determinada solução.
: realizada a partir da determinação das absorbâncias de,
(5 padrões). Prepara
absorbância (eixo y)
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
de Biofísica: exercícios
Instrumento utilizado para determinar os valores de transmitância (luz
uz absorvida) de uma solução em um ou mais
http://quimicanastaipas.wordpress.com
A sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de
, que deve ser determinado pela curva de
melhor comprimento
uma determinada solução,
Para quantificação de amostras desconhecidas, é necessário estabelecer,
” (ou “curva de calibração”), que
os valores
de, pelo
repara-se
(eixo y). A
concentração da amostra desconhecida pode, então, ser determinada neste
Práticas de Biofísica: exercícios
30
MATERIAL
I. Equipamentos:
• Espectrofotômetro com cubetas II. Vidrarias e utensílios:
• Frasco de vidro âmbar de 1L • Becker de 100 mL • Tubos de ensaio de 15 mL (de vidro) • Pipetas graduadas (de 5 ou 10 mL) • Canetas para marcação em vidro • Estantes para tubo de ensaio • Pipetadores (ou peras) • Micropipeta de 1000 µL • Ponteiras • Papel toalha
III. Reagentes:
• KMnO4 • Água destilada (1L)
PROCEDIMENTO:
1. Preparar uma solução de KMnO4 a 0,1 g/L (solução estoque). Armazená-la em frasco âmbar.
2. Zerar o aparelho com o tubo branco (água destilada); 3. Realizar as leituras espectrofotométricas em cada comprimento de onda,
conforme tabela 1 e determinar o melhor comprimento de onda;
Tabela 1: Determinação do melhor comprimento de onda para leitura espectrofotométrica do KMnO4
λ (nm) A T 400
425
450
475
500
525
550
575
600
625
650
675
700
Práticas de Biofísica: exercícios
31
4. Dilua a solução estoque conforme indicado na tabela 2; 5. Determine a concentração (g/L) de cada diluição e realize a leitura
espectrofotométrica (valores de absorbância), de acordo com a determinação
do melhor comprimento de onda.
TUBOS SOL. ESTOQUE KMnO4 0,1 g/L
ÁGUA DESTILADA (mL)
CONCENTRAÇÃO (g/L)
ABSORBÂNCIA (= ______nm)
1 1mL 9 2 2mL 8 3 3mL 7 4 4mL 6 5 5mL 5 Solução X - - ? Branco - 10 - Zerar
EXERCÍCIOS:
1) Elabore uma curva (no Excel) determinando o espectro de absorção da solução de permanganato de potássio (cole abaixo):
2) Qual a importância da determinação do espectro de absorção?
Práticas de Biofísica: exercícios
32
3) Elabore uma curva padrão a partir das diluições da solução estoque e determine a concentração da solução desconhecida (solução X):
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO
•
•
CONSIDERAÇÕES:�
MATERIAL
I. Equipamentos:
••
II. Vidrarias e utensílios:
••••••••••
III. Reagentes:
•
••
VIII. EFEITO DA OSMOLARIDADE DO MEIO
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVOS:
• Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das hemácias;
• Estimar extracelular
CONSIDERAÇÕES:� Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é
primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de isotonicidade meio extern
MATERIAL
I. Equipamentos:
• Espectrofotômetro com cubetas• Centrífuga
II. Vidrarias e utensílios:
• Tubos de ensaio• Pipetas graduadas • Estantes para tubo de ensaio• Pipetadores (ou peras)• Micropipeta de 100• Ponteiras• Luvas • Canetas para marcação em vidro• Papel toalha• Termômetro
II. Reagentes:
• Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaClSacarose (0,4 M); Manitol (0,4 M); Glicose (0,4 M)
• Sangue de ovino com EDTA• Água destilada
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
EFEITO DA OSMOLARIDADE DO MEIO
NOME DOS COMPONENTES:
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das hemácias;
o ponto de isotonicidade celular com relação à osmolaridadeextracelular
CONSIDERAÇÕES: Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de isotonicidade celular deve ser determinadomeio externo.
I. Equipamentos:
Espectrofotômetro com cubetas
Centrífuga II. Vidrarias e utensílios:
Tubos de ensaio 15 mL
Pipetas graduadas 10 mL
Estantes para tubo de ensaio
Pipetadores (ou peras)
Micropipeta de 100
Ponteiras
Canetas para marcação em vidro
Papel toalha
Termômetro
Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaClSacarose (0,4 M); Manitol (0,4 M); Glicose (0,4 M)
Sangue de ovino com EDTA
Água destilada
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
EFEITO DA OSMOLARIDADE DO MEIO
NOME DOS COMPONENTES:
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das
o ponto de isotonicidade celular com relação à osmolaridade
Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de
celular deve ser determinado
Espectrofotômetro com cubetas
15 mL (tipo Falcon
10 mL
Estantes para tubo de ensaio
Pipetadores (ou peras)
Micropipeta de 100 µL
Canetas para marcação em vidro
Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaClSacarose (0,4 M); Manitol (0,4 M); Glicose (0,4 M)
Sangue de ovino com EDTA
33
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
EFEITO DA OSMOLARIDADE DO MEIO
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das
o ponto de isotonicidade celular com relação à osmolaridade
Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de
celular deve ser determinado
Espectrofotômetro com cubetas
tipo Falcon)
Canetas para marcação em vidro
Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaClSacarose (0,4 M); Manitol (0,4 M); Glicose (0,4 M)
Práticas
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
EFEITO DA OSMOLARIDADE DO MEIO SOBRE A INTEGRIDADE DAS HEMÁCIAS
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das
o ponto de isotonicidade celular com relação à osmolaridade
Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de
celular deve ser determinado com relação à osmolarida
Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaClSacarose (0,4 M); Manitol (0,4 M); Glicose (0,4 M)
Práticas de Biofísica: exercícios
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ – UESC DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: BIOFÍSICA / PROFª BIANCA MENDES MACIEL
SOBRE A INTEGRIDADE DAS HEMÁCIAS
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das
o ponto de isotonicidade celular com relação à osmolaridade
Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de
com relação à osmolarida
Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaCl
de Biofísica: exercícios
SOBRE A INTEGRIDADE DAS HEMÁCIAS
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das
o ponto de isotonicidade celular com relação à osmolaridade do meio
Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de
com relação à osmolaridade do
Soluções preparadas na aula V: NaCl (0,2 M); KCl (0,2 M); CaCl2 (0,15 M);
de Biofísica: exercícios
SOBRE A INTEGRIDADE DAS HEMÁCIAS
DATA: ____/_____/_____
Demonstrar o efeito da osmolaridade do meio sobre a integridade das
do meio
Qualquer experimento que envolva cultivo de células, tecidos ou órgãos é primordial preservar a integridade estrutural da célula. Para isso, o ponto de
de do
(0,15 M);
Práticas de Biofísica: exercícios
34
PROCEDIMENTO:
1. Dilua uma das soluções (uma solução por grupo), conforme o quadro a seguir:
TUBOS SOLUÇÃO
(mL)
ÁGUA (mL) CONCENTRAÇÃO
(Osm.L-1)
PRESSÃO
OSMÓTICA
(mmHg)
[1] 2 8
[2] 3 7
[3] 4 6
[4] 5 5
[5] 6 4
[6] 7 3
[7] 8 2
[8] 9 1
2. Calcule as concentrações osmolares e as pressões osmóticas das soluções;
3. Meça a temperatura dos tubos (basta apenas medir de um dos tubos);
4. Adicione em cada tubo 0,1 mL de sangue (use luvas), agite cuidadosamente por
inversão e deixem em repouso por 5 minutos;
5. Em seguidas, centrifugue a 2.500 rpm por 5 minutos;
6. Transfira o sobrenadante para uma cubeta de colorímetro e meça a
absorbância a 540 nm.
ANOTAÇÃO DOS RESULTADOS:
TUBOS CONCENTRAÇÃO
(mOsm.L-1)
A
(540 nm)
[1]
[2]
[3]
[4]
[5]
[6]
[7]
[8]
Práticas de Biofísica: exercícios
35
EXERCÍCIOS:
1) Construa um gráfico (no Excel) relacionando a absorbância (na ordenada) e a
osmolaridade da solução (na abscissa).
2) Com base nos seus dados, faça uma estimativa da osmolaridade no interior
das hemácias.
3) Que conclusões podem ser tiradas acerca da integridade das hemácias em
função da concentração da solução no experimento realizado?
4) De acordo com a literatura, uma solução de NaCl a 0.9% é isosmolar com o
sangue. Isto está de acordo com os seus resultados? Apresente explicações
para possíveis discrepâncias:
NOME DOS COMPONENTES:
OBJETIVO
•
CONSIDERAÇÕES:�
�
�
�
MATERIAL
I. Equipamentos:
••
II. Vidrarias e utensílios:
••
NOME DOS COMPONENTES
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